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君欲善其事,必先利其器!——2017年诺贝尔化学奖评介

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中国生物化学与分子生物学报 2017年第10期33卷 979-984页

作者：尹长城北京大学医学部基础医学院生物物理学系

2017年诺贝尔化学奖授予三位冷冻电镜领域的学者瑞士洛桑大学的退休荣誉教授Jacques Dubochet、美国哥伦比亚大学的美国科学院院士Joachim Frank和英国剑桥MRC分子生物学实验室的英国皇家学会院士Richard Henderson,奖励他们对冷冻电镜... 详细信息

2017年诺贝尔化学奖授予三位冷冻电镜领域的学者瑞士洛桑大学的退休荣誉教授Jacques Dubochet、美国哥伦比亚大学的美国科学院院士Joachim Frank和英国剑桥MRC分子生物学实验室的英国皇家学会院士Richard Henderson,奖励他们对冷冻电镜技术的发展做出的原创性贡献。

关键词：冷冻电镜诺贝尔奖

冷冻电镜技术的突破导致结构生物学发生革命性变化

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中国生物化学与分子生物学报 2018年第1期34卷 1-12页

作者：尹长城北京大学医学部生物物理学系北京大学蛋白质科学中心北京100083

最近,冷冻电镜技术的突破引起结构生物学发生了革命。这一革命导致2017年诺贝尔化学奖授予对冷冻电镜技术发展做出开创性贡献的3位科学家Jacques Dubochet、Joachim Frank和Richard Henderson。本文将综述冷冻电镜的发展历程,导致结构... 详细信息

最近,冷冻电镜技术的突破引起结构生物学发生了革命。这一革命导致2017年诺贝尔化学奖授予对冷冻电镜技术发展做出开创性贡献的3位科学家Jacques Dubochet、Joachim Frank和Richard Henderson。本文将综述冷冻电镜的发展历程,导致结构生物学革命的冷冻电镜关键技术,包括电镜、图像记录装置和图像处理算法方面的突破,以及中国科学家应用冷冻电镜取得的重要科学成就,涵盖基因表达/调控、蛋白质合成/降解、膜蛋白、免疫、病毒等相关蛋白复合体。最后,对冷冻电镜的未来发展方向进行展望。

关键词：冷冻电镜结构生物学蛋白质分子机器

Western blot detection of PMI protein in transgenic rice

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Journal of Integrative Agriculture 2016年第4期15卷 726-734页

作者： RONG Rui-juan WU Peng-cheng LAN Jin-ping WEI Han-fu WEI Jian CHEN Hao SHI Jia-nan HAO Yu-jie LIU Li-juan DOU Shi-juan LI Li-yun WU Lin LIU Si-qi yin chang-cheng LIU Guo-zhen College of Life Sciences Hebei Agricultural University Baoding 071001 P.R. China Beijing Protein Innovation Co. Ltd. Beijing 101318 P.R.China Beijing Institute of Genomics Chinese Academy of Sciences Beijing 100101 P.R. China

Phosphomannose isomerase （PMI） encoding gene manA is a desirable selective marker in transgenic research. Under- standing of its expression patterns in transgenic plant and establishing highly sensitive detection method based on immunoassay have great impacts on the application of PMI. In this study, PMI-specific monoclonal antibodies were generated using recombinant protein as immunogen, and could be used in Western blot to detect as little as 0.5 ng His-tagged PMI protein or rice expressed PMI protein in sample accounted for 0.4% of single rice grain （about 0.08 mg）. PMI protein driven by CaMV-35S promoter was detected in dozens of tested tissues, including root, stem, leaf, panicle, and seed at all developmental stages during rice growing, and PMI protein accounted for about 0.036% of total protein in the leaves at seedling stage. The established method potentially can be used to monitor PMI protein in rice grains.

