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考虑间隙磨损的机构过中心锁定可靠性分析

机械强度 2015年第5期37卷 874-879页

作者：秦强李婷婷冯蕴雯薛小锋西北工业大学航空学院西安710072 中国航空工业集团第一飞机设计研究院西安710089

根据机构的具体安装形式,综合考虑了铰链磨损与杆端关节轴承磨损对机构过中心锁定可靠性的影响。提出了自润滑杆端关节轴承磨损计算模型,在"有效杆长理论"和"连续接触模型"的假设下建立了平面四连杆机构过中心锁定可靠性分析模型,给出... 详细信息

根据机构的具体安装形式,综合考虑了铰链磨损与杆端关节轴承磨损对机构过中心锁定可靠性的影响。提出了自润滑杆端关节轴承磨损计算模型,在"有效杆长理论"和"连续接触模型"的假设下建立了平面四连杆机构过中心锁定可靠性分析模型,给出了在考虑初始间隙与磨损情况下的机构过中心锁定可靠性分析方法,并对机构使用关节轴承和铰链连接情况下的过中心可靠性进行了对比分析。研究结果表明,机构过中心锁定失效概率会在机构运动周期达到一定次数后迅速增加;在机构中采用自润滑杆端关节轴承可以显著提高机构过中心锁定可靠性。

关键词：杆端关节轴承过中心锁定磨损间隙可靠性

猪圆环病毒3型ORF2基因的截短表达及间接ELISA抗体检测方法的建立

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畜牧与兽医 2020年第8期52卷 68-74页

作者：何博王勤欧云文达州职业技术学院四川达州635001 开江县动物疫病预防控制中心四川达州636250 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃兰州730046

试验旨在建立一种快速的猪圆环病毒3型(PCV3)抗体检测方法。采用PCR方法对PCV3 ORF2基因主要抗原区域进行扩增,并利用原核表达系统进行截短表达,以纯化后的重组蛋白作为包被抗原,建立间接ELISA抗体检测方法。结果显示:PCR扩增了片段大小... 详细信息

试验旨在建立一种快速的猪圆环病毒3型(PCV3)抗体检测方法。采用PCR方法对PCV3 ORF2基因主要抗原区域进行扩增,并利用原核表达系统进行截短表达,以纯化后的重组蛋白作为包被抗原,建立间接ELISA抗体检测方法。结果显示:PCR扩增了片段大小为348 bp的ORF2基因主要抗原区域,PCR扩增产物克隆至pET-32a原核表达载体,转入大肠杆菌BL21,获得了以包涵体形式表达的重组蛋白,纯化后经Western blot鉴定表明具有良好的反应活性。以重组蛋白作为包被抗原建立了检测PCV3抗体的间接ELISA方法,对PCV3阳性血清的最低检出效价可达1∶20480;用该方法检测猪圆环病毒2型(PCV2)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪细小病毒(PPV)、伪狂犬病毒(PRV)、乙型脑炎病毒(JEV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)等猪常见疫病阳性血清,结果均为阴性;批内重复性试验和批间重复性试验的变异系数均小于5%。应用该方法检测四川地区533份不同日龄临床猪血清样品,PCV3阳性感染率达14.82%。表明建立的ELISA方法具有良好的敏感性、特异性、重复性和临床适用性,为我国商品化PCV3血清学抗体检测试剂盒的研制奠定了基础。

关键词：猪圆环病毒3型 ORF2基因截短表达间接ELISA 抗体检测

猪流行性乙型脑炎病毒一步法RT-PCR的建立及达州市猪流行性乙型脑炎病毒流行病学调查与分析

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黑龙江畜牧兽医 2021年第16期 79-84页

作者：何博王勤欧云文刘俐君达州职业技术学院四川达州635001 开江县动物疫病预防控制中心四川开江636250 中国动物卫生与流行病学中心山东青岛266032 达州市动物疫病预防控制中心四川达州635000

为了建立一种快速检测猪流行性乙型脑炎病毒(Janpanese encephalitis virus,JEV)的病原学检测方法,并掌握达州市JEV的感染情况,试验根据GenBank中JEV E基因序列设计1对检测引物,建立一步法RT-PCR,并对退火温度(50,52,54,56,58℃)、模板... 详细信息

