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正离子型疏水改性聚氧乙烯单成相组分双水相系统的相行为

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高分子学报 2006年第4期16卷 569-573页

作者：邓刚姚善泾林东强浙江大学化学工程与生物工程学系杭州310027

对正离子型疏水改性聚氧乙烯(HM-EO)单成相组分双水相系统的相行为进行了考察,并分析其电荷特性.HM-EO在水溶液中呈现两亲性,可以形成胶束,进而形成带电的胶束簇集体.通过改变溶液的pH值、盐浓度及添加带相反电荷的表面活性剂SDS,可改... 详细信息

对正离子型疏水改性聚氧乙烯(HM-EO)单成相组分双水相系统的相行为进行了考察,并分析其电荷特性.HM-EO在水溶液中呈现两亲性,可以形成胶束,进而形成带电的胶束簇集体.通过改变溶液的pH值、盐浓度及添加带相反电荷的表面活性剂SDS,可改变胶束簇集体的带电状态,从而影响系统的相行为.增大pH值,有利于系统的分相.盐的添加也可以增大双水相两相区域,正离子影响次序为K+>Na+,负离子次序为SO42->F->Cl->Br->I-.进一步考察了HM-EO和SDS之间的相互作用,结果表明SDS能与HM-EO形成混合胶束簇集体,改变HM-EO双水相系统的带电特性.

关键词：双水相系统疏水改性聚氧乙烯静电相互作用胶束簇集体

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疏水性电荷诱导层析纯化免疫球蛋白IgY

化工学报 2011年第6期62卷 1574-1580页

作者：童红飞林东强姚善泾化学工程联合国家重点实验室浙江大学化学工程与生物工程学系浙江杭州310027

利用疏水性电荷诱导层析(HCIC)从鸡血中分离免疫球蛋白IgY。采用经辛酸预处理后的血浆上清液作为原料,直接用HCIC分离纯化IgY。考察了两种HCIC介质,市售介质MEP HyperCel和实验室自制介质Bestarose-DVS-MMI,优化了上样pH、洗脱pH和上样... 详细信息

利用疏水性电荷诱导层析(HCIC)从鸡血中分离免疫球蛋白IgY。采用经辛酸预处理后的血浆上清液作为原料,直接用HCIC分离纯化IgY。考察了两种HCIC介质,市售介质MEP HyperCel和实验室自制介质Bestarose-DVS-MMI,优化了上样pH、洗脱pH和上样量等条件。研究发现,以2-巯基-1-甲基咪唑为配基的Bestarose-DVS-MMI介质优于MEP HyperCel介质,前者分离IgY的纯度和收率较高,HPLC分析IgY纯度可达92%以上,收率约95%。通过配基结构比较和表面电势分析,探讨了HCIC分离IgY的机制。结果表明,采用HCIC可以实现IgY的高效分离,为从血液中分离免疫球蛋白提供了新方法。

关键词：疏水性电荷诱导层析免疫球蛋白 IgY 鸡血浆

琼脂糖－DEAE离子交换介质的配基密度和孔径对BSA吸附的影响

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化工学报 2011年第11期62卷 3164-3170页

作者：卢慧丽林东强姚善泾化学工程联合国家重点实验室浙江大学化学工程与生物工程学系浙江杭州310027

离子交换色谱是蛋白质分离纯化的有效方法之一,配基密度和介质孔径是影响蛋白质吸附的关键因素。采用3种不同琼脂糖浓度的凝胶为基质,具有不同的平均孔径,分别偶联上阴离子交换配基DEAE,通过调控反应条件,包括反应温度、反应时间、碱浓... 详细信息

离子交换色谱是蛋白质分离纯化的有效方法之一,配基密度和介质孔径是影响蛋白质吸附的关键因素。采用3种不同琼脂糖浓度的凝胶为基质,具有不同的平均孔径,分别偶联上阴离子交换配基DEAE,通过调控反应条件,包括反应温度、反应时间、碱浓度和DEAE浓度,得到了不同配基密度和介质孔径的系列DEAE离子交换介质。考察了牛血清白蛋白(BSA)的静态和动态吸附性能,发现随配基密度增加或介质孔径减小,BSA饱和吸附容量有所增大;对于吸附动力学,介质孔径显著影响有效扩散系数。结果表明,配基密度和介质孔径共同决定了蛋白质的吸附性能,介质孔径主导蛋白质的孔内扩散,而配基密度则影响配基-蛋白质间的相互作用。

