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lncRNA2099对猪前脂肪细胞增殖、分化标志基因的影响

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华北农学报 2024年第1期39卷 184-190页

作者：张冬杰马守正汪亮刘娣黑龙江省农业科学院畜牧研究所黑龙江哈尔滨150086

为了探究lncRNA2099对猪前脂肪细胞增殖分化的影响,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测lncRNA2099在猪心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、背肌和背脂及离体培养的前体脂肪细胞增殖和分化阶段的表达水平;利用核质分离技术确定lncRNA2099... 详细信息

为了探究lncRNA2099对猪前脂肪细胞增殖分化的影响,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测lncRNA2099在猪心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、背肌和背脂及离体培养的前体脂肪细胞增殖和分化阶段的表达水平;利用核质分离技术确定lncRNA2099在脂肪细胞中的表达位置;构建真核表达载体pcDNA3.1-lncRNA2099,采用qRT-PCR技术检测在脂肪细胞内过表达该lncRNA后对脂肪细胞增殖、分化相关标志基因表达的影响。结果显示:lncRNA2099存在明显组织表达特异性,且在肾脏和背脂中高表达,在背肌中不表达;lncRNA2099在猪前脂肪细胞增殖阶段12 h表达量最高,随后逐渐降低。在分化阶段第2天表达量最高,随后逐渐降低。核质定位结果表明,lncRNA2099在细胞核与细胞质中均有表达;在脂肪细胞内过表达lncRNA2099后,增殖标志基因P21与成脂分化标志基因LPL表达量极显著升高。lncRNA2099可能作为转录调节因子抑制猪前脂肪细胞增殖、促进成脂分化。

关键词：猪 lncRNA2099 前脂肪细胞增殖成脂分化

基于改进经验模态分解和混合深度学习模型的风速预测

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智慧电力 2024年第1期52卷 1-7页

作者：杨迪王辉贺仁杰成润坤张国维刘达华北电力大学经济与管理学院北京102206 华北电力大学智慧能源研究所北京102206

准确的风速预测对风电消纳和电力系统的稳定运行具有重要意义。提出将改进的自适应噪声完全集合经验模态分解(ICEEMDAN)方法和混合深度学习模型相结合以提高风速预测准确性。首先,采用ICEEMDAN分解方法提取复杂风速序列中不同频率特征;... 详细信息

准确的风速预测对风电消纳和电力系统的稳定运行具有重要意义。提出将改进的自适应噪声完全集合经验模态分解(ICEEMDAN)方法和混合深度学习模型相结合以提高风速预测准确性。首先,采用ICEEMDAN分解方法提取复杂风速序列中不同频率特征;其次,针对不同频率特征构建时间卷积网络(TCN)-门控循环单元神经网络(GRU)模型,获取长期时序信息并对各特征序列进行预测;最后,加权集成每个特征序列的预测值作为最终结果。实验结果表明,所提ICEEMDAN-TCN-GRU模型较对比模型模型预测精度高、稳定性强。

关键词：风电风速预测时间序列分解时间卷积网络门控循环单元神经网络

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低温对民猪骨骼肌线粒体能量代谢基因的影响

西北农业学报 2024年第7期33卷 1195-1201页

作者：张冬杰马守正汪亮李忠秋刘娣黑龙江省农业科学院畜牧研究所哈尔滨150086

为了探究低温环境下民猪肌肉组织内与线粒体能量代谢相关基因的变化情况,以解析民猪抗寒特性的遗传机制。将9头体质量相近的母猪随机分成3组,每组3头,在冬季将其中2组置于室外半敞篷舍内饲养,分别处理3 d(急性低温处理组)和58 d(慢性低... 详细信息

为了探究低温环境下民猪肌肉组织内与线粒体能量代谢相关基因的变化情况,以解析民猪抗寒特性的遗传机制。将9头体质量相近的母猪随机分成3组,每组3头,在冬季将其中2组置于室外半敞篷舍内饲养,分别处理3 d(急性低温处理组)和58 d(慢性低温处理组),1组置于常规舍内饲养,作为对照组。以背肌为试验材料,采用PCR array方法,对90个与线粒体能量代谢相关基因的表达水平进行检测。结果表明,与对照组相比,急性低温处理组基因的表达水平差异不显著,但慢性低温处理显著改变 ATP5H、 ATP5L、 ATP6V1G3、 COX5A、 COX7A2、 COX7A2L、 NDUFS4、 SDHB、 UQCRQ和 GADD45B基因的表达水平,尤其是 GADD45B,达到了极显著水平(P<0.01),这些基因均为编码OXPHOS系统亚基基因,推测慢性低温诱导了背肌ATP的生成。对 GADD45B基因进一步分析发现,该基因在哺乳动物中高度保守,基本符合分子进化规律,表达具有明显的组织特异性。急性低温处理对民猪背肌内ATP的生成影响不显著,但慢性低温处理诱导ATP的生成,以维持体温恒定。

