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Effects of intra-gastric beta-casomorphin-7 on somatostatin and gastrin gene expression in rat gastric mucosa

World Journal of Gastroenterology 2007年第14期13卷 2094-2099页

作者： ya-feng zong wei-hua chen yuan-shu zhang si-xiang zou Department of Animal Physiology and Biochemistry Nanjing Agricultural University Nanjing 210095 Jiangshu Province China

AIM： To investigate the in vivo effect of beta-casomorphin-7on the regulation of gastric somatostatin and gastrin messenger RNA in rat gastric mucosa.METHODS： Somatostatin and gastrin mRNA were quantified by RT-PCR and in situ hybridization （ISH）in 24 rats. The rats were divided into three treatment groups： basal diet ＋ physiological saline （n = 8）, basal diet ＋ beta-casomorphin-7 （7.5 × 10^-7 mol）（n = 8）,and basal diet ＋ poly-Gly-7 （containing equal mol of N with 7.5 × 10^-7 mol beta-casomorphin-7）（n = 8）.After oral administration for 30 days, rats were killed by exsanguinations.RESULTS： After intra-gastric administration of betacasomorphin-7 for 30 d, gastrin mRNA increased by 52.8% （P 〈 0.05, n = 8）, and somatostatin mRNA levels decreased by 30.7% compared with the controls （P 〈0.01, n = 8）. No significant differences in the expression of the two genes were observed in the poly-Gly-treated group, although gastrin mRNA expression was elevated by 35.6% as against the control group （P = 0.15, n =8）. The long-term oral administration of a casomorphin solution significantly decreased the even gray of D-cells,but did not lower the number of D-cells both in the antrum and fundus. Interestingly, the number of G-cells increased in the antrum and fundus, but its average density was augmented only in the antrum.CONCLUsiON： Beta-casomorphin-7 is capable of modulating gene expression of the regulatory peptides from G and D cells. Data from in situ hybridization studies indicate that beta-casomorphin-7 affects gastrin gene expression indirectly by means of the paracrine action of somatostatin, and depends on its intrinsic molecular function.

关键词： Beta-casomorphin-7 Adult rat Somatostatin Gastrin Expression

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β-酪啡肽7促大鼠胃内胃泌素的表达

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动物学报 2006年第6期52卷 1075-1081页

作者：宗亚峰陈伟华邹思湘张源淑南京农业大学兽医学院农业部动物生理生化重点开放实验室南京210095

本实验研究了β-酪啡肽7(β-casomorphin7,βCM7)在成年大鼠胃内的吸收及对胃黏膜中胃泌素(gas-trin)表达的影响。实验包括3个部分:1)将成年大鼠胃贲门和幽门结扎,并分别对胃伴行血管和网膜进行结扎和不结扎处理,采用反相HPLC法发现,胃... 详细信息

本实验研究了β-酪啡肽7(β-casomorphin7,βCM7)在成年大鼠胃内的吸收及对胃黏膜中胃泌素(gas-trin)表达的影响。实验包括3个部分:1)将成年大鼠胃贲门和幽门结扎,并分别对胃伴行血管和网膜进行结扎和不结扎处理,采用反相HPLC法发现,胃注射βCM7在两种不同处理中相同时间点的βCM7浓度无统计学差异;2)体外酶解实验表明,βCM7能抗成年大鼠胃黏膜酶水解并以完整的分子形式存在;3)将成年雄性SD大鼠设为对照组和3个试验组,分别灌喂1ml生理盐水、7·5×10-9mol/L纳洛酮(Naloxone,NaL)、7·5×10-9mol/LβCM7和7·5×10-9mol/LNaL+7·5×10-9mol/LβCM7。饲养周期为30d。半定量RT-PCR法观察了大鼠胃黏膜中胃泌素和生长抑素(Somatostatin,SS)mRNA表达的变化。结果显示:βCM7组能显著刺激胃黏膜中胃泌素基因的表达(n=8,P<0·05),且该效应不能被纳洛酮逆转;NaL组大鼠胃黏膜中胃泌素基因的表达极显著低于对照和各试验组(n=8,P<0·01);仅βCM7组能显著抑制胃黏膜中SS基因的表达(n=8,P<0·05)。上述结果表明:βCM7不能被成年大鼠胃黏膜吸收且能以完整的肽结构存在;βCM7可能通过抑制SSmR-NA表达来促进胃黏膜中胃泌素的表达。

