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DNA分子标记在香蕉种质资源中的应用

分子植物育种 2024年第6期22卷 1944-1950页

作者：漆艳香赵洪谢艺贤喻群芳曾凡云彭军张欣中国热带农业科学院环境与植物保护研究所农业农村部热带农林有害生物入侵监测与控制重点开放实验室海口571101 贵州大学精细化工研究开发中心贵阳550025

香蕉是重要的经济作物和粮食作物,也是全球鲜果贸易量和消费量最大的水果。DNA分子标记在香蕉上的应用已逾30年,取得了一些进展。本研究综述了DNA分子标记在香蕉种质遗传多样性与亲缘关系分析、种质鉴定及辅助育种等方面的应用现状,并... 详细信息

香蕉是重要的经济作物和粮食作物,也是全球鲜果贸易量和消费量最大的水果。DNA分子标记在香蕉上的应用已逾30年,取得了一些进展。本研究综述了DNA分子标记在香蕉种质遗传多样性与亲缘关系分析、种质鉴定及辅助育种等方面的应用现状,并对香蕉DNA分子标记的发展及应用前景进行了展望,以期为香蕉种质资源创新利用等研究提供思路。

关键词：香蕉种质资源 DNA分子标记

香蕉枯萎病菌内源报告基因Foc4carS的鉴定及其应用

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热带作物学报 2024年第5期45卷 873-885页

作者：彭军曾凡云王艳玮漆艳香丁兆建王少伶谢艺贤张欣中国热带农业科学院环境与植物保护研究所/农业农村部热带作物有害生物综合治理重点实验室/海南省热带农业有害生物监测与控制重点实验室海南海口571101 中国热带农业科学院三亚研究院海南三亚572000 琼台师范学院生物科学系海南海口571127

香蕉枯萎病是由尖孢镰刀菌古巴转化型(Fusarium oxysporum f. sp. cubense, Foc)引起的香蕉毁灭性土传病害,其中4号生理小种(Foc4)能感染几乎所有的香蕉品系,危害最严重。carS基因通过调控下游car结构基因参与调控镰刀菌类胡萝卜素的生... 详细信息

香蕉枯萎病是由尖孢镰刀菌古巴转化型(Fusarium oxysporum f. sp. cubense, Foc)引起的香蕉毁灭性土传病害,其中4号生理小种(Foc4)能感染几乎所有的香蕉品系,危害最严重。carS基因通过调控下游car结构基因参与调控镰刀菌类胡萝卜素的生物合成,本研究克隆鉴定了Foc4carS基因(FOIG_05085),Foc4carS蛋白具有典型的RING-finger蛋白结构域。利用分割标记法(Split-marker PCR)获得Foc4carS基因的融合片段,同时构建含有Foc4carS基因sgRNA591序列的pUC-fFuCas9-HTBNLS-hph-Foc4carS基因编辑载体,通过PEG介导的原生质体转化获得该基因的敲除突变体、回补突变体以及基因编辑敲除体,并对敲除和回补突变体的生物学特性和致病力进行分析。结果显示:ΔFoc4carS突变体的菌落直径、产孢量和致病力等生物学表型与野生菌株Foc4无显著差异,而ΔFoc4carS突变体菌落颜色呈深橙色,Foc4carS基因的缺失影响了次生代谢产物类胡萝卜素的生物合成;基因编辑的ΔFoc4carS(HDR)突变体不论是再生筛选板还是继代后的PDA平板,其菌落均出现典型的深橙色,表明Foc4carS可作为内源报告基因,在香蕉枯萎菌Foc4中进行基因质粒型CRISPR/Cas9编辑可行。

关键词：香蕉枯萎菌Foc4 Foc4carS基因类胡萝卜素基因敲除 CRISPR/Cas9基因编辑

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‘单瓣红’木芙蓉开花物候研究

绵阳师范学院学报 2024年第5期43卷 72-80页

作者：郑斌石小庆曹冬梅田征谢译贤黎思佚权秋梅西华师范大学环境科学与工程学院四川南充637002 成都市植物园四川成都610083 内蒙古师范大学化学与环境科学学院内蒙古呼和浩特010022

植物的开花物候是有花植物重要的生活史特征,也是传粉生物学所关注的内容之一.以‘单瓣红’木芙蓉为研究对象,通过野外调查与统计分析‘单瓣红’木芙蓉在2020—2021年的开花物候特征,得出结果:(1)‘单瓣红’木芙蓉在晴天时(20℃以上)为... 详细信息

植物的开花物候是有花植物重要的生活史特征,也是传粉生物学所关注的内容之一.以‘单瓣红’木芙蓉为研究对象,通过野外调查与统计分析‘单瓣红’木芙蓉在2020—2021年的开花物候特征,得出结果:(1)‘单瓣红’木芙蓉在晴天时(20℃以上)为开花1 d,在阴雨天气(20℃以下)时,开花持续2 d.晴天的自然结实率显著高于雨天的结实率,因此阴雨天气‘单瓣红’木芙蓉适合度会降低,可能是对传粉者访花频率减少的一种适应.(2)单株和种群开花都集中在10月.单株开花时间持续30~36 d,开花振幅呈现出单峰性.种群开花表现出集中开花的模式.短时间集中开花的展示有利于吸引更多的传粉者,提高繁殖成功率,因此在开花高峰期的结实率显著高于开花早期和晚期.(3)2021年降水量较大的情况下,产花量比2020年减少,所以在2021年的盛花时期的座果率也相对较低.因此‘单瓣红’木芙蓉开花对降温和降水比较敏感,会导致座果率降低而适合度下降.以上研究结果可为阐明‘单瓣红’木芙蓉繁殖机制提供相关科学依据.

