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A novel live attenuated vaccine candidate protects chickens against subtype B avian metapneumovirus

Journal of Integrative Agriculture 2024年第5期23卷 1658-1670页

作者： Lingzhai Meng Mengmeng Yu Suyan Wang yuntong chen Yuanling Bao Peng Liu Xiaoyan Feng Tana He Ru Guo Tao Zhang Mingxue Hu Changjun Liu Xiaole Qi Kai Li Li Gao Yanping Zhang Hongyu Cui Yulong Gao Avian Immunosuppressive Diseases Division State Key Laboratory for Animal Disease Control and PreventionHarbin Veterinary Research InstituteChineseAcademy of Agricultural SciencesHarbin150069China Avian ImmunosuppressiveDiseases DivisionStateKey LaboratoryforAnimal Disease Cont National Poultry Laboratory Animal Resource Center Harbin 150069China

Avian metapneumovirus(aMPV) is a highly contagious pathogen that causes acute upper respiratory tract diseases in chickens and turkeys, resulting in serious economic losses. Subtype B aMPV has recently become the dominant epidemic strain in China. We developed an attenuated aMPV subtype B strain by serial passaging in Vero cells and evaluated its safety and efficacy as a vaccine candidate. The safety test showed that after the 30th passage, the LN16-A strain was fully attenuated, as clinical signs of infection and histological lesions were absent after *** LN16-A strain did not revert to a virulent strain after five serial passages in chickens. The genomic sequence of LN16-A differed from that of the parent wild-type LN16(wtLN16) strain and had nine amino acid mutations. In chickens, a single immunization with LN16-A induced robust humoral and cellular immune responses, including the abundant production of neutralizing antibodies, CD4^(+) T lymphocytes, and the Th1(IFN-γ) and Th2(IL-4 and IL-6)cytokines. We also confirmed that LN16-A provided 100% protection against subtype B aMPV and significantly reduced viral shedding and turbinate inflammation. Our findings suggest that the LN16-A strain is a promising live attenuated vaccine candidate that can prevent infection with subtype B aMPV.

关键词： avian metapneumovirus attenuated protection vaccine candidate chickens

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禽白血病病毒J亚群感染鸡组织中细胞受体chNHE 1的表达分析

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畜牧兽医学报 2024年第8期55卷 3631-3639页

作者：张莉于蒙蒙王颖王素艳许壮壮刘鹏陈运通祁小乐李留安高玉龙天津农学院动物科学与动物医学学院、天津市农业动物繁育与健康养殖重点实验室天津300392 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所、动物疫病防控全国重点实验室禽免疫抑制病创新团队哈尔滨150069

旨在研究鸡钠氢交换蛋白1(chicken sodium hydrogen exchanger isoform 1,chNHE1)在不同类型鸡组织内的表达情况,J亚群禽白血病病毒(subgroup J avian leukosis virus, ALV-J)的组织嗜性及ALV-J感染后组织chNHE1的mRNA变化情况。本研究利用qPCR技术,检测了商品肉鸡、商品蛋鸡和SPF鸡脏器内的chNHE1转录量,ALV-J感染鸡后各组织的病毒载量及组织chNHE1的转录量的变化。结果显示,chNHE1在3种类型鸡的心、肝、脾、肺、肾、盲肠扁桃体、胸腺和法氏囊中均能检测到,但转录量高低存在较大差异,其中,免疫器官内的chNHE1转录量相对较高;SPF鸡接种ALV-J后,心、脾、肾和盲肠扁桃体中的病毒载量相对较高,而肝、肺、胸腺和法氏囊中的病毒载量相对较低;ALV-J感染后,脾、肾和盲肠扁桃体中的chNHE1转录量明显上调,但心中的转录量与空白对照相比无明显变化。本研究分析了3种类型鸡chNHE1的组织转录特点及ALV-J感染对组织内chNHE1转录的影响,该研究结果为探究受体chNHE1的转录与ALV-J的组织嗜性的关系提供重要的理论依据。

关键词： J亚群禽白血病病毒鸡钠氢交换蛋白1 组织表达转录量变化

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鸡群中鸡传染性贫血病原与抗体检测及分离株VP1基因序列分析

