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Development of a single transcript CRISPR/Cas9 toolkit for efficient genome editing in autotetraploid alfalfa

The Crop Journal 2024年第3期12卷 788-795页

作者： Haixia Zhao Siyi Zhao yingping cao Xiping Jiang Lijuan Zhao Zhimeng Li Mengqi Wang Ruijuan Yang Chuanen Zhou Zhaoming Wang Feng Yuan Dongmei Ma Hao Lin Wenwen Liu Chunxiang Fu CAS Key Laboratory of Biofuels Shandong Provincial Key Laboratory of Energy GeneticsQingdao Institute of Bioenergy and Bioprocess TechnologyChinese Academy of SciencesQingdao 266101ShandongChina Shandong Energy Institute Qingdao 266101ShandongChina Qingdao New Energy Shandong Laboratory Qingdao 266101ShandongChina University of Chinese Academy of Sciences Beijing 100049China The Key Laboratory of Plant Development and Environmental Adaptation Biology Ministry of EducationSchool of Life SciencesShandong UniversityQingdao 266101ShandongChina Key Laboratory of Forage Breeding and Seed Production of Inner Mongolia Inner Mongolia M-Grass Ecology and Environment(Group)Co.Ltd.Hohhot 010016Inner MongoliaChina School of Ecology Environment Ningxia UniversityYinchuan 750021NingxiaChina Biotechnology Research Institute Chinese Academy of Agricultural SciencesBeijing 100081China

Alfalfa(Medicago sativa.L.)is a globally significant autotetraploid legume forage ***,despite its importance,establishing efficient gene editing systems for cultivated alfalfa remains a formidable *** this study,we pioneered the development of a highly effective ultrasonic-assisted leaf disc transformation system for Gongnong 1 alfalfa,a variety widely cultivated in Northeast ***,we created a single transcript CRISPR/Cas9(CRISPR_2.0)toolkit,incorporating multiplex gRNAs,designed for gene editing in Gongnong *** Cas9 and gRNA scaffolds were under the control of the Arabidopsis ubiquitin-10 promoter,a widely employed polymeraseⅡconstitutive promoter known for strong transgene expression in *** assess the toolkit’s efficiency,we targeted PALM1,a gene associated with a recognizable multifoliate *** the CRISPR_2.0 toolkit,we directed PALM1 editing at two sites in the wild-type Gongnong *** indicated a 35.1%occurrence of editing events all in target 2 alleles,while no mutations were detected at target 1 in the transgenic-positive *** explore more efficient sgRNAs,we developed a rapid,reliable screening system based on Agrobacterium rhizogenes-mediated hairy root transformation,incorporating the visible reporter *** screening system demonstrated that most purple visible hairy roots underwent gene ***,sgRNA3,with an 83.0%editing efficiency,was selected using the visible hairy root *** anticipated,tetra-allelic homozygous palm1 mutations exhibited a clear multifoliate *** palm1 lines demonstrated an average crude protein yield increase of 21.5%compared to trifoliolate *** findings highlight the modified CRISPR_2.0 system as a highly efficient and robust gene editing tool for autotetraploid alfalfa.

关键词： Alfalfa Gene editing CRISPR_2.0 toolkit Hairy root system Tetra-allelic homozygous mutants

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基于常规检验指标构建区分结直肠腺瘤与结直肠癌的预测模型

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肿瘤防治研究 2024年第5期51卷 353-360页

作者：林俊生应紫灵黄政渊祝先进曹颖平卢娉霞福建医科大学附属协和医院检验科福州350001 福建医科大学医学技术与工程学院医学检验系福州350122 福建医科大学附属协和医院急诊外科福州350001

目的回顾性分析结直肠腺瘤(CRA)患者与结直肠癌(CRC)患者的常规检验指标并建立预测模型。方法选取580例诊断为CRA患者117例和CRC患者463例,按照7∶3随机分为训练集406例、验证集174例。采用Logistic回归法建立模型,并绘制列线图。分别... 详细信息

目的回顾性分析结直肠腺瘤(CRA)患者与结直肠癌(CRC)患者的常规检验指标并建立预测模型。方法选取580例诊断为CRA患者117例和CRC患者463例,按照7∶3随机分为训练集406例、验证集174例。采用Logistic回归法建立模型,并绘制列线图。分别采用受试者工作特征曲线(ROC)、校准图、临床决策曲线(DCA)评估预测模型的区分度、校准度和临床应用的有效性。结果单因素Logistic回归分析初步筛选出13个候选变量,包括年龄、大便隐血试验(FOBT)、纤维蛋白原(FIB)、凝血酶时间(TT)、白蛋白(ALB)、白细胞计数(WBC)、中性粒细胞计数(NEUT#)、红细胞比积(HCT)、平均血红蛋白含量(MCH)、红细胞体积分布宽度(RDW)、血小板计数(PLT)、平均血小板体积(MPV)、活化部分凝血活酶时间(APTT)。多因素Logistic回归显示MPV、FIB、ALB、FOBT、TT以及HCT是CRA患者患CRC的危险因素(P<0.05)。构建预测模型,训练集和验证集发生CRC的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.915和0.836。校准曲线显示,模型预测准确率较高,校正能力良好。DCA结果显示,当阈值概率为55%~95%时,训练集与验证集的净收益均大于2个极端模型,即临床有益。结论本研究构建的预测模型具有较好的区分度、校准度和临床应用的有效性,可作为区分CRA和CRC患者的辅助工具。

