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产气荚膜梭菌α-β2-ε融合蛋白原核表达及其间接ELISA方法的建立

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微生物学通报 2024年第8期51卷 3189-3200页

作者：潘瑶任小侠胡云皓王雅茜刘燕蓝岚王豪杰岳怀宁吴建平朱良全四川省甘孜藏族自治州畜牧业科学研究所四川康定626000 中国兽医药品监察所北京100081

【背景】产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens)是引起牛魏氏梭菌病(猝死症)的主要病原,严重危害养牛业。酶联免疫吸附法(ELISA)是诊断疫病及抗体检测的重要手段。【目的】表达重组α-β2-ε融合蛋白,并以此为靶抗原建立间接ELISA抗体... 详细信息

【背景】产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens)是引起牛魏氏梭菌病(猝死症)的主要病原,严重危害养牛业。酶联免疫吸附法(ELISA)是诊断疫病及抗体检测的重要手段。【目的】表达重组α-β2-ε融合蛋白,并以此为靶抗原建立间接ELISA抗体检测方法,为临床检测牦牛***及流行病学调查提供技术支持。【方法】利用生物信息学软件(EditSeq、Protean)和Jameson-Wolf方法分析牛源***的α、β2和ε蛋白抗原指数,截取抗原指数较高肽段并用柔性Linker连接,经密码子优化后克隆至载体pET-32a(+),构建重组表达质粒pET-32α-β2-ε,转化至大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)感受态细胞,经培养、诱导表达、纯化后采用SDS-PAGE和Western blotting鉴定。以重组α-β2-ε融合蛋白作为包被抗原,经棋盘法和控制单一变量法优化反应条件,建立间接ELISA抗体检测方法,通过受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线确定临界值并对其敏感性、特异性、重复性和临床效果进行评价。【结果】α的241‒403肽段、β2的161‒355肽段、ε的154‒331肽段抗原指数较高,将它们连接并融合表达,经SDS-PAGE和Western blotting鉴定融合蛋白表达正确。ELISA抗体检测方法最佳工作条件为:抗原包被浓度5μg/mL 4℃过夜或37℃孵育60 min;5%脱脂乳于37°C封闭1 h;血清稀释度为1:150于37°C孵育30 min;酶标二抗1:2000于37°C孵育30 min;避光显色10 min。检测临界值为0.4702;敏感性高,可检测阳性血清最大稀释度为1:3200;特异性强,与溶血性曼氏杆菌、沙门氏菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等阳性血清均无交叉反应;重复性好,批内和批间变异系数均小于10%。四川省甘孜藏族自治州部分地区共277份牦牛血清样品检测结果显示,***抗体阳性率为89.89%,与商品化产气荚膜梭菌α毒素ELISA检测试剂盒检测结果基本一致。【结论】成功制备重组α-β2-ε融合蛋白并建立检测***的间接ELISA抗体检测方法。

关键词：产气荚膜梭菌 α毒素 β2毒素 ε毒素融合表达间接ELISA

Comparative analysis of the characteristics of outlet short circuit and winding insulation fault of distribution transformer and its preventive measures

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High Voltage 2024年第3期9卷 700-709页

作者： Richang Xian Yuyao hu Bingqian Zhang Qingyu Rong Rujie Zhao Wei Wang Yang Guo yunhao Li College of Electrical and Electronic Engineering Shandong University of TechnologyZiboChina State Grid of China Technology College JinanChina Shandong huineng Electric Co. Ltd.ZiboChina

Outlet short circuit on the low-voltage(LV)side and winding inter-turn short circuit faults are hazardous to transformer *** investigate the formation mechanism of winding insulation faults of distribution transformer,ANSYS Maxwell was used to build a coupled magnetic field-circuit model with the same structural dimension as the actual distribution *** outlet short circuit and winding inter-turn insulation faults were set by using the voltage-controlled switch in the external circuit of the ***-sequently,the differences in the electromagnetic characteristics and the electrodynamic force distributions of the windings under three operating conditions,namely,nominal load,three-phase outlet short circuit on the LV side and inter-turn insulation failure were studied,*** results show that compared with the rated load,in the cases of outlet short circuit and inter-turn insulation faults,the amplitude of winding current in-creases by 20 and 50 times,the magnetic field strength grows by 20 and 17 times,and the electrodynamic force rises by 400 and 230 times,*** short circuit fault is more likely to cause the winding instability and deformation,and inter-turn short circuit fault can easily burn out winding ***,corresponding preventive measures were proposed.