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中国家禽 2024年第2期46卷 52-58页

作者：冯笑艳胡明雪林雨萌刘长军李凯祁小乐崔红玉高立王素艳陈运通王笑梅张艳萍高玉龙中国农业科学院哈尔滨兽医研究所动物疫病防控全国重点实验室黑龙江哈尔滨150069

为了解鸡群中鸡传染性贫血病毒(CAV)感染及抗体产生情况,从黑龙江省两个无临床症状鸡群(B群和S群)中,分别采集血清通过ELISA方法进行抗体检测,采集抗凝血并分离淋巴细胞,针对基因组保守序列设计引物,通过PCR方法进行病原检测,并对从B群... 详细信息

为了解鸡群中鸡传染性贫血病毒(CAV)感染及抗体产生情况,从黑龙江省两个无临床症状鸡群(B群和S群)中,分别采集血清通过ELISA方法进行抗体检测,采集抗凝血并分离淋巴细胞,针对基因组保守序列设计引物,通过PCR方法进行病原检测,并对从B群病原阳性鸡分离到的分离株进行VP1基因序列分析。结果显示,B群和S群CAV抗体阳性率分别为62.7%(79/126)和68.2%(88/129),病原阳性率分别为43.0%(49/114)和62.3%(48/77),其中,B群和S群中抗体和病原双阴性的鸡分别为23.7%(27/114)和15.6%(12/77),而抗体和病原双阳性的鸡分别高达28.1%(32/114)和46.8%(36/77);在双阳性鸡中,B群和S群分别有62.5%(20/32)和58.3%(21/36)抗体滴度在1.0×10^(4)及以上,从B群病原阳性鸡全血中分离到一株CAV(HLJ/2022株),分离株HLJ/2022第394位氨基酸为谷氨酰胺,具有强毒的分子特征;两个鸡群的环境拭子CAV阳性率为10.0%(3/30),存在于消毒前的鸡蛋表面、更衣处和鞋底。研究表明,检测鸡群的CAV抗体阳性率在62.7%以上,病原阳性率在43.0%以上,抗体滴度在1.0×104及以上CAV仍可存在,CAV流行株(HLJ/2022)具有强毒分子特征,鸡群环境中存在CAV污染,结果为CIA防控提供重要的参考意见。

关键词：鸡传染性贫血病毒血清学检测病原学检测病毒分离鉴定 VP1基因序列分析

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基于网络药理学及分子对接方法探究舒胸方治疗冠心病的机制研究

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广东化工 2024年第2期51卷 133-137页

作者：杨策冉珍珍龙冰冰易东阳朱小龙陈芸彤庞毅王文祥重庆三峡医药高等专科学校药学院重庆404120 三峡库区道地药材开发利用重庆市重点实验室重庆404120 重庆文理学院重庆402160

目的:研究舒胸方治疗冠心病(CHD)的分子机制。方法:应用TCMSP获取舒胸方中红花、川芎、三七的化学成分,GeneCards和OMIM数据库预测舒胸方活性成分和冠心病靶点;用STRING数据库绘制成分-靶点PPI网络图;以Cytoscape软件绘制“成分-靶点-... 详细信息

目的:研究舒胸方治疗冠心病(CHD)的分子机制。方法:应用TCMSP获取舒胸方中红花、川芎、三七的化学成分,GeneCards和OMIM数据库预测舒胸方活性成分和冠心病靶点;用STRING数据库绘制成分-靶点PPI网络图;以Cytoscape软件绘制“成分-靶点-疾病”网络图,对于所获得的靶点和化合物分子信息应用微生信平台分别再进行GO和KEGG富集分析;使用PDB、Pubchem数据库和AutoDockTools软件对舒胸方核心化合物和CHD核心靶点进行分子对接。结果:筛得舒胸方中497个化学成分及8408个CHD的相关靶点;PPI网络分析获取353个交集靶点后,根据Degree值得到30个核心靶点,其主要核心靶点包括SRC、STAT3、PIK3R1等。GO功能富集分析得到112条与生物过程相关条目、102条与分子功能相关条目、63条与细胞组分相关条目(P<0.05),KEGG通路富集分析得到P13K-Akt、MAPK等164条通路(P<0.05)分子对接结果显示木脂素与SRC,6-羟基黄酮与STAT3,杨酶酮与PIK3R1具有较高的对接活性。结论:舒胸方的多种活性成分,如木脂素,6-羟基黄酮,杨酶酮可能通过抑制SRC,STAT3、PIK3R1的基因表达进而调控PI3K-AKT、MAPK等信号通路来治疗CHD。

关键词：舒胸方网络药理学冠心病分子对接作用机制

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表达基因Ⅰ亚型禽呼肠孤病毒σB和σC的重组4型禽腺病毒的拯救及鉴定

