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The efficacy of NP11-4-derived immunotoxin scFv-artesunate in reducing hepatic fibrosis inducedby Schistosoma japonicum in mice

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The Journal of Biomedical Research 2011年第2期25卷 148-154页

作者： Hong Li Chunyan Gu Yongya Ren Yang Dai Xiaojuan zhu Jing Xu Yuhua Li Zhenning Qiu Jin zhu yinchang zhu Xiaohong Guan Zhenqing Feng Key Labortary of Antibody Technique of Ministry of Health Nanjing Medical University Nanjing Jiangsu 210029 China Pathology Department Nanjing Medmal University Nanjing Jiangsu 210029 China Jiangsu Institute of Parasitic Diseases Wuxi Jiangsu 214000 China Huadong Medical Institute of Bioteehniques Nanjing Jiangsu 210002 China

Schistosomiasis is one of the most prevalent parasitic diseases in China, and hepatic fibrosis caused by schistosome infection is the principal cause of death. The aim of this study was to evaluate the efficacy of NPll-4- derived immunotoxin scFv-artesunate on Schistosoma japonicum-induced hepatic fibrosis. A single-chain variable fragment （scFv） was generated from the murine anti-Schistosoma japonicum （S. japanicum） monoclonal antibody NP11-4. The scFv was expressed as a soluble protein and purified by Ni-affinity chromatography. After conjuga- tion with artesunate, the binding ability with soluble egg antigens （SEA） was determined by an enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA）. The biological activity of purified scFv, scFv-artesunate （immunotoxin）, and artesunate was detected in vivo. Image-Pro Plus software was used to analyze the size of egg granuloma and the extent of liver fibrosis. The recombinant scFv expession vector was constructed and expressed successfully. After purification by a His-trap Ni-affinity column, the scFv yield was approximately 0.8 mg/L of culture medium. ELISA results showed that chemical conjugation did not affect the binding activity of the immunotoxin. Our animal experiments indicated that the immunotoxin could significantly reduce the size of egg granuloma in the liver and inhibit hepatic fibrosis. The immunotoxin could be used as a promising candidate in the targeted therapy of S. .japonicum-induced hepatic fibrosis.

关键词： Schistosoma japonicum scFv immunotoxin hepatic fibrosis

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B细胞表位预测的研究进展

中国血吸虫病防治杂志 2006年第3期18卷 236-238,240页

作者：章辉朱荫昌江苏省血吸虫病防治研究所江苏省寄生虫分子生物学重点实验室江苏省寄生虫病学重点学科无锡214064

表位,又称抗原决定簇,是指免疫应答中被特异的效应分子或T、B淋巴细胞识别的抗原分子的特定结构位点.B细胞表位是指抗原中可被B细胞抗原受体(BCR)或抗体特异性识别并相互结合的线性片段或空间构象型结构.B细胞表位的预测对免疫原性多肽... 详细信息

表位,又称抗原决定簇,是指免疫应答中被特异的效应分子或T、B淋巴细胞识别的抗原分子的特定结构位点.B细胞表位是指抗原中可被B细胞抗原受体(BCR)或抗体特异性识别并相互结合的线性片段或空间构象型结构.B细胞表位的预测对免疫原性多肽和新型疫苗分子的设计都有很大的帮助,并有利于诊断试剂的开发以及临床疾病的诊断.

关键词： B细胞表位表位预测 B细胞抗原受体抗原决定簇特异性识别效应分子诊断试剂免疫应答新型疫苗免疫原性

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热休克蛋白及其在血吸虫研究中的进展

中国血吸虫病防治杂志 2005年第3期17卷 234-238页

作者：王晓婷朱荫昌江苏省血吸虫病防治研究所江苏省寄生虫分子生物学重点实验室江苏省寄生虫病学重点学科无锡214064

热休克蛋白(HSP)是生物界普遍存在的一类高度保守蛋白质,在生物体正常状态下有一定浓度的表达,当受到不同理化及病理因素刺激时,生物体合成这类蛋白质的能力将大大增加.HSP具有重要的生理功能,如参与相关蛋白质的折叠、亚基的装配、蛋... 详细信息

热休克蛋白(HSP)是生物界普遍存在的一类高度保守蛋白质,在生物体正常状态下有一定浓度的表达,当受到不同理化及病理因素刺激时,生物体合成这类蛋白质的能力将大大增加.HSP具有重要的生理功能,如参与相关蛋白质的折叠、亚基的装配、蛋白质的降解修复和细胞内物质运输等,以保护生物体体细胞免受内外不良因素的损害[1].该蛋白的生物学功能十分广泛,具有分子伴侣作用并参与抗原提呈过程.自发现以来,人们对果蝇、细菌、寄生虫、哺乳动物和人等各种生物的HSP进行了广泛的研究,已成为抗寄生虫感染中研究的热点之一.本文对其特点、功能和在血吸虫研究中的进展做一综述.

