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Pathological Changes in Andrias davidianus Infected with Chinese Giant Salamander Ranavirus

Asian Herpetological Research 2016年第4期7卷 258-264页

作者： Yi GENG Matthew James GRAY Kaiyu WANG Defang CHEN Ping OUyang Xiaoli HUANG Changliang HE Zhijun ZHONG zexiao yang College of Veterinary Medicine Sichuan Agricultural University Center for Wildlife Health University of Tennessee Department of Aquaculture Sichuan Agricultural University

Chinese giant salamander ranavirus （CGSRV） is an emerging pathogen in captive populations of the Chinese giant salamander （Andrias davidianus）. We processed 140 morbid Chinese giant salamanders from seven captive breeding populations over five years, and describe the disease associated with CGSRV infection. The most common gross signs were significant swelling of the legs and coelomic cavity, erythema of the legs and ventrum in juveniles; cutaneous erosions and ulcerations in adults, particularly the limbs and the head; and marked petechial or ecchymotic hemorrhages of the internal organs, particularly the liver, spleen and kidney. Histological examination showed degeneration, necrosis, and inflammation in many organs, particularly in the organs where hemorrhage was observed. There was evidence of eosinophilic inclusion bodies in degenerated and necrotic cells. We identified virus particles and empty capsids without viral nucleoid in the inclusion bodies using electron microscopy. Virus particles were hexagonal or round shape, and appeared in paracrystalline arrays, aggregates, or singly. All enveloped viral particles were 140-160 nm. Polymerase chain reaction followed by sequencing verified that the virus particles were CGSRV. These results collectively support that CGSRV was the etiologic agent responsible for these mass die-offs of the Chinese giant salamander. The pathology described herein will be useful in diagnosing cases of ranaviral disease caused by CGSRV, and provide evidence that this pathogen is a significant threat to the Chinese giant salamander.

关键词： pathology CGSRV Andrias davidianus ranavirus China

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The omp2 Gene of HPS-type Bacteria Cloning and Sequence Analysis Isolates from Sichuan Province

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Engineering（科研） 2012年第10期4卷 153-158页

作者： Lirui Li zexiao yang Yin Wang Qiu Jin Xulong Wu Rongchang Zhang Sichuan Agricultural University Sichuan Laboratory of Animal Disease and Human Health SLADHH Ya'an China Tibet Changdu animal health and phytosanitary supervision TCAHPS Changdu China

In order to compare the homology and antigen of Haemophilus parasuis (HPS)4 outer membrane protein P2(omp2), we design a test with specific primers, using PCR amplification of isolates of Haemophilus parasuis from Sichuan Province(HP Sch2010), ompP2 gene will be cloned into the pGM-T vector, and transformed into E. coli DH5α. Identified by PCR and sequencing and analysis, the sequencing results showed that the published 4 HPS SW124 strains omp2 gene (1077bp), compared with the amplified 1086bp purpose fragment(containing omp2 genes), is relatively stable, with the nucleotide homology level 97% and amino acid homology level of 92.5%. The variable regions are mainly concentrated in the three base sequences: 40-65,110-156,180-202.

关键词： Haemophilus parasuis virulence genes omp2

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天津市学龄前儿童超重和肥胖与血压、血糖、血脂异常的关系

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中国慢性病预防与控制 2023年第7期31卷 518-522页

作者：杨赜骁冷俊宏杨西林天津医科大学公共卫生学院天津300070 天津市妇女儿童保健中心天津300070

目的研究天津市学龄前儿童超重和肥胖与血压、血糖、血脂异常的关系,为成年期疾病的早期预防提供依据。方法采用整群随机抽样方式,于2019年3至6月抽取天津市48所托幼机构5677名5~6岁儿童为研究对象,测量身高、体重、血压、血糖和血脂水... 详细信息