为了建立一种快速检测猪流行性乙型脑炎病毒(Janpanese encephalitis virus,JEV)的病原学检测方法,并掌握达州市JEV的感染情况,试验根据GenBank中JEV E基因序列设计1对检测引物,建立一步法RT-PCR,并对退火温度(50,52,54,56,58℃)、模板添加量(1,2,4,6,8μL)、引物添加量(0.1,0.2,0.4,0.6,0.8μL)进行优化,考察方法的特异性、敏感性、重复性、符合性,同时对2017-2020年分别采集于达州市7个市(县、区)的243份样品进行JEV检测,对检测结果进行不同地区、不同年份、不同季节、不同饲养方式下猪群中JEV阳性率的比较分析。结果表明:优化后的一步法RT-PCR扩增体系为2×Step Buffer 12.5μL,上下游引物(20μmol/L)各0.4μL,RNA(68 ng/μL)4μL,H2O 7.7μL。扩增程序为50℃30 min;95℃5 min;94℃40 s,54℃40 s,72℃40 s,30个循环;72℃10 min;4℃终止反应。该方法能够特异性扩增JEV,而检测猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪伪狂犬病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV-2)、猪细小病毒(PPV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)均为阴性,对JEV RNA的检测灵敏度为27.2 pg,对JEV、CSFV、PRRSV、PEDV、TGEV、PRV、PCV-2、PPV、3份JEV阳性病料、3份JEV阴性病料重复检测3次的结果完全一致,检测243份猪临床病料样品的平均阳性率为9.05%,其中不同地区阳性率为3.45%~13.04%,2017,2018,2019,2020年阳性率分别为5.77%、6.90%、10.29%和12.31%,夏季和冬季的阳性率分别为13.33%和5.17%,规模化养猪场和散养户的阳性率分别为5.94%和11.27%,说明建立的JEV一步法RT-PCR具有良好的特异性、敏感性、重复性和临床适用性,达州市JEV的流行存在个别地区感染情况较严重、2019年和2020年感染情况较2017年和2018年严重、夏季感染情况较冬季严重、散养户感染情况较规模化养猪场严重等特点。

关键词：猪流行性乙型脑炎病毒一步法RT-PCR 检测方法流行病学调查与分析

离子交换纤维深度处理铅锌矿重金属废水试验研究

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水处理技术 2013年第12期39卷 99-101,107页

作者：覃朝科李运稳刘静静易鹞中南大学湖南长沙410083 中国有色桂林矿产地质研究院有限公司广西桂林541004 桂林正翰科技开发有限责任公司广西桂林541805 钦州市环保局广西钦州535009

采用强酸阳离子交换纤维处理铅锌矿含Fe、Zn、Cd、Pb等重金属废水,考察了不同预处理方法和流速下的处理效果。结果表明,经过NaOH、Ca(OH)2(石灰乳)预处理,废水中铁的去除率达99.9%以上,但是采用Ca(OH)2时,引入了大量的Ca、Mg离子,较采用... 详细信息

采用强酸阳离子交换纤维处理铅锌矿含Fe、Zn、Cd、Pb等重金属废水,考察了不同预处理方法和流速下的处理效果。结果表明,经过NaOH、Ca(OH)2(石灰乳)预处理,废水中铁的去除率达99.9%以上,但是采用Ca(OH)2时,引入了大量的Ca、Mg离子,较采用NaOH预处理方法的离子交换纤维单位处理水量降低33%;经离子交换纤维柱处理后,出水中Cd、Zn含量均可达到地表水Ⅲ类水质标准;流速的适度增大对处理效果影响不明显。

关键词：离子交换纤维铅锌矿重金属废水

川东北地区腹泻牛群中牛病毒性腹泻病毒的分子流行病学调查及病毒分离鉴定

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家畜生态学报 2023年第6期44卷 60-64,91页

作者：王勤何博刘小可欧云文刘俐君达州职业技术学院四川达州635001 四川省开江县动物疫病防控中心四川达州636250 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃兰州730046 四川省达州市动物疫病预防控制中心四川达州635000

为了掌握川东北地区腹泻牛群中牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的感染情况和主要流行基因型及亚型,采用RT-PCR方法对采集于川东北地区临床腹泻牛粪便样品进行了病原学检测。根据5'-UTR基因序列进行遗传变异分析和基因分型鉴定,并对RT-PCR阳性样... 详细信息

为了掌握川东北地区腹泻牛群中牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的感染情况和主要流行基因型及亚型,采用RT-PCR方法对采集于川东北地区临床腹泻牛粪便样品进行了病原学检测。根据5'-UTR基因序列进行遗传变异分析和基因分型鉴定,并对RT-PCR阳性样品进行了病毒的分离鉴定。结果显示:97份腹泻样品中BVDV平均阳性感染率为9.28%,达州市的阳性率最高(13.04%)、巴中市的阳性率最低(5.26%)。在5'-UTR基因系统进化树中9份阳性样品均为BVDV-1型,包括BVDV-1a(n=2)和BVDV-1b(n=7),经细胞培养、RT-PCR检测、间接免疫荧光检测共分离鉴定出2株致细胞病变型BVDV。表明川东北地区腹泻牛群中均存在BVDV感染,流行的优势基因亚型为BVDV-1b,丰富了BVDV的分子流行病学资料,为川东北地区BVDV的综合防控提供了理论基础。