关键词：血吸虫高度保守蛋白质白及抗寄生虫感染热休克蛋白相关蛋白质生物学功能生物体正常状态病理因素生理功能物质运输不良因素抗原提呈分子伴侣哺乳动物 HSP 细胞内体细胞

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纳米药物研究进展

中国血吸虫病防治杂志 2006年第1期18卷 74-77页

作者：戴建荣朱荫昌江苏省血吸虫病防治研究所

纳米(nanometer,nm)是一种度量单位,1 nm为10-9m,相当于10个氢原子并排起来的长度[1].纳米技术(nanotechnology)是一门在0.1～100 nm空间尺度内操纵原子和分子,对材料进行加工,制造出具有特定功能产品的高新技术[2,3].由于纳米微粒的小... 详细信息

纳米(nanometer,nm)是一种度量单位,1 nm为10-9m,相当于10个氢原子并排起来的长度[1].纳米技术(nanotechnology)是一门在0.1～100 nm空间尺度内操纵原子和分子,对材料进行加工,制造出具有特定功能产品的高新技术[2,3].由于纳米微粒的小尺寸效应、表面积效应、量子尺寸效应和宏观量子隧道效应等使得它们具有常规材料不具备的特性,在纺织、食品、建材、矿业、信息、化工、医药和国防等方面具有更为广阔的应用前景[4].

关键词：纳米技术药物研究进展空间尺度高新技术纳米微粒表面积原子材料尺寸量子

胶体染料试纸条法检测牛血吸虫病的进一步研究

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中国血吸虫病防治杂志 2006年第4期18卷 270-272页

作者：何伟朱荫昌曹国群江苏省血吸虫病防治研究所无锡214064

目的评价胶体染料试纸条法(DDIA)检测牛血吸虫病的效果。方法采用5、10、20μl不同血清检测量进行DDIA检测,以确定DDIA检测牛血吸虫病的最适条件。以确定的最适条件对血吸虫病牛、阴性对照牛和肝片形吸虫病牛的血清进行检测并和环卵沉... 详细信息

目的评价胶体染料试纸条法(DDIA)检测牛血吸虫病的效果。方法采用5、10、20μl不同血清检测量进行DDIA检测,以确定DDIA检测牛血吸虫病的最适条件。以确定的最适条件对血吸虫病牛、阴性对照牛和肝片形吸虫病牛的血清进行检测并和环卵沉淀试验(COPT)检测结果进行比较。结果检测血清量为10μl时,DDIA的敏感性、特异性和与肝片形吸虫的交叉反应率分别为95.7%、96.0%和20.0%;COPT的敏感性、特异性和与肝片形吸虫的交叉反应率分别为72.9%、100.0%和0。结论当检测血清量为10μl时,DDIA检测牛血吸虫病有较高的敏感性和特异性,且敏感性高于COPT。

关键词：胶体染料试纸条法环卵沉淀试验牛血吸虫病免疫诊断

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日本血吸虫病疫苗研究进展

中国血吸虫病防治杂志 2006年第5期18卷 397-400页

作者：辛晓芳朱荫昌王国治中国药品生物制品检定所北京100050 江苏省血吸虫病防治研究所

血吸虫病是一种严重危害人类健康的寄生虫病,广泛流行于我国长江沿岸的湖南、湖北、江西、安徽、江苏省和大山区的四川、云南省等地.在流行区,由于不断地开展化疗工作,不断地对再感染进行重复治疗,耗费了大量的人力和物力.因此,寻找一... 详细信息

血吸虫病是一种严重危害人类健康的寄生虫病,广泛流行于我国长江沿岸的湖南、湖北、江西、安徽、江苏省和大山区的四川、云南省等地.在流行区,由于不断地开展化疗工作,不断地对再感染进行重复治疗,耗费了大量的人力和物力.因此,寻找一种补充性的、可产生长期效用的防治方法--疫苗,一直成为近年来科学家们奋斗的目标.尽管动物试验和一些人体研究表明,可以通过获得某种程度的抵抗力来应对血吸虫感染,但我们迄今对人类血吸虫感染的有关保护机制仍然知之甚少.当血吸虫进入机体时,免疫系统产生抵抗寄生虫入侵的有关免疫应答反应,并帮助对抗抑制宿主抗虫卵肉芽肿反应的因子,激活巨噬细胞以及各种不同的T细胞和抗体,它们既可以促进、也可以阻碍保护性应答[1,2].目前的候选疫苗虽然不是控制血吸虫病的最终解决方案,但它们仍可提供部分保护作用.同时,血吸虫感染致病直接与宿主中血吸虫虫卵的数目有关,所以疫苗可通过阻止血吸虫入侵,干扰产卵和排卵两个途径发挥作用.

