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Morphological and Hormonal Identifi cation of Porcine Atretic Follicles and Relationship Analysis of Hormone Receptor Levels During Granulosa Cell Apoptosis In vivo

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Journal of Integrative Agriculture 2014年第5期13卷 1058-1064页

作者： yu de-bing yu Min-li LIN Fei JIANG Bao-chun YANG Li-na WANG Si-yu ZHAO Ying WNAG Zheng-chao department of Animal Genetics Breeding and Reproduction College of Animal Science and Technology Nanjing Agricultural University

Recent reports have demonstrated that follicular atresia is initiated or caused by granulosa cell apoptosis followed by theca cell degeneration in mammalian ovaries, but the mechanism of follicular atresia is still to be elucidated. Therefore, our present study was designed to examine our hypothesis that the changes of follicular microenvironment induce the granulosa cell apoptosis during pocrine follicular atresia in vivo. We firstly isolated intact porcine antral follicles and identified them into three groups, healthy follicles （HF）, early atretic follicles （EAF） and progressed atretic follicles （PAF） through morphology and histology. To further confirm their status, we detected hormone levels in follicular fluids and the expression level of apoptosis gene Bax in granulosa cells. The rate of progesterone （P） and estradiol （E2） was increased with the expression of Bax, indicating hormone can be used as a marker of granulosa cell apoptosis or follicular atresia. Finally, we analyzed the expression level of hormone receptor genes in granulosa cells and their relationship with follicular atresia. In PAF, the expression of Progesterone receptor （PGR） was increased significantly while estradiol receptor （ER） had no notable changes, which suggesting the increased-PGR accelerated the effect of P-stimulated granulosa cell apoptosis. The dramatic increasing of androgen receptor （AR） expression in PAF and the obvious increase of tumor necrosis factor-u receptor （TNFR） in EAF indicated that there are different pathways regulating granulosa cell apoptosis during follicular atresia. Together, our results suggested that different pathways of granulosa cell apoptosis was induced by changing the follicular microenvironment during follicular atresia.

关键词： granulosa cell apoptosis follicular atresia progesterone estradiol porcine

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Identification of Novel and Differentially Expressed MicroRNAs in the Ovaries of Laying and Non-Laying Ducks

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Journal of Integrative Agriculture 2013年第1期12卷 136-146页

作者： yu de-bing JIANG Bao-chun GONG Jing DONG Fu-lu LU Ying-lin yuE Hui-jie WANG Zheng-chao DU Wen-xing GUO An-yuan department of Animal Science and Technology College of Animal Science and Technology Nanjing Agricultural University Bioinformatics & Molecular Imaging Key Laboratory Department of Systems Biology College of Life Science and Technology Huazhong University of Science and Technology Provincial Key Laboratory for developmental Biology and Neurobiology College of Life Science Fujian Normal University

MicroRNAs （miRNAs）, which post-transcriptionally regulate gene expression by binding to the 3′untranslated region of mRNAs to either inhibit or enhance translation, are involved in diverse biological processes. The use of high-throughput Solexa sequencing plays important roles in the discovery of miRNAs. In this study, we used high-throughput Solexa sequencing to identify novel duck miRNAs and compare the miRNA expression profiles in laying and non-laying duck ovaries. Using a bioinformatic analysis, we discovered 86 potential duck miRNAs similar to known chicken miRNAs and 43 unique sequences that matched known miRNAs of other species. We also found that miRNA variations and isoforms were widespread in our two RNA libraries, with most of the variations occurring in the 3′region of the miRNAs. Furthermore, we detected 55 miRNAs that exhibited significant expression differences between laying and non-laying ducks. Gene ontology （GO） and kyoto encyclopedia of genes and genomes （KEGG） enrichment analyses of the potential targets of the differentially expressed miRNAs indicated these miRNAs may play key roles in the egg laying process. Finally, we confirmed the differential expression of 5 miRNAs in the laying and non-laying samples by qRT-PCR. Cumulatively, our work provides the first look at the miRNA expression profile of the duck ovary and provides novel insight into the roles of miRNAs in egg laying and reproduction.

