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Development of RT PCR Assay for Detection of Duck Hepatitis Virus Type 1

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Animal Husbandry and Feed Science 2017年第5期9卷 308-310页

作者： wang yongjuan Cui Pingfu Liu Bo Meng Ting Jiangsu Agri animal Husbandry Vocational College/Jiangsu Provincial Key Laboratory of Veterinary Bio pharmaceutical High Tech Research Taizhou 225300 China Taizhou Entry Exit Inspection and Quarantine Bureau Taizhou 225300 China

In this study,a RT-PCR assay for rapid detection of duck hepatitis virus type 1( DHV-1) was established in the presence of a pair of primers designed based on vp1 gene sequence,using the genomic RNA of DHV-1 or other common viruses as the template. The template was serially diluted 10-fold to determine the reaction sensitivity. Finally,seven liver samples of ducks with suspected DHV-1 infection,which were collected from different regions of Jiangsu Province,were detected with this method. The results showed that a DNA fragment of about 360 bp was specifically amplified with the RT-PCR system,and the detection limit was1 fg/μL. The detection rate of clinical samples with this method was 100%. The results revealed that the RT-PCR system which had high specificity and high sensitivity in the detection of DHV-1 was successfully established.

关键词： Duck hepatitis virus type 1 RT PCR Detection

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层叠式笼养在家禽养殖中应用及效果评价

畜牧兽医科学（电子版） 2022年第17期 162-164页

作者：沈明君王永娟高邮市高八度生物科技有限公司江苏扬州225000 扬州瑞农科技有限公司江苏扬州225000 江苏农牧科技职业学院江苏泰州225300

如今家禽养殖模式从散养、家庭小规模养殖向规模化、集约化、产业化、机械化养殖模式转变发展。特别是随着人们对家禽产品的需求越来越多,质量要求越来越高,但家禽养殖的用地、征地、租地越发困难,这些因素都决定了层叠式笼养的发展模... 详细信息

如今家禽养殖模式从散养、家庭小规模养殖向规模化、集约化、产业化、机械化养殖模式转变发展。特别是随着人们对家禽产品的需求越来越多,质量要求越来越高,但家禽养殖的用地、征地、租地越发困难,这些因素都决定了层叠式笼养的发展模式在当前及未来家禽养殖上逐渐成为家禽养殖的首选模式,层叠式笼养也得到了充分的应用和发展。应用好层叠式笼养模式,可以提高家禽圈舍的利用率,减少饲料的损耗,形成一套家禽集约化、高效益的饲养管理模式。将层叠式笼养技术应用在家禽养殖上,该养殖模式与现代信息技术相结合,提高家禽养殖的综合生产能力及经济效益,使家禽养殖达到节能减耗、绿色环保的目的,同时促进家禽养殖模式现代化发展,还可以解决家禽养殖存在的用地、占地的问题。

关键词：层叠式笼养家禽养殖应用效果评价

通用分子佐剂与IBDV亚单位联合的疫苗免疫效果

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河南农业科学 2015年第11期44卷 129-132,146页

作者：王永娟崔平福朱善元左伟勇江苏农牧科技职业学院/江苏省兽用生物制药高技术研究重点实验室江苏泰州225300 泰州出入境检验检疫局江苏泰州225300

为评价通用载体p ET-m LTA-CTLA-4表达的蛋白质与传染性法氏囊病毒(IBDV)亚单位联合疫苗的免疫效果,表达重组蛋白m LTA-CTLA-4,以家兔毒性试验确定其安全性;同时RT-PCR法扩增鸡IBDV的VP2基因,构建表达载体p ET-VP2;选择10日龄非免疫健... 详细信息

为评价通用载体p ET-m LTA-CTLA-4表达的蛋白质与传染性法氏囊病毒(IBDV)亚单位联合疫苗的免疫效果,表达重组蛋白m LTA-CTLA-4,以家兔毒性试验确定其安全性;同时RT-PCR法扩增鸡IBDV的VP2基因,构建表达载体p ET-VP2;选择10日龄非免疫健康鸡进行分组试验,包括IBDV活疫苗免疫组、不同剂量VP2+m LTA-CTLA-4免疫组及空白对照组,免疫后定期检测鸡血清抗体Ig G及小肠黏膜抗体Ig A的ELISA效价;在加强免疫后用IBDV野生毒株攻击,连续观察2周并计算保护率。结果显示,重组蛋白m LTA-CTLA-4安全无毒性,IBDV活疫苗免疫组产生的抗体Ig G、Ig A水平均高于重组蛋白免疫组,重组蛋白免疫组与活疫苗免疫组对鸡的保护率均为100%。表明重组蛋白m LTA-CTLA-4可与IBDV亚单位疫苗联合应用,保护鸡只免受IBDV感染。