关键词：离子交换色谱配基密度介质孔径蛋白吸附

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微胶囊固定化克雷伯杆菌生产1,3-丙二醇

化工学报 2006年第12期57卷 2933-2937页

作者：陈国赵亚囡黄和姚善泾浙江大学化学工程与生物工程学系浙江杭州310027 南京工业大学制药与生命科学学院江苏南京210009

1，3-丙二醇是合成新型聚酯材料——聚对苯二甲酸丙二酯（PTT）的单体．近几年，利用微生物法生产1，3-丙二醇已成为国内外研究的热点。使用的微生物主要有克雷伯杆菌属（Klebsiella）、肠杆菌属（Enterobacter）、柠檬酸杆菌属（Citrob... 详细信息

1，3-丙二醇是合成新型聚酯材料——聚对苯二甲酸丙二酯（PTT）的单体．近几年，利用微生物法生产1，3-丙二醇已成为国内外研究的热点。使用的微生物主要有克雷伯杆菌属（Klebsiella）、肠杆菌属（Enterobacter）、柠檬酸杆菌属（Citrobacter）、梭状芽孢杆菌属（Clostridium）、乳酸杆菌属（Lactobacilli）等，其中Klebsiella pneumoniae以其较高的转化率，得到较多的关注．但是微生物发酵法的生产强度及发酵液中的产品浓度都比较低，在价格上尚无法和化学合成法进行竞争．因此开发合适的方法以提高产品浓度和生产效率是生物法生产1，3-丙二醇的研究重点．

关键词： 1,3-丙二醇微胶囊固定化细胞 Klebsiella pneumoniae 发酵

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层层自组装纤维素硫酸钠-壳聚糖复合膜

化工学报 2008年第11期59卷 2910-2915页

作者：谢瑜亮王明君姚善泾浙江大学化学工程与生物工程学系浙江杭州310027

采用层层自组装技术,以具有良好生物相容性的多糖类物质——壳聚糖(chitosan)和纤维素硫酸钠(NaCS)为原料,制备了NaCS-chitosan复合膜。使用扫描电子显微镜观察复合膜形貌特征以表征自组装复合膜的形成,使用红外光谱分析了复合膜形成机... 详细信息

采用层层自组装技术,以具有良好生物相容性的多糖类物质——壳聚糖(chitosan)和纤维素硫酸钠(NaCS)为原料,制备了NaCS-chitosan复合膜。使用扫描电子显微镜观察复合膜形貌特征以表征自组装复合膜的形成,使用红外光谱分析了复合膜形成机理,使用紫外-可见光吸收研究了复合膜形成的动力学特征。同时还考察了各实验因素对NaCS-chitosan复合膜形成过程的影响。结果表明,制备条件对复合膜形成过程有明显的影响,在现有的制备条件下,层层自组装复合膜的形成是一个一级反应过程。

关键词：层层自组装技术壳聚糖纤维素硫酸钠复合膜

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基于微孔过滤板的蛋白吸附高通量筛选方法

化工学报 2017年第6期68卷 2399-2406页

作者：褚文宁林东强姚善泾浙江大学化学工程与生物工程学院生物质化工教育部重点实验室浙江杭州310027

针对色谱分离过程优化,建立了基于微孔过滤板的蛋白吸附高通量筛选方法,用于介质初筛、吸附性能考察、吸附等温线和吸附动力学测定、吸附和洗脱条件优化等。首先优化了96孔过滤板的操作参数,以2种离子交换介质和2种混合模式介质为典型代... 详细信息

针对色谱分离过程优化,建立了基于微孔过滤板的蛋白吸附高通量筛选方法,用于介质初筛、吸附性能考察、吸附等温线和吸附动力学测定、吸附和洗脱条件优化等。首先优化了96孔过滤板的操作参数,以2种离子交换介质和2种混合模式介质为典型代表,采用微孔过滤板方法考察了不同介质和液相条件下牛血清白蛋白的吸附,得到结合载量分布图,确定了合适的蛋白吸附和解吸条件。进一步测定了4种介质在特定吸附条件下的吸附等温线和吸附动力学曲线,获得吸附相关参数。最后,采用微孔过滤板进行了洗脱条件优化,并与填充柱色谱分离进行比较,验证了方法的可靠性。结果表明,基于微孔过滤板的蛋白吸附高通量筛选是切实可行的,可以快速筛选色谱介质和液相,优化蛋白分离条件,具有资源消耗小、实验通量大、研发周期短、适用性广、稳定性高的特点,是蛋白色谱分离过程优化的一种新方法。

