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Effect of hepatitis C virus nonstructural protein NS3 on proliferation and MAPK phosphorylation of normal hepatocyte line

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World Journal of Gastroenterology 2005年第14期11卷 2157-2161页

作者： De-yunfeng YiSun rui-XueCheng Xiao-MingOuyang HuiZheng DepartmentofPathology CollegeofBasicMedicine~CenlralSouthUniversityChangsha410078HunanProvinceChina

AIM:To study the effect of hepatitis C virus nonstructural region 3 (HCV NS3) protein on proliferation and transformation of normal human liver cell line. METHODS: QSG7701 cells were transfected with pRcHCNS3-5', pRcHCNS3-3'and pRcCMV using lipofectamine transfecting technique and selected with G418 method. Expression of HCV NS3 protein was determined by immunohistochemistry. Biologic characteristics of transfected cells were evaluated by population doubling time and soft agar assays. Activation of MAPK was analyzed using Western blot with phosphospecific monoclonal antibody against dually phosphorylated MAPK. RESULTS: QSG7701 cells transfected with pRcHCNS3-5' showed strong intracellular expression of HCVNS3 protein, and the positive signal was localized in *** expressing strength of HCVNS3 protein in pRcHCNS3-3'-transfected cells was weaker than that in pRcHCNS3-5'-transfected cells. The population doubling time in the transfected cells with pRcHCNS3-5' (12 h) was much shorter than those with pRcHCNS3-3', pRcCMV and normal cells (24, 26, 28 h, respectively) (P<0.01). The transfected cells with pRcHCNS3-5' showed much more anchorage independent colonies than that in those with pRcHCNS3-3' and pRcCMV (P<0.01). The cloning efficiencies of transfected cells with pRcHCNS3-5', pRcHCNS3-3', pRcCMV and controls were 33%, 1.33%, 1.46%, 1.11% respectively. The level of phosphorylated MAPK in the cells with pRcHCNS3-5' was much higher than that in those with pRcHCNS3-3'and pRcCMV and normal cells (P<0.01). CONCLUSION: The results suggest that (1) QSG7701 cells are a better human liver cell line for investigating' the pathogenesis of HCV NS3 protein. (2) 5' region of the HCV genome segment encoding HCV NS3 is involved in cell growth and cell phenotype. (3) HCV NS3 N-terminal peptide may up-regulate the activation of MAPK, but not affect the expression of MAPK.

关键词： HCV NS3 Cell proliferation QSG7701 strain Transfection Mitogen-activated protein kinase

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Delivering Microrobots in the Musculoskeletal System

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Nano-Micro Letters 2024年第11期16卷 585-617页

作者： Mumin Cao Renwang Sheng Yimin Sun Ying Cao Hao Wang Ming Zhang Yunmeng Pu Yucheng Gao Yuanwei Zhang Panpan Lu Gaojun Teng Qianqian Wang yunfeng rui Department of Orthopaedics Zhongda HospitalSchool of MedicineSoutheast UniversityNanjingJiangsuPeople’s Republic of China School of Medicine Southeast UniversityNanjing 210009People’s Republic of China Orthopaedic Trauma Institute(OTI) Southeast UniversityNanjing 210009People’s Republic of China Jiangsu Key Laboratory for Design and Manufacture of Micro‑Nano Biomedical Instruments School of Mechanical EngineeringSoutheast UniversityNanjing 210009People’s Republic of China Center of Interventional Radiology and Vascular Surgery Department of RadiologyZhongda HospitalSchool of MedicineSoutheast UniversityNanjing 210009People’s Republic of China

Disorders of the musculoskeletal system are the major contributors to the global burden of disease and current treatments show limited *** often suffer chronic pain and might eventually have to undergo end-stage ***,future treatments should focus on early detection and intervention of regional *** have been gradually used in organisms due to their advantages of intelligent,precise and minimally invasive targeted *** the combination of control and imaging systems,microrobots with good biosafety can be delivered to the desired area for *** the musculoskeletal system,microrobots are mainly utilized to transport stem cells/drugs or to remove hazardous substances from the *** to traditional biomaterial and tissue engineering strategies,active motion improves the efficiency and penetration of local targeting of cells/*** review discusses the frontier applications of microrobotic systems in different tissues of the musculoskeletal *** summarize the challenges and barriers that hinder clinical translation by evaluating the characteristics of different microrobots and finally point out the future direction of microrobots in the musculoskeletal system.

