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人激活转录因子5基因真核表达载体的构建及其生物学功能研究

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生物技术通讯 2014年第1期25卷 13-16页

作者：符静徐小洁刘家宏田沛荣范忠义吕朝晖王涛朱建华陆菊明叶棋浓军事医学科学院生物工程研究所北京100850 解放军总医院内分泌科北京100853 解放军总医院第一附属医院北京100039

目的:构建带myc标签的人激活转录因子5(ATF5)的真核表达载体,获得myc-ATF5融合蛋白,并对其生物学功能进行初步检测。方法:以本实验室保存的带有XL5标签的ATF5质粒为模板,采用PCR技术扩增ATF5编码序列,将其插入pXJ-40-myc载体中,Western... 详细信息

目的:构建带myc标签的人激活转录因子5(ATF5)的真核表达载体,获得myc-ATF5融合蛋白,并对其生物学功能进行初步检测。方法:以本实验室保存的带有XL5标签的ATF5质粒为模板,采用PCR技术扩增ATF5编码序列,将其插入pXJ-40-myc载体中,Western印迹检测其表达;将重组质粒与空载体分别转染人胚肾293T细胞,通过Western印迹和qRT-PCR检测其下游基因哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)在蛋白和mRNA水平的变化。结果:双酶切和测序结果表明myc-ATF5真核表达质粒构建成功,转染293T细胞后获得表达;Western印迹和qRT-PCR证明myc-ATF5可升高mTOR的转录和蛋白水平。结论:构建了带myc标签的人ATF5真核表达载体,为进一步研究ATF5在自噬中的功能奠定了基础。

关键词：人激活转录因子5 真核表达生物学功能

流感嗜血杆菌结合疫苗临床安全性及免疫原性研究

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中华疾病控制杂志 2009年第6期13卷 663-666页

作者：潘红星张艺飓陈帅顾善坤梅茂冬张盐姝朱叶江蒯云朱凤才江苏省疾病预防控制中心江苏南京210009 滨海县疾病预防控制中心江苏盐城224500

目的评价国产流感嗜血杆菌结合疫苗的安全性和免疫原性。方法按整群随机抽样原则,以国产同类疫苗作为对照开展现场临床研究;比较试验和对照疫苗免后不良反应率、抗-Hib阳转率、保护率、免后抗-Hib水平(GMT)和免后抗-Hib较免前平均增长... 详细信息

目的评价国产流感嗜血杆菌结合疫苗的安全性和免疫原性。方法按整群随机抽样原则,以国产同类疫苗作为对照开展现场临床研究;比较试验和对照疫苗免后不良反应率、抗-Hib阳转率、保护率、免后抗-Hib水平(GMT)和免后抗-Hib较免前平均增长倍数。结果试验组及对照组接种后总体不良反应率分别为26.00%和22.67%,差异无统计学意义(P>0.05);在安全性观察期内,所观察到的不良反应以1、2级不良反应为主,未观察到3级以上不良反应。免后抗体总阳转率分别为98.52%和98.37%,试验疫苗和对照疫苗免后阳转率差异无统计学意义(P>0.05);两疫苗免后保护率、免后抗-Hib GMT和免后抗-Hib较免前平均增长倍数差异均无统计学意义(P>0.05)。结论受评的该国产流感嗜血杆菌结合疫苗总体不良反应与国产同类疫苗差异无统计学意义,免疫后抗体阳转率较高,抗体滴度上升幅度较大,具有良好的临床安全性和免疫原性。

关键词：嗜血菌流感疫苗安全

新型免疫活性细胞CIK体外对肝癌细胞的杀伤

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世界华人消化杂志 2000年第8期8卷 863-866页

作者：杜清友王福生徐东平刘洪雷周云刘明旭王业东陈菊梅吴祖泽中国人民解放军302医院生物工程研究室北京市100039 中国人民解放军军事医学科学院放射医学研究所北京市100850

目的观察人体 CIK(cytokine-induced killer)细胞的体外增殖力及杀伤肝癌细胞活性。方法采取健康自愿者的成分血,用淋巴细胞分离液分离获得外周血单个核细胞(PBMC),在体外培养条件下,通过加入不同细胞因子(如 IFN-γ,IL-1,IL-2,CD3 mAb... 详细信息

