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Effects of calcium application on apple fruit softening during storage revealed by proteomics and phosphoproteomics

Horticultural Plant Journal 2022年第4期8卷 408-422页

作者： yaxiu xu Jiaojiao Liu Nannan Zang Zepeng Yin Aide Wang Key Laboratory of Fruit Postharvest Biology Key Laboratory of Protected HorticultureNational and Local Joint Engineering Research Center of Northern Horticultural Facilities Design and Application TechnologyCollege of HorticultureShenyang Agricultural UniversityShenyang 110866 China

Fruit ripening has been reported to be related to calcium(Ca),but the underlying mechanisms by which Ca regulates this process remain largely unknown.In order to study the changes of proteins and enriched phosphopeptides,we conducted TMT labeling,bio-material-based PTM enrichment based on mass spectrometry in Ca-treated‘Golden Delicious’(GD)apple fruit(Malus×domestica).This dataset presents a comprehensive overview of the critical pathways involved in fruit ripening.A total of 47 proteins and 124 phosphoproteins significantly changed in Ca-treated fruit,which are crucial for regulating the cell wall and cytoskeleton,Ca-mediated signaling and transport,ethylene production,protein fate,especially ubiquitination-based protein degradation,and primary and secondary metabolisms.Our results indicated that Ca inhibited the abundance of polygalacturonase(PG)activity and increased the phosphorylation level of CSLD3.PG and phosphorylation were involved in cell wall degradation,thereby delaying fruit softening.As a secondary messenger,Ca-mediated signaling subsequently triggered downstream mitogen-activated protein kinases(MAPK)cascades and activated the membrane,transport,and ROS signaling.Moreover,MdEIN2,a key enzyme involved in the ubiquitin of protein modification,increased at Ser753 and Ser758 in Ca-treated fruit.Furthermore,diverse primary and secondary metabolisms including glycolysis,fatty acid metabolism,and oxidation respiratory chain were modulated to prevent fruit softening.These results provide basic information from protein and phosphorylation levels for apple fruit ripening during storage,which may be helpful for apple fruit storage control.

关键词： Apple Proteomics Phosphoproteomics Calcium Fruit ripening

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Comparative transcriptome analysis of the climacteric of apple fruit uncovers the involvement of transcription factors affecting ethylene biosynthesis

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Horticultural Plant Journal 2023年第4期9卷 659-669页

作者： Tong Li Xiao Zhang Yun Wei yaxiu xu Weiting Liu Hongjian Li Guangxin Yang Aide Wang Xiaoxue Wang Rice Research Institute Shenyang Agricultural UniversityShenyangLiaoning 110866China College of Horticulture Shenyang Agricultural UniversityShenyangLiaoning 110866China Liaoning Institute of Pomology XiongyueLiaoning115009China

Apple(Malus domestica)fruit generally undergoes a climacteric.During its ripening process,there is a peak in ethylene release and its firmness simultaneously decreases.Although more in-depth research into the mechanism of climacteric-type fruit ripening is being carried out,some aspects remain unclear.In this study,we compared the transcriptomes of 0-Pre and 15-Post(pre-and post-climacteric fruit),and 15-Post and 15-MCP[fruit treated with 1-MCP(1-methylcyclopropene)].Various transcription factors,such as MADS-box,ERF,NAC,Dof and SHF were identified among the DEGs(differential gene expressions).Furthermore,these transcription factors were selected for further validation analysis by qRT-PCR.Moreover,yeast one hybrid(Y1H),β-glucuronidase(GUS)transactivation assay and dual-luciferase reporter assay showed that MdAGL30,MdAGL104,MdERF008,MdNAC71,MdDof1.2,MdHSFB2a and MdHSFB3 bound to MdACS1 promoter and directly regulated its transcription,thereby regulating ethylene biosynthesis in apple fruit.Our results provide useful information and new insights for research on apple fruit ripening.

