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Dynamic nano-Ag colloids cytotoxicity to and accumulation by Escherichia coli:Effects of Fe^3+,ionic strength and humic acid

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Journal of Environmental Sciences 2020年第3期32卷 180-193页

作者： Weicheng Zhang Bingyu Ning Caiyun Sun Ke Song Xin Xu Tao Fang lunguang yao Collaborative Innovation Center of Water Security for Water Source Region of Mid-line of South-to-North Diversion Project of Henan Province Nanyang Normal UniversityNanyang 473061China Henan Key Laboratory of Ecological Security for Water Source Region of Mid-line of South-to-North Diversion Project Nanyang Normal UniversityNanyang 473061China State Key Laboratory of Motor Vehicle Biofuel Technology Nanyang 473000China Institute of Hydrobiology Chinese Academy of SciencesWuhan 430072China University of Chinese Academy of Sciences Beijing 100049China

Released Ag ions or/and Ag particles are believed to contribute to the cytotoxicity of Ag nanomaterials,and thus,the cytotoxicity and mechanism of Ag nanomaterials should be dynamic in water due to unfixed Ag particle:Ag+ *** recent research found that the cytotoxicity of PVP-Ag nanoparticles is attributable to Ag particles alone in 3 hr bioassays,and shifts to both Ag particles and released Ag^+ in 48 hr ***,as a continued study,the cytotoxicity and accumulation of 50 and 100 nm Ag colloids in Escherichia coli were determined *** cytotoxicity and mechanisms of nanoAg colloids are dynamic throughout exposure and are derived from both Ag ions and *** accumulation by *** is derived mainly from extracellular Ag particles during the initial 12 hr of exposure,and thereafter mainly from intracellular Ag ***^3+ accelerates the oxidative dissolution of nano-Ag colloids,which results In decreasing amounts of Ag particles and particle-related ***^+ stabilizes nano-Ag colloids,thereby decreasing the bioavailability of Ag particles and particle-related *** acid(HA) binds Ag^+ to form Ag^+-HA,decreasing ion-related toxicity and binding to the *** surface,decreasing particle-related *** in complex conditions showed a stronger relative contribution to toxicity and accumulation than Na^+ or Fe^3+.The results highlighted the cytotoxicity and mechanism of nano-Ag colloids are dynamic and affected by environmental factors,and therefore exposure duration and water chemistry should be seriously considered in environmental and health risk assessments.

关键词： Cytotoxicity mechanism Accumulation Nano-Ag colloids Escherichia coli Environmental factors

Expression and Antigen Activity Determination of Human Thyroid Peroxidase in Silkworm and Yeast

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Wuhan University Journal of Natural Sciences 2016年第6期21卷 531-536页

作者： GUO Baodang GAO Wanli Lü Huifang ZHANG Xiaoliang yao Xiaogui yao lunguang Henan Provincial Engineering Laboratory of Insects Bio-reactor Nanyang Normal University Nanyang 473000Henan China Autobio Diagnostics Company Limited Zhengzhou 450016Henan China Shaoyang Central Hospital Shaoyang 422000 HunanChina

In this study,we report the expression of human thyroid peroxidase（TPO） in silkworm larvae and Pichia pastoris GS115. Recombinant TPO is sequentially purified from the hemolymph of infected silkworm larvae and yeast using a Ni-NTA resin kit. The concentration of yield of recombinant TPO is 4.87 mg per thousand larvae and 40.83 mg per liter yeast culture. However,the recombinant TPO produced in silkworm show similar binding ability with the specific anti-TPO serum to standard human TPO purified from insect cells. The lower antigen activity indicates the TPO expressed in yeast is not suitable to be used as the coating antigen in enzyme linked immunosorbent assay（ELISA）. The cost of TPO expressed in B. mori is about 1/4 that of in insect cells,and the cost of TPO purified from silkworm for ELISA is only 1/8 that of TPO produced from Sf9 cells. It indicates the Bm NPV-silkworm expression system is a cost-effectiv e platform for producing TPO with high antigen activity.