目的观察人体 CIK(cytokine-induced killer)细胞的体外增殖力及杀伤肝癌细胞活性。方法采取健康自愿者的成分血,用淋巴细胞分离液分离获得外周血单个核细胞(PBMC),在体外培养条件下,通过加入不同细胞因子(如 IFN-γ,IL-1,IL-2,CD3 mAb)培养诱导成 CIK 细胞和 LAK 细胞,观察不同培养细胞的增殖能力;用流式细胞仪对培养细胞做细胞表型动态分析,观察培养细胞的表面标志;与 LAK 细胞作对比,用 MTT 法测定并比较不同效应细胞的体外抗肝癌细胞活性。结果 CIK 细胞在培养14d 后开始大量增殖且在含人血清的培养基中增殖数量最多,可达500多倍,经表型分析表明,CIK 细胞属于异质细胞群,在培养过程中,CD^(3+)CD^(56+)双阳性细胞的绝对数量获得了大量增殖,至56d 时可占细胞总数的51.26%,是 CIK 主要的效应细胞;实验表明,CIK 细胞体外杀伤肝癌细胞的活性明显优于 LAK 细胞。结论 CIK 细胞是一种具有较强杀伤肝癌细胞的免疫活性细胞,有可能应用于抗肿瘤的生物治疗。

关键词：肝肿瘤免疫活性 CIK细胞外周血单个核细胞

1405例肝硬化并发败血症病原特点及预后分析

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传染病信息 2014年第3期27卷 148-151页

作者：陈素明崔恩博熊艺茹鲍春梅贾田野王欢张成龙张鞠玲庞君丽曲芬毛远丽解放军第三〇二医院临床检验医学中心北京100039 解放军第三〇二医院医务部科训科北京100039

目的分析肝硬化败血症患者的病原特点及预后,为有效救治提供依据。方法回顾分析我院肝硬化住院患者中有败血症临床征象并血培养阳性的病例资料,进一步分析其感染病原特点及预后。结果 2011—2013年进行血培养的肝硬化患者12 307例,血培... 详细信息

目的分析肝硬化败血症患者的病原特点及预后,为有效救治提供依据。方法回顾分析我院肝硬化住院患者中有败血症临床征象并血培养阳性的病例资料,进一步分析其感染病原特点及预后。结果 2011—2013年进行血培养的肝硬化患者12 307例,血培养阳性1405例(11.42%)。病原菌包括革兰阴性杆菌(729株,51.89%)、革兰阳性球菌(604株,42.99%)、真菌(51株,3.63%)及其他(21株,1.49%)。败血症组中腹腔穿刺(25.69%)、肝癌有创治疗(18.65%)、静脉留置管(16.65%)、留置导尿管(16.16%)及糖尿病(5.12%)的比例明显高于对照组(P<0.05);革兰阴性杆菌感染组病死率(19.34%)明显高于革兰阳性球菌组(6.46%)(P<0.05);鲍曼不动杆菌感染病死率(56.52%)和铜绿假单胞菌感染病死率(58.62%)明显高于大肠埃希菌(30.23%)(P<0.05)。结论肝硬化败血症以革兰阴性杆菌感染为主,不同种类感染病原的预后不同,穿刺、肝癌有创治疗、插管及糖尿病患者更容易发生败血症。

关键词：肝硬化败血症病原特征

2009-2013年我国16省市社区获得性细菌性腹泻病原菌分布及临床耐药分析

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传染病信息 2014年第3期27卷 143-147页

作者：崔恩博陈素明张成龙王勇贾天野鲍春梅张鞠玲王欢庞君丽曲芬毛远丽解放军第三○二医院临床检验医学中心北京100039 解放军疾病预防控制中心北京100071

目的分析我国近5年社区获得性细菌性腹泻病原菌分布及耐药特点。方法收集2009—2013年我国16省市分离自社区获得性细菌性腹泻患者新鲜大便标本的病原菌,用沙门、志贺菌属琼脂培养基、麦康凯培养基和庆大霉素培养基分离培养,挑取疑似腹... 详细信息