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中国兽医科学 2024年第9期54卷 1175-1181页

作者：许壮壮郭茹王素艳高立陈运通张涛高宁玉吴龙波祁小乐张艳萍崔红玉刘永振段雨路王牟平高玉龙黑龙江八一农垦大学动物科技学院黑龙江大庆163000 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所动物疫病防控全国重点实验室禽免疫抑制病创新团队黑龙江哈尔滨150069

为获得1株能够融合表达基因Ⅰ亚型禽呼肠孤病毒(avian reovirusⅠ-sub,ARV GCⅠ-sub)σB和σC的重组4型禽腺病毒(fowl adenovirus 4,FAdV-4)株,以禽腺病毒rHN20为病毒载体,构建表达σB和σC蛋白的重组黏粒rHN20-r1966-ARV GCⅠ-sub,使... 详细信息

为获得1株能够融合表达基因Ⅰ亚型禽呼肠孤病毒(avian reovirusⅠ-sub,ARV GCⅠ-sub)σB和σC的重组4型禽腺病毒(fowl adenovirus 4,FAdV-4)株,以禽腺病毒rHN20为病毒载体,构建表达σB和σC蛋白的重组黏粒rHN20-r1966-ARV GCⅠ-sub,使用新型Fosmid黏粒拯救系统进行病毒拯救。通过PCR、间接免疫荧光试验(ⅠFA)、Western-blot以及体外复制动力学曲线鉴定重组毒株。结果显示,在感染的LMH细胞中成功检测到ARVGCⅠ-sub的σB和σC基因;Western-blot结果显示,在感染重组病毒的LMH细胞中成功检测到FAdV-4的Fiber蛋白、ARVGCⅠ-subσB和σC蛋白;ⅠFA结果显示,能特异性检测到FAdV-4的Fiber蛋白、ARVGCⅠ-subσB和σC蛋白;重组毒rHN20-r1966-ARV GCⅠ-sub与亲本毒rHN20的复制能力无明显差异;表明重组病毒rHN20-r1966-ARV GCⅠ-sub拯救成功。重组病毒rHN20-r1966-ARV GCⅠ-sub的成功构建为同时靶向ARVσB和σC蛋白的ARV防控疫苗的研制提供了技术支撑,为ARV与FAdV-4的防控奠定了基础。

关键词：基因Ⅰ亚型禽呼肠孤病毒 4型禽腺病毒 σB σC 重组病毒

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基因Ⅳ型禽呼肠孤病毒σC蛋白单克隆抗体的制备及功能鉴定

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中国动物检疫 2024年第8期41卷 98-104页

作者：高金慧王素艳刘芮祁小乐陈运通张艳萍崔红玉刘永振段雨路高立高玉龙黑龙江八一农垦大学动物科技学院黑龙江大庆163000 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所动物疫病防控全国重点实验室黑龙江哈尔滨150069

为制备基因Ⅳ型(GCⅣ)禽呼肠孤病毒(avian reovirus,ARV)σC蛋白单克隆抗体,构建了重组原核表达质粒pCold-I-ARV-GCⅣ-σC,将重组质粒导入感受态细胞BL21(DE3)中进行蛋白诱导表达;随后将纯化后的σC蛋白免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合技... 详细信息

为制备基因Ⅳ型(GCⅣ)禽呼肠孤病毒(avian reovirus,ARV)σC蛋白单克隆抗体,构建了重组原核表达质粒pCold-I-ARV-GCⅣ-σC,将重组质粒导入感受态细胞BL21(DE3)中进行蛋白诱导表达;随后将纯化后的σC蛋白免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合技术制备杂交瘤细胞,利用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)筛选获得阳性杂交瘤细胞;以间接免疫荧光(IFA)和蛋白免疫印迹(Western blot)试验鉴定杂交瘤细胞后,将杂交瘤细胞株通过腹腔注射小鼠制备单克隆抗体腹水,以ELISA测定腹水效价。结果显示:成功筛选出一株分泌ARV GCⅣσC蛋白单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞株(1H4);制备的单克隆抗体能与ARV GCⅣσC蛋白发生反应,同时与感染不同基因型ARV的鸡肝癌细胞(LMH)均有良好的反应性;该单克隆抗体识别重链为IgG1,其腹水ELISA效价为1:256000。结果表明,成功制备ARV GCⅣσC蛋白单克隆抗体,其效价高,反应性良好,为进一步研究σC蛋白功能、ARV致病机理以及建立临床诊断方法奠定了基础。