关键词：高通量筛选微孔过滤板色谱分离吸附蛋白分离

高压CO_2条件下粗状假丝酵母催化苯乙酮不对称还原合成α-苯乙醇

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催化学报 2006年第7期27卷 631-635页

作者：应小姣姚善泾关怡新浙江大学化学工程与生物工程学系浙江杭州310027

研究了在高压CO7条件下利用粗状假丝酵母Candida valida CICCl444活性细胞催化苯乙酮不对称还原合成（R）-α-苯乙醇．高压C02条件可对粗状假丝酵母细胞的活性产生一定的影响，但反应的选择性反而有所提高，证实了高压CO2作为该反应环... 详细信息

研究了在高压CO7条件下利用粗状假丝酵母Candida valida CICCl444活性细胞催化苯乙酮不对称还原合成（R）-α-苯乙醇．高压C02条件可对粗状假丝酵母细胞的活性产生一定的影响，但反应的选择性反而有所提高，证实了高压CO2作为该反应环境是可行的．考察了底物浓度、细胞用量、反应温度和压力等因素对反应的影响．结果表明，这些因素对反应产率有很大的影响，在最佳反应条件下，反应底物苯乙酮的转化率和产物α-苯乙醇的产率均可达90％以上，对映体过量值（ee）保持在80％左右．与常压静置条件下的反应相比，高压CO2条件下粗状假丝酵母催化苯乙酮不对称还原反应的转化率和产率分别提高了20％和40％左右，对映体选择性也提高了5％～10％．

关键词：高压二氧化碳粗状假丝酵母全细胞生物催化苯乙酮不对称还原 α-苯乙醇

一种新型蛋白质沉淀体系——加压CO_2乙醇-水体系

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化工学报 2005年第1期56卷 135-141页

作者：齐祥明姚善泾关怡新朱自强浙江大学化学工程与生物工程学系浙江杭州310027

将有机溶剂抗溶剂与高压气体等电沉淀技术结合起来 ,提出了一种新的蛋白质纯化方法 .实验以加压CO2为挥发性酸 ,乙醇为助沉淀剂 ,对BSA的等电沉淀进行了研究 .由实验结果可知 ,本方法可使BSA处理浓度提高 ,CO2 操作压力降低 ,其中乙醇... 详细信息

将有机溶剂抗溶剂与高压气体等电沉淀技术结合起来 ,提出了一种新的蛋白质纯化方法 .实验以加压CO2为挥发性酸 ,乙醇为助沉淀剂 ,对BSA的等电沉淀进行了研究 .由实验结果可知 ,本方法可使BSA处理浓度提高 ,CO2 操作压力降低 ,其中乙醇既具有促进沉淀的作用又具有降低BSA缓冲能力的作用 .蛋白质稳定性测试结果表明 ,在实验操作条件下 ,BSA未发生不可逆的构象变化 ,能保持稳定 .这些结果对该方法的进一步完善及其在蛋白质等生物活性成分分离纯化领域的应用具有借鉴作用 .

关键词：等电沉淀有机溶剂抗溶剂沉淀 CO2 BSA

细胞破碎对离子交换扩张床吸附中生物质与吸附剂间相互作用的影响

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化工学报 2006年第7期57卷 1637-1642页

作者：董建南林东强姚善泾浙江大学化学工程与生物工程学系浙江杭州310027

以***5α为模型生物质,StreamlineDEAE为典型阴离子交换扩张床吸附剂,通过生物质脉冲响应法获得生物质穿透指数(BTI)作为生物质/吸附剂间相互作用的定量评价参数,考察细胞破碎方法对扩张床吸附的影响.结果表明,随着细胞破碎程度的加剧,... 详细信息

以***5α为模型生物质,StreamlineDEAE为典型阴离子交换扩张床吸附剂,通过生物质脉冲响应法获得生物质穿透指数(BTI)作为生物质/吸附剂间相互作用的定量评价参数,考察细胞破碎方法对扩张床吸附的影响.结果表明,随着细胞破碎程度的加剧,碎片粒径减小,碎片zeta电位绝对值也减小,BTI增大,生物质与吸附剂间相互作用减弱.从静电相互作用理论出发,建立了BTI与生物质zeta电位(ζB)、离子交换介质zeta电位(ζA)和生物质颗粒大小(dB)三者乘积(-ζAζBdB)间良好的线性关系.当-ζAζBdB0.9,该关系可用于预估生物质的影响,简化扩张床吸附的过程设计.

关键词：扩张床吸附生物质脉冲响应法细胞破碎静电相互作用 zeta电位