关键词：大鼠 β-酪啡肽7 吸收表达胃泌素生长抑素纳洛酮

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β酪啡肽7在成年大鼠十二指肠内的稳定性及对胆囊收缩素基因表达的影响

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营养学报 2007年第4期29卷 396-400页

作者：宗亚峰陈伟华邹思湘张源淑南京农业大学动物医学院南京210095

目的:本实验研究了β酪啡肽7在成年大鼠十二指肠内的吸收和稳定特性及其对胆囊收缩素表达的影响。方法:(1)比较吸收和阻断吸收两种状态下灌注的β酪啡肽7浓度变化,从而定性判断其在成年大鼠肠道内的吸收特性;(2)体外酶解实验观察β酪啡... 详细信息

目的:本实验研究了β酪啡肽7在成年大鼠十二指肠内的吸收和稳定特性及其对胆囊收缩素表达的影响。方法:(1)比较吸收和阻断吸收两种状态下灌注的β酪啡肽7浓度变化,从而定性判断其在成年大鼠肠道内的吸收特性;(2)体外酶解实验观察β酪啡肽7对大鼠十二指肠黏膜的酶解特性;(3)半定量RT-PCR法检测灌喂β酪啡肽7对肠黏膜胆囊收缩素和生长抑素基因表达的变化。结果:β酪啡肽7在成年大鼠十二指肠内不被吸收但被肠黏膜酶快速降解,且显著刺激肠黏膜中胆囊收缩素基因的表达,该效应被纳洛酮部分逆转;β酪啡肽7显著抑制生长抑素基因表达。结论:除了内源性阿片肽系统外,β酪啡肽还可能通过抑制生长抑素基因表达来促进肠粘膜中胆囊收缩素的表达,从而影响肠运动机能。

关键词：成年大鼠 β酪啡肽7 吸收胆囊收缩素生长抑素十二指肠

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仔猪胃肠道食糜和血液中酪啡肽的检测及阿片样活性分析

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畜牧兽医学报 2006年第10期37卷 1063-1066页

作者：张源淑宗亚峰邹思湘陈伟华南京农业大学农业部重点开放动物生理生化研究室南京210095

将24头仔公猪分为对照组(正常哺乳28 d断奶)、试验I组(添喂β-酪啡肽-7)和试验Ⅱ组(添喂酪蛋白酶解物)。试验组于21 d断奶,再连续添喂酪蛋白胃蛋白酶解液或β-酪啡肽-7 10 d,每天2次(共20mL),至32 d,3组动物各随机取6头同时剖杀,取血、... 详细信息

将24头仔公猪分为对照组(正常哺乳28 d断奶)、试验I组(添喂β-酪啡肽-7)和试验Ⅱ组(添喂酪蛋白酶解物)。试验组于21 d断奶,再连续添喂酪蛋白胃蛋白酶解液或β-酪啡肽-7 10 d,每天2次(共20mL),至32 d,3组动物各随机取6头同时剖杀,取血、胃食糜和空肠食糜。通过所建立的RP-HPLC方法,在胃食糜和空肠食糜中检测到β-酪啡肽-5、β-酪啡肽-7样物质。对照组、酪啡肽-7组和酪蛋白水解液组,β-酪啡肽-7的平均含量分别为21.12±2.38,23.58±7.49、21.81±9.93μg/g胃食糜和16.99±3.48、19.08±2.85、21.36±4.85μg/g肠食糜;胃食糜中-βCM-7的含量高于空肠食糜,试验组均高于对照组。在各组仔猪的血液中未检测到酪啡肽样物质。肠食糜的细胞生物学试验结果表明:与喂仔猪料的对照组比较,试验I组和试验Ⅱ组对细胞腺苷酸环化酶的活性均具有不同程度的抑制作用,抑制率分别为27.9%和89.0%,抑制作用均能被纳洛酮反转,逆转率分别是43.2%和89.07%。提示在21日龄断奶仔猪饲料中添加酪啡肽或酪蛋白酶解物,其肠道中有酪啡肽释放,阿片总活性升高。