关键词：民猪骨骼肌低温线粒体能量代谢

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多信息智能传感器融合技术在联合作战中的应用

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国防科技 2024年第1期45卷 22-29页

作者：周宇赵玲杨航张昀李国伟刘娣华北计算技术研究所北京100083

基于传感器融合的相关概念介绍传感器的算法、方式、层次和数据类型。从实现多信息智能传感器的关键技术角度,将常见的关键技术按照战场要素感知、通信数据传输和数据管理及应用三方面展开介绍。以美国西格玛防务公司的应用案例为分析对... 详细信息

基于传感器融合的相关概念介绍传感器的算法、方式、层次和数据类型。从实现多信息智能传感器的关键技术角度,将常见的关键技术按照战场要素感知、通信数据传输和数据管理及应用三方面展开介绍。以美国西格玛防务公司的应用案例为分析对象,介绍多信息融合智能传感器融合技术在战场环境下的应用,同时分析多信息智能传感器的基本架构及特点、工作流程以及能力要素。对多信息智能传感器融合技术的未来发展提出几点思考。

关键词：传感器融合智能化联合作战数据

Clone and Bioinformatics Analysis of Pig SRPK1 Gene 5' UTR Region

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Journal of Northeast Agricultural University(English Edition) 2011年第3期18卷 22-27页

作者： E Guangxin liu di yang Xiuqin zhang dongjie YU Cui College of Animal Science and Technology Northeast Agricultural University Harbin 150030 China Hellongliang Academy of Agricultural Sciences Harbin 150086 China Agricultural College Hainan University Haikou 570228 China

Part 5＇ UTR region of pig SRPK1 gene was cloned by inverse PCR （I-PCR）, then a 425 bp gene sequence was acquired. A promoter region in -1--309 bp was predicted by online tool （TFSEARCH） and 32 binding sites of transcription with scores higher than 85 were getten, of which scores of Spl, MyoD, and HSF2 were over 90. Some of these binding sites of transcription factors were connected with promoters, but TATA-box, which was important to gene expression, hadn＇t been found in this region. By using PCR-SSCP method to search SNPs this part （5＇ UTR of SRPK1 in pig）, total of 40 Large White pigs were obtained as the research objects, but no polymorphism were found. Thus, 5＇ UTR of SRPK1 was speculated with a characteristic of high conservation, while it might have been directly or indirectly selected in commercial breeding. The paper provided a further feature of SRPK1 gene in molecular genetics.

关键词： pig SRPK1 bioinformatics transcription factor SSCP inverse PCR (I-PCR)

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猪视黄醇结合蛋白在毕赤酵母中的表达及检测

东北农业大学学报 2009年第3期40卷 62-65页

作者：张冬杰谷溪杨国伟刘娣黑龙江省农业科学院哈尔滨150086

采用RT-PCR技术从猪的肝脏中扩增到RBP基因,将其与巴斯德毕赤酵母分泌型表达载体pPICZαC重组构建了重组表达载体pPICZαC-RBP,测序正确后将其用SacⅠ内切酶线性化后采用电穿孔法转化巴斯德毕赤酵母菌GS115,经ZeocinTM抗性筛选高拷贝重... 详细信息

采用RT-PCR技术从猪的肝脏中扩增到RBP基因,将其与巴斯德毕赤酵母分泌型表达载体pPICZαC重组构建了重组表达载体pPICZαC-RBP,测序正确后将其用SacⅠ内切酶线性化后采用电穿孔法转化巴斯德毕赤酵母菌GS115,经ZeocinTM抗性筛选高拷贝重组菌株后用甲醇诱导表达,Western Blot分析结果表明,诱导表达的培养上清液中表达出具有生物活性的RBP重组蛋白。

关键词：猪视黄醇结合蛋白毕赤酵母真核表达

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调控民猪Tβ4基因转录因子的筛选与分析

中国畜牧兽医 2019年第9期46卷 2535-2542页

作者：张冬杰汪亮刘洋刘娣黑龙江省农业科学院畜牧研究所哈尔滨150086 农业农村部种养结合重点实验室哈尔滨150086 东北农业大学动物科技学院哈尔滨150030