关键词：川东北地区腹泻牛群牛病毒性腹泻病毒流行病学调查基因分型病毒分离鉴定

猪细小病毒6型ORF 2基因的截短表达及多克隆抗体制备

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中国畜牧兽医 2023年第6期50卷 2487-2495页

作者：欧云文潘琴汪洋代军飞任绍科张洋张杰开江县动物疫病预防控制中心达州636250 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室兰州730046 河北科技师范学院河北省预防兽医学重点实验室秦皇岛066004

【目的】原核截短表达猪细小病毒6型(Porcine parvovirus type 6,PPV6)ORF 2基因,并制备PPV6 VP1(348 aa-675 aa)蛋白多克隆抗体,为后续研究该蛋白的生物学功能提供材料。【方法】以PPV6分离毒株基因组为模板,PCR扩增获得ORF 2截短基因... 详细信息

【目的】原核截短表达猪细小病毒6型(Porcine parvovirus type 6,PPV6)ORF 2基因,并制备PPV6 VP1(348 aa-675 aa)蛋白多克隆抗体,为后续研究该蛋白的生物学功能提供材料。【方法】以PPV6分离毒株基因组为模板,PCR扩增获得ORF 2截短基因片段,将其克隆至原核表达载体pET30a(+)中构建重组质粒pET30a-PPV6-ORF2。经酶切和测序鉴定后,将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,IPTG诱导表达,Ni-NTA树脂亲和层析纯化,通过SDS-PAGE和Western blotting鉴定纯化后重组蛋白。将纯化后的重组蛋白与弗氏佐剂混匀乳化,免疫新西兰大耳白兔制备多克隆抗体,采用Western blotting、间接免疫荧光试验(IFA)和间接ELISA鉴定免疫兔血清特异性。【结果】成功构建了pET30a-PPV6-ORF2重组表达载体,原核截短表达了PPV6 VP1(348 aa-675 aa)蛋白;SDS-PAGE结果显示,重组PPV6 VP1(348 aa-675 aa)蛋白大小约为40 ku,主要以包涵体形式存在;Western blotting结果显示,该蛋白可与PPV6阳性猪血清发生特异性结合,具有良好的反应原性;Western blotting间接与ELISA结果显示,纯化后免疫兔血清与PPV6全病毒蛋白发生特异性反应,抗体效价为1∶25600;IFA鉴定结果表明,PPV6 VP1(348 aa-675 aa)蛋白兔源多克隆抗体具有良好的特异性。【结论】本研究成功原核截短表达了PPV6 ORF 2基因并制备了兔抗PPV6 VP1(348 aa-675 aa)蛋白多克隆抗体,为PPV6血清学检测方法的建立和PPV6 VP1蛋白的进一步研究提供了参考。

关键词：猪细小病毒6型(PPV6) ORF 2基因截短表达多克隆抗体

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2型糖尿病患者认知功能障碍危险因素的临床研究

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中国现代医生 2013年第13期51卷 44-46页

作者：刘琴陈婉君戚韵雯陈秋霞晏勇重庆医科大学附属第一医院神经内科在读硕士研究生重庆400016

目的研究老年2型糖尿病患者认知功能障碍的危险因素,为早期预防和治疗2型糖尿病患者认知功能障碍提供临床依据。方法选择临床已确诊2型糖尿病的患者211例。采用蒙特利尔认知评估量表(MOCA)中文版对所有入选对象进行认知功能评估,并根据... 详细信息

目的研究老年2型糖尿病患者认知功能障碍的危险因素,为早期预防和治疗2型糖尿病患者认知功能障碍提供临床依据。方法选择临床已确诊2型糖尿病的患者211例。采用蒙特利尔认知评估量表(MOCA)中文版对所有入选对象进行认知功能评估,并根据其结果 MOCA评分结果分为认知功能正常组(NC组)和认知功能障碍组(CI组)。详细记录其性别、年龄、受教育程度、工作性质、患糖尿病年限、是否合并高血压,并测定其体重指数及糖化血红蛋白水平等。结果 2型糖尿病认知功能障碍组与认知功能正常组在年龄、受教育程度、工作性质、体重指数和糖化血红蛋白水平之间存在统计学差异(P<0.05)。多因素逐步回归分析发现年龄、受教育程度及糖化血红蛋白水平是MOCA评分的独立危险因素。结论高龄、高体重指数和高糖化血红蛋白是2型糖尿病患者的认知功能障碍的危险因素。受教育程度高是2型糖尿病认知功能障碍的保护因素。有效控制血糖、体重、增加受教育的程度等可能有助于预防或延缓2型糖尿病患者认知功能障碍的发生。