目的分析我国近5年社区获得性细菌性腹泻病原菌分布及耐药特点。方法收集2009—2013年我国16省市分离自社区获得性细菌性腹泻患者新鲜大便标本的病原菌,用沙门、志贺菌属琼脂培养基、麦康凯培养基和庆大霉素培养基分离培养,挑取疑似腹泻病原菌的纯菌落用VITEKⅡ细菌鉴定仪和微量编码生化反应管鉴定,再以沙门菌、志贺菌、弧菌和致泻性大肠埃希菌血清凝集试验进行血清型分型;采用K-B法检测细菌的药物敏感性(药敏)。结果 5年间共收集到我国16个省市各类腹泻病原菌10 881株,包括7个菌属、22个菌种和90个血清型,其中志贺菌7632株(70.14%),弧菌1351株(12.42%),沙门菌981株(9.02%),致泻性大肠埃希菌341株(3.13%),气单胞菌302株(2.78%),邻单胞菌269株(2.47%),小肠结肠耶尔森菌5株(0.05%)。志贺菌血清型以B群中的F2a、F4a和F1a为主,沙门菌血清型以肠炎沙门菌和鼠伤寒沙门菌为主。药敏监测显示,志贺菌对头孢噻肟、头孢吡肟、头孢美唑、亚胺培南和磷霉素等敏感性较好,敏感率分别为89.7%、92.3%、96.7%、100%和97.7%;沙门菌对头孢噻肟、头孢吡肟、氨曲南、亚胺培南和磷霉素等敏感率分别为94.0%、97.9%、94.4%、100%和96.4%;气单胞菌对头孢吡肟、左氧氟沙星、亚胺培南和磷霉素等敏感率分别为80.9%、80.0%、92.6%和84.0%;致泄性大肠埃希菌对抗生素的敏感率普遍较差;弧菌对所测抗生素敏感性(氨苄西林除外)均较好。结论我国社区获得性细菌性腹泻病原菌以志贺菌属、弧菌属和沙门菌属为主,经验性抗生素治疗应该覆盖这些病原,靶向治疗应该考虑药敏试验结果。

关键词：腹泻大肠杆菌沙门菌属志贺菌属药物耐受性抗菌药

高等医学院校与医疗机构开展省部共建的现状及发展策略

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卫生软科学 2019年第5期33卷 74-77页

作者：郑德亮王菊珍杜慧赵萍王贵祥马宁李辉业武敏郭莲张英殷雪峰于筠山东大学附属省立医院山东济南250021 云南省肿瘤医院云南昆明650106 哈尔滨医科大学附属第一医院黑龙江哈尔滨150081 西安市第四医院陕西西安710004 兰州大学第二医院甘肃兰州730030 天津医科大学肿瘤医院天津300060 青海省中医院青海西宁810000 蚌埠医学院第一附属医院安徽蚌埠233004 杭州市第一人民医院浙江杭州310006 包头市中心医院内蒙古包头014040 新疆医科大学第一附属医院新疆乌鲁木齐830054 大连医科大学附属第一医院辽宁大连116011

省部共建是国家推进新时期改革创新的重要举措,在高等医学院校与医疗机构中开展省部共建工作是很有必要的。介绍了省部共建的相关概念,以河北医科大学、阜外云南心血管病医院为例分析目前我国的应用现状,并论述高等医学院校与医疗机构... 详细信息

省部共建是国家推进新时期改革创新的重要举措,在高等医学院校与医疗机构中开展省部共建工作是很有必要的。介绍了省部共建的相关概念,以河北医科大学、阜外云南心血管病医院为例分析目前我国的应用现状,并论述高等医学院校与医疗机构省部共建存在对共建工作定位有偏差、缺乏明确责任主体和建设目标、缺乏有效的共建保障措施及有效的监督评价机制等问题。建议应统一认识、明确责任和共建目标、成立专门共建机构、建立健全长效机制、着力引导协作,合理推进高水平医学院校与医疗机构建设。

关键词：省部共建高等医学院校医疗机构现状发展策略

MALDI-TOF-MS鉴定宋内志贺菌的临床应用

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传染病信息 2014年第3期27卷 152-156页

作者：鲍春梅宋新爱崔恩博王欢张鞠玲陈素明张成龙贾天野曲芬毛远丽解放军第三○二医院临床检验医学中心北京100039

目的建立基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization-time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)鉴定宋内志贺菌的质谱数据库,实现对临床分离宋内志贺菌的快速鉴定。方法建立经提取法处理后... 详细信息