关键词：结直肠腺瘤结直肠癌预测模型列线图

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Development of a single transcript CRISPR/Cas9 toolkit for efficient genome editing in autotetraploid alfalfa

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The Crop Journal 2024年第3期 788页

作者： Haixia Zhao Siyi Zhao yingping cao Xiping Jiang Lijuan Zhao Zhimeng Li Mengqi Wang Ruijuan Yang Chuanen Zhou Zhaoming Wang Feng Yuan Dongmei Ma Hao Lin Wenwen Liu Chunxiang Fu

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导线横断面结构对直流输电线路正极性电晕放电的影响

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高电压技术 2020年第7期46卷 2487-2495页

作者：张新春曹应平王增基王峰华北电力大学机械工程系保定071003

导线横断面几何构型是影响直流输电线路电晕放电的重要因素,研究导线断面结构对电晕放电特性的影响对高压输电工程导线断面选择具有重要意义。为此利用流体-化学动理学方法首先建立了不同横断面结构导线表面电晕放电混合数值模型,对圆... 详细信息

导线横断面几何构型是影响直流输电线路电晕放电的重要因素,研究导线断面结构对电晕放电特性的影响对高压输电工程导线断面选择具有重要意义。为此利用流体-化学动理学方法首先建立了不同横断面结构导线表面电晕放电混合数值模型,对圆形导线和股线导线电晕放电过程中的表面电子数密度和电场强度分布规律进行了研究,具体分析了导线横断面最外层股线数对正极性电晕放电特性的影响。研究结果表明:股线附近的电子数密度明显高于圆断面导线,但在流注放电阶段,流注通道内不同横断面导线电子数密度相差不大;在放电初期,股线导线表面的电场强度明显高于圆形导线表面,随着放电时间的发展,场强差值逐渐减小;随着导线断面股线数(瓣数)的增加,导线表面电子数密度和电场强度反而减小,当股线数达到某一定值时,其股线导线表面电晕特性接近于圆断面导线。

关键词：横断面几何电晕放电混合模型直流导线

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Differentiation and prognostic stratification of acute myeloid leukemia by serum-based spectroscopy coupling with metabolic fingerprints

Differentiation and prognostic stratification of acute myelo...

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2022CCTB中国肿瘤标志物学术大会暨中国整合肿瘤学大会暨第十六届肿瘤标志物青年科学家论坛暨中国肿瘤标志物产业创新大会

作者： Yang Chen Zhengwei Duan Lijing Xiao yingping cao Yi Peng Wuping Liu Jianda Hu Fujian Medical University 福建医科大学附属协和医院福建省血液病研究所福建医科大学附属协和医院检验科福建医科大学医学技术与工程学院眼视光学系厦门大学电子科学系福建省等离子体与磁共振研究重点实验室

Acute myeloid leukemia(AML) is a heterogeneous disease characterized by complex molecular and cytogenetic *** approaches to predict the prognosis of AML have increasingly attracted *** were 98 non-M3 AML cases and 48 healthy controls were enrolled in the current *** routine assays for cytogenetic and molecular genetic analyses were performed on the bone marrow samples of AML ***,metabolic profiling of these AML subjects were also performed on the serum samples by combining Ag nanoparticles-based surface-enhanced Raman spectroscopy(SERS) with proton nuclear magnetic resonance(NMR) *** most of the routine biochemical test showed no significant differences between the M0～M2 and M5 groups,the metabolic profiles were significantly different either between AML subtypes or between prognostic risk *** SERS bands were screened to serve as potential markers for AML *** results demonstrated that the classification models for M0～M2 and M5 shared two bands(i.e.,1328 and 741 cm-1),all came from nucleic acid ***,Metabolic profiles provided various differential metabolites responsible for different AML subtypes,and we found altered pathways mainly included energy metabolism like glycolysis,pyruvate metabolism,and metabolisms of nucleic acid bases as well as specific amino acid *** is concluded that integration of SERS and NMR provides the rational and could be reliable to reveal AML differentiation,and meanwhile lay the basis for experimental and clinical practice to monitor disease progression and prognostic evaluation.