关键词：木芙蓉生境开花物候环境因子

Effects of Boron on Spore Germination and Integrity of Colletotrictum gloeosporioides( Penz) Saec

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Agricultural Biotechnology 2014年第6期3卷 38-41,50页

作者： Ying LU yixian xie Lei ZHANG Songgang LI Environment and Plant Protection Institute Chinese Academy of Tropical Agricultural Sciences Key Laboratory of Monitoring and Control of Tropical Agricultural and Forest Invasive Alien Pests Ministry of Agriculture Key Laboratory of Pests Detection and Control for Tropical Agriculture Tropical Crops Genetic Resources Institute Chinese Academy of Tropical Agricultural Sciences

Litchi anthracnose caused by Colletotrictum gloeosporioides （Penz） Saec. is an extremely destructive and widely distributed disease, which results in poor market value. Borate, an essential plant micronutrient that helps plant growth and has been used extensively in industry and agriculture as a safe method for control of fungi, was effective in the form of potassium tetraborate for control of C. gloeosporioides （Penz）. In this study, boron strongly inhibited spore germina- tion, germ tube elongation, and mycelial spread of C. gloeosporioides （Penz） in the culture medium. Application of boron at 1% caused the appearance of abnor- mal spores （disrupted） in some cases. On the basis of propidium iodide fluorescent staining, the loss of membrane integrity in C. gloeosporioides （Penz） was ob- served after boron treatment. Furthermore, Boron led to the leakage of cellular constituents （soluble proteins and carbohydrates） from hyphae of C. gloeosporioides （Penz）. These data suggest that the mechanisms may be directly related with the disruption effect of boron on cell membrane of the fungal pathogen, resulting in the breakdown of cell membrane structure and loss of cytoplasmic materials from the hyphae.

关键词： Boron Colletotrictum gloeosporioides (Penz) Saec Cell membrane breakdown Cellular leakage

香蕉枯萎病菌Dicer-like基因的功能分析

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园艺学报 2023年第2期50卷 279-294页

作者：张欣漆艳香曾凡云王艳玮谢培兰谢艺贤彭军中国热带农业科学院环境与植物保护研究所农业农村部热带作物有害生物综合治理重点实验室海南省热带农业有害生物监测与控制重点实验室海口571101

香蕉枯萎病病原菌尖孢镰刀菌古巴专化型(Fusarium oxysporum ***)4号生理小种(Foc4)含有两个进化上高度保守的Dicer-like基因FocDCL1和FocDCL2。为了探究该基因的功能及其在RNAi中的作用机制,利用同源重组的方法获得ΔFocDCL1、ΔFocDCL... 详细信息

香蕉枯萎病病原菌尖孢镰刀菌古巴专化型(Fusarium oxysporum ***)4号生理小种(Foc4)含有两个进化上高度保守的Dicer-like基因FocDCL1和FocDCL2。为了探究该基因的功能及其在RNAi中的作用机制,利用同源重组的方法获得ΔFocDCL1、ΔFocDCL2和ΔFocDCL1/2基因敲除突变体。表型分析显示,与Foc4野生型相比,突变体菌丝的营养生长无显著差异,但产孢量下降;ΔFocDCL2突变体在非生物胁迫刚果红处理后菌落明显变小且气生菌丝增多;ΔFocDCL2和ΔFocDCL1/2的致病力下降。miRNA深度测序数据显示,与Foc4野生型相比,ΔFocDCL1、ΔFocDCL2和ΔFocDCL1/2敲除突变体的miRNA长度分布和5′–端首位碱基出现频率都发生了改变,都能产生自身特异miRNA。DCL功能存在交叉和冗余,miRNA可以通过依赖独立的、交叉的或者联合的DCL发生;此外,鉴定到不依赖DCL形成的miRNA。这些结果表明FocDCL在产孢量、非生物胁迫、致病力以及小RNA发生中发挥作用。

关键词：香蕉枯萎病 Fusarium oxysporum f.sp.cubense Dicer-like基因致病力测试 miRNA

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忧患意识与对外战略策略

外交学院学报 2000年第3期 42-50页

作者：谢益显外交学院 100037

1999年发生科索沃战争和美国炸弹袭击中国驻南使馆事件 ,使我们中国人对自己所处的国际环境和国家安全的忧患意识更见深重了。这要求我们在对外战略策略方面必须有相应的反映。可是 ,不能认为国际形势和格局以及中国对外关系状况有了根... 详细信息