关键词：佐剂传染性法氏囊病毒疫苗亚单位疫苗

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肠气囊肿症12例的诊治分析

中华消化内镜杂志 2017年第2期34卷 127-131页

作者：王永娟焦国慧王玉明周璐张洁王邦茂天津医科大学总医院消化科天津300052

目的探讨肠气囊肿症（PCI）的发病特点和恰当的诊治方式。方法对1997年至2015年在天津医科大学总医院确诊的12例PCI患者进行分析，评估其病因、内镜特点、治疗效果及预后。结果4例因长期接触三氯乙烯或病因不明导致原发性PCI；其余8例... 详细信息

目的探讨肠气囊肿症（PCI）的发病特点和恰当的诊治方式。方法对1997年至2015年在天津医科大学总医院确诊的12例PCI患者进行分析，评估其病因、内镜特点、治疗效果及预后。结果4例因长期接触三氯乙烯或病因不明导致原发性PCI；其余8例为继发性PCI，患有白塞病、结缔组织病、肺气肿、糖尿病、恶性肿瘤等。内镜表现包括单发泡状气囊肿、线状或鹅卵石样气囊肿、葡萄或串珠状气囊肿等，病变累及乙状结肠6例、升结肠3例、降结肠2例、十二指肠2例、直肠1例。药物或联合内镜治疗后，8例明显缓解，2例好转，2例因恶性肿瘤死亡。结论PCI是一种罕见病证，病因机制尚不明确，多继发于其他疾病，通过结肠镜、超声内镜可明确诊断。单发性PCI可行内镜下高频电切除治疗，多发性PCI予内镜下囊肿夹破、抗生素联合菌群调节药物治疗效果显著。积极治疗原发病，早期发现并发症可改善预后并减少复发。

关键词：内镜检查内镜治疗肠气囊肿症

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某新型自动发射系统动力学仿真研究

兵工自动化 2016年第8期35卷 25-32页

作者：史亦超王永娟南京理工大学机械工程学院南京210094

为了探索武器设计参数对自动机运动特性的影响,以某新型自动发射系统为研究对象进行模拟和动力学仿真研究。在已有三维模型的基础上建立该系统的多刚体动力学模型,运用ADAMS软件,对自动机的运动学和动力学进行仿真,验证自动机动作的可靠... 详细信息

为了探索武器设计参数对自动机运动特性的影响,以某新型自动发射系统为研究对象进行模拟和动力学仿真研究。在已有三维模型的基础上建立该系统的多刚体动力学模型,运用ADAMS软件,对自动机的运动学和动力学进行仿真,验证自动机动作的可靠性;根据本发射装置曲直兼容、点面杀伤及枪管双向缓冲等特点,分别建立发射2种不同弹药(穿甲弹和榴弹)和有无前冲击发的工况模型,分析自动机运动特性,验证其兼容发射特性;通过改变设计参数值,得出参数变化对自动机运动的影响规律。结果表明:武器设计参数对自动机运动规律的影响并不成特定的规律,设计者需综合分析各参数变化对其运动特性的影响,寻求最佳参数匹配方案。

关键词：曲直兼容前冲击发虚拟样机动力学/动力学分析

和田河气田奥陶系碳酸盐岩裂缝特征及形成期次

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新疆石油地质 2017年第2期38卷 133-136页

作者：戴俊生王宇坤冯建伟李树博王永娟中国石油大学地球科学与技术学院山东青岛266580

塔里木盆地巴楚隆起和田河气田奥陶系碳酸盐岩储集层非均质性强,孔喉结构较差,溶洞、溶孔多被充填,裂缝发育程度成为决定气田产能的主要因素。根据对岩心裂缝的观察发现,研究区储集层裂缝大部分为构造缝,西部高角度裂缝发育,东部低角度... 详细信息

塔里木盆地巴楚隆起和田河气田奥陶系碳酸盐岩储集层非均质性强,孔喉结构较差,溶洞、溶孔多被充填,裂缝发育程度成为决定气田产能的主要因素。根据对岩心裂缝的观察发现,研究区储集层裂缝大部分为构造缝,西部高角度裂缝发育,东部低角度和高角度裂缝共同发育。利用露头剖面上裂缝的切割关系、产状、充填关系、充填物碳氧同位素及流体包裹体等综合分析认为,研究区裂缝的形成主要有3期,分别为海西运动早期、海西运动晚期和喜马拉雅运动期。