关键词：血吸虫病疫苗免疫应答反应血吸虫感染日本人类健康虫卵肉芽肿保护性应答寄生虫病

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血吸虫病快速诊断试纸条试剂盒稳定性研究

中国血吸虫病防治杂志 2005年第4期17卷 262-264页

作者：何伟朱荫昌曹国群辛晓芳江苏省血吸虫病防治研究所无锡214064 中国药品生物制品检定所

目的观察血吸虫病快速诊断试纸条(DDIA)试剂盒的稳定性。方法分别用保存于37℃、室温和4℃的DDIA试剂盒定期对阳性和阴性参考血清进行检测,根据其敏感性、特异性、灵敏度和精密性的结果对试剂盒的稳定性进行评价。结果DDIA试剂盒在37℃... 详细信息

目的观察血吸虫病快速诊断试纸条(DDIA)试剂盒的稳定性。方法分别用保存于37℃、室温和4℃的DDIA试剂盒定期对阳性和阴性参考血清进行检测,根据其敏感性、特异性、灵敏度和精密性的结果对试剂盒的稳定性进行评价。结果DDIA试剂盒在37℃保存180d,或在室温及4℃条件下保存360d,其敏感性、特异性、灵敏度和精密性均保持不变。结论DDIA试剂盒在37℃下至少可保存180d,在室温或4℃条件下至少可保存360d。

关键词：血吸虫病快速诊断试纸条稳定性

胶体染料试纸条试剂盒检测曼氏血吸虫病的初步研究

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中国血吸虫病防治杂志 2006年第6期18卷 419-421页

作者：朱荫昌 Sohair Hassen 何伟曹国群江苏省血吸虫病防治研究所江苏省寄生虫分子生物学重点实验室江苏省寄生虫病学重点学科无锡214064 埃及国家研究中心

目的探索日本血吸虫胶体染料试纸条试剂盒(DDIA)用于检测曼氏血吸虫病的可行性。方法采用日本血吸虫DDIA检测从埃及尼罗河地区曼氏血吸虫病流行区采集的曼氏血吸虫病人血清及当地健康人血清。结果34份曼氏血吸虫病人血清DDIA均呈阳性,1... 详细信息

目的探索日本血吸虫胶体染料试纸条试剂盒(DDIA)用于检测曼氏血吸虫病的可行性。方法采用日本血吸虫DDIA检测从埃及尼罗河地区曼氏血吸虫病流行区采集的曼氏血吸虫病人血清及当地健康人血清。结果34份曼氏血吸虫病人血清DDIA均呈阳性,14份当地健康者血清均为阴性。与用曼氏血吸虫IHA和ELISA法检测结果相同。结论日本血吸虫DDIA也可用于检测曼氏血吸虫病。

关键词：胶体染料试纸条曼氏血吸虫病免疫诊断

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对钉螺具有毒性作用细菌的分离及初步鉴定

中国血吸虫病防治杂志 2005年第5期17卷 338-340页

作者：余传信殷旭仁杨小红朱荫昌江苏省血吸虫病防治研究所无锡214064

目的筛选对钉螺具有毒性作用的细菌及其毒素成分。方法收集濒死钉螺及其周围的土壤样本,分离其中的细菌。经发酵制备细菌的发酵上清、细菌裂解产物。通过杀螺毒性试验测定细菌发酵上清液、细菌的裂解产物及细菌对钉螺的毒性作用。结果... 详细信息

目的筛选对钉螺具有毒性作用的细菌及其毒素成分。方法收集濒死钉螺及其周围的土壤样本,分离其中的细菌。经发酵制备细菌的发酵上清、细菌裂解产物。通过杀螺毒性试验测定细菌发酵上清液、细菌的裂解产物及细菌对钉螺的毒性作用。结果从濒死钉螺及土壤样本中分离到104株细菌,经初步鉴定,这些细菌包括革兰氏阳性球菌、革兰氏阳性杆菌,革兰氏阴性球菌、革兰氏阴性杆菌。细菌PY1-1,PY3-3,PY1-2-1,PY7-2,PY3-5,PY19-3,PY2-2-2,PY8-2-2,PY8-4,PY16-1的发酵上清液、细菌裂解产物及细菌菌体对钉螺均具有不同程度的毒性作用,其中细菌PY1-1,PY7-2,PY3-5,PY19-3,PY2-2-2,PY8-2-2,PY16-1的发酵上清液对钉螺的杀灭作用均>50.0%。结论对钉螺具有毒性作用的细菌已经被分离出,为进一步鉴定对钉螺具有毒性作用的单一细菌成分奠定了基础。

关键词：钉螺细菌毒性作用