关键词：酪啡肽阿片活性断奶仔猪酪蛋白水解肽

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酪蛋白酶解产物阿片样活性的细胞生物学鉴定

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中国乳品工业 2000年第4期28卷 36-38页

作者：张源淑邹思湘陈伟华南京农业大学江苏南京210095

以富含δ 阿片受体的NG1 0 8-1 5杂交瘤细胞株 ,在有和无阿片特异性拮抗剂纳洛酮存在的情况下 ,与酪蛋白及其胃蛋白酶酶解消化液共同孵育。其细胞抽提液用 1 2 5I标记cAMP试剂盒进行放免测定 ,观察对细胞腺苷酸环化酶活性的影响。结果证... 详细信息

以富含δ 阿片受体的NG1 0 8-1 5杂交瘤细胞株 ,在有和无阿片特异性拮抗剂纳洛酮存在的情况下 ,与酪蛋白及其胃蛋白酶酶解消化液共同孵育。其细胞抽提液用 1 2 5I标记cAMP试剂盒进行放免测定 ,观察对细胞腺苷酸环化酶活性的影响。结果证明 ,酪蛋白经胃蛋白酶处理后有阿片样活性物质释放。

关键词：酪蛋白杂交瘤细胞阿片活性物质鉴定酶解

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伴大豆球蛋白胃蛋白酶水解肽对大鼠肠道细菌区系变化的影响

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中国农业科学 2009年第10期42卷 3700-3705页

作者：左伟勇陈伟华邹思湘张源淑南京农业大学动物医学院江苏畜牧兽医职业技术学院兽医系

【目的】在分子水平上探讨伴大豆球蛋白水解肽对肠道双歧杆菌生长的影响。【方法】选取21日龄健康清洁级雄性SD大鼠,随机分为4个处理,每个处理3只,基础日粮预饲1周后,分别灌胃生理盐水(对照组)、伴大豆球蛋白液(Conglycinin组)、伴大豆... 详细信息

【目的】在分子水平上探讨伴大豆球蛋白水解肽对肠道双歧杆菌生长的影响。【方法】选取21日龄健康清洁级雄性SD大鼠,随机分为4个处理,每个处理3只,基础日粮预饲1周后,分别灌胃生理盐水(对照组)、伴大豆球蛋白液(Conglycinin组)、伴大豆球蛋白酶水解肽P2组分(P2-PTC组)、伴大豆球蛋白盐酸彻底水解液(HCl-FHC组),各0.5ml,1次/天。除对照组外,各处理组灌胃液体总含氮量相等(折合蛋白含量为0.5mg·ml-1),试验共21d。应用PCR-DGGE技术分析灌胃伴大豆球蛋白酶解肽对大鼠粪样细菌区系变化的影响,并采用连续稀释PCR的方法半定量研究伴大豆球蛋白酶解肽对大鼠肠道双歧杆菌数量的影响。【结果】灌胃伴大豆球蛋白酶解肽的大鼠在试验后第1周,其粪样微生物区系变化迅速,而后缓慢,最终形成稳定的体系,提示酶解肽在一定程度上影响了肠道细菌的组成,与对照组和蛋白盐酸彻底水解液组比较,肠道双歧杆菌数量明显增加。【结论】本试验在分子水平证明了伴大豆球蛋白水解肽对肠道双歧杆菌的生长有促进作用。