关键词： Microrobot Musculoskeletal system Targeted delivery Microrobotic systems Magnetic actuation

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影像学指标评估老年髋关节脆性骨折风险进展

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中国医学影像技术 2018年第11期34卷 1740-1743页

作者：史婧靳激扬芮云峰李荥娟东南大学附属中大医院放射科江苏南京210009 东南大学附属中大医院老年髋部骨折多学科综合诊疗协作组江苏南京210009 东南大学附属中大医院骨科江苏南京210009 东南大学附属中大医院老年科江苏南京210009

随着社会人口老龄化,老年髋关节脆性骨折(或称骨质疏松性骨折)日益增多。成像技术不断创新,使影像学指标能够提供更多关于骨密度、骨结构、骨材料属性和骨骼肌量的相关信息,更好地反映老年髋关节骨强度改变,并有助于指导临床制定治疗方... 详细信息

随着社会人口老龄化,老年髋关节脆性骨折(或称骨质疏松性骨折)日益增多。成像技术不断创新,使影像学指标能够提供更多关于骨密度、骨结构、骨材料属性和骨骼肌量的相关信息,更好地反映老年髋关节骨强度改变,并有助于指导临床制定治疗方案和监测药物疗效。本文对影像学指标评估老年髋关节脆性骨折风险的研究进展进行综述。

关键词：脆性骨折骨密度髋骨折磁共振成像体层摄影术,X线计算机

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尼古丁对大鼠髌腱肌腱干细胞生物学特性影响的实验研究

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中国运动医学杂志 2015年第8期34卷 786-792页

作者：张昕芮云峰王宸东南大学附属中大医院骨科南京210009

目的:探讨体外尼古丁对大鼠髌腱肌腱干细胞(tendon-derived stem cells,TDSCs)的细胞活力、细胞早期凋亡以及肌腱相关基因表达的影响,揭示吸烟导致肌腱病变以及损伤肌腱延迟愈合的潜在细胞学发病机制。方法:无菌条件下取8周龄SD大鼠的髌... 详细信息

目的:探讨体外尼古丁对大鼠髌腱肌腱干细胞(tendon-derived stem cells,TDSCs)的细胞活力、细胞早期凋亡以及肌腱相关基因表达的影响,揭示吸烟导致肌腱病变以及损伤肌腱延迟愈合的潜在细胞学发病机制。方法:无菌条件下取8周龄SD大鼠的髌腱,I型胶原酶消化分离获得单个有核细胞,以最适密度(50个/cm2)进行接种,细胞呈克隆样生长,获得原代TDSCs。基础培养细胞至第3代,将其分为两组,实验组用不同浓度的尼古丁培养基(10-7 M,10-6 M,10-5 M,10-4 M和10-2 M)干预,对照组继续采用基础培养基(0M)培养。处理6 h、24 h、48 h和72 h后分别应用四唑盐(MTT)比色法检测尼古丁对TDSCs体外存活的影响,72h后应用Annexin V-FITC/PI双染法检测尼古丁对TDSCs体外早期凋亡的影响,实时荧光定量PCR(Realtime PCR)检测肌腱相关基因Col1a1和Scx的表达。结果:与对照组相比,实验组不同浓度的尼古丁干预下,TDSCs的细胞活力呈下降趋势,呈时间依赖性和浓度依赖性,浓度高于10-4 M时作用显著,差异具有统计学意义(P<0.05)。流式细胞仪检测TDSCs早期凋亡(Annexin V+/PI-)的数量随着尼古丁浓度的增加而增加,差异具有统计学意义(P<0.05)。同时,Realtime PCR检测结果显示:与对照组相比,实验组中Col1a1和Scx的m RNA表达水平均降低,浓度高于10-5 M时作用显著,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:体外尼古丁可抑制大鼠髌腱TDSCs的细胞活力,导致TDSCs早期凋亡,同时抑制TDSCs中成肌腱分化转录、细胞外基质合成相关基因的表达。这可能是吸烟导致肌腱病变以及损伤肌腱延迟愈合的潜在细胞学发病机制。