关键词： human thyroid peroxidase silkworm larvae Pichia pastoris antigen activity cost effective

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禽白血病P27蛋白单克隆抗体的制备

南阳师范学院学报 2025年第1期24卷 46-52页

作者：李洁琼罗明展王雄胡小敏张梦杨姚伦广河南省南水北调中线渠首湿地生态系统野外科学观测研究站河南南阳473061 河南省畜禽保健品工程技术研究中心河南南阳473061 南阳师范学院生命科学学院河南南阳473061

为提高禽类养殖场对禽白血病病毒(Avian Leukosis Virus,ALV)的检测效率,采用原核表达系统制备J亚群禽白血病病毒(Avian Leukosis Virus Subgroup J,ALV-J)的P27蛋白,并基于该蛋白制备了高特异性的单克隆抗体。首先,通过BABL/c小鼠抗原... 详细信息

为提高禽类养殖场对禽白血病病毒(Avian Leukosis Virus,ALV)的检测效率,采用原核表达系统制备J亚群禽白血病病毒(Avian Leukosis Virus Subgroup J,ALV-J)的P27蛋白,并基于该蛋白制备了高特异性的单克隆抗体。首先,通过BABL/c小鼠抗原免疫反应,获得杂交瘤细胞株诱生的小鼠腹水。随后,利用辛酸-硫酸铵沉淀法和Protein G琼脂凝胶亲和层析柱法对腹水中的单克隆抗体进行纯化。通过酶联免疫吸附试验(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)对纯化抗体进行效价和特异性鉴定。最后,利用杆状病毒表达系统表达的P27蛋白检测制备的抗体的特异性。研究结果显示,本实验成功获得了4株杂交瘤细胞(3C9、1H15、1H6和7G2)。其中,作为酶标抗体的7G2表现出最佳性能,而3C9则为最佳抗原。间接免疫荧光法(Indirect Immunofluorescence Assay,IFA)的结果显示,单克隆抗体能够与表达禽白血病P27的杆状病毒发生特异性反应。这表明禽白血病病毒P27蛋白单克隆抗体制备成功。

关键词：家禽养殖禽白血病病毒单克隆抗体杆状病毒表达系统

青蒿素对狗尾草和马齿苋种子萌发和幼苗生长的化感效应研究

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植物生理学报 2021年第5期57卷 1163-1169页

作者：燕志强谈晶郭凯姚伦广南阳师范学院生命科学与农业工程学院南水北调中线水源区水安全河南省协同创新中心河南南阳473061

为明确化感物质青蒿素(AR)对2种常见杂草狗尾草和马齿苋种子萌发和幼苗生长的作用,分别采用1、10、50、100、200μmol·L^(-1)的青蒿素处理种子,测定其发芽势、发芽率、根长、茎长和鲜重,以及过氧化氢(H2O_(2))、丙二醛(MDA)和游离脯氨... 详细信息

为明确化感物质青蒿素(AR)对2种常见杂草狗尾草和马齿苋种子萌发和幼苗生长的作用,分别采用1、10、50、100、200μmol·L^(-1)的青蒿素处理种子,测定其发芽势、发芽率、根长、茎长和鲜重,以及过氧化氢(H2O_(2))、丙二醛(MDA)和游离脯氨酸(Pro)的含量。结果显示:AR对马齿苋种子的发芽率无明显影响,而50-200μmol·L^(-1) AR处理对马齿苋种子发芽势以及狗尾草种子的发芽率和发芽势均有显著的抑制作用。幼苗生长方面, 10-200μmol·L^(-1)的AR对狗尾草和马齿苋的根长以及狗尾草的茎长均表现出显著的抑制活性;而1μmol·L^(-1)的低浓度AR对马齿苋的茎长以及2种杂草的鲜重已有显著影响,活性效果均呈现良好的量效关系。狗尾草和马齿苋中H2O_(2)、MDA和游离Pro的含量随AR浓度的增加而迅速升高,在10或50μmol·L^(-1)浓度时达到显著水平。这些结果表明AR对马齿苋和狗尾草具有显著的化感效应,这种抑制活性与氧化胁迫有关。