关键词：伴大豆球蛋白水解肽变性梯度凝胶电泳细菌区系肠道双歧杆菌

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不同蛋白酶水解面筋蛋白制备谷氨酰胺结合肽的比较研究

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畜牧兽医学报 2006年第9期37卷 883-888页

作者：杨得胜张源淑邹思湘陈伟华南京农业大学农业部动物生理生化重点开放实验室南京210095

选取食品级胰蛋白酶、胃蛋白酶、ProtamexTM复合蛋白酶、Alcalase碱性蛋白酶3.0T、Neutrase中性蛋白酶1.5 MG和FlavourzymeTM复合风味蛋白酶1000 MG以确定蛋白酶对酰氨基的水解能力。单酶在适宜的条件下水解面筋蛋白4 h后取样。试验采用... 详细信息

选取食品级胰蛋白酶、胃蛋白酶、ProtamexTM复合蛋白酶、Alcalase碱性蛋白酶3.0T、Neutrase中性蛋白酶1.5 MG和FlavourzymeTM复合风味蛋白酶1000 MG以确定蛋白酶对酰氨基的水解能力。单酶在适宜的条件下水解面筋蛋白4 h后取样。试验采用双(1,1-三氟乙酸基)碘苯(BTI)保护肽中结合Gln,通过高效液相色谱测定肽中Glu含量间接测定Gln,分析水解液中氨基氮的含量,并计算平均肽链长度。结果发现胰蛋白酶、胃蛋白酶和Pro-tamexTM复合蛋白酶对酰氨基的水解能力较小,对酰氨基的破坏率分别为2.79%,1.90%和5.80%;而Alcalase碱性蛋白酶3.0T、Neutrase中性蛋白酶1.5MG和FlavourzymeTM复合风味蛋白酶1000 MG分别是32.25%,26.55%和16.38%。胰蛋白酶、胃蛋白酶和ProtamexTM复合蛋白酶水解面筋蛋白8 h后Gln的得率分别是77.86%,69.58%和87.70%。试验结果表明胰蛋白酶、胃蛋白酶和ProtamexTM复合蛋白酶为制备Gln结合肽的合适蛋白酶。

关键词：谷氨酰胺谷氨酰胺结合肽蛋白酶面筋蛋白

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The first data release(DR1) of the LAMOST regular survey

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Research in Astronomy and Astrophysics 2015年第8期15卷 1095-1124页

