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中国实验方剂学杂志 2016年第5期22卷 60-63页

作者：臧文怡毛春芹苏晓楠周亚萍汪丽君谢辉南京中医药大学药学院南京210023

目的:建立HPLC同时测定益经颗粒中芍药苷、阿魏酸、毛蕊花糖苷、斯皮诺素含量的方法,为该制剂的质量控制提供参考。方法:采用Kromasil C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-0.1%乙酸(16∶84),流速1 m L·min^(-1),检测波长(0~... 详细信息

目的:建立HPLC同时测定益经颗粒中芍药苷、阿魏酸、毛蕊花糖苷、斯皮诺素含量的方法,为该制剂的质量控制提供参考。方法:采用Kromasil C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-0.1%乙酸(16∶84),流速1 m L·min^(-1),检测波长(0~12 min,230 nm;13~30 min,330 nm),柱温30℃。结果:芍药苷、阿魏酸、毛蕊花糖苷、斯皮诺素的线性范围分别为0.360 2~1.801 2,0.170 6~0.852 9,0.055 98~0.279 9,0.055 44~0.277 2μg,平均加样回收率分别为101.14%,98.97%,98.81%,97.92%,RSD分别为2.0%,1.9%,2.7%,1.8%。结论:该方法简便、准确、重复性好,可用于同时测定益经颗粒中芍药苷、阿魏酸、毛蕊花糖苷、斯皮诺素的含量,可提高该制剂的质量。

关键词：益经颗粒芍药苷阿魏酸毛蕊花糖苷斯皮诺素

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补肾益精法经外泌体途径对系统性硬皮病的血管保护作用研究

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广州中医药大学学报 2022年第5期39卷 1143-1150页

作者：朱珂谢颂苗杨海诗朱佳玲李东海齐庆广州中医药大学第一附属医院广东广州510405 深圳市龙岗中心医院广东深圳518116 东莞市中医院广东东莞523000 广州医科大学附属第二医院广东广州510260

【目的】观察经补肾益精法处理后人脐静脉内皮细胞(HUVEC)来源的外泌体对系统性硬皮病血管损伤的治疗作用。【方法】(1)体外研究:制备大鼠补肾益精中药复方含药血清,通过血管内皮细胞成管实验观察含药血清与对照血清对HUVEC成管的影响,... 详细信息

【目的】观察经补肾益精法处理后人脐静脉内皮细胞(HUVEC)来源的外泌体对系统性硬皮病血管损伤的治疗作用。【方法】(1)体外研究:制备大鼠补肾益精中药复方含药血清,通过血管内皮细胞成管实验观察含药血清与对照血清对HUVEC成管的影响,细胞免疫荧光染色法检测血小板内皮细胞黏附分子1(CD31)表达。采用超速离心法提取HUVEC细胞上清液中外泌体,透射电镜观察外泌体形态,Nano Analyzer法检测外泌体径粒与浓度,Western Blot法检测外泌体标志物的表达。设置对照血清干预HUVEC来源的外泌体组(对照血清-外泌体组)和含药血清干预HUVEC来源的外泌体组(含药血清-外泌体组),用外泌体处理HUVEC后,通过成管实验观察HUVEC成管能力,细胞免疫荧光染色法检测CD31表达。(2)体内研究:设置正常组、模型组及外泌体组。采用皮下注射博来霉素(100μL·mg^(-1)·d^(-1))28 d构建硬皮病小鼠模型。此外,模型组及外泌体组小鼠在造模第1、7天分别额外给予外泌体悬液及含药血清-外泌体局部皮下注射。4周后,观察小鼠皮肤组织病理变化,免疫组织化学法检测小鼠皮肤组织血管生成素1(ANG-1)、血管内皮细胞生长因子(VEGF)、血管性假血友病因子(vWF)、CD31表达水平。【结果】与对照组比较,含药血清组与含药血清-外泌体组的HUVEC成管能力及CD31表达均显著增强。电镜下可见类圆形高亮膜性微囊泡,外泌体的标志物表达增强。HE染色结果显示,与模型组比较,外泌体组小鼠皮肤胶原纤维含量有所减少,胶原间隙增宽,血管数量增多;免疫组织化学结果显示外泌体组小鼠皮肤ANG-1、VEGF、v WF、CD31表达水平显著高于模型组,较正常组有所降低。【结论】补肾益精法可通过HUVEC来源的外泌体途径发挥对系统性硬皮病的血管保护作用。

关键词：补肾益精法系统性硬皮病外泌体人脐静脉内皮细胞小鼠

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补肾益精中药复方对内皮间质转化的影响

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中医学报 2019年第6期34卷 1221-1225页

作者：谢颂苗邱路萍韩敬端黄嘉祺程子璇林少健眭道顺齐庆广州中医药大学广东广州510405 深圳市南山区妇幼保健院广东深圳518000 广州中医药大学第一附属医院广东广州510405

目的:探讨补肾益精中药复方对转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)诱导的内皮间质转化的作用及机制。方法:TGF-β1诱导人脐静脉细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)构建内皮间质转化模型,分别用... 详细信息

目的:探讨补肾益精中药复方对转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)诱导的内皮间质转化的作用及机制。方法:TGF-β1诱导人脐静脉细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)构建内皮间质转化模型,分别用对照血清、补肾益精复方含药血清、黄芪甲苷、Fli1 siRNA+含药血清干预模型,显微镜检测HUVEC细胞内皮间质转化过程,实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative polymerase chain reaction,QPCR)法检测各组VE-cadherin、FSP1、Fli1的表达。结果:①经TGF-β1诱导后,细胞形态呈现纤维化改变,VE-cadherin表达降低,FSP1表达升高,提示内皮间质转化模型诱导成功;同时Fli1在内皮间质转化模型中为低表达。②采用Fli1 siRNA干扰设计Fli1 siRNA序列,显示Fli1 siRNA-1明显抑制Fli1 mRNA表达,同时VE-cadherin表达明显下降,FSP1表达明显上升。③黄芪甲苷组、补肾益精复方含药血清组中Fli1、VE-cadherin的表达较内皮间质转化模型组升高,FSP1表达降低,提示血管内皮间质得到改善;Fli1siRNA+含药血清组较含药血清组Fli1下降、VE-cadherin下降、FSP1上升,其改善不如单独含药血清组明显。结论:补肾益精法中药复方可改善硬皮病血管内皮间质转化,其机制可能与上调Fli1有关。

关键词：补肾益精中药复方转化生长因子-β1 内皮间质细胞转化硬皮病人脐静脉细胞

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