关键词：青蒿素狗尾草马齿苋化感效应

大肠杆菌L-苏氨酸脱氢酶的高效表达及其酶学性质分析

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食品科学 2023年第18期44卷 85-92页

作者：刘欣欣王瑶史红玲姚伦广王贤唐存多南阳师范学院生命科学与农业工程学院河南南阳473061 赊店老酒股份有限公司博士后创新实践基地河南南阳473300 河南农业大学食品科学技术学院河南郑州450002

为提高L-苏氨酸脱氢酶(L-threonine dehydrogenase,L-TDH)催化L-苏氨酸脱氢合成L-2-氨基乙酸乙酯效率,通过基因挖掘的手段挖掘出来自大肠杆菌(Escherichia coli)的L-TDH,再借助pACYCDuet-1表达系统将其在E. coli BL21(DE3)中进行可溶性表达及鉴定。结果表明,L-TDH在E. coli BL21(DE3)中实现了高水平的可溶性表达,其裂解液中的酶活力为19.13 IU/mL,约为E. coli BL21(DE3)本底表达水平的79倍。纯化后的比活力为12.77 IU/mg,它的最适反应温度为45℃,最适反应pH值为9.0,在35℃和40℃保温120 min,残留酶活力仍能达到90%以上。此外,Ec TDH动力学参数也优于其他已报道的L-TDH,在转化L-苏氨酸合成2,5-二甲基吡嗪(2,5-dimethylpyrazine,2,5-DMP)的过程中具有更大优势,也为实现转化L-苏氨酸合成2,5-DMP的工业化生产奠定了理论基础。

关键词： L-苏氨酸 L-苏氨酸脱氢酶大肠杆菌表达生物转化

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二氧化碳还原用甲酸脱氢酶的研究进展

精细化工 2023年第10期40卷 2089-2097,2206页

作者：史红玲王瑶袁书玮姚伦广唐存多薛闯南阳师范学院生命科学与农业工程学院河南南阳473061 大连理工大学生物工程学院辽宁大连116024 河南师范大学化学化工学院河南新乡453007

CO_(2)的还原和资源化利用是缓解温室效应的重要手段。生物催化剂对反应和底物具有高选择性,因此被用于构建高效的CO_(2)还原系统。其中,甲酸脱氢酶(FDH),特别是某些烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)依赖型/金属辅因子(W或Mo)的甲酸脱氢酶,... 详细信息

CO_(2)的还原和资源化利用是缓解温室效应的重要手段。生物催化剂对反应和底物具有高选择性,因此被用于构建高效的CO_(2)还原系统。其中,甲酸脱氢酶(FDH),特别是某些烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)依赖型/金属辅因子(W或Mo)的甲酸脱氢酶,能够可逆地将CO_(2)还原成甲酸盐。该文首先介绍了甲酸脱氢酶的特性及分类,其次综述了CO_(2)还原用甲酸脱氢酶的活性位点及催化机制、FDH的分子改造、全细胞生物催化CO_(2)还原为甲酸盐的最新进展,为CO_(2)还原用生物催化剂的研究提供了启示,为以CO_(2)为原料构建可行的CO_(2)还原系统来生产增值的燃料和化学品提供了理论基础。

关键词：甲酸脱氢酶 CO_(2)还原酶工程全细胞催化甲酸盐

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微生物磷脂酶D的克隆表达研究进展

食品工业科技 2021年第15期42卷 396-402页

作者：董自星杨爽爽唐存多姚伦广阚云超南阳师范学院昆虫生物反应器河南省工程实验室和河南省南水北调中线水源区生态安全重点实验室河南南阳473061 南阳师范学院体育学院河南南阳473061

磷脂酶D(Phospholipase D,PLD,EC 3.***.4.4)是催化磷脂的磷酸二酯键水解和转磷脂酰基反应的一类酶的总称。PLD所具有的转磷脂活性使其在食品、医药以及细胞生物学等领域具有广泛的应用价值,但其大规模工业化生产受到诸多因素的限制。利... 详细信息