作者： A-Li Luo Yong-Heng Zhao Gang Zhao Li-Cai Deng Xiao-wei Liu Yi-Peng Jing Gang Wang Hao-Tong zhang Jian-Rong Shi xiang-Qun Cui yao-Quan Chu Guo-Ping Li Zhong-Rui Bai Yue Wu yan Cai shu-Yun Cao Zi-huang Cao Jeffrey L.Carlin Hai-yuan chen Jian-Jun chen Kun-Xin chen Li chen Xue-Lei chen Xiao-yan chen Ying chen Norbert Christlieb Jia-Ru Chu chen-Zhou Cui Yi-Qiao Dong Bing Du Dong-wei Fan Lei feng Jian-Ning Fu Peng Gao Xue-Fei Gong Bo-Zhong Gu yan-Xin Guo Zhan-Wen Han Bo-Liang He Jin-Liang Hou Yong-Hui Hou Wen Hou Hong-Zhuan Hu Ning-Sheng Hu Zhong-Wen Hu Zhi-Ying Huo Lei Jia Fang-hua Jiang xiang Jiang Zhi-Bo Jiang Ge Jin Xiao Kong Xu Kong ya-Juan Lei Ai-hua Li Chang-hua Li Guang-wei Li Hai-Ning Li Jian Li Qi Li Shuang Li Sha-Sha Li Xin-Nan Li yan Li Yin-Bi Li Ye-Ping Li yuan Liang Chien-cheng Lin Chao Liu Gen-Rong Liu Guan-Qun Liu Zhi-Gang Liu Wen-Zhi Lu Yu Luo Yin-Dun Mao Heidi Newberg Ji-Jun Ni Zhao-xiang Qi Yong-Jun Qi Shi-Yin Shen Huo-Ming Shi Jing Song Yi-Han Song Ding-Qiang Su Hong-Jun Su Zheng-Hong Tang Qing-Sheng Tao yuan Tian Dan Wang Da-Qi Wang feng-Fei Wang Guo-Min Wang Hai Wang Hong-Chi Wang Jian Wang Jia-Ning Wang Jian-Ling Wang Jian-Ping Wang Jun-Xian Wang Lei Wang Meng-Xin Wang Shou-Guan Wang shu-Qing Wang Xia Wang ya-Nan Wang You Wang Yue-Fei Wang You-Fen Wang Peng wei Ming-Zhi wei Hong Wu Ke-Fei Wu Xue-Bing Wu Yu-Zhong Wu Xiao-Zheng Xing Ling-Zhe Xu Xin-Qi Xu yan Xu Tai-Sheng yan De-hua yang Hai-feng yang Hui-Qin yang Ming yang Zheng-Qiu yao Yong Yu Hui yuan Hai-Bo yuan Hai-Long yuan wei-Min yuan Chao Zhai En-Peng zhang hua-wei zhang Jian-Nan zhang Li-Pin zhang wei zhang Yong zhang yan-Xia zhang Zheng-Chao zhang Ming Zhao Fang Zhou Xu Zhou Jie Zhu Yong-Tian Zhu si-cheng zou Fang Zuo National Astronomical Observatories Chinese Academy of Sciences Department of Astronomy Peking University Shanghai Astronomical Observatory Chinese Academy of Sciences Nanjing Institute of Astronomical Optics & Technology National Astronomical ObservatoriesChinese Academy of Sciences University of Science and Technology of China Department of Physics Applied Physics and AstronomyRensselaer Polytechnic InstituteTroyNY 12180USA Department of Physics and Astronomy Earlham CollegeRichmondIN 47374USA Universitt Heidelberg Zentrum für AstronomieLandessternwarteKnigstuhl 1269117 HeidelbergGermany Department of Astronomy Beijing Normal University Yunnan Observatories Chinese Academy of Sciences Purple Mountain Observatory Chinese Academy of Sciences

The Large sky Area Multi-Object Fiber Spectroscopic Telescope（LAMOST） general survey is a spectroscopic survey that will eventually cover approximately half of the celestial sphere and collect 10 million spectra of stars, galaxies and QSOs. Objects in both the pilot survey and the first year regular survey are included in the LAMOST DR1. The pilot survey started in October 2011 and ended in June 2012, and the data have been released to the public as the LAMOST Pilot Data Release in August 2012. The regular survey started in September 2012, and completed its first year of operation in June 2013. The LAMOST DR1 includes a total of 1202 plates containing 2 955 336 spectra, of which 1 790 879 spectra have observed signalto-noise ratio（SNR） ≥ 10. All data with SNR ≥ 2 are formally released as LAMOST DR1 under the LAMOST data policy. This data release contains a total of 2 204 696 spectra, of which 1 944 329 are stellar spectra, 12 082 are galaxy spectra and 5017 are quasars. The DR1 not only includes spectra, but also three stellar catalogs with measured parameters： late A,FGK-type stars with high quality spectra（1 061 918 entries）, A-type stars（100 073 entries）, and M-type stars（121 522 entries）. This paper introduces the survey design, the observational and instrumental limitations, data reduction and analysis, and some caveats. A description of the FITS structure of spectral files and parameter catalogs is also provided.