关键词： fault characteristics winding

Identification of Nonstructural Protein 8 as the N-Terminus of the RNA-Dependent RNA Polymerase of Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus

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Virologica Sinica 2018年第5期33卷 429-439页

作者： Yuanyuan Liu yunhao hu Yue Chai Liping Liu Jiangwei Song Shaochuan Zhou Jia Su Lei Zhou Xinna Ge Xin Guo Jun Han Hanchun Yang Key Laboratory of Animal Epidemiology of the Ministry of Agriculture College of Veterinary Medicine and State Key Laboratory of Agrobiotechnology China Agricultural University

Porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV) is a member within the family Arteriviridae of the order Nidovirales. Replication of this positive-stranded RNA virus within the host cell involves expression of viral replicase proteins encoded by two ORFs, namely ORF1 a and ORF1 b. In particular, translation of ORF1 b depends on a-1-ribosomal frameshift strategy. Thus, nonstructural protein 9 (nsp9), the first protein within ORF1 b that specifies the function of the viral RNA-dependent RNA polymerase, is expressed as the C-terminal extension of nsp8, a small nsp that is encoded by ORF1 a. However, it has remained unclear whether the mature form of nsp9 in virus-infected cells still retains nsp8,addressing which is clearly critical to understand the biological function of nsp9. By taking advantage of specific antibodies to both nsp8 and nsp9, we report the following findings. (1) In infected cells, PRRSV nsp9 was identified as a major product with a size between 72 and 95 k Da (72–95 KDa form), which exhibited the similar mobility on the gel to the in vitro expressed nsp8–9 ORF1 b, but not the ORF1 b-coded portion (nsp9 ORF1 b). (2) The antibodies to nsp8, but not to nsp7 or nsp10, could detect a major product that had the similar mobility to the 72–95 KDa form of nsp9. Moreover, nsp9 could be co-immunoprecipitated by antibodies to nsp8, and vice versa. (3) Neither nsp4 nor nsp2 PLP2 was able to cleave nsp8–nsp9 in vitro. Together, our studies provide experimental evidence to suggest that nsp8 is an N-terminal extension of *** findings here paves way for further charactering the biological function of PRRSV nsp9.

关键词： Porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV) Nsp8 Nsp9

Theta Oscillations Support Prefrontal-hippocampal Interactions in Sequential Working Memory

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Neuroscience Bulletin 2024年第2期40卷 147-156页

作者： Minghong Su Kejia hu Wei Liu yunhao Wu Tao Wang Chunyan Cao Bomin Sun Shikun Zhan Zheng Ye Institute of Psychology Chinese Academy of SciencesBeijing 100101China Department of Psychology University of Chinese Academy of SciencesBeijing 100049China Department of Neurosurgery Center for Functional NeurosurgeryRuijin HospitalShanghai Jiao Tong University School of MedicineShanghai 200025China Institute of Neuroscience Center for Excellence in Brain Science and Intelligence TechnologyChinese Academy of SciencesShanghai 200031China

The prefrontal cortex and hippocampus may support sequential working memory beyond episodic memory and spatial *** stereoelectroencephalography(SEEG)study investigated how the dorsolateral prefrontal cortex(DLPFC)interacts with the hippocampus in the online processing of sequential *** patients with epilepsy(eight women,age 27.6±8.2 years)completed a line ordering task with SEEG recordings over the DLPFC and the *** showed longer thinking times and more recall errors when asked to arrange random lines clockwise(random trials)than to maintain ordered lines(ordered trials)before recalling the orientation of a particular ***,the ordering-related increase in thinking time and recall error was associated with a transient theta power increase in the hippocampus and a sustained theta power increase in the DLPFC(3–10 Hz).In particular,the hippocampal theta power increase correlated with the memory precision of line ***,theta phase coherences between the DLPFC and hippocampus were enhanced for ordering,especially for more precisely memorized ***,the theta band DLPFC→hippocampus influence was selectively enhanced for ordering,especially for more precisely memorized *** study suggests that theta oscillations may support DLPFC-hippocampal interactions in the online processing of sequential information.