关键词：塔里木盆地巴楚隆起和田河气田碳酸盐岩储集层裂缝期次碳同位素氧同位素流体包裹体

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汇率服从跳扩散过程的外汇期权定价

哈尔滨师范大学自然科学学报 2017年第1期33卷 22-24页

作者：王永娟孙丽男黑河学院

在汇率过程为分形跳—扩散过程,执行价格为常数的条件下,构造出汇率函数受分形Brown运动和跳—扩散过程共同作用的模型,得到了执行价格为常数的外汇期权的定价公式.

关键词：分形跳—扩散外汇期权汇率保险精算定价

慢病毒介导的siRNA对1型鸭肝炎病毒复制的抑制作用

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中国动物传染病学报 2021年第6期29卷 16-21页

作者：董亚青彭仪伟王永娟施鑫蕊江苏农牧科技职业学院动物医学院泰州225300

为探索RNAi技术在鸭病毒性肝炎防控中的作用,本研究将筛选出的沉默RdRp效果较好的shRNA1、shRNA2和突变体shRNA-NC分别插入pPLK/GFP/+Puro载体,构建慢病毒载体pPLK-shRNA-RdRp-1、pPLK-shRNA-RdRp-2、pPLK-shRNA-NC,制备重组慢病毒Lenti-shRNA-RdRp-1、Lenti-shRNA-RdRp-2、Lenti-shRNA-NC;将重组慢病毒单独或者联合接种鸭胚成纤维细胞后感染DHAV-1,应用荧光定量PCR的方法检测感染DHAV-1的鸭胚成纤维细胞上RdRp基因的表达量及病毒TCID_(50),判断siRNA对病毒及病毒基因的抑制作用,并进一步将结果在鸭胚上进行检测。结果显示,Lenti-shRNA-RdRp-1、Lenti-shRNA-RdRp-2、Lenti-shRNA-RdRp-1+2均能较好的抑制RdRp基因的表达,病毒感染后72 h,三组的抑制效率均在95%以上,且在鸭胚中也能较好抑制DHAV-1的增殖,为鸭病毒性肝炎的防控提供了新思路和方向。

关键词：慢病毒鸭肝炎病毒抑制 siRNA

猪伪狂犬病毒YZ株的分离鉴定及遗传进化分析

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扬州大学学报（农业与生命科学版） 2020年第5期41卷 36-41页

作者：傅宏庆姚志兰刘轶秋王永娟江苏农牧科技职业学院/江苏省兽用生物制药高技术研究重点实验室江苏泰州225300 北京青嵘农业科技有限公司北京100071

为了解猪伪狂犬病毒(PRV)流行变异株的病原学特性及分子遗传变异特点,从江苏扬州市某发病猪场采集病料,经无菌处理后接种BHK-21细胞并连续传代,分离获得1株病毒。通过细胞病变观察、PCR鉴定、电镜观察和动物感染试验,证明该毒株为伪狂... 详细信息

为了解猪伪狂犬病毒(PRV)流行变异株的病原学特性及分子遗传变异特点,从江苏扬州市某发病猪场采集病料,经无菌处理后接种BHK-21细胞并连续传代,分离获得1株病毒。通过细胞病变观察、PCR鉴定、电镜观察和动物感染试验,证明该毒株为伪狂犬病毒,将其命名为YZ株。利用PCR扩增、测序,获得YZ株的gB与gE基因序列,基因同源性分析与遗传进化分析表明:YZ株gB与gE基因与我国猪伪狂犬变异毒株同源性均在99.2%以上,且位于同一进化分支,提示该毒株与流行于我国的猪伪狂犬变异毒株亲缘关系较近。进一步研究YZ株的致病性,将该毒株P5代细胞培养液人工感染60日龄PRV阴性健康猪。结果表明:试验猪在感染病毒后出现发热、呕吐、腹泻、咳嗽、呼吸困难和神经症状,发病率达100%。感染猪剖检病变为脑组织水肿出血、肝脏组织表面出现灰白色坏死灶。综上, PRV-YZ株遗传进化分析与致病性研究表明该毒株为猪伪狂犬变异毒株。这一研究可为江苏省PRV的流行病学、遗传进化分析以及免疫防控提供参考。

关键词：伪狂犬病毒变异株进化树分析致病性