1999年发生科索沃战争和美国炸弹袭击中国驻南使馆事件 ,使我们中国人对自己所处的国际环境和国家安全的忧患意识更见深重了。这要求我们在对外战略策略方面必须有相应的反映。可是 ,不能认为国际形势和格局以及中国对外关系状况有了根本的改变。因此 ,中国原有的国际大战略和对外基本战略都需要继续得到肯定。在此前提下 ,在我们的对外战略策略意识方面除了总的需要增强“人民的凝聚力”之外 ,还需要在民众中增强反霸斗争的决心和信心 ,做好进行可能的反侵略战争的心理准备 ,加强对外交流和宣传中国社会主义和平外交的一贯的记录、现实的实践及其信守的原则和根据。

关键词：沉着警惕实力自身凝聚力对方民众心理

Inhibitory Effects of Six Fungicides against Neocordana musae

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Plant Diseases and Pests 2021年第5期12卷 17-19,26页

作者： Yanxiang Qi Yanping Fu Fanyun Zeng Jun Peng yixian xie Xin Zhang Environment and Plant Protection Institute Chinese Academy of Tropical Agricultural Sciences/Hainan Provincial Key Laboratory of Pests Detection and Control for Tropical AgricultureHaikou 571101China

[Objective]The paper was to screen effective fungicides to control Cordana leaf spot caused by Neocordana musae.[Method]The toxicities of six fungicides against mycelial growth of *** were measured by the method of mycelium growth inhibition.[Result]The average EC50 values of six fungicides against mycelial growth ranged from 0.1029 to 504.065μg/*** them,22.5%picoxystrobin SC and 12.5%epoxiconazole SC showed strong inhibitory activity on mycelial growth,with the average EC50 values of 0.1029 and 0.6851μg/mL,respectively;followed by 50%thiophanate-methyl SC,with an average EC50 value of 1.993.80%Azoxystrobin WG showed a relatively low sensitivity against ***,with an average EC50 value of 504.046.[Conclusion]The six fungicides tested have great value in preventing and controlling Cordana leaf spot.22.5%Picoxystrobin SC,12.5%epoxiconazole SC and 50%thiophanate-methyl SC have better inhibitory activities on mycelial growth of ***,and can be further used in field trials.

关键词： Neocordana musae Fungicide Inhibitory activities Toxicity

HPLC监测甲氨喋呤血药浓度方法的改进与优化

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北方药学 2023年第4期20卷 1-4,9页

作者：谢亦娴蔡秀莺福建省三明市大田县总医院福建三明366102

目的:采用经过改进与优化的高效液相色谱(HPLC)法对人体血清中的甲氨喋呤(MTX)血药浓度进行监测,评定其效能与价值。方法:采集血清样品100μL,用高氯酸溶液(15%)进行处理,以HPLC法实施测定。流动相:甲醇-10mmol/L磷酸二氢钾(20∶80,采... 详细信息

目的:采用经过改进与优化的高效液相色谱(HPLC)法对人体血清中的甲氨喋呤(MTX)血药浓度进行监测,评定其效能与价值。方法:采集血清样品100μL,用高氯酸溶液(15%)进行处理,以HPLC法实施测定。流动相:甲醇-10mmol/L磷酸二氢钾(20∶80,采用氢氧化钠调至pH6.5),色谱柱:大连依利特ODS C_(18),流速:1.0mL/min,紫外检测波长:303nm,柱温:35℃。结果:MTX的血药浓度位于0.1~64μmol/L这一范围内,会有较好的线性关系(r=0.9995)。MTX低浓度的日内、日间精密度(RSD)分别为2.69%、4.35%,而提取回收率是70.8%;中浓度分别是1.07%、2.70%与78.2%,高浓度则为0.93%、1.94%与75.3%;最低检测限是0.03μmol/L。结论:经过改建与优化后的HPLC法不仅准确、可靠,而且还有着较好的重现性,较高的灵敏度,在监测大剂量MTX的血药浓度当中,有着较好的应用价值。

关键词：甲氨喋呤高效液相色谱法血药浓度优化

Characterization of Chinese Isolates of Mango Bacterial Canker Xanthomonas campestris pv. mangiferaeindicae

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Plant Diseases and Pests 2016年第3期7卷 33-34,40页

作者： Qi Yanxiang Zhang He Pu Jinji Zhang Xin Yu Quanfang Lu Ying xie yixian Environment and Plant Protection Institute Chinese Academy of Tropical Agricultural Sciences

Mango bacterial canker is caused by Xanthomonas campestris pv. mangiferaeindicae. During 2009 and 2013,leaves,twigs and fruits of mango were collected from commercial and experimental mango fields with typical canker symptoms in Hainan,Guangxi,Guangdong and Szechwan Provinces of China. The causal agent was identified as X. campestris pv. mangiferaeindicae through KC semi-selective medium isolation,pathogenicity tests,and sequencing of the gyrB gene.

关键词： Xanthomonas campestris pv. mangiferaeindicae Bacterial canker Mango