关键词： Apple RNA-Seq Fruit ripening Ethylene Transcription factor

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CaMKⅡ对多囊卵巢综合征模型小鼠颗粒细胞中Caspase-3表达的影响

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吉林大学学报（医学版） 2023年第4期49卷 968-974页

作者：谢贤国马亚博徐娅秀张燕杜长征徐金瑞杨易宁夏大学西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室宁夏银川750021 宁夏大学生命科学学院微生物与分子生物学系宁夏银川750021

目的:探讨钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)在正常小鼠卵巢和多囊卵巢综合征(PCOS)小鼠卵巢组织中的差异表达,阐明CaMKⅡ对PCOS小鼠卵巢颗粒细胞凋亡的影响。方法:用蓖麻油溶解脱氢表雄酮(DHEA)皮下注射诱导PCOS小鼠模型(PCOS组),对照... 详细信息

目的:探讨钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)在正常小鼠卵巢和多囊卵巢综合征(PCOS)小鼠卵巢组织中的差异表达,阐明CaMKⅡ对PCOS小鼠卵巢颗粒细胞凋亡的影响。方法:用蓖麻油溶解脱氢表雄酮(DHEA)皮下注射诱导PCOS小鼠模型(PCOS组),对照组小鼠注射等体积蓖麻油,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测2组小鼠血清中睾酮水平,阴道涂片监测2组小鼠发情周期变化,HE染色观察2组小鼠卵巢组织病理形态表现,免疫荧光染色法检测2组小鼠卵巢组织中CaMKⅡ蛋白定位和荧光强度,Western blotting法检测2组小鼠卵巢组织中CaMKⅡ和含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3 (Caspase-3)蛋白表达水平。采用短发夹RNA (sh-RNA)-CaMKⅡ慢病毒转染人卵巢颗粒细胞(KGN细胞)建立稳转体系,分为空白对照组、 sh-CaMKⅡ-1组和sh-CaMKⅡ-2组,Western blotting法检测各组KGN细胞中CaMKⅡ和Caspase-3蛋白表达水平。结果:与对照组比较,PCOS组小鼠血清中总睾酮和游离睾酮水平明显升高(P<0.01),发情周期紊乱,停滞于发情中期,卵巢组织中出现颗粒细胞层数较少的空泡状卵泡,表明PCOS小鼠模型建立成功。CaMKⅡ蛋白在小鼠卵巢组织的卵母细胞、颗粒细胞和间质细胞中均有表达;与对照组比较,PCOS组小鼠卵巢组织中CaMKⅡ荧光强度和蛋白表达水平明显降低(P<0.01),Caspase-3蛋白表达水平明显升高(P<0.01)。与空白对照组比较,sh-CaMKⅡ-1和sh-CaMKⅡ-2组KGN细胞中CaMKⅡ蛋白表达水平明显降低(P<0.01),Caspase-3蛋白表达水平明显升高(P<0.01)。结论:PCOS小鼠卵巢组织中CaMKⅡ蛋白表达水平降低诱导Caspase-3蛋白表达水平升高,进而促进颗粒细胞凋亡。

关键词：钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ 多囊卵巢综合征动物模型含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3

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小鼠原始卵泡发育关键时期卵巢中miRNAs的生物学特征及功能分析

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黑龙江畜牧兽医 2023年第23期 7-12,126-129页

作者：于建杰王相燕石家祺徐娅秀漆志鹏丁向彬刘新峰天津农学院动物科学与动物医学学院天津市农业动物繁育与健康养殖重点实验室天津300384 宁夏大学西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室银川750021 宁夏大学生命科学学院银川750021

为了探究15.5胚龄和17.5胚龄小鼠卵巢中原始卵泡发育相关的miRNAs并解析其生物学功能,试验随机选用8~10周龄40只雌性和8只雄性健康小鼠进行饲养并合笼处理,提取小鼠原始卵泡发育关键时期15.5胚龄和17.5胚龄卵巢组织总RNA,PCR扩增筛选目... 详细信息