目的研究天津市学龄前儿童超重和肥胖与血压、血糖、血脂异常的关系,为成年期疾病的早期预防提供依据。方法采用整群随机抽样方式,于2019年3至6月抽取天津市48所托幼机构5677名5~6岁儿童为研究对象,测量身高、体重、血压、血糖和血脂水平。采用SPSS 23.0进行t检验、方差分析、χ^(2)检验和多因素logistic回归分析。结果学龄前儿童超重、肥胖率分别为16.19%和11.71%。多因素logistic回归分析结果显示,肥胖与收缩压(SBP)异常(OR=3.88,95%CI:3.15~4.78)、舒张压(DBP)异常(OR=2.69,95%CI:2.16~3.35)、空腹血糖(FPG)异常(OR=2.50,95%CI:1.18~5.28)、TG异常(OR=6.58,95%CI:4.55~9.52)高风险相关,超重与SBP异常(OR=1.86,95%CI:1.50~2.30)、DBP异常(OR=1.52,95%CI:1.22~1.90)、TG异常(OR=1.69,95%CI:1.06~2.70)高风险相关,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。肥胖、超重组包含1种危险因素的风险是BMI正常组的2.46倍(OR=2.46,95%CI:2.04~2.96)、1.59倍(OR=1.59,95%CI:1.35~1.88);包含2种危险因素的风险是BMI正常组的4.97倍(OR=4.97,95%CI:3.70~6.68)、1.59倍(OR=1.59,95%CI:1.13~2.23);包含3种危险因素的风险是BMI正常组的29.37倍(OR=29.37,95%CI:10.39~83.02)、4.14倍(OR=4.14,95%CI:1.11~15.47)。结论天津市学龄前儿童超重和肥胖可增加儿童罹患高血压、高血糖及高甘油三酯血症的风险。

关键词：学龄前儿童超重肥胖危险因素

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猪源嗜麦芽寡养单胞菌的分离鉴定与生物学分析

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中国农业大学学报 2018年第4期23卷 45-52页

作者：张鹏飞王印杨泽晓姚学萍张博四川农业大学动物医学院成都611130 动物疫病与人类健康四川省重点实验室成都611130

从四川省某规模化养猪场病死猪肺脏分离得到1株嗜麦芽寡养单胞菌,分析其生物学特性,为临床鉴别诊断和治疗提供参考。观察分离株的染色特点、培养特性,并通过生化试验进行鉴定;测定分离株对小鼠的LD_(50)并进行药物敏感试验,以分析分离... 详细信息

从四川省某规模化养猪场病死猪肺脏分离得到1株嗜麦芽寡养单胞菌,分析其生物学特性,为临床鉴别诊断和治疗提供参考。观察分离株的染色特点、培养特性,并通过生化试验进行鉴定;测定分离株对小鼠的LD_(50)并进行药物敏感试验,以分析分离株的致病性与耐药性;测序分析分离株16S rRNA基因序列,构建系统进化发育树。结果表明:该分离株的16S rRNA基因序列与嗜麦芽寡养单胞菌的同源性为99%;在TSA琼脂培养基上培养18h后可长成灰白色、光滑的露珠样小菌落,在血琼脂上菌落周围呈现α溶血;对小鼠的致病性试验测得LD_(50)为6.62×10~7 cfu/只;药敏试验发现分离株对多粘菌素B较为敏感,对喹诺酮类、四环素类、头孢类、碳青酶烯类和氨基糖苷类药物均表现为耐药。经鉴定,分离株为嗜麦芽寡养单胞菌,致病性较强,对多种药物耐药。该研究为该菌的临床诊断、选药治疗、疾病控制等奠定了基础。

关键词：嗜麦芽寡养单胞菌 16S rRNA 分离鉴定人兽共患病

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1株兔肺源金黄色葡萄球菌的分离鉴定及耐药分析

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西北农业学报 2020年第3期29卷 341-346页

作者：侯景杨泽晓赵位王翔晏仕强四川农业大学动物医学院成都611130

为了解四川某养兔场疑似金黄色葡萄球菌感染病例的病原菌及其药物敏感性,采集兔肺脏的化脓灶样品进行细菌分离纯化、染色镜检、培养特性、生化试验、16S rDNA序列鉴定及分离菌株的药敏试验和耐药基因检测。结果表明,分离鉴定出1株对小... 详细信息