关键词： microRNA Solexa sequencing duck ovary

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激活素A通过TGFβ/SMAD信号通路促进鸡原始生殖细胞增殖

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农业生物技术学报 2017年第4期25卷 537-546页

作者：于敏莉李铭虞德兵杜文兴南京农业大学动物科技学院

原始生殖细胞（primordial germ cells,PGCs）是一类具有分化潜能的生殖细胞。为了检测激活素A（activin A）对鸡胚血液PGCs体外存活和增殖的影响,本研究从第13;5期鸡胚血液中分离提取PGCs,并进行鉴定;在完全培养液中分别添加0和100 ng/... 详细信息

原始生殖细胞（primordial germ cells,PGCs）是一类具有分化潜能的生殖细胞。为了检测激活素A（activin A）对鸡胚血液PGCs体外存活和增殖的影响,本研究从第13;5期鸡胚血液中分离提取PGCs,并进行鉴定;在完全培养液中分别添加0和100 ng/m L activin A培养48 h后,检测PGCs数目、形态及细胞周期;检测Dazl（deleted in azoospermia-like）基因甲基化水平;并通过Western blot检测转化生长因子-β（transforming growth factor-β,TGF-β）信号通路中TGF-β、SMAD2/3的表达和磷酸化变化。结果显示,从鸡胚血液中分离的PGCs,经过红细胞裂解液处理和传代后,可获得高纯度PGCs,且具有良好的生长趋势。培养的PGCs呈阶段特异性胚胎抗原（stage specific embryonic antigen 1,SSEA-1）、鸡（Gallus gallus）VASA同源基因（chicken vasa homologue,CVH）免疫染色和过碘酸希夫（periodic acid schiff reaction,PAS）反应染色阳性,并且表达多能性相关基因Pou V、Nanog和Sox2(SRY（sex determining region Y）-box 2),表明经过体外培养后,鸡胚血液PGCs仍能维持其生物学特性。添加activin A,可显著降低PGCs中Dazl基因甲基化水平,提高PGCs的体外存活能力。activin A处理后,显著增加了PGCs的数量;上调细胞周期蛋白（cyclins）及细胞周期蛋白依赖性激酶（cyclin-dependent kinases,CDKs）的表达;流式细胞检测进一步证实了activin A增加S/G2期PGCs细胞的比例。activin A显著上调了TGF-β蛋白的表达,促进SMAD2/3的磷酸化。以上结果表明,activin A可通过激活TGF-β/SMAD信号通路显著提高PGCs的体外存活和增殖能力。研究结果为揭示activin A对鸡胚PGCs增殖的作用机制提供了依据,为利用PGCs体外培养模型进一步深入研究生殖细胞发育调控提供基础资料。

关键词：鸡原始生殖细胞(PGC) 激活素A 存活增殖

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对优秀教练员激励机制分析与研究

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体育科技文献通报 2010年第10期18卷 111-113页

作者：于丙德南京工业大学体育部江苏南京210009

优秀教练员的培养是训练工作的重要组成部分,建立一支高水平、高素质的教练员队伍已经成为加强运动训练的一个重要环节。在对教练员的激励机制的研究中,首先对教练员的需求进行了分析,然后提出对教练员的激励的具体方法。

关键词：优秀教练员激励机制方法

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对福建晋江体育产品制造民营企业自主创新能力的分析

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体育科技文献通报 2010年第4期18卷 104-105页

作者：于丙德南京工业大学体育部江苏南京210009

自主创新是提高体育产品制造、民营创新能力的重要手段。本文从政府与市场的关系、企业自身情况,多维度探讨了提升福建晋江体育产品制造民营企业自主创新能力的方法。

关键词：创新晋江体育产品制造民营企业分析

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篮球职业联赛广东队夺冠的成功之道

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军事体育进修学院学报 2010年第4期29卷 59-61页

作者：于丙德南京工业大学体育部江苏南京210009

广东宏远篮球队继连续两个赛季取得常规赛冠军之后,终于在2003~2004赛季夺得CBA总冠军,成为CBA历史上第三支篮球职业联赛冠军的球队。10年风雨篮球路,宏远篮球俱乐部不仅取得优异的运动成绩,而且通过自己具有特色的青训系统、城市的篮... 详细信息

广东宏远篮球队继连续两个赛季取得常规赛冠军之后,终于在2003~2004赛季夺得CBA总冠军,成为CBA历史上第三支篮球职业联赛冠军的球队。10年风雨篮球路,宏远篮球俱乐部不仅取得优异的运动成绩,而且通过自己具有特色的青训系统、城市的篮球文化底蕴,通过树立广东宏远的品牌价值以及对队员的人文关怀等方法,建立了一套较为完善的训练设施和与市场经济相适应的企业管理制度。

关键词：广东宏远篮球队夺冠人才培养案例

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认真实施《会计法》,强化会计管理工作

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山东农业大学学报（社会科学版） 2001年第3期3卷 107-108页

作者：江玉坤于德炳山东农业大学计财处山东泰安271018

分析了新修订的《会计法》在会计理论和实践方面的突破 ,探讨了新的《会计法》在我国社会主义市场经济建设和对外开放中的作用 ,以及在社会主义市场经济条件下和与国际接轨中如何贯彻实施会计法 ,规范会计行为 ,更好地为经济建设服务。

