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缺氧肝癌源性外泌体miR-1260b对肿瘤相关巨噬细胞M2亚型的影响及其机制

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精准医学杂志 2023年第2期38卷 105-110,115页

作者：杨晔妮赵梓吟王有鹏孙洪发张顺韩冰青岛大学附属医院肝胆胰外科山东青岛266003 青岛大学附属医院器官移植中心山东青岛266003

目的探究缺氧肝癌源性外泌体miR-1260b对肿瘤相关巨噬细胞M2亚型的影响及其机制。方法人肝癌细胞97H(MHCC97H)细胞经100μmol/L CoCl 2处理24 h后获得缺氧97H细胞。利用丙二醇甲醚醋酸酯(PMA)处理THP-1细胞24 h后获得M0巨噬细胞,实时荧... 详细信息

目的探究缺氧肝癌源性外泌体miR-1260b对肿瘤相关巨噬细胞M2亚型的影响及其机制。方法人肝癌细胞97H(MHCC97H)细胞经100μmol/L CoCl 2处理24 h后获得缺氧97H细胞。利用丙二醇甲醚醋酸酯(PMA)处理THP-1细胞24 h后获得M0巨噬细胞,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)方法检测THP-1细胞中CD 11b的相对表达量。将常氧/缺氧97H细胞与M0巨噬细胞共培养48 h后,采用RT-qPCR方法检测巨噬细胞中CD 163、CD 206和TNF-α基因相对表达量。通过低温差速离心法提取常氧/缺氧97H细胞的外泌体,通过生物透射电子显微镜观察外泌体的形态,采用纳米颗粒跟踪分析仪(NTA)分析粒子直径,采用Western blot法检测外泌体中凋亡诱导因子6相互作用蛋白(Alix)和钙联蛋白相对表达量。外泌体与M0巨噬细胞共培养48 h后,采用RT-qPCR方法检测M0巨噬细胞中CD 206相对表达量。用携带Dil染剂的外泌体与M0巨噬细胞共培养24 h,采用荧光显微镜观察M0巨噬细胞内的荧光反应。采用RT-qPCR方法检测外泌体中miR-1260b相对表达量,并向M0、M2巨噬细胞内转染miR-1260b Mimic/Inhibitor后,采用RT-qPCR方法检测细胞内CD 206、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)相对表达量。将转染了miR-1260b Inhibitor的常氧/缺氧97H细胞共培养M0巨噬细胞,采用RT-qPCR方法检测M0巨噬细胞CD 206、TNF-α相对表达量。结果PMA处理THP-1细胞24 h后所获得的M0巨噬细胞CD 11b显著高表达(t=78.14,P<0.05)。缺氧97H细胞与M0巨噬细胞共培养可以使巨噬细胞CD 163以及CD 206的表达升高,TNF-α的表达降低(t=14.23~46.88,P<0.05)。成功分离并提取缺氧97H细胞分泌的外泌体颗粒,其可以被M0巨噬细胞吞噬。Western blot结果显示,外泌体颗粒高表达Alix蛋白且基本不表达钙联蛋白。RT-qPCR检测显示,缺氧肝癌源性外泌体共培养M0巨噬细胞后可以使M0巨噬细胞高表达CD 206(t=17.06,P<0.05);缺氧肝癌源性外泌体高表达miR-1260b(t=12.09,P<0.05);转染miR-1260b Mimic后,M0巨噬细胞可以高表达CD 206,低表达TNF-α(t=8.82、8.22,P<0.05),转染Inhibitor后,M2巨噬细胞可以高表达TNF-α(t=16.88,P<0.05)。常氧97H细胞预先转染miR-1260b Mimic可以高表达CD 206,低表达TNF-α(t=26.95、21.45,P<0.05);而缺氧97H细胞预先转染miR-1260b Inhibitor后显著影响了CD 206、TNF-α的表达(t=9.09、12.54,P<0.05)。结论缺氧肝癌细胞源性的外泌体可以诱导M2巨噬细胞极化,miR-1260b是缺氧肝癌细胞源性外泌体对巨噬细胞产生极化影响的关键靶分子,该机制进而促进了肝癌细胞免疫逃逸。

关键词：肝肿瘤细胞低氧外泌体微RNAs 转染巨噬细胞肿瘤逃逸

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柚子-魔芋解酒型功能酸奶的研制

农产品加工 2022年第9期 20-23,26页

作者：赵慧芳张旭邢叶妮武玥杨淑玉武妮张文轩张佳思王俊国内蒙古农业大学食品科学与工程学院内蒙古呼和浩特010018

为了研制风味独特且具有解酒特性的功能酸奶,以牛乳、柚子为主要原料,蜂蜜、魔芋等为辅料,确定最佳添加参数。结果表明,在牛乳中添加白砂糖3.5%,魔芋粉0.06%-卡拉胶0.02%,接种量0.15%,43℃下发酵3.5 h后,加入9%柚子,4%蜂蜜,制得的酸奶... 详细信息