为了解四川某养兔场疑似金黄色葡萄球菌感染病例的病原菌及其药物敏感性,采集兔肺脏的化脓灶样品进行细菌分离纯化、染色镜检、培养特性、生化试验、16S rDNA序列鉴定及分离菌株的药敏试验和耐药基因检测。结果表明,分离鉴定出1株对小鼠具有致病性的金黄色葡萄球菌,药敏试验结果显示,金黄色葡萄球菌分离菌株具有多重耐药性,仅对头孢哌酮、头孢拉定、头孢噻吩、哌拉西林4种药物敏感,其他15种药物均耐受。耐药基因PCR检测结果显示,meca、aac(6′)/aph(2′)、aph(3′)-III、ant(4′,4′′)、plw043耐药基因呈阳性,耐药表型和基因型相一致。

关键词：兔金黄色葡萄球菌分离鉴定耐药基因

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不同血糖代谢水平孕妇妊娠期24~28周血脂水平与巨大儿的相关性研究

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中国慢性病预防与控制 2023年第9期31卷 665-669页

作者：马然杨赜骁栾奕然荀晓益董微孙续国天津医科大学医学技术学院天津300203 天津市妇女儿童保健中心检验科天津300070 天津市妇女儿童保健中心办公室天津市妇女儿童保健中心妇保指导科天津300070

目的探讨不同血糖代谢水平的孕妇妊娠24~28周脂代谢水平与分娩巨大儿的相关性,为预防巨大儿的发生提供临床依据。方法回顾分析2019年8月1日至2020年7月31日在天津市妇女儿童保健中心定期产检的1053例单胎妊娠孕妇的临床资料,根据妊娠24... 详细信息

目的探讨不同血糖代谢水平的孕妇妊娠24~28周脂代谢水平与分娩巨大儿的相关性,为预防巨大儿的发生提供临床依据。方法回顾分析2019年8月1日至2020年7月31日在天津市妇女儿童保健中心定期产检的1053例单胎妊娠孕妇的临床资料,根据妊娠24~28周口服75 g葡萄糖耐量试验(OGTT)结果分为正常糖耐量组(636例)和妊娠糖尿病组(417例),根据新生儿体重将正常糖耐量组分为正常糖耐量孕妇巨大儿组(40例)和正常糖耐量孕妇非巨大儿组(596例),妊娠糖尿病组分为妊娠糖尿病孕妇巨大儿组(34例)和妊娠糖尿病孕妇非巨大儿组(383例)。收集研究对象妊娠24~28周的血脂指标,包括总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)。采用SPSS 22.0软件进行t检验、非参数检验和χ^(2)检验。采用多因素logistic回归分析不同血糖代谢水平孕妇妊娠期24~28周血脂水平与巨大儿之间的关系。结果妊娠24~28周,正常糖耐量孕妇巨大儿组TG、LDL-C/HDL-C、TC/HDL-C和TG/HDL-C水平均高于正常糖耐量孕妇非巨大儿组,妊娠糖尿病孕妇巨大儿组TG、TG/HDL-C水平均高于妊娠糖尿病孕妇非巨大儿组,妊娠糖尿病孕妇巨大儿组HDL-C水平低于妊娠糖尿病孕妇非巨大儿组,差异均有统计学意义(P<0.05)。多因素logistic回归分析结果显示,校正孕妇年龄、妊娠前体质指数(BMI)和生产孕周后,对于正常糖耐量孕妇,妊娠24~28周LDL-C/HDL-C(OR=2.147,95%CI:1.106~4.170)、TC/HDL-C(OR=1.871,95%CI:1.078~3.248)与分娩巨大儿高风险相关(P<0.05)。对于妊娠糖尿病孕妇,妊娠24~28周TG(OR=1.588,95%CI:1.115~2.260)、TG/HDL-C(OR=2.010,95%CI:1.200~3.367)与分娩巨大儿高风险相关(P<0.05,P<0.01)。结论正常糖耐量孕妇妊娠24~28周LDL-C/HDL-C和TC/HDL-C的异常升高增加巨大儿的发生风险,妊娠糖尿病孕妇妊娠24~28周TG和TG/HDL-C的异常升高增加巨大儿的发生风险,有效控制妊娠期24~28周血脂水平有利于降低巨大儿的发生风险。