关键词：尼古丁肌腱干细胞肌腱病变延迟愈合成肌腱分化

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用公正守护法治生命线

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宁夏党校学报 2015年第2期17卷 5-8页

作者：芮云风中共宁夏回族自治区委党校法学教研部宁夏银川750021

贯彻落实党的十八届四中全会精神,必须树立科学的司法理念、完善党对司法的领导、尊重司法权力运行的内在规律,不断推进司法公正目标的实现。

关键词：司法理念公正司法司法改革

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老年股骨颈骨折治疗研究进展

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中国修复重建外科杂志 2019年第8期33卷 1033-1040页

作者：周洋洋倪英杰李荥娟陈辉芮云峰东南大学附属中大医院创伤骨科南京210009 东南大学创伤骨科研究所南京210009 东南大学附属中大医院老年髋部骨折多学科综合诊疗协作组(MDT) 南京210009 东南大学附属中大医院创伤救治中心南京210009 无锡市锡山人民医院骨科江苏无锡214105 东南大学附属中大医院无锡分院骨科江苏无锡214105 东南大学附属中大医院老年科南京210009

目的介绍保守治疗、内固定、人工关节置换术和多学科综合诊疗(multidisciplinary team,MDT模式等治疗老年股骨颈骨折的研究进展。方法广泛查阅国内、外近年相关文献,对多种老年股骨颈骨折治疗方法、新治疗模式的特点和应用进行总结分析... 详细信息

目的介绍保守治疗、内固定、人工关节置换术和多学科综合诊疗(multidisciplinary team,MDT模式等治疗老年股骨颈骨折的研究进展。方法广泛查阅国内、外近年相关文献,对多种老年股骨颈骨折治疗方法、新治疗模式的特点和应用进行总结分析。结果老年非移位型股骨颈骨折应手术治疗,保守治疗继发移位风险高。移位型骨折则应尽早进行手术,人工半髋、全髋关节置换术后患者的远期功能结果没有差别。人工半髋关节置换术中出血量少、手术时间短,适合基础情况不佳的高龄患者;人工全髋关节置换术适合基础情况较好、对生活质量要求较高的老年患者。MDT可有效减少患者术前等待时间和住院时间、降低内科并发症发生率、改善患者营养状况和降低患者死亡率。结论内固定、人工关节置换术等术式和MDT新模式用于老年股骨颈骨折的治疗均取得了显著成果。

关键词：股骨颈骨折保守治疗内固定人工关节置换术多学科综合诊疗老年患者

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锁定钢板与髓内钉治疗老年肱骨近端Neer二、三部分骨折的疗效比较

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中国修复重建外科杂志 2022年第3期36卷 274-278页

作者：范文斌崔学良石柳谢添芮云峰陈辉东南大学附属中大医院骨科南京210009 东南大学附属中大医院创伤救治中心南京210009 东南大学创伤骨科研究所南京210009

目的比较锁定钢板及髓内钉治疗老年肱骨近端Neer二、三部分骨折的疗效。方法回顾分析2015年1月—2018年12月符合选择标准的86例肱骨近端Neer二、三部分骨折老年患者临床资料。其中,46例行锁定钢板固定(锁定钢板组),40例行髓内钉固定(髓... 详细信息