关键词： Sequential working memory Hippocampus Dorsolateral prefrontal cortex Theta oscillations Stereoelectroencephalography(SEEG) Phase coherence Granger causality

晚期资本主义的异化消费与生态——论安德列·高兹对异化消费的生态批判

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北京理工大学学报（社会科学版） 2023年第6期25卷 1-9页

作者：胡云皓中国人民大学马克思主义学院北京100872

在西方马克思主义学界探讨晚期资本主义社会问题和生态危机的过程中,异化消费始终是一个绕不开的研究主题。高兹对此做出最为尖锐和全面的生态批判。与马克思时代相比,职业劳动进一步异化,呈现出一系列新特点、新形式和新趋势。这就不... 详细信息

在西方马克思主义学界探讨晚期资本主义社会问题和生态危机的过程中,异化消费始终是一个绕不开的研究主题。高兹对此做出最为尖锐和全面的生态批判。与马克思时代相比,职业劳动进一步异化,呈现出一系列新特点、新形式和新趋势。这就不断催生和加剧异化消费,进而二者相互作用,共同推动资本主义的“双面社会”。从生成逻辑上看,异化劳动通过制造虚假需要作为中介,使消费主要服务于资本增殖的无限需求,从而导致生活必需品和自然资源的双重匮乏。异化消费是劳动、需要、生态等各种异化现象的重要表征和集合点,使得社会陷入一种“丰裕的贫困”状态。只有先进的社会主义制度才能通过缩短工时、重新分配必要劳动和推行文化变革等方式来克服经济理性和异化消费,从而实现生态重建的现代化。这一批判理论在价值取向、文化观念和适度原则等方面对中国推动生产方式和消费方式的绿色转型带来重要启示。

关键词：异化劳动异化消费虚假需要经济理性生态理性

根据股骨头负重区判断非创伤性股骨头坏死带塌陷生存

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中华关节外科杂志（电子版） 2024年第3期18卷 307-313页

作者：江梦钰陈志文胡云浩凡一诺方汉军刘予豪王海彬何伟陈镇秋周驰广州中医药大学第一临床医学院 510499 广州中医药大学第三临床医学院 510080 广州中医药大学第一附属医院 510405 广州中医药大学第三附属医院 510378 广州中医药大学第一附属医院 510405 广州中医药大学（茂名市中医院） 525000

目的本研究旨在通过股骨头负重区完整率来探讨股骨头坏死（ONFH）“带塌陷生存”的条件，评估其诊断国际骨循环研究协会（ARCO ⅢA）期患者结局的可靠性。方法选择广州中医药大学第一附属医院（2010年至2017年）的非创伤性股骨头坏... 详细信息

目的本研究旨在通过股骨头负重区完整率来探讨股骨头坏死（ONFH）“带塌陷生存”的条件，评估其诊断国际骨循环研究协会（ARCO ⅢA）期患者结局的可靠性。方法选择广州中医药大学第一附属医院（2010年至2017年）的非创伤性股骨头坏死患者中属于ARCO ⅢA期“带塌陷”的患者，拥有正常沟通能力，临床就诊影像学资料完整，知情同意，定期复查。同时排除患有其他严重慢性病史的老年患者，影像学资料不完整、用药不当、进行全髋关节置换术或保髋手术患者。通过日本骨坏死研究会（JIC）分型对进行分类，根据结局分为塌陷进展组和带塌陷生存组。通过X线平片的标准正位（AP）和蛙位（FL）测量外侧股骨头负重区完整率（APIR）和前侧股骨头负重区完整率（FLIR），并明确该指标与结局的关系。然后通过单因素和多因素logistic回归分析确定塌陷进展的危险因素，最后采用受试者工作特征（ROC）曲线分析负重区完整率对塌陷进展和带塌陷生存诊断的可靠性。结果共纳入72例（90髋）ARCO ⅢA期ONFH患者，其中带塌陷生存37髋随访时间85（72，166）个月，塌陷进展53髋随访时间24（6，78）个月；JIC分型（χ2=21.312，P<0.001）是影响“带塌陷生存”的因素；ROC曲线分析结果显示，APIR的临界值为16.6%［线下面积（AUC）=91.0%，Youden指数=0.78，P<0.000 1）］，即APIR≥16.6%时与带塌陷生存相关；FLIR 的临界值为16.1%（AUC=89.7%，Youden指数=0.82，P<0.000 1），即FLIR≥16.1%时与带塌陷生存相关。该结果提示APIR和FLIR与结局相关。结论前外侧股骨头负重区完整率与带塌陷生存密切相关，提示ARCOⅢA期ONFH患者可根据APIR和FLIR判断是否符合“带塌陷生存”的条件，以此合理选择治疗手段。

关键词：股骨头坏死负重预后

基于改进MVCNN的IFC构件分类识别审查方法

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湖南大学学报（自然科学版） 2023年第11期50卷 216-223页