关键词： transgenic rice protein expression CaMV-35S promoter phosphomannose isomerase (PMI) Western blot

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Ca^(2+)对骨骼肌钙释放通道的调节

生理科学进展 2006年第2期37卷 132-135页

作者：韩红梅尹长城北京大学医学部基础医学院生物物理学系北京100083

钙释放通道(calcium release channel)又称Ryanod ine受体(RyR),是细胞内质网膜上介导细胞内钙信号转导的离子通道。RyR1在骨骼肌细胞的兴奋-收缩偶联过程中起重要作用,是肌质网快速释放Ca2+的通道。许多调节因素,如一些内源性蛋白(FK... 详细信息

钙释放通道(calcium release channel)又称Ryanod ine受体(RyR),是细胞内质网膜上介导细胞内钙信号转导的离子通道。RyR1在骨骼肌细胞的兴奋-收缩偶联过程中起重要作用,是肌质网快速释放Ca2+的通道。许多调节因素,如一些内源性蛋白(FK结合蛋白、钙调素、钙结合蛋白)和一些离子(Ca2+、Mg2+),通过不同的作用位点与RyR1结合,调控RyR1的结构与功能。研究表明,Ca2+是众多调节RyR 1因素中的核心成分和前提条件,其对RyR 1的结构与功能有重要的调控作用。

关键词：钙释放通道 Ca^2+ 肌质网

骨骼肌内质网Ca^(2+)泵转运Ca^(2+)的结构基础

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生物化学与生物物理进展 2006年第3期33卷 210-220页

作者：韦日生王佩荣尹长城北京大学基础医学院生物物理学系北京100083

Ca2+泵(Ca2+-ATPase)是调节细胞内Ca2+浓度的重要蛋白质之一.Ca2+泵在转运Ca2+的过程中经历一系列构象变化.其中,E1状态为外向的Ca2+高亲和状态,E2状态则为内向的Ca2+低亲和状态.目前,骨骼肌内质网Ca2+泵转运Ca2+过程中的几个中间状态,... 详细信息

Ca2+泵(Ca2+-ATPase)是调节细胞内Ca2+浓度的重要蛋白质之一.Ca2+泵在转运Ca2+的过程中经历一系列构象变化.其中,E1状态为外向的Ca2+高亲和状态,E2状态则为内向的Ca2+低亲和状态.目前,骨骼肌内质网Ca2+泵转运Ca2+过程中的几个中间状态,包括E1-2Ca2+,E1-ATP,E1-P-ADP,E2-Pi和E2状态的三维晶体结构已经解析.介绍这几种状态的晶体结构,并分析Ca2+泵在执行功能过程中结构与功能的关系.

关键词： Ca^2+泵(Ca^2+-ATPase) 晶体结构构象变化

Investigating Müller glia reprogramming in mice: a retrospective of the last decade, and a look to the future

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Neural Regeneration Research 2025年第4期20卷 946-959页

作者： Zhiyuan yin Jiahui Kang Xuan cheng Hui Gao Shujia Huo Haiwei Xu Key Lab of Visual Damage and Regeneration&Restoration of Chongqing Southwest Eye HospitalSouthwest HospitalThird Military Medical University(Army Medical University)ChongqingChina

Müller glia,as prominent glial cells within the retina,plays a significant role in maintaining retinal homeostasis in both healthy and diseased *** lower vertebrates like zebrafish,these cells assume responsibility for spontaneous retinal regeneration,wherein endogenous Müller glia undergo proliferation,transform into Müller glia-derived progenitor cells,and subsequently regenerate the entire retina with restored ***,Müller glia in the mouse and human retina exhibit limited neural reprogramming.Müller glia reprogramming is thus a promising strategy for treating neurodegenerative ocular disorders.Müller glia reprogramming in mice has been accomplished with remarkable success,through various *** in molecular,genetic,epigenetic,morphological,and physiological evaluations have made it easier to document and investigate the Müller glia programming process in ***,there remain issues that hinder improving reprogramming efficiency and ***,understanding the reprogramming mechanism is crucial toward exploring factors that will improve Müller glia reprogramming efficiency,and for developing novel Müller glia reprogramming *** review describes recent progress in relatively successful Müller glia reprogramming *** also provides a basis for developing new Müller glia reprogramming strategies in mice,including epigenetic remodeling,metabolic modulation,immune regulation,chemical small-molecules regulation,extracellular matrix remodeling,and cell-cell fusion,to achieve Müller glia reprogramming in mice.