关键词： techniques: spectroscopic survey—data release—catalog

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两种病原菌联合诱导大鼠实验性乳腺炎研究

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西北农林科技大学学报（自然科学版） 2007年第7期35卷 11-14页

作者：张大松张源淑邹思湘陈伟华南京农业大学农业部动物生理生化重点开放实验室江苏南京210095

为深入研究奶牛乳腺炎提供一个更方便、经济的实验平台,试验建立了由金黄色葡萄球菌和大肠杆菌联合诱导的大鼠乳腺炎模型。分别用低浓度(金黄色葡萄球菌和大肠杆菌浓度均为1×105mL-1,L组)和高浓度(金黄色葡萄球菌和大肠杆菌浓度均为1×... 详细信息

为深入研究奶牛乳腺炎提供一个更方便、经济的实验平台,试验建立了由金黄色葡萄球菌和大肠杆菌联合诱导的大鼠乳腺炎模型。分别用低浓度(金黄色葡萄球菌和大肠杆菌浓度均为1×105mL-1,L组)和高浓度(金黄色葡萄球菌和大肠杆菌浓度均为1×1012mL-1,H组)细菌混合液,经乳头管灌注到大鼠第4对乳腺内,诱导大鼠的乳腺炎试验。结果表明,低浓度组(L组)乳腺的病变主要以腺泡上皮发生轻度脂肪变性,腺泡腔的分泌物中有透明滴状物为主要特征,高浓度组(H组)的乳腺腺泡结构破坏严重,腺泡中有较多的嗜中性粒白细胞浸润。L组乳腺组织IL-6水平较对照组有所升高,H组则有显著(P<0.05)下降,试验组血清IL-6水平均极显著(P<0.01)低于对照组;L组和H组乳腺组织TNF-α水平分别显著(P<0.05)和极显著(P<0.01)高于对照组,血清TNF-α水平均极显著(P<0.01)低于对照组。试验组乳腺NAGase活性均显著(P<0.05)和极显著(P<0.01)高于对照组;试验组血清NAGase活性均低于对照组,其中H组极显著(P<0.01)下降。由上述结果可知,高低浓度的金黄色葡萄球菌和大肠杆菌联合诱导的大鼠乳腺炎模型均已成功建立。

关键词：大鼠乳腺炎联合诱导金黄色葡萄球菌大肠杆菌

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水解面筋蛋白高效制备谷氨酰胺结合肽的研究

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食品科学 2006年第9期27卷 181-185页

作者：杨得胜张源淑邹思湘陈伟华南京农业大学农业部动物生理生化重点开放实验室江苏南京210095

采用食品级胃蛋白酶、胰蛋白酶、Protamex复合酶双酶组合对面筋蛋白进行水解制备Gln结合肽。先确定三种单酶各自对面筋蛋白适宜的初始pH、温度、酶浓度和底物浓度。并以双酶进行两两组合水解。在进行水解度控制实验时取样,分析水解液中... 详细信息

采用食品级胃蛋白酶、胰蛋白酶、Protamex复合酶双酶组合对面筋蛋白进行水解制备Gln结合肽。先确定三种单酶各自对面筋蛋白适宜的初始pH、温度、酶浓度和底物浓度。并以双酶进行两两组合水解。在进行水解度控制实验时取样,分析水解液中氨基氮的含量,计算平均肽链长度,并用高效液相色谱分析水解液中Gln的得率。实验结果表明胰蛋白酶和胃蛋白酶联合水解的效果最好,条件为:胰蛋白酶在pH8.0,50℃,S%=12.8%(W/V),E%=9%(W/W)水解6h,再用胃蛋白酶pH2.0,40℃,E%=5%(W/W)条件下水解5h,可得到平均肽链长度为2.20个氨基酸残基的蛋白水解液,Gln得率最高,为60.43%。认为胰蛋白酶和胃蛋白酶组合是面筋蛋白中高效制备谷氨酰胺结合肽的最佳组合。

关键词：谷氨酰胺谷氨酰胺结合肽蛋白酶组合

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