作者：王茹胡芸浩黄炜赵俊浩西安建筑科技大学土木工程学院陕西西安710055 结构工程与抗震教育部重点实验室陕西西安710055

为实现IFC构件精确、高效分类,提出一种改进的多视图卷积神经网络(Multiview Convolutional Neural Network,MVCNN)模型,该模型引入了自注意力模块和长短期记忆(LongShort-termMemory,LSTM)网络,针对MVCNN模型特征融合的局限性,设计了LS... 详细信息

为实现IFC构件精确、高效分类,提出一种改进的多视图卷积神经网络(Multiview Convolutional Neural Network,MVCNN)模型,该模型引入了自注意力模块和长短期记忆(LongShort-termMemory,LSTM)网络,针对MVCNN模型特征融合的局限性,设计了LSTM_ATT模块;通过对各视图数据特征关系的自适应调整,并结合注意力权重对输入的各视图数据进行融合,得到一个更具辨识性的3D形状描述符,从而提高模型对各相似IFC构件的分类检测性能.使用IFCNet数据集对建筑领域20个主要类别的IFC构件进行训练并在测试集上对改进MVCNN模型与MVCNN模型进行实验对比.实验结果表明,改进模型的分类准确率和F1值分别达到了88.27%、86.72%,相比改进前准确率提高了9.46%,对相似构件之间的分类识别效果明显.

关键词： IFC构件分类识别多视图卷积神经网络深度学习审查

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碳酸钙纳米孔隙中凝聚水数学模型及实验研究

中国岩溶 2020年第3期39卷 311-318页

作者：胡云皓于青春中国地质大学(北京)水资源与环境学院北京100083

岩石纳米孔隙中的凝聚水与许多水文地质工程地质问题关系密切:干旱区凝聚水是维持当地生态平衡的重要水资源,石雕石刻文物保护中凝聚水问题是需要考虑的关键因素之一,页岩气工程中页岩纳米孔隙中的凝聚水对页岩气的聚集和流动有重要影响... 详细信息

岩石纳米孔隙中的凝聚水与许多水文地质工程地质问题关系密切:干旱区凝聚水是维持当地生态平衡的重要水资源,石雕石刻文物保护中凝聚水问题是需要考虑的关键因素之一,页岩气工程中页岩纳米孔隙中的凝聚水对页岩气的聚集和流动有重要影响,全球碳循环问题中凝聚水会影响C02与碳酸盐岩的作用。本文给出了单位体积岩石形成的凝聚水的质量与温度、相对湿度、孔隙度、颗粒大小之间数学关系式。在这一关系式中,通过分离压理论计算吸附水,通过开尔文方程考虑了毛细作用。把解析计算结果与三个平行样四个不同湿度下的凝聚水量实验值对比,对所提出的数学表达式进行了验证。实验时选取直径500 nm的碳酸钙球形颗粒,采用夯实的办法加工成样,把样品置于恒温恒湿环境中令水汽在孔隙中凝聚,定期对样品称重计算凝聚水质量,直到凝聚过程达到平衡。

关键词：纳米碳酸钙孔隙凝聚水数学模型相对湿度

中医呼吸导引康复技术对改善慢性阻塞性肺疾病稳定期患者肺功能的研究

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中华中医药学刊 2016年第2期34卷 414-417页

作者：胡贇皓张炜上海中医药大学附属曙光医院上海201203

目的:评价中医呼吸导引康复技术对慢性阻塞性肺疾病(COPD)稳定期患者肺功能的影响。方法:治疗组予健康宣教联合中医呼吸导引康复训练,对照组予以健康宣教,均以3个月锻炼期为1个疗程。观察治疗前后、组间在症状、肺功能指标等指标上的变... 详细信息

目的:评价中医呼吸导引康复技术对慢性阻塞性肺疾病(COPD)稳定期患者肺功能的影响。方法:治疗组予健康宣教联合中医呼吸导引康复训练,对照组予以健康宣教,均以3个月锻炼期为1个疗程。观察治疗前后、组间在症状、肺功能指标等指标上的变化。结果:中医呼吸锻炼在改善COPD患者临床症状总分和肺功能指标与对照组相比有显著统计学差异。结论:中医呼吸导引能改善COPD稳定期II、III级患者的临床症状,能有效改善肺功能。

关键词：慢性阻塞性肺疾病(COPD)稳定期中医呼吸导引临床症状肺功能临床研究