目的建立基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization-time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)鉴定宋内志贺菌的质谱数据库,实现对临床分离宋内志贺菌的快速鉴定。方法建立经提取法处理后鉴定宋内志贺菌的质谱数据库。在分别使用直接涂抹法和提取法处理后对200株宋内志贺菌野生株进行鉴定验证;同时针对宋内志贺菌的不同菌相、不同激光强度和不同样本保存时间分别进行MALDI-TOF-MS鉴定。再选取100株大肠埃希菌,进行MALDI-TOF-MS鉴定,以确定新建数据库的特异性。结果宋内志贺菌经提取法处理后的鉴定符合率为100%,经直接涂抹法处理后的鉴定符合率为71.5%。宋内志贺菌不同菌相和不同激光强度的鉴定结果差异无统计学意义(P>0.05);而样本不同保存时间鉴定结果差异有统计学意义(P<0.05)。使用新数据库后,大肠埃希菌鉴定符合率为96.0%。结论经提取法处理后应用MALDI-TOF-MS鉴定宋内志贺菌建立的质谱数据库,能快速、准确鉴定宋内志贺菌到种水平,满足腹泻病原菌临床分离株的快速诊断。

关键词：志贺菌属提取法微生物学图谱

MA120微生物鉴定/药敏分析系统在临床微生物鉴定与药物敏感性测定中的效果评价

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传染病信息 2016年第5期29卷 267-271,275页

作者：张鞠玲张成龙贾天野王欢袁媛庞君丽陈素明张树永鲍春梅曲芬解放军第三0二医院临床检验医学中心北京100039 阳光融和医院检验科潍坊261000

目的评价国产微生物鉴定/药敏分析系统(MA120)在临床微生物鉴定和药物敏感性测定的效果。方法收集解放军第三〇二医院2013年1月—2014年12月间的临床分离株1803株,包括革兰阴性菌1205株及革兰阳性菌598株,共28个菌属,107个菌种,菌种经16... 详细信息

目的评价国产微生物鉴定/药敏分析系统(MA120)在临床微生物鉴定和药物敏感性测定的效果。方法收集解放军第三〇二医院2013年1月—2014年12月间的临床分离株1803株,包括革兰阴性菌1205株及革兰阳性菌598株,共28个菌属,107个菌种,菌种经16S r DNA测序(测序)鉴定确认。用MA120进行细菌的鉴定与药敏检测,鉴定结果与测序确认结果比较,计算种的鉴定符合率;药敏结果与VITEK 2全自动细菌鉴定/药敏分析系统(VITEK 2)的药敏检测结果比较,计算耐药的符合率。结果 MA120鉴定革兰阴性菌19个菌属67个菌种1205株,与测序结果总体符合率为91.12%;鉴定革兰阳性菌9个菌属40个菌种598株,与测序结果总体符合率为94.31%。MA120药敏卡涵盖常见的抗生素,耐药率与VITEK2的符合率分别为:肠杆菌科89.54%,非发酵菌86.11%,葡萄球菌属94.74%,肠球菌属与链球菌属82.61%。结论 MA120在常见临床微生物的鉴定与药敏中的应用具有较好的效果,鉴定细菌种类涵盖临床常见的致病菌,且具有的药敏抗生素种类齐全,并可根据美国临床和实验室标准协会的建议及临床需求及时完善,应用灵活。

关键词：微生物鉴定药物敏感性评价

甲状腺功能亢进性心脏病的超声心动图及相关因素分析

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中国临床保健杂志 2012年第2期15卷 116-118页

作者：张苏皖李素梅方星星荆春艳王菊梅任安陈若平叶山东陈超肖淳纯安徽医科大学附属省立医院安徽省立医院内分泌科合肥230001

目的探讨甲状腺功能亢进性心脏病的超声心动图表现及相关危险因素。方法回顾分析361例甲亢患者(包括单纯甲亢及甲亢性心脏病患者)的超声心动图资料、一般临床资料及检测指标。结果单纯甲亢患者的左心室射血分数(LVEF)高于甲亢性心脏病(P... 详细信息

目的探讨甲状腺功能亢进性心脏病的超声心动图表现及相关危险因素。方法回顾分析361例甲亢患者(包括单纯甲亢及甲亢性心脏病患者)的超声心动图资料、一般临床资料及检测指标。结果单纯甲亢患者的左心室射血分数(LVEF)高于甲亢性心脏病(P<0.01),两组间左心房、左心室大小差异有统计学意义(P<0.05)。甲亢性心脏病组患者年龄、病程(P<0.01)、血清游离甲状腺素(FT4)水平、甲状腺体积及重量、收缩压和脉压差(P<0.05)均显著高于单纯甲亢组,血浆总胆固醇和三酰甘油均低于甲亢组(P<0.05)。结论年龄、病程及FT4水平是甲亢性心脏病的主要危险因素,超声心动图检查有助早期发现甲亢患者心脏结构和功能改变。

关键词：甲状腺功能亢进症心脏病超声心动描记术危险因素