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微小RNA let-7c通过抑制血小板源性生长因子受体表达促进小鼠血管平滑肌细胞衰老

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中华老年心脑血管病杂志 2023年第6期25卷 629-633页

作者：崔星钢余逸杰姜瑜李波赵倩茹朱灿宏仲威卞石惠江苏大学附属医院心内科镇江212001 江苏大学附属人民医院老年科

目的探讨微小RNA(miRNA)let-7c参与小鼠血管平滑肌细胞(VSMC)衰老的机制。方法选择C57BL/6J小鼠40只,将小鼠分为对照组、老年组各20只,通过qPCR技术检测小鼠血清及主动脉血管中let-7c miRNA表达水平。从C57BL/6J小鼠主动脉中提取并原代... 详细信息

目的探讨微小RNA(miRNA)let-7c参与小鼠血管平滑肌细胞(VSMC)衰老的机制。方法选择C57BL/6J小鼠40只,将小鼠分为对照组、老年组各20只,通过qPCR技术检测小鼠血清及主动脉血管中let-7c miRNA表达水平。从C57BL/6J小鼠主动脉中提取并原代培养VSMC。通过博来霉素体外诱导细胞衰老模型。使用Lipo2000脂质体转染法过表达或抑制细胞let-7c miRNA表达。将VSMC分为阴性对照(NC)组、博来霉素组、博来霉素+let-7c过表达组、博来霉素+let-7c抑制组,通过衰老相关β半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色评估组织或细胞衰老水平。将VSMC分为控制组、血小板衍生生长因子(PDGF)组、PDGF+let-7c过表达组,采用Western blot检测各组细胞蛋白表达。将VSMC分为空白组、let-7c过表达组、突变组、突变+let-7c过表达组,使用双荧光素酶报告基因验证let-7c靶点。结果老年组小鼠主动脉和血清中let-7c miRNA相对表达水平显著高于对照组(6.37±0.81 vs 1.00±0.00,P<0.05;5.23±0.44 vs 1.00±0.00,P<0.05)。博来霉素+let-7c过表达组中SA-β-gal染色阳性比例较博来霉素组增多,而博来霉素+let-7c抑制组中SA-β-gal染色阳性比例较博来霉素组明显减少(P<0.05)。与PDGF+let-7c过表达组比较,PDGF组血清反应因子表达显著升高,α平滑肌肌动蛋白及平滑肌肌球蛋白重链表达显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。双荧光素酶实验显示,let-7c过表达组中荧光素酶活性水平较空白组显著下降(0.43±0.05 vs 1.00±0.00,P<0.05)。结论miRNA let-7c通过抑制PDGF受体表达促进小鼠VSMC衰老。

关键词：循环微RNA 血小板源性生长因子肌细胞平滑肌

白三烯受体拮抗剂对哮喘模型肺组织TIMP-1的影响

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临床儿科杂志 2005年第12期23卷 875-878页

作者：季伟周卫芳朱灿红苏州大学附属儿童医院呼吸科江苏苏州215003

目的观察白三烯受体拮抗剂对哮喘模型肺组织TIMP-1表达的影响,提供哮喘防治新途径的可靠实验依据。方法雄性健康豚鼠108只随机分为3组,以卵蛋白(OVA)致敏和激发建立哮喘模型,给予白三烯受体拮抗剂扎鲁司特(Zafirlukast)治疗。肺组织切... 详细信息

目的观察白三烯受体拮抗剂对哮喘模型肺组织TIMP-1表达的影响,提供哮喘防治新途径的可靠实验依据。方法雄性健康豚鼠108只随机分为3组,以卵蛋白(OVA)致敏和激发建立哮喘模型,给予白三烯受体拮抗剂扎鲁司特(Zafirlukast)治疗。肺组织切片免疫组化标记TIMP-1,图像分析TIMP-1表达水平,光镜观察病理学变化。结果OVA激发后8周,治疗组肺组织中TIMP-1标记阳性细胞明显多于哮喘组和对照组(P<0.05),分别为17.55±7.08,10.20±2.80及7.57±3.39;激发后12周两两比较差异均有显著性,治疗组TIMP-1标记阳性细胞明显多于哮喘组,后者TIMP-1表达水平明显高于对照组(P<0.05)。激发后8周始,治疗组气道炎症、上皮细胞增生和胶原沉积等病理学变化较哮喘组明显减轻。结论白三烯受体拮抗剂可使哮喘豚鼠肺组织TIMP-1表达水平增加,在延缓哮喘气道重塑发生过程中起重要作用。

关键词：哮喘组织基质金属蛋白酶抑制物白三烯受体拮抗剂气道重塑

吸入性糖皮质激素对哮喘气道重塑模型平滑肌的影响

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江苏医药 2006年第1期32卷 50-51,F0003页