关键词：妊娠血糖代谢水平血脂巨大儿

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猪流行性腹泻病毒S蛋白间接ELISA抗体检测方法的建立

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云南农业大学学报（自然科学版） 2021年第2期36卷 235-240,267页

作者：姜睿姣蒋子睿王印姚学萍杨泽晓罗燕四川农业大学动物医学院四川成都611130 动物疫病与人类健康四川省重点实验室四川成都611130

【目的】建立快速准确检测猪流行性腹泻病毒(PEDV)的方法。【方法】以原核表达的PEDV S蛋白为包被抗原,建立高效特异的间接ELISA抗体检测方法。PCR扩增PEDV S基因并命名为SJ,纯化鉴定后克隆至表达载体pET-32a (+),构建重组质粒pET-32a (... 详细信息

【目的】建立快速准确检测猪流行性腹泻病毒(PEDV)的方法。【方法】以原核表达的PEDV S蛋白为包被抗原,建立高效特异的间接ELISA抗体检测方法。PCR扩增PEDV S基因并命名为SJ,纯化鉴定后克隆至表达载体pET-32a (+),构建重组质粒pET-32a (+)-SJ。重组蛋白经诱导表达、纯化鉴定后,测定蛋白质量浓度,以其为抗原包被于板。优化ELISA反应条件,对建立方法的特异性、重复性、符合性及临床应用进行评估。【结果】原核表达的PEDV S蛋白约为35 ku,质量浓度为1.145 mg/mL。Western-blot鉴定其具有良好的反应原性,以其作为包被抗原建立的PEDV间接ELISA抗体检测方法仅对PEDV血清检测为阳性,具有良好的特异性。批内和批间重复性试验的变异系数均小于6%,利用该方法对临床样品检测的结果与市售检测结果符合率为96.67%。【结论】该方法特异性良好,重复性高,成本低,可用于临床PEDV血清抗体检测以及PEDV流行病学的监测,对本病的预防具有重要意义。

关键词：猪流行性腹泻病毒 S蛋白免疫印迹间接ELISA

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四川省猪流行性腹泻病毒SNJ-P株的分离鉴定与遗传进化分析

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云南农业大学学报（自然科学版） 2022年第5期37卷 790-798页

作者：庞茂楠蒋子睿王印罗燕姚学萍杨泽晓四川农业大学动物医学院四川成都611130 动物疫病与人类健康四川省重点实验室四川成都611130

【目的】探究四川省猪流行性腹泻病毒(PEDV)毒株流行变异情况,并分析疫苗免疫效果不佳的原因。【方法】从四川某猪场采集仔猪肠道样本进行PCR检测、病毒纯化、病毒滴度测定以及病毒感染等试验;测定分离株全基因组序列,将分离株S基因序... 详细信息

【目的】探究四川省猪流行性腹泻病毒(PEDV)毒株流行变异情况,并分析疫苗免疫效果不佳的原因。【方法】从四川某猪场采集仔猪肠道样本进行PCR检测、病毒纯化、病毒滴度测定以及病毒感染等试验;测定分离株全基因组序列,将分离株S基因序列与其他地区毒株及疫苗株进行比对并构建进化树;比较分离株与经典疫苗株CV777 S蛋白氨基酸位点变异情况。【结果】成功分离获得1株PEDV毒株,并命名为PEDV SNJ-P,该毒株病毒滴度为1×107.5/100μL。动物感染试验表明:分离株能引起仔猪出现腹泻和脱水等症状并导致死亡。全基因组测序及遗传进化分析表明:PEDV SNJ-P株全基因共28003 bp,基因型为S non-INDEL型;与同型的中国分离株PEDV-WS、CH/JLDH/2016和CH/HNLH/2015等毒株亲缘关系较近,与同型的疫苗株亲缘关系相对较远,与经典疫苗株亲缘关系较远。与经典疫苗株CV777相比,SNJ-P株的S蛋白存在多处氨基酸突变、缺失和插入现象。【结论】由于毒株出现变异,SNJ-P株与疫苗株亲缘关系较远,当前所用疫苗无法提供有效保护。本研究结果以期为国内PEDV毒株的研究及疫苗开发提供借鉴。