关键词：禽呼肠孤病毒基因Ⅳ型 σC蛋白单克隆抗体功能鉴定

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Human umbilical cord mesenchymal stem cells attenuate diabetic nephropathy through the IGF1R-CHK2-p53 signalling axis in male rats with type 2 diabetes mellitus

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Journal of Zhejiang University-Science B(Biomedicine & Biotechnology) 2024年第7期25卷 568-580页

作者： Hao ZHANG Xinshu WANG Bo HU Peicheng LI Yierfan ABUDUAINI Hongmei ZHAO Ayinaer JIEENSIHAN Xishuang chen Shiyu WANG Nuojin GUO Jian YUAN Yunhui LI Lei LI yuntong YANG Zhongmin LIU Zhaosheng TANG Hua WANG Department of Endocrinology Shanghai East HospitalSchool of MedicineTongji UniversityShanghai 200120China Research Center for Translational Medicine Shanghai East HospitalSchool of MedicineTongji UniversityShanghai 200120China Department of Cardiology Shanghai East HospitalSchool of MedicineTongji UniversityShanghai 200120China Department of Biochemistry and Molecular Biology School of MedicineTongji UniversityShanghai 200331China Shanghai Institute of Stem Cell Research and Clinical Translation Shanghai East HospitalShanghai 200120China Ji’an Hospital Shanghai East HospitalJi’an 343000China

diabetes mellitus(DM)is a disease syndrome characterized by chronic hyperglycaemia.A long-term high-glucose environment leads to reactive oxygen species(ROS)production and nuclear DNA *** umbilical cord mesenchymal stem cell(HUcMSC)infusion induces significant antidiabetic effects in type 2 diabetes mellitus(T2DM)***-like growth factor 1(IGF1)receptor(IGF1R)is important in promoting glucose metabolism in diabetes;however,the mechanism by which HUcMSC can treat diabetes through IGF1R and DNA damage repair remains *** this study,a DM rat model was induced with high-fat diet feeding and streptozotocin(STZ)administration and rats were infused four times with *** glucose,interleukin-6(IL-6),IL-10,glomerular basement membrane,and renal function were *** that interacted with IGF1R were determined through coimmunoprecipitation *** expression of IGF1R,phosphorylated checkpoint kinase 2(p-CHK2),and phosphorylated protein 53(p-p53)was examined using immunohistochemistry(IHC)and western blot ***-linked immunosorbent assay(ELISA)was used to determine the serum levels of 8-hydroxydeoxyguanosine(8-OHdG).Flow cytometry experiments were used to detect the surface markers of *** identification of the morphology and phenotype of HUcMSC was performed by way of oil red“O”staining and Alizarin red *** rats exhibited abnormal blood glucose and IL-6/10 levels and renal function changes in the glomerular basement membrane,increased the expression of IGF1 and ***1R interacted with CHK2,and the expression of p-CHK2 was significantly decreased in IGF1R-knockdown *** cisplatin was used to induce DNA damage,the expression of p-CHK2 was higher than that in the IGF1R-knockdown group without cisplatin *** infusion ameliorated abnormalities and preserved kidney structure and function in DM *** expression of IGF1,IGF1R,p-CHK2,and p-p53,and the level of 8-OHdG in the DM group increased sign

关键词： Insulin-like growth factor 1 receptor(IGF1R) Checkpoint kinase 2(CHK2) Protein 53(p53) Diabetes mellitus Human umbilical cord mesenchymal stem cell(HUcMSC) DNA damage repair

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Decitabine induces IRF7-mediated immune responses in p53-mutated triple-negative breast cancer:a clinical and translational study

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Frontiers of Medicine 2024年第2期18卷 357-374页

作者： Haoyu Wang Zhengyuan Wang Zheng Wang Xiaoyang Li yuntong Li Ni Yan Lili Wu Ying Liang Jiale Wu Huaxin Song Qing Qu Jiahui Huang Chunkang Chang Kunwei Shen Xiaosong chen Min Lu Department of General Surgery Comprehensive Breast Health CenterRuijin Hospital Affiliated to Shanghai Jiao Tong University School of MedicineShanghai200025China Shanghai Institute of Hematology State Key Laboratory of Medical GenomicsNational Research Center for Translational Medicine(Shanghai)Ruijin Hospital Affiliated to Shanghai Jiao Tong University School of MedicineShanghai200025China Department of Hematology Shanghai Institute of HematologyRuijin Hospital Affiliated to Shanghai Jiao Tong University School of MedicineShanghai200025China Department of Hematology Shanghai Jiao Tong University Affiliated Sixth People’s HospitalShanghai200025China