关键词：会计法会计管理会计理论会计实践会计监督会计行为国际接轨

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关于少年女排在启蒙阶段有关进攻性技术与防守性技术训练安排的探讨

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南京体育学院学报（社会科学版） 2005年第3期19卷 84-86页

作者：于丙德李花南京工业大学体育部山东德州市财贸经济学校山东德州253007

采用文献资料法,访谈法,对少年女排在启蒙阶段有关进攻性技术与防守性技术训练的安排作多角度的分析,研究显示:启蒙训练阶段训练中应先练习防守性技术,这符合少年女子运动生理及形态特点,利于其养成低姿习惯;在技术训练中适当安排进攻... 详细信息

采用文献资料法,访谈法,对少年女排在启蒙阶段有关进攻性技术与防守性技术训练的安排作多角度的分析,研究显示:启蒙训练阶段训练中应先练习防守性技术,这符合少年女子运动生理及形态特点,利于其养成低姿习惯;在技术训练中适当安排进攻性技术训练,以保证运动员全面技术水平的提高;在启蒙阶段,应合理安排实际的训练方法,抓住重要环节,正确引导,合理的训练,切实的计划,对促进儿童的正常发育是十分重要的。

关键词：排球青少年进攻防守技术

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太湖鸡PRL、PRLR和FSHβ基因多态与前期产蛋性状关系研究

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西北农业学报 2007年第5期16卷 11-14页

作者：洪坤月汪峰虞德兵杜文兴南京农业大学动物科技学院江苏南京210095

采用PCR-SSCP法对太湖鸡催乳素（PRL）、催乳素受体（PRLR）和促卵泡激素β亚基（FSHβ）基因进行多态性检测，并分析其与开产50%后20周产蛋性状的关系。结果表明：PRL和FSHβpro2的基因型频率都是AA型最高，BB型最低，等位基因频率也是... 详细信息

采用PCR-SSCP法对太湖鸡催乳素（PRL）、催乳素受体（PRLR）和促卵泡激素β亚基（FSHβ）基因进行多态性检测，并分析其与开产50%后20周产蛋性状的关系。结果表明：PRL和FSHβpro2的基因型频率都是AA型最高，BB型最低，等位基因频率也是A高于B，FSHβ基因exon3位点没有多态；PRLR只有两种基因型，外显子3是AA型频率高于BB型，外显子6是CC型频率高于DD型，且等位基因A和C的频率分别高于等位基因B和D的频率。太湖鸡PRL、PRLR和FSHβ基因开产50%后20周产蛋性状的不同基因型间差异均不显著（P〉0.05），但是PRLR基因外显子3的开产50%后9~11周蛋重平均数基因型间差异接近显著（P=0.08）。基因间交互作用分析发现，催乳素受体基因外显子3和外显子6有极显著的交互作用（P〈0.01），产蛋量较高的合并基因型AADD可以作为太湖鸡选育的参考。

关键词：鸡催乳素催乳素受体促卵泡激素β亚基产蛋性能

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鸡FSHβ和ESRα基因SNPs分析与早期产蛋性能关系

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华北农学报 2008年第5期23卷 49-52页

作者：周俊虞德兵洪坤月汪峰杜文兴江苏畜牧兽医职业技术学院江苏泰州225300 南京农业大学动物科技学院江苏南京210095

采用PCR-SSCP法对85羽绿壳蛋鸡进行促卵泡激素β亚基(FSHβ)和雌激素受体α亚基(ESRα)基因多态性检测并测序,分析其与早期产蛋性状的关系。基因FSHβ和ESRα都发现了多态,测序结果表明:FSHβpro 2位点有3处SNPs,分别是:A-464G,-450插... 详细信息

采用PCR-SSCP法对85羽绿壳蛋鸡进行促卵泡激素β亚基(FSHβ)和雌激素受体α亚基(ESRα)基因多态性检测并测序,分析其与早期产蛋性状的关系。基因FSHβ和ESRα都发现了多态,测序结果表明:FSHβpro 2位点有3处SNPs,分别是:A-464G,-450插入碱基A,A-405G。FSHβexon 3有1处碱基突变,即A2447G;ESRα基因5'-UTR区有4处碱基变异,分别是:A-34G,T-76C,T-79C,C-102T。ESRα基因内含子1区发现3处SNPs,分别是:T122C,A155G,C169T。与早期(36周)产蛋关系分析表明,FSHβ基因调控区的AA基因型36周平均产蛋量显著高于AB型(p0.05)。

关键词：鸡促卵泡激素β亚基雌激素受体α亚基产蛋性能

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