关键词： 2型糖尿病认知功能障碍

藏红花素对心肌微血管内皮细胞缺氧复氧损伤的保护作用研究

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今日药学 2019年第10期29卷 669-672,683页

作者：曾超姚远范智文秦晓平席玉胜陈运文范积平中国人民解放军陆军第七十四集团军医院心血管内科广东广州510318 中国人民解放军陆军第七十四集团军医院药剂科广东广州510318 中国人民解放军联勤保障部队第923医院综合医疗科广西贵港537105

目的探讨藏红花素通过降低氧化应激水平对心肌微血管内皮细胞缺氧复氧损伤的保护作用。方法分离8周龄雄性C57BL/6N小鼠左心室心肌微血管内皮细胞(CMECs)。细胞分为4组:正常细胞组(Control组)、溶剂对照组(Vehicle组)、缺氧复氧组(H/R组... 详细信息

目的探讨藏红花素通过降低氧化应激水平对心肌微血管内皮细胞缺氧复氧损伤的保护作用。方法分离8周龄雄性C57BL/6N小鼠左心室心肌微血管内皮细胞(CMECs)。细胞分为4组:正常细胞组(Control组)、溶剂对照组(Vehicle组)、缺氧复氧组(H/R组)、缺氧复氧+藏红花素组(H/R+Crocin组)。检测细胞内超氧阴离子水平、细胞增殖能力、细胞迁移能力及Nox2水平。结果(1)与正常细胞组比较,缺氧复氧组CMECs细胞增殖能力降低(P<0.05),细胞迁移能力显著减弱、细胞内超氧阴离子水平显著升高(P<0.01);(2)予藏红花素预处理后,较缺氧复氧组,缺氧复氧+藏红花素组CMECs细胞增殖能力升高、细胞迁移能力增强、细胞内超氧阴离子水平降低(P<0.05);(3)Western Blot法显示,较正常细胞组,缺氧复氧组Nox2水平显著升高(P<0.01),予藏红花素预处理后,CMECs细胞经过缺氧复氧后,细胞内Nox2水平较缺氧复氧组降低(P<0.05)。结论藏红花素通过降低CMECs细胞缺氧复氧后Nox2水平,减少CMECs细胞内ROS水平,起到保护CMECs细胞缺氧复氧损伤的作用。

关键词：藏红花素心肌微血管内皮细胞缺氧复氧损伤氧化应激 NADPH氧化酶

不同方案治疗丙型肝炎病毒和人类免疫缺陷病毒合并感染患者对血细胞影响的比较

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医学研究杂志 2012年第12期41卷 23-25页

作者：孙洪清黄琴沈芳邬敏周晓明蔡卫平胡芸文上海市公共卫生临床中心感染科 200083 上海市公共卫生临床中心检验科复旦大学上海医学院流行病学教研室广州市第八人民医院感染科

目的探讨以蛋白酶抑制剂(PIs)或非核苷类反转录酶抑制剂(NNRTIs)为主方案治疗丙型肝炎病毒(HCV)/人类免疫缺陷病毒(HIV)合并感染的患者,比较其对血细胞的影响。方法采用随机、开放、对照方法收集初次就诊的273例HCV/HIV合并感染患者为... 详细信息

目的探讨以蛋白酶抑制剂(PIs)或非核苷类反转录酶抑制剂(NNRTIs)为主方案治疗丙型肝炎病毒(HCV)/人类免疫缺陷病毒(HIV)合并感染的患者,比较其对血细胞的影响。方法采用随机、开放、对照方法收集初次就诊的273例HCV/HIV合并感染患者为研究对象。分别用PIs(PIs组)或NNRTIs(NNRTIs组)为主的方案治疗。比较治疗前、后血红蛋白(Hb)、白细胞(WBC)、红血胞(RBC)、血小板(PLT)等指标。结果治疗后PIs组和NNRTIs组Hb、WBC、PLT、RBC均有不同程度的上升,但是NNRTIs组比PIs组上升明显,Hb分别为137.0±24.5g/L和133.0±14.7g/L,WBC分别为(5.810±1.981)×109/L和(4.440±1.244)×109/L,PLT分别为(206.0±66.7)×109/L和(135.0±42.4)×109/L,两组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论 PIs或NNRTIs为主治疗HCV/HIV合并感染的患者对血细胞没有影响。

关键词： PIs NNRTIs HCV HIV 合并感染血细胞