作者：朱灿红季伟周卫芳苏州大学附属儿童医院 215003

目的探讨吸入性糖皮质激素对哮喘气道重塑模型平滑肌的影响。方法雄性豚鼠108只,随机分为哮喘发作组(A组)、治疗组(B组)和对照组(C组)。每组动物分别予以卵蛋白(OVA)、布地奈德或生理盐水处理,在每个时点末次激发后24 h处死,留取肺组织... 详细信息

目的探讨吸入性糖皮质激素对哮喘气道重塑模型平滑肌的影响。方法雄性豚鼠108只,随机分为哮喘发作组(A组)、治疗组(B组)和对照组(C组)。每组动物分别予以卵蛋白(OVA)、布地奈德或生理盐水处理,在每个时点末次激发后24 h处死,留取肺组织,测量气道平滑肌的厚度。结果在12周时各组气道平滑肌层厚度,A组(26.56±3.39)μm,B组(18.29±4.11)μm,C组(9.85±3.59)μm,两两比较均有显著性差异(P0.05),直到激发8周后各组平滑肌层厚度才出现显著性差异(P<0.05)。结论吸入性糖皮质激素能抑制气道平滑肌层增厚,但这种作用是不完全的。

关键词：糖皮质激素哮喘气道重塑平滑肌

电子支气管镜在儿童肺部大片阴影病灶性疾病的诊治作用

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临床儿科杂志 2014年第2期32卷 131-135页

作者：尹芳周卫芳黄莉朱灿红王美娟闻芳严永东季伟苏州大学附属儿童医院江苏苏州215003

目的：探讨电子支气管镜及肺泡灌洗术在儿童肺部大片阴影病灶性疾病诊治中的价值。方法回顾性分析2011年1月-2012年6月74例影像学示肺部大片状阴影，并行电子支气管镜检查及肺泡灌洗术的住院患儿的临床资料。结果电子支气管镜检查发现... 详细信息

目的：探讨电子支气管镜及肺泡灌洗术在儿童肺部大片阴影病灶性疾病诊治中的价值。方法回顾性分析2011年1月-2012年6月74例影像学示肺部大片状阴影，并行电子支气管镜检查及肺泡灌洗术的住院患儿的临床资料。结果电子支气管镜检查发现儿童肺部大片阴影以感染最常见（68/74，91.89%），包括大叶性肺炎65例，肺结核3例；其次为支气管异物（5例，6.76%）和肺出血（1例，1.35%）。炎症部位以左下叶最多，其次为右下叶，病变部位与术前影像学检查一致率为97.30%。肺泡灌洗液检测提示，大叶性肺炎以支原体感染为主（42/65，64.62%），支原体感染检出率以学龄前期组最高（70.83%），在不同年龄患儿中的差异有统计学意义（P＆lt;0.01）。第1次电子支气管镜及肺泡灌洗术后1周内复查影像学，61.54%大叶性肺炎患儿肺部病变明显好转。发病后在1~2周内行电子支气管镜检查的短程组患儿的肺部病变好转率（90.91%）高于2~3周的中程组（51.72%）和＆gt;3周的长程组（35.71%），住院时间也短于中程组和长程组，差异均有统计学意义（P＆lt;0.05）。结论电子支气管镜及肺泡灌洗术在儿童肺部大片阴影病灶性疾病中具有病因诊断和治疗的双重作用。

关键词：肺部大片阴影电子支气管镜肺泡灌洗术儿童

PBL教学法与mini-CEX在老年医学规范化培训中的应用

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继续医学教育 2020年第6期34卷 14-15页

作者：金成丁璐彭良欢李蓉黄根牙朱灿宏江苏大学附属人民医院老年医学科江苏镇江212000

目的探讨以问题为导向(problem-based learning,PBL)的教学法在老年医学科住院医师规范化培训中的应用。方法将2017年1月-2018年12月进入江苏大学附属人民医院老年医学科进行规范化培训的60名全科规范化培训住院医师分为传统教学组和PB... 详细信息

目的探讨以问题为导向(problem-based learning,PBL)的教学法在老年医学科住院医师规范化培训中的应用。方法将2017年1月-2018年12月进入江苏大学附属人民医院老年医学科进行规范化培训的60名全科规范化培训住院医师分为传统教学组和PBL教学组,每组30名规培医师,在老年医学科规培时间均为1个月,比较两组教学效果。通过对全科规范化培训住院医师的综合临床能力、知识理论和临床技能操作这三个方面进行考核。其中应用迷你临床演练评估(mini-clinical evaluation exercise,mini-CEX)对规培医师临床综合能力进行测评。结果 PBL教学组的临床综合能力高于传统教学组(P<0.05)。结论应用PBL教学法教学可提高全科规范化培训住院医师临床综合能力。