目的比较锁定钢板及髓内钉治疗老年肱骨近端Neer二、三部分骨折的疗效。方法回顾分析2015年1月—2018年12月符合选择标准的86例肱骨近端Neer二、三部分骨折老年患者临床资料。其中,46例行锁定钢板固定(锁定钢板组),40例行髓内钉固定(髓内钉)。两组患者性别、年龄、致伤原因、骨折侧别及分型、受伤至手术时间以及合并损伤等一般资料比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。比较两组疼痛视觉模拟评分(VAS)、美国肩肘外科(ASES)评分、Constant-Murley评分,以及肩关节活动度(前屈、外展、外旋);X线片复查骨折愈合情况,于术后第2天及末次随访图像测量颈干角并计算差值。结果两组患者均获随访,随访时间18~40个月,平均30.4个月;两组随访时间差异无统计学意义(t=-0.986,P=0.327)。X线片复查示两组骨折均愈合,锁定钢板组骨折愈合时间为(11.3±2.1)周,髓内钉组为(10.3±2.0)周,差异有统计学意义(t=2.250,P=0.027)。锁定钢板组颈干角差值为(7.63±7.01)°,髓内钉组为(2.85±2.82)°,差异有统计学意义(t=4.032,P0.05)。锁定钢板组13例(28.3%)、髓内钉组4例(10.0%)发生并发症,差异有统计学意义(χ;=4.498,P=0.034)。结论锁定钢板及髓内钉均可用于治疗老年肱骨近端Neer二、三部分骨折,其中髓内钉固定手术更加微创,术后并发症更少,骨折愈合更快。

关键词：肱骨近端骨折锁定钢板髓内钉内固定老年

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PFNA与Gamma-Ⅲ钉治疗不稳定型股骨粗隆间骨折的对比研究

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中国现代医生 2012年第13期50卷 30-32页

作者：芮云峰于文源浙江省浦江县人民医院骨科浙江浦江322200

目的探讨股骨近端防旋髓内钉(PFNA)与Gamma-Ⅲ钉治疗不稳定型股骨粗隆间骨折(IFF)的临床疗效。方法2008年5月～2010年5月我院骨科住院IFF患者86例,根据手术方法的不同分为PFNA组42例和Gamma-Ⅲ钉组44例。比较两组的手术操作时间、术中... 详细信息

目的探讨股骨近端防旋髓内钉(PFNA)与Gamma-Ⅲ钉治疗不稳定型股骨粗隆间骨折(IFF)的临床疗效。方法2008年5月～2010年5月我院骨科住院IFF患者86例,根据手术方法的不同分为PFNA组42例和Gamma-Ⅲ钉组44例。比较两组的手术操作时间、术中出血量、住院时间和骨折的临床愈合时间。参考Parker髋关节功能标准对髋关节功能结局进行评判,并观察两组的术后并发症。结果所有患者的伤口均一期愈合,未出现伤口严重感染和皮缘坏死。两组的手术操作时间分别为(70.0±16.5)min、(82.5±22.5)min,术中出血量分别为(120±30)mL、(150±40)mL,骨折愈合时间分别为(13.2±2.5)周、(14.5±2.0)周,两者比较差异均有统计学意义(P0.05)。两组的髋关节功能优良率分别为88.1%和88.6%,两组的术后并发症发生率分别为4.8%(2/42)和6.8%(3/44),两组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 PFNA与Gamma-Ⅲ钉均可作为治疗老年不稳定型IFF患者的理想方法,PFNA手术操作更简单、手术创伤相对小,更具有优势。

关键词：股骨近端防旋髓内钉 Gamma钉不稳定型股骨粗隆间骨折髋关节功能

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人IL-1受体拮抗蛋白重组逆转录病毒载体的构建、鉴定及在骨关节炎软骨细胞中的表达

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中国修复重建外科杂志 2008年第5期22卷 533-538页

作者：芮云峰王友张晓玲孙红立曲志虎戴尅戎上海交通大学医学院附属第九人民医院骨科上海200011 中国科学院上海生命科学研究院/上海交通大学医学院健康科学研究所骨科细胞与分子生物学实验室