关键词： cell fusion chemical small-molecules epigenetic extracellular matrix immune metabolic mice Müller glia neurodegenerative diseases reprogramming retina regeneration

冲击载荷下的石油测试管柱减振系统的数值模拟

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机械设计与制造 2007年第10期 8-10页

作者：尹长城王元勋湖北汽车工业学院汽车系十堰442002 华中科技大学土木工程与力学学院武汉430074

基于有限元分析软件ANSYS研究冲击载荷下石油测试管柱减振系统的动力学性质,在模拟过程中涉及几何非线性、材料非线性、状态非线性和动态加载等问题。建立新设计研制的减振器和以往现场用的减振器三维有限元模型,在ANSYS/LS-DYNA中进行... 详细信息

基于有限元分析软件ANSYS研究冲击载荷下石油测试管柱减振系统的动力学性质,在模拟过程中涉及几何非线性、材料非线性、状态非线性和动态加载等问题。建立新设计研制的减振器和以往现场用的减振器三维有限元模型,在ANSYS/LS-DYNA中进行仿真计算,讨论在冲击强度一定的条件下,三种不同频率范围内的半正弦脉冲力对减振效果的影响,并比较两种减振器的减振效果。并用实验结果验证模型。

关键词：地基扰动力减振系数冲击强度新型减振器

板料单点渐进成形中成形角对成形影响的模拟分析

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模具工业 2007年第8期33卷 8-11页

作者：吴胜军尹长城湖北汽车工业学院汽车工程系湖北十堰442002

介绍了金属板料单点渐进成形的基本原理;利用有限元软件LS_DYNA分析了板料渐进成形中当工具头压下时,不同成形角条件下,工具头与板料接触区域的应力分布;根据对模拟数据的分析比较,讨论了不同成形角对板料成形时的影响;就提高成形直壁... 详细信息

介绍了金属板料单点渐进成形的基本原理;利用有限元软件LS_DYNA分析了板料渐进成形中当工具头压下时,不同成形角条件下,工具头与板料接触区域的应力分布;根据对模拟数据的分析比较,讨论了不同成形角对板料成形时的影响;就提高成形直壁件的高度提出了改进意见,并在试验中得到证实。

关键词：板料单点渐进成形成形角应力

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基于细胞的噬菌体抗体库筛选技术

中国生物工程杂志 2008年第12期28卷 82-88页

作者：尹长城黄华樑阎锡蕴中国科学院生物物理研究所生物大分子国家重点实验室北京100101 北京安波特基因工程技术有限公司北京102206

肿瘤细胞表面抗原的表达量低,免疫原性弱,用固定化抗原方法筛选时,因抗原构象改变而很难获得有价值的抗体。同时,这类抗原多具有复杂的结构,其转运、定位与细胞类型及所处的微环境有关。在基于细胞的筛选中,靶抗原处于天然状态,且不需纯... 详细信息

肿瘤细胞表面抗原的表达量低,免疫原性弱,用固定化抗原方法筛选时,因抗原构象改变而很难获得有价值的抗体。同时,这类抗原多具有复杂的结构,其转运、定位与细胞类型及所处的微环境有关。在基于细胞的筛选中,靶抗原处于天然状态,且不需纯化,甚至可以对未知抗原进行筛选,因此广泛用于对内化抗体和血管内皮抗原表位抗体的筛选。基于细胞筛选的主要问题是非特异结合导致的选择背景过高,为此,许多研究都致力于改善选择的灵敏度和特异性。伴随高通量流式细胞术、组合化学及蛋白质组学研究技术的运用,细胞筛选技术将更趋实用和成熟。拟对细胞和组织的筛选技术作一概括,为了解基于细胞的筛选和优化实验设计提供参考。

关键词：抗体细胞筛选噬菌体展示