关键词：

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对恐怖主义概念与成因的初步分析

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中国人民公安大学学报（社会科学版） 2001年第4期17卷 54-58页

作者：曹颖苹梅建明公安部办公厅北京100741 中国人民公安大学北京100038

恐怖主义是由个人、群体、组织甚至国家基于政治目的 ,为了在尽可能广泛的范围内制造恐怖气氛 ,针对政府、公众或个人使用暴力或以暴力相威胁的行动。恐怖主义是现代社会的产物 ,现代社会特殊的政治、经济、意识形态催生了恐怖主义 ,现... 详细信息

恐怖主义是由个人、群体、组织甚至国家基于政治目的 ,为了在尽可能广泛的范围内制造恐怖气氛 ,针对政府、公众或个人使用暴力或以暴力相威胁的行动。恐怖主义是现代社会的产物 ,现代社会特殊的政治、经济、意识形态催生了恐怖主义 ,现代社会的技术条件使恐怖主义成为可能。

关键词：恐怖主义概念原因

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Cyr61在肿瘤中的作用及临床应用前景

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中华检验医学杂志 2016年第8期39卷 571-574页

作者：吴聪莲祝先进曹颖平福建医科大学协和临床医学院临床检验诊断学专业2014级福州350001 福建医科大学附属协和医院检验科

富含半胱氨酸蛋白61（Cyr61）是一种分泌型基质蛋白，广泛参与调控细胞多种功能。近来的研究显示，Cyr61在肿瘤的发生、发展中扮演重要的角色，现认为其可能是一新的潜在促肿瘤形成因子，发挥着类似“癌基因”的作用。本文就近年来Cyr6... 详细信息

富含半胱氨酸蛋白61（Cyr61）是一种分泌型基质蛋白，广泛参与调控细胞多种功能。近来的研究显示，Cyr61在肿瘤的发生、发展中扮演重要的角色，现认为其可能是一新的潜在促肿瘤形成因子，发挥着类似“癌基因”的作用。本文就近年来Cyr61与肿瘤发生发展关系的研究进展及在肿瘤诊断及治疗中的应用前景进行简要的归纳。

关键词：肿瘤 CCN胞间信号蛋白质类富含半胱氨酸蛋白质61 整合素类

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税额确认程序中的举证责任--基于“放管服”的视角

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税务研究 2020年第3期 63-67页

作者：胡邵峰曹映平王维顺湖南税务高等专科学校国家税务总局济南市税务局

本文探讨了税额确认程序中举证责任的法律个性,分析了税额确认程序中举证责任的特点,并通过对"放管服"改革与举证责任的逻辑自洽和"放管服"视角下税额确认程序举证责任规则设计的分析,发现在税额确认程序中,举证责任的分配正是一个"放""... 详细信息

本文探讨了税额确认程序中举证责任的法律个性,分析了税额确认程序中举证责任的特点,并通过对"放管服"改革与举证责任的逻辑自洽和"放管服"视角下税额确认程序举证责任规则设计的分析,发现在税额确认程序中,举证责任的分配正是一个"放""管""服"结合的过程。

关键词：税额确认举证责任征管程序税收核定

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房地产税收制度与土地出让金制度改革匹配问题探析

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中国资产评估 2011年第6期 39-41页

作者：曹映平湖南税务高等专科学校

本文以调控房价为出发点,拟通过对房地产税收制度和土地出让金制度相关法律关系、制度设计功能的分析,提出两个制度的改革路径不宜简单选择合并或替代的方式,而应从疏通法理通道入手,在对土地出让金进行价值分析的基础上,找出解决土地... 详细信息

本文以调控房价为出发点,拟通过对房地产税收制度和土地出让金制度相关法律关系、制度设计功能的分析,提出两个制度的改革路径不宜简单选择合并或替代的方式,而应从疏通法理通道入手,在对土地出让金进行价值分析的基础上,找出解决土地出让金存在的法律依据和房地产税的计税依据,以此来解决两个制度在改革过程中的匹配问题。

关键词：土地出让金制度房地产税收制度制度改革匹配法律关系设计功能改革路径价值分析

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结建地下人防工程的所有权法律属性探讨

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湖南税务高等专科学校学报 2005年第5期18卷 30-31页

作者：曹映平湖南税务高等专科学校湖南长沙410116

通过分析应当分摊的公共建筑面积和附属公共配套设施、独立使用空间,投资人和所有权人的权利确认,建设部的建筑工程报建的面积计算方式和房产测量规范,建筑物的功能面积承担的结建设施的费用,所有权登记的等问题,论证地下人防工程的投... 详细信息

通过分析应当分摊的公共建筑面积和附属公共配套设施、独立使用空间,投资人和所有权人的权利确认,建设部的建筑工程报建的面积计算方式和房产测量规范,建筑物的功能面积承担的结建设施的费用,所有权登记的等问题,论证地下人防工程的投资人应确认为购买了所结建房屋的业主,希望由地面房屋所有权人取得登记权的制度更加完善。

关键词：人防工程所有权配套设施独立使用空间

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