p53 is mutated in half of cancer ***,no p53-targeting drugs have been ***,we reposition decitabine for triple-negative breast cancer(TNBC),a subtype with frequent p53 mutations and extremely poor *** a retrospective study on tissue microarrays with 132 TNBC cases,DNMT1 overexpression was associated with p53 mutations(P=0.037)and poor overall survival(OS)(P=0.010).In a prospective DEciTabinE and Carboplatin in TNBC(DETECT)trial(NCT03295552),decitabine with carboplatin produced an objective response rate(ORR)of 42%in 12 patients with stage IV *** the 9 trialed patients with available TP53 sequencing results,the 6 patients with p53 mutations had higher ORR(3/6 vs.0/3)and better OS(16.0 vs.4.0 months)than the patients with wild-type *** a mechanistic study,isogenic TNBC cell lines harboring DETECT-derived p53 mutations exhibited higher DNMT1 expression and decitabine sensitivity than the cell line with wild-type *** the DETECT trial,decitabine induced strong immune responses featuring the striking upregulation of the innate immune player IRF7 in the p53-mutated TNBC cell line(upregulation by 16-fold)and the most responsive patient with *** integrative studies reveal the potential of repurposing decitabine for the treatment of p53-mutated TNBC and suggest IRF7 as a potential biomarker for decitabine-based treatments.

关键词： p53 mutation triple-negative breast cancer decitabine DNMT1 IRF7 innate immune response

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我国部分地区A2dB1型传染性法氏囊病病毒新型变异株的鉴定及序列分析

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中国家禽 2024年第9期46卷 194-200页

作者：张文英于航博姜楠王国栋牛鑫鑫黄萌萌张玉龙韩金泽许萌萌刘长军王素艳李凯高立崔红玉张艳萍陈运通高玉龙祁小乐中国农业科学院哈尔滨兽医研究所动物疫病防控全国重点实验室禽免疫抑制病创新团队黑龙江哈尔滨150001 世界动物卫生组织传染性法氏囊病参考实验室黑龙江哈尔滨150001

为持续了解传染性法氏囊病病毒新型变异株(Novel variant infectious bursal disease virus,nVarIBDV)在我国流行情况,研究收集2021—2022年6个主要养禽地区疑似传染性法氏囊病(Infectious bursal disease,IBD)鸡病料,采用RT-PCR进行检测,并对11株IBDV代表毒株的基因组双节段代表区段VP2-HVR和VP1-B-marker进行基因测序及序列分析。结果显示:所检测病料的IBDV阳性率为20.65%(19/92),其中11株IBDV代表毒株均为A2dB1型nVarIBDV。研究表明,nVarIBDV在我国主要养禽地区仍持续流行,而且出现了值得注意的新的突变位点,有必要进行持续的IBDV流行病学监测。

关键词：传染性法氏囊病病毒新型变异株 A2dB1型流行病学

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PJ-80型无线电测向机性能探究与装配调试

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信息化研究 2018年第6期44卷 73-78页

作者：陈云桐马和明南京市江宁高级中学南京211100

无线电测向运动是一项科技体育竞技活动,江苏省无线电测向锦标赛至2018年已是第19届。多年来,江苏的无线电测向运动发展领跑全国,无线电测向竞赛项目包括3.5MHz测向机制作(装配调试)、无线电测向计时赛。运动员的身体素质是提升竞技成... 详细信息

无线电测向运动是一项科技体育竞技活动,江苏省无线电测向锦标赛至2018年已是第19届。多年来,江苏的无线电测向运动发展领跑全国,无线电测向竞赛项目包括3.5MHz测向机制作(装配调试)、无线电测向计时赛。运动员的身体素质是提升竞技成绩的基础,测向技术水平和测向机性能探究才是取得良好成绩的关键因素。文章介绍了PJ-80型无线电测向机原理、无线电发射机发射信号的特点、磁性天线工作原理。在无线电测向机装配调试过程中,对无线电测向机的3项性能指标:方向性、灵敏度、频率覆盖范围进行了分析探究。经历过日常训练和参赛,作者体会到在中学阶段开展该项活动有利于学生培养对电子信息、通信导航等学科兴趣,为学生进入高等教育阶段进一步学习打下良好的基础。

关键词：无线电测向运动测向机性能方向性灵敏度频率覆盖范围装配调试

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