关键词：猪流行性腹泻病毒分离鉴定 S蛋白基因遗传进化分析

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西部白眉长臂猿支气管败血波氏杆菌的分离鉴定及其耐药基因检测

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西北农业学报 2020年第5期29卷 668-674页

作者：姜睿姣张鹏飞王印姚学萍杨泽晓罗燕四川农业大学动物医学院成都611130 动物疫病与人类健康四川省重点实验室成都611130

为探究某动物园西部白眉长臂猿死亡的可能原因,无菌采集病死白眉长臂猿肺脏组织进行细菌分离鉴定。通过分离纯化、培养特性观察、革兰染色镜检、生化试验以及16S rDNA克隆测定对分离菌株进行鉴定;进一步研究分离株的致病性、耐药性,并... 详细信息

为探究某动物园西部白眉长臂猿死亡的可能原因,无菌采集病死白眉长臂猿肺脏组织进行细菌分离鉴定。通过分离纯化、培养特性观察、革兰染色镜检、生化试验以及16S rDNA克隆测定对分离菌株进行鉴定;进一步研究分离株的致病性、耐药性,并进行超广谱β-内酰胺酶耐药基因检测及测序分析。结果表明,分离得到1株革兰阴性小杆菌,命名为J181121,该分离菌的培养及生化特性符合支气管败血波氏杆菌,其16S rDNA基因序列与Genbank中支气管败血波氏杆菌(登录号:CP018761.1)的同源性为99%,对小鼠致病力强。药敏试验结果显示,分离株对β-内酰胺类抗生素耐药,PCR检测到超广谱β-内酰胺酶耐药基因bla-SHV。

关键词：白眉长臂猿支气管败血波氏杆菌分离鉴定超广谱β-内酰胺酶

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林麝肺源ST1249型铜绿假单胞菌的分离鉴定及其全基因组序列分析

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西北农林科技大学学报（自然科学版） 2020年第10期48卷 9-17页

作者：伍茜杨威赵位程建国罗燕王印杨泽晓姚学萍四川农业大学动物医学院四川成都611130 四川养麝研究所四川都江堰611800

【目的】对分离自林麝化脓肺脏的1株疑似铜绿假单胞菌(PA)进行鉴定,并分析其致病和耐药机制,为林麝PA感染化脓性疾病的防控奠定基础。【方法】将病原菌分离纯化后,依次进行生化试验、16S rRNA序列分析、药敏试验和小鼠致病性试验,并通... 详细信息

【目的】对分离自林麝化脓肺脏的1株疑似铜绿假单胞菌(PA)进行鉴定,并分析其致病和耐药机制,为林麝PA感染化脓性疾病的防控奠定基础。【方法】将病原菌分离纯化后,依次进行生化试验、16S rRNA序列分析、药敏试验和小鼠致病性试验,并通过全基因组测序,对分离菌株进行群体进化和物种分型分析以及基因功能注释。【结果】分离自林麝化脓肺脏的1株疑似铜绿假单胞菌经鉴定与PA相符,命名为FMDP001。药敏试验显示其对阿莫西林、头孢曲松、氨曲南、多粘菌素B和林可霉素耐药;对小鼠半数致死量为9.4×105 CFU/mL。全基因组序列分析显示该菌基因组大小为6955100 bp,序列类型为ST1249,与B136-33株同源性最高,且两菌株基因组平均核苷酸一致性(ANI)值达98.93%;全基因组中共有357个序列编码FMDP001与致病性相关的基因,根据功能分为黏附、铁摄取、胞外毒性蛋白和调控系统;84个序列编码耐药基因,其中多药耐药外排泵为主要成分。【结论】从林麝化脓肺脏中分离到1株致病性较强的PA,并获得ST1249型林麝源PA的全基因组序列,序列显示该菌携带大量药物外排泵及生物膜形成相关基因,决定其具有多重耐药特性,哌拉西林等可作为该类型PA感染的临床用药。

关键词：林麝铜绿假单胞菌全基因组序列分析致病性耐药性

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