为了筛选调控民猪胸腺β4(Tβ4)基因转录的增强子,探究该基因的表达调控机制,本研究以民猪基因组DNA为模板,通过PCR扩增Tβ4基因启动子区系列截短片段,与pMD18-T载体连接构建克隆质粒;通过双酶切和连接反应将系列截短片段定向连入pGL3-b... 详细信息

为了筛选调控民猪胸腺β4(Tβ4)基因转录的增强子,探究该基因的表达调控机制,本研究以民猪基因组DNA为模板,通过PCR扩增Tβ4基因启动子区系列截短片段,与pMD18-T载体连接构建克隆质粒;通过双酶切和连接反应将系列截短片段定向连入pGL3-basic载体构建双荧光素酶重组质粒;将重组质粒转染PK15细胞系,利用双荧光素酶检测系统测定重组质粒的相对荧光素酶活性;根据相对荧光素酶活性的高低进一步筛选Tβ4基因的启动子核心区域;利用3个在线软件预测核心区域内的转录因子结合位点,根据预测结果,使用重叠PCR定点缺失转录因子结合位点构建突变载体,在PK15细胞中以野生型载体为对照检测突变载体的相对荧光素酶活性。结果表明,试验成功构建了6个Tβ4基因系列截短的启动子片段,其中5个片段具有明显的活性。经过两轮的双荧光素酶活性检测发现,-155^-105 bp区域为民猪Tβ4基因的启动子核心区域,经生物信息学分析发现,该区域存在E2F-1、MYBAS1和ELK-1转录因子的结合位点。利用定点缺失构建了3个转录因子缺失的突变载体,经双荧光素酶检测发现仅有ELK-1结合位点的缺失,会造成启动子活性的显著下降(P<0.05)。据此推测ELK-1是民猪Tβ4基因转录的正调控元件。

关键词：民猪 Tβ4基因启动子荧光素酶活性增强子

民猪PGD和LDHA基因的表达与冷诱导研究

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东北农业大学学报 2011年第9期42卷 17-21页

作者：张冬杰刘娣汪亮王文涛杨国伟黑龙江省农业科学院哈尔滨150086

葡萄糖-6-磷酸脱氢酶基因(6-phosphogluconate dehydrogenase,PGD)是戊糖代谢途径中的一个关键酶,乳酸脱氢酶A(Lactate dehydrogenase A,LDHA)是动物体内参与糖酵解的重要酶类之一。为了探讨PGD和LDHA基因在民猪抵御寒冷气候的过程中是... 详细信息

葡萄糖-6-磷酸脱氢酶基因(6-phosphogluconate dehydrogenase,PGD)是戊糖代谢途径中的一个关键酶,乳酸脱氢酶A(Lactate dehydrogenase A,LDHA)是动物体内参与糖酵解的重要酶类之一。为了探讨PGD和LDHA基因在民猪抵御寒冷气候的过程中是否起着一定的生物学作用,研究采用RT-PCR和Real-time PCR的方法,分析了这2个基因在民猪大肠,腿肌、肺、脂肪、心脏、脾脏和肝脏的表达情况以及冷诱导后在腿肌的表达变化情况。结果表明,PGD基因在所检的7个组织内均高水平表达,冷诱导后表达水平显著上升(P<0.05),LDHA基因在所检的7个组织中也均有表达,冷诱导后表达水平出现显著下降(P<0.05)。

关键词： PGD LDHA 民猪冷诱导 Real-time PCR

利用连接介导PCR检测外源基因整合位点体系的建立

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东北农业大学学报 2013年第12期44卷 93-97页

作者：刘娣李斌张冬杰黑龙江省农业科学院哈尔滨150086 东北农业大学动物科学技术学院哈尔滨150030

黑素皮质素受体4(Melanocortin receptor 4,MC4R)基因是影响猪生长肥育性能的主效基因之一,是参与调控体重、采食和能量平衡的关键信号物质。文章以转猪MC4R基因阳性小鼠基因组为试验材料,通过连接介导PCR(ligation-mediated PCR,LM-PCR... 详细信息

黑素皮质素受体4(Melanocortin receptor 4,MC4R)基因是影响猪生长肥育性能的主效基因之一,是参与调控体重、采食和能量平衡的关键信号物质。文章以转猪MC4R基因阳性小鼠基因组为试验材料,通过连接介导PCR(ligation-mediated PCR,LM-PCR)方法,检测猪MC4R基因在小鼠基因组上的整合位点。结果表明,通过显微注射导入的猪MC4R基因随机整合到了小鼠6号染色体的37 236 754位点处。本研究初步建立了利用LM-PCR法对外源基因整合位点检测的体系,可为今后转基因动物检测奠定基础。

关键词：猪 MC4R基因转基因小鼠整合位点 LM—PCR