为了探究15.5胚龄和17.5胚龄小鼠卵巢中原始卵泡发育相关的miRNAs并解析其生物学功能,试验随机选用8~10周龄40只雌性和8只雄性健康小鼠进行饲养并合笼处理,提取小鼠原始卵泡发育关键时期15.5胚龄和17.5胚龄卵巢组织总RNA,PCR扩增筛选目的片段,高通量测序获得miRNAs,对其进行聚类、相关性、主成分和碱基偏好性分析,按照表达量倍数差异和表达差异显著性筛选差异表达miRNAs,对差异miRNAs进行靶基因预测,最后对获得的靶基因进行GO功能注释和KEGG富集分析。结果表明:经测序筛选共获得25个差异表达的miRNAs,其中上调的miRNAs有11个,下调的miRNAs有14个,差异倍数大于2且上调的miRNAs总共有5个,分别为mmu-miR-3471、mmu-miR-3472、mmu-miR-5132-3p、mmu-miR-3962及mmu-miR-7118-3p;15.5胚龄和17.5胚龄的卵巢样品分别被聚集在两个区域,具有很好的一致性;miRNAs的长度不同,首位碱基的偏好性也不同;miRNAs在不同染色体上的碱基偏好程度也不一样;对筛选到的25个差异miRNAs进行靶基因预测,共获得12665个靶基因;GO功能注释主要获得了与细胞组分或细胞进程有关的GO富集条目,如细胞过程的调节、调节细胞代谢过程、细胞通讯等。KEGG富集分析发现TGF-beta信号通路和磷酸酰肌醇信号通路与卵泡发育密切相关。说明差异miRNAs可能主要通过TGF-beta信号通路和磷酸酰肌醇信号通路参与卵巢中原始卵泡的发育调控。

关键词：小鼠卵巢原始卵泡卵母细胞 miRNAs

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湖泊岸线变化对水体污染物输移扩散影响研究

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环境科学与管理 2024年第2期49卷 39-43页

作者：许猛刘亚修陈天力浙江省机电设计研究院有限公司浙江杭州310000 杭州环研科技有限公司浙江杭州310000 杭州市生态环境局浙江杭州310000

为研究湖泊岸线变化情况对于水体污染物输移扩散的影响作用,选择某市的一个辖区,针对该辖区某湖泊岸线变化实施潮流场数值模拟。选用COD作为水体污染物实施输移扩散模拟,构建COD输移扩散模型。主要考虑6个点源的污染物输入,依据点源排... 详细信息

为研究湖泊岸线变化情况对于水体污染物输移扩散的影响作用,选择某市的一个辖区,针对该辖区某湖泊岸线变化实施潮流场数值模拟。选用COD作为水体污染物实施输移扩散模拟,构建COD输移扩散模型。主要考虑6个点源的污染物输入,依据点源排污量分别在大潮与小潮作用的湖泊岸线变化情况下研究不同岸线类型的COD输移扩散情况。在大潮、小潮作用下,COD在修复岸线与自然岸线的输移扩散范围更小,在人工岸线的输移扩散范围大。可以看出,与人工岸线相比,自然岸线和修复岸线可以抑制COD在水体中的扩散范围。

关键词：岸线分类水体污染物输移扩散湖泊岸线岸线类型

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Quantitative analysis of Ni effect on CCT diagrams of novel air-cooled bainite steels using artificial neural network models

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Journal of University of Science and Technology Beijing 2005年第5期12卷 410-415页

作者： Weihong xu Wei You yaxiu Liu Bingzhe Bai Hongsheng Fang Department of Mechanical and Electrical Engineering North China Institute of Science and Technology Beijing 101601 China Department of Electronics and Information Engineering North China Institute of Science and Technology Beijing 101601 China Department of Materials Science and Engineering Tsinghua University Beijing 100084 China

The quantitative effect of Ni content on continuous cooling transformation （CCT） diagrams of novel air-cooled bainite steels was analyzed using artificial neural network models. The results showed that Ni may retard the high- and medium-temperature transformation and martensite transformation. The results conform to the materials science theories.

关键词： novel air-cooled bainite steels nickel CCT diagrams artificial neural network

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民用飞机高原机场起飞性能分析及优化

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航空工程进展 2023年第1期14卷 135-140页

作者：王天波赵涛徐蕾刘超丁亚修中航西飞民用飞机有限责任公司工程技术中心西安710089 中国民用航空西北地区管理局西安710082

民用飞机在高原机场运营时,爬升梯度要求高,减载严重,对其起飞性能进行优化研究以增加起飞重量,在经济效益层面具有重要意义。基于理论分析,在满足适航要求的前提下,采用减小襟翼偏度和使用改进爬升法两种爬升方式,进行起飞性能优化,对... 详细信息