关键词：老年医学全科医师规范化培训 PBL教学 mini-CEX 教学效果

肺炎支原体耐药在难治性肺炎支原体肺炎患儿发病中的作用

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中华实用儿科临床杂志 2021年第11期36卷 822-826页

作者：张伟利张新星顾文婧严永东季伟朱灿红邵雪君郝创利陈正荣苏州大学附属儿童医院呼吸科江苏苏州215003

目的研究苏州地区肺炎支原体(MP)耐药情况,并试图说明MP耐药与难治性肺炎支原体肺炎(RMPP)之间的关系。方法选取2013年10月至2014年9月在苏州大学附属儿童医院呼吸科确诊MPP而住院治疗的82例患儿,其中48例应用阿奇霉素治疗(10 mg/kg,1次... 详细信息

目的研究苏州地区肺炎支原体(MP)耐药情况,并试图说明MP耐药与难治性肺炎支原体肺炎(RMPP)之间的关系。方法选取2013年10月至2014年9月在苏州大学附属儿童医院呼吸科确诊MPP而住院治疗的82例患儿,其中48例应用阿奇霉素治疗(10 mg/kg,1次/d,静脉滴注5~7 d),临床症状及胸部影像学仍持续进展,临床确诊为RMPP的患儿(RMPP组)作为试验组,另外34例应用大环内酯类抗生素(MA)治疗有效,确诊为普通肺炎支原体肺炎(GMPP)(GMPP组),从这些患儿气道分泌物中提取MP DNA,并对红霉素作用靶位MP 23S rRNA的2063和2064位点突变进行测序,并根据耐药基因测序结果将其分为MA耐药组(MRMP组)及MA敏感组(MSMP组)。比较2组患儿临床特点。结果在MRMP组中,PMPP发生率为62.2%(46/74例),而MSMP组中,PMPP发生率为25.0%(2/8例),2组患儿耐药基因MP 23S rRNA点突变对RMPP的发生无显著影响(χ^(2)=2.719,P=0.099)。相对于MRMP组,MSMP组患儿发热时间更短,糖皮质激素的应用更少。2组患儿在胸部影像学检查以及一些化验结果,如白细胞总数及分类、C反应蛋白(CRP)、丙氨酸转氨酶(ALT)、乳酸脱氢酶(LDH)和肌酸激酶同工酶(CK-MB)等方面差异均无统计学意义。结论MP肺炎发热持续超过1周,提示MP耐药的可能,MP对MA耐药并未加剧RMPP的发生。通过胸部影像学特征及检验结果方面的差异来判断MP是否耐药并不可靠。

关键词：肺炎支原体难治性肺炎支原体肺炎大环内酯类耐药儿童

麝香保心丸治疗冠心病慢性心力衰竭患者临床疗效观察

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中西医结合心脑血管病杂志 2015年第15期13卷 1704-1706页

作者：李蓉吴泰蓉朱灿宏黄根牙彭良欢江苏大学附属人民医院江苏镇江212002

目的观察麝香保心丸对冠心病慢性心力衰竭患者的心功能、血流动力学及相关指标影响。方法 100例冠心病慢性心力衰竭患者随机分为观察组和对照组,各50例。对照组采用西医常规治疗,观察组在西医常规治疗的基础上加用麝香保心丸。治疗6周... 详细信息

目的观察麝香保心丸对冠心病慢性心力衰竭患者的心功能、血流动力学及相关指标影响。方法 100例冠心病慢性心力衰竭患者随机分为观察组和对照组,各50例。对照组采用西医常规治疗,观察组在西医常规治疗的基础上加用麝香保心丸。治疗6周后比较两组患者心功能、血浆N末端脑钠肽前体(NT-proBNP)和血清心型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)水平。结果两组治疗后左室射血分数(LVEF)、左室舒张末内径(LVEDD)、左室收缩末内径(LVESD)、心输出量(CO)、每搏量(SV)及6min步行距离均较治疗前有改善,观察组改善的程度优于对照组(P<0.05);治疗后观察组血浆NT-proBNP和血清H-FABP水平均低于对照组(P<0.05),观察组临床疗效优于对照组(P<0.05)。结论麝香保心丸可明显改善冠心病慢性心力衰竭患者的心脏舒缩功能,降低血浆NT-proBNP和H-FABP水平。

关键词：慢性心力衰竭麝香保心丸冠心病

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鼠脂肪干细胞的分离、培养和鉴定

交通医学 2016年第1期30卷 34-38页

作者：朱灿红张旦红陈正荣王美娟张亚苏州大学附属儿童医院呼吸科江苏215003 苏州大学附属儿童医院外科江苏215003 苏州大学附属儿童医院实验室江苏215003