目的构建含人IL-1受体拮抗蛋白(IL-1 receptor antagonist,IL-1Ra)逆转录病毒表达载体(PLXRN-IL-1Ra),体外转染人骨关节炎(osteoarthritis,OA)软骨细胞,研究其相关特性。方法利用细菌内同源重组技术快速构建PLXRN-IL-1Ra逆转录病毒重组... 详细信息

目的构建含人IL-1受体拮抗蛋白(IL-1 receptor antagonist,IL-1Ra)逆转录病毒表达载体(PLXRN-IL-1Ra),体外转染人骨关节炎(osteoarthritis,OA)软骨细胞,研究其相关特性。方法利用细菌内同源重组技术快速构建PLXRN-IL-1Ra逆转录病毒重组质粒,经测序及酶切鉴定正确后转染PT67细胞,包装成为重组PLXRN-IL-1Ra逆转录病毒,并使用小鼠肾成纤维细胞系NIH/3T3对病毒进行滴度测定。实验分为3组:未转染组(A组)、PLXRN空质粒转染组(B组)、PLXRN-IL-1Ra转染组(C组),病毒感染人OA软骨细胞后,RT-PCR检测细胞内IL-1Ra基因的转录和表达;ELISA法检测细胞培养上清液中人IL-1Ra蛋白表达。结果酶切鉴定及基因测序证实重组逆转录病毒质粒中含有人IL-1Ra cDNA,测定包装的病毒滴度为3×104CFU/mL。原代软骨细胞体外培养呈多角形或梭形,甲苯胺蓝染色见细胞内有紫色异染颗粒。RT-PCR结果显示在C组出现311bp人IL-1Ra mRNA片段,A、B组未见人IL-1Ra mRNA的表达带,GAPDH在各组均有表达。ELISA检测发现C组细胞上清有一定量的人IL-1Ra表达,蛋白浓度为(60.47±15.13)ng/L,A组和B组均无人IL-1Ra表达。结论构建的IL-1Ra逆转录病毒表达载体成功地感染人OA软骨细胞,并在体外获得稳定表达,为将表达人IL-1Ra基因的人OA软骨细胞用于OA基因治疗提供了实验依据。

关键词： IL-1受体拮抗蛋白逆转录病毒载体骨关节炎软骨细胞基因治疗

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飞秒激光焊接离体皮肤组织工艺与性能试验研究

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中国激光 2022年第20期49卷 53-61页

作者：宋紫燕黄俊李英哲李骐彤夏胜男王克鸿芮云峰南京理工大学材料科学与工程学院江苏南京210094 东南大学附属中大医院骨科江苏南京210009

为了获得飞秒激光工艺参数对生物组织融合效果的影响规律,基于单因子试验法,分析了激光功率、离焦量等工艺参数对离体皮肤组织融合形貌、切口抗拉强度及热损伤的影响规律。结果表明,激光功率及扫描速度对焊后离体皮肤组织外观形貌及切... 详细信息

为了获得飞秒激光工艺参数对生物组织融合效果的影响规律,基于单因子试验法,分析了激光功率、离焦量等工艺参数对离体皮肤组织融合形貌、切口抗拉强度及热损伤的影响规律。结果表明,激光功率及扫描速度对焊后离体皮肤组织外观形貌及切口抗拉强度具有重要影响,激光功率对组织热损伤具有决定性影响;降低激光功率及扫描速度,采用多次重复扫描方法,焊后离体皮肤组织的切口抗拉强度较大;在保证一定连接强度的条件下,焊接后组织热损伤参数在10^(-3)数量级左右。在此基础上,对工艺参数进行优化,结果表明,在该工艺条件下,组织切口可实现全层融合,外观形貌良好,热损伤低于采用连续激光得到同等抗拉强度时组织所产生的热损伤。

关键词：医用光学组织焊接激光材料加工热效应组织性能参数优化

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