民用飞机在高原机场运营时,爬升梯度要求高,减载严重,对其起飞性能进行优化研究以增加起飞重量,在经济效益层面具有重要意义。基于理论分析,在满足适航要求的前提下,采用减小襟翼偏度和使用改进爬升法两种爬升方式,进行起飞性能优化,对不同起飞襟翼构型和不同爬升方法下的起飞距离、加速—停止距离和起飞限重进行计算分析。结果表明:通过有效优化可以显著提高飞机的起飞限重,改善起飞性能,提高运营效益。

关键词：民用飞机起飞性能高原机场运行一发失效

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内含肽介导的撕裂Cas9:一种非转基因的植物基因编辑系统

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西南大学学报（自然科学版） 2023年第8期45卷 105-112页

作者：贾凌许冰心叶冬梅李亚秀夏庆友西南大学前沿交叉学科研究院生物学研究中心重庆400715

CRISPR/Cas9技术在植物的基础研究以及谷物的遗传改造方面展现出了前所未有的潜力.目前植物基因编辑方法大多是基于农杆菌介导的遗传转化,该方法不仅涉及转基因过程,容易引发公众关注,同时该方法对较难转化的植物而言有一定的技术挑战.... 详细信息

CRISPR/Cas9技术在植物的基础研究以及谷物的遗传改造方面展现出了前所未有的潜力.目前植物基因编辑方法大多是基于农杆菌介导的遗传转化,该方法不仅涉及转基因过程,容易引发公众关注,同时该方法对较难转化的植物而言有一定的技术挑战.研究开发了一个简单的非转基因植物基因编辑方法,即采用病毒递送的方式将片段化的Cas9和gRNA运送到烟草中.为了适应马铃薯病毒X载体的运载能力,将金黄色葡萄球菌SaCas9分成3个部分,用2个片段化的内含肽将其连接成完整的Cas9蛋白.结果表明:在培养的细胞和植物叶片中,2个片段化的内含肽均能使3个片段化的Cas9重组为完整的Cas9蛋白.将3个片段化的载体和1个sgRNA载体注射到叶片中,能对PDS基因进行靶向编辑.该非转基因的植物基因编辑方法可能对其他多种植物有一定的应用效果.

关键词： CRSIPR/Cas9技术基因工程基因组修饰植物基因编辑

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杭州市重金属污染现状及防治对策

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工业安全与环保 2013年第3期39卷 52-54页

作者：刘亚修曹睿许猛杭州市环境保护科学研究设计有限公司杭州310014 杭州市环境保护科学研究院杭州310014 浙江省机电设计研究院有限公司杭州310002

通过对杭州市重金属污染情况的分析可知,杭州水体和土壤受到了重金属不同程度的污染,提出杭州重金属污染防治要通过调整产业结构,优化空间布局,提高准入门槛,淘汰落后产能,实施清洁生产,提高"三废"治理水平,从源头控制到末端治理全过程... 详细信息

通过对杭州市重金属污染情况的分析可知,杭州水体和土壤受到了重金属不同程度的污染,提出杭州重金属污染防治要通过调整产业结构,优化空间布局,提高准入门槛,淘汰落后产能,实施清洁生产,提高"三废"治理水平,从源头控制到末端治理全过程控制污染源。同时要加大受重金属污染水体和土壤的生态修复,确保环境及群众生命安全。

关键词：杭州重金属污染防治对策

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图书馆移动服务创新实践

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数字图书馆论坛 2018年第3期 31-35页

作者：于亚秀李欣徐来刘欢华东师范大学图书馆上海200062 华东师范大学信息化办公室上海200062

本文通过分析图书馆基于移动互联网环境开展服务的方式,针对图书馆开展"无卡化"服务的需求,以华东师范大学图书馆"无卡化"创新实践为案例,介绍图书馆开展以用户体验为主导的服务创新模式所需的移动互联网平台和技术,通过人与设备的连接... 详细信息

本文通过分析图书馆基于移动互联网环境开展服务的方式,针对图书馆开展"无卡化"服务的需求,以华东师范大学图书馆"无卡化"创新实践为案例,介绍图书馆开展以用户体验为主导的服务创新模式所需的移动互联网平台和技术,通过人与设备的连接实现人与服务的连接,使用户充分享受图书馆服务。

关键词：移动互联网生态用户体验创新2.0 虚拟校园卡无卡化

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