目的：研究脂肪干细胞（adipose-derived stem cells,ADSCs）的分离、培养和鉴定的方法,为组织工程、细胞疗法、基因疗法提供可靠的细胞来源。方法：采用反复贴壁法从小鼠脂肪组织中分离、纯化脂肪干细胞,观察其细胞形态,MTT法测定其生... 详细信息

目的：研究脂肪干细胞（adipose-derived stem cells,ADSCs）的分离、培养和鉴定的方法,为组织工程、细胞疗法、基因疗法提供可靠的细胞来源。方法：采用反复贴壁法从小鼠脂肪组织中分离、纯化脂肪干细胞,观察其细胞形态,MTT法测定其生长曲线,流式细胞仪对干细胞表面标志物进行鉴定,采用不同诱导液对脂肪干细胞进行诱导,鉴定其多系分化能力。结果：接种后第2 d,大多数呈纺锤形,少数呈三角形、多角形等形状。至第5 d左右,呈成纤维细胞样梭形细胞。至第9-10 d,细胞呈均一的梭形;传代细胞形态与原代细胞类似,但生长速度加快,生长曲线为＂S＂形曲线。经测定CD90阳性细胞达到96.6%;CD44阳性细胞数达到85.3%;CD11b、CD45阳性细胞均为0.5%。经油红O染色检测,诱导的干细胞胞质中的脂滴被染为红色;碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）染色表现为细胞内灰黑色或黑色颗粒,Von Kossa染色表现为细胞内可见黑色的矿化结节;用阿尔新蓝染色检测,将软骨结节样结构染成蓝色。结论：反复贴壁法可以从小鼠脂肪组织中分离出ADSCs,具备干细胞的各项特征,为干细胞的临床应用提供丰富的干细胞来源。

关键词：干细胞脂肪组织分离培养鉴定

2005年至2014年苏州地区儿童呼吸道肺炎支原体感染流行病学分析

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中华传染病杂志 2015年第10期33卷 594-598页

作者：张新星季伟顾文婧陈正荣严永东王美娟黄莉朱灿红邵雪君苏州大学附属儿童医院呼吸科 215003 苏州大学附属儿童医院检验科 215003

目的分析苏州地区儿童呼吸道肺炎支原体（MP）感染流行病学特征，为临床合理诊治及卫生行政部门制订防控措施提供参考依据。方法收集2005年10月至2014年12月苏州地区20021例因呼吸道感染住院患儿痰标本，荧光定量PCR法检测MPDNA；同时... 详细信息

目的分析苏州地区儿童呼吸道肺炎支原体（MP）感染流行病学特征，为临床合理诊治及卫生行政部门制订防控措施提供参考依据。方法收集2005年10月至2014年12月苏州地区20021例因呼吸道感染住院患儿痰标本，荧光定量PCR法检测MPDNA；同时在人院24h内及治疗7～10d采集静脉血，ELISA法检测血清特异性MP抗体IgG、IgM，分析MP检出情况。各组阳性率比较采用卡方检验或Fisher确切概率法，计量资料采用Wilcoxon秩和检验。结果20021例患儿中，MP感染率为36．08％（7224／20021），其中女性患儿MP感染率为40．81％（3057／7490），明显高于男性患儿的33．25％（4167／12531，x^2=116．20，P〈0．01）。〈6个月、～1岁、～3岁、～7岁以及〉7岁患儿的MP感染率分别为18．35％、29．39％、43．93％、54．10％和64．48％，MP感染率随着年龄的增大逐渐升高（x^2=1949．65，P〈0．01）。春夏秋冬四季MP感染率分别为31.97％、41．57％、40．88％和29．90％，夏秋季患儿MP感染率明显高于冬春季（x^2=234．61，P〈0．01）。2008年秋季为10年中最高MP检出季节，达55．07％，而2010年春季MP感染率为10年中最低季节（18．48％）。除2007年四季MP感染率无明显波动外，其余年份四季的MP感染率均有不同程度的波动。2008年、2009年、2012年及2013年苏州地区MP感染率分别为46．03％、46．60％、39．28％和47．40％，处于较高水平，2011年为25．24％，为10年来最低水平，其余年份MP感染率均维持在30％左右。结论苏州地区儿童呼吸道MP感染处于较高水平，女性患儿感染率高于男性，MP感染可发生在各个年龄段儿童，但随着年龄的增大感染率逐渐升高，夏秋季节为MP感染高发季，每隔2-3年MP感染出现一个流行小高峰，流行期可持续2年左右。

关键词：肺炎支原体呼吸道疾病流行病学儿童