为了研制风味独特且具有解酒特性的功能酸奶,以牛乳、柚子为主要原料,蜂蜜、魔芋等为辅料,确定最佳添加参数。结果表明,在牛乳中添加白砂糖3.5%,魔芋粉0.06%-卡拉胶0.02%,接种量0.15%,43℃下发酵3.5 h后,加入9%柚子,4%蜂蜜,制得的酸奶组织状态均匀,口感细腻,酸甜适中。对酸奶解酒功效的测定发现,该配方酸奶在模拟人工胃液的环境里可降解酒精15%左右,有效解酒时间24 min。该款酸奶具有解酒功效且风味口感俱佳,因此具有广阔的市场前景。

关键词：酸奶柚子魔芋解酒加工工艺

三种蜱媒传染病在媒介蜱和鼠类中复合感染的研究

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中华流行病学杂志 2005年第1期26卷 9-13页

作者：赵秋敏吴晓明张泮河李建民杨红魏茂提张习坦曹务春军事医学科学院微生物流行病研究所北京100071

目的　了解中国部分地区埃立克体病和其他蜱媒传染病病原体的复合感染情况。方法运用聚合酶链反应方法对内蒙古自治区、黑龙江省、北京市的蜱和鼠类标本粒细胞埃立克体、莱姆病螺旋体、斑点热群立克次体的感染进行检测 ,对福建省的蜱和... 详细信息

目的　了解中国部分地区埃立克体病和其他蜱媒传染病病原体的复合感染情况。方法运用聚合酶链反应方法对内蒙古自治区、黑龙江省、北京市的蜱和鼠类标本粒细胞埃立克体、莱姆病螺旋体、斑点热群立克次体的感染进行检测 ,对福建省的蜱和鼠脾脏标本中查菲埃立克体、斑点热立克次体及莱姆病螺旋体的感染情况进行检测。结果　内蒙古采集的全沟硬蜱 4 0 8只 ,人粒细胞埃立克体感染率 6 .8% ,莱姆病螺旋体感染率 7.8% ,斑点热群立克次体感染率 4 5 .6 % ,其中粒细胞埃立克体与莱姆病螺旋体复合感染标本 5份 (5 / 4 0 8) ,粒细胞埃立克体与斑点热群立克次体复合感染标本 1份 (1/ 4 0 8)。黑龙江采集的 4 6只全沟硬蜱中人粒细胞埃立克体感染率 6 .5 % ,莱姆病螺旋体感染率10 .8% ,斑点热群立克次体感染率 34.8% ,其中粒细胞埃立克体与莱姆病螺旋体复合感染标本 1份(1/ 4 6 )。北京市采集的蜱类标本 92 2只 ,有 2只检测到莱姆病螺旋体的DNA片段。福建省宁化地区采集的优势蜱种越原血蜱 2 83组 (6 5 9只 )中 ,查菲埃立克体最小阳性率为 3.8% (2 5组阳性 ) ,38份野鼠脾脏的阳性率为 5 6 .4 % (2 1只阳性 ) ,检测出有 2只 (2 / 6 5 9)蜱同时感染了粒细胞埃立克体和斑点热群立克次体 ,野鼠的脾脏标本中。

关键词：复合感染莱姆病螺旋体粒细胞埃立克体斑点热群立克次体标本体感硬蜱感染率采集

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无锡市小型兽类寄生蜱调查分析

中华卫生杀虫药械 2016年第4期22卷 372-374页

作者：兰策介沈元游颖琦戴新吴小群赵强无锡市疾病预防控制中心江苏无锡214023 宜兴市疾病预防控制中心江苏宜兴214200 无锡市锡山区疾病预防控制中心江苏无锡214000

目的了解无锡市小型兽类寄生蜱,为防控相关蜱媒传染病提供参考。方法在野外采用鼠笼法,在室内采用电子猫灭鼠法捕捉鼠类等小型兽类,检获小型兽类体表寄生蜱,应用SPSS 17.0对数据进行统计分析。结果无锡市小型兽类主要为鼠类、刺猬、黄... 详细信息

目的了解无锡市小型兽类寄生蜱,为防控相关蜱媒传染病提供参考。方法在野外采用鼠笼法,在室内采用电子猫灭鼠法捕捉鼠类等小型兽类,检获小型兽类体表寄生蜱,应用SPSS 17.0对数据进行统计分析。结果无锡市小型兽类主要为鼠类、刺猬、黄鼬、鼩鼱,野外优势鼠类为黑线姬鼠和北社鼠,分别占野外鼠类总数的47.5%和43.2%;室内优势鼠类为黄胸鼠和褐家鼠,分别占室内鼠类总数的67.6%和29.7%。发现7种蜱虫,分别为褐黄血蜱、长角血蜱、越原血蜱、粒形硬蜱、中华硬蜱、寄麝硬蜱和镰形扇头蜱,分别占检获总数的71.7%、10.3%、2.2%、14.0%、0.7%、0.7%、0.4%。刺猬、黄鼬、野外鼠的蜱虫感染率分别为100%、66.7%、15.4%,室内鼠和鼩鼱未发现蜱感染。卡方检验显示,除鼩鼱分别和野外鼠和室内鼠的蜱虫感染率差异不显著外,其他类群的小型兽类蜱虫感染率差异都显著。结论无锡市的蜱媒传染病防控工作,应主要关注黑线姬鼠、北社鼠、刺猬等宿主动物,以及长角血蜱、褐黄血蜱、粒形硬蜱等优势蜱虫。

关键词：小型兽类鼠类蜱虫