磷脂酶D(Phospholipase D,PLD,EC 3.***.4.4)是催化磷脂的磷酸二酯键水解和转磷脂酰基反应的一类酶的总称。PLD所具有的转磷脂活性使其在食品、医药以及细胞生物学等领域具有广泛的应用价值,但其大规模工业化生产受到诸多因素的限制。利用基因工程技术对磷脂酶D基因进行克隆表达,开发高产量、高纯度和高转磷脂活性的PLD资源成为当前的研究热点。本文主要对微生物PLD克隆与高效表达方面的研究进展进行分析,以期对微生物PLD的大规模生产及其相关产品的开发利用提供参考。

关键词：微生物磷脂酶 D 转磷脂活性克隆表达大规模工业化生产潜在应用

皮南杂交牛H1至H4代数量性状遗传分析及优种筛选

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畜牧与兽医 2025年第1期57卷 11-19页

作者：杜瑞卿张志峰王建钦孙志和陈岭李巧珍齐香萍白跃宇姚伦广南阳师范学院生命科学与农业工程学院南阳黄牛科技中心新野县畜牧局河南省动物卫生监督所郑州大学农学院

为了改良皮南杂交牛的种质性能，选择2000—2020年20年间出生的H1(横交固定一代)至H4代14 030头牛进行选种育种培养，观察体重、体尺、外貌评分等36个个体表型性状指标，记录每头牛上三代亲缘关系；对获得数据经整理和检验后，进行选择... 详细信息

为了改良皮南杂交牛的种质性能，选择2000—2020年20年间出生的H1(横交固定一代)至H4代14 030头牛进行选种育种培养，观察体重、体尺、外貌评分等36个个体表型性状指标，记录每头牛上三代亲缘关系；对获得数据经整理和检验后，进行选择指数(CBI)计算，对不同性别、不同分类(核心牛群和良种牛群)的群体进行正态分布概率遗传参数分析和判别分析筛选。结果：从H3代的核心母牛群和公牛群中筛选出28头各指标综合表现好的种子公牛和母牛，从H4代的核心母牛群和公牛群中筛选出56头各指标综合表现好的种子公牛和母牛；CBI指数大于116.40的有100头；核心公牛的表型值比核心母牛的表型值高，但是核心母牛的遗传力、选择系数R比核心公牛的大；同类型的牛群其一代比一代的遗传力大，核心牛群的遗传力均值在0.4～0.5;从H3和H4代核心牛群中选出的优秀种牛群，H4代选择系数R比H3代大。本研究结果对选种育种具有重要参考价值和指导意义，选择系数R值增大说明所选的优秀种牛群下一代比本代在多个观察表型性状指标上可能有较大改善；本研究提出的群体正态分布概率遗传参数分析法和判别分析法，在理论和实际效果方面都具有重要意义。

关键词：皮南杂交牛数量性状遗传分析选择指数遗传参数

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活体微藻对镉(Ⅱ)的富集机理

环境工程学报 2018年第5期12卷 1382-1388页

作者：蒋心诚李彩云周旭东姚伦光高鹏程西北农林科技大学资源环境学院杨凌712100 南水北调中线水源区水安全河南省协同创新中心南阳473061 河南省南水北调中线水源区生态安全重点实验室南阳473061

选取小球衣藻(Chlamydomonas microsphaera)、铜绿微囊藻(Microcystis aeruginosa)、钝顶螺旋藻(Spirulina platensis)和四尾栅藻(Scenedesmus quadricauda)等4种微藻,通过室内模拟实验,对水体中的Cd^(2+)进行吸附,并对吸附Cd^(2+)的微藻分别采用去离子水、0.2 mol·L^(-1)Ca Cl2与研磨处理,测定Cd^(2+)的解脱量,研究活体微藻对重金属离子的富集特征与机理。结果表明:4种活体微藻均对水体中Cd^(2+)有较强的富集能力,在Cd^(2+)初始浓度为10 mg·L^(-1)、溶液pH为7.0的实验条件下,小球衣藻富集量可达76.34 mg·g^(-1),铜绿微囊藻、钝顶螺旋藻和四尾栅藻富集量分别为24.78、15.28和9.85 mg·g-1,说明微藻是良好的重金属吸附剂;4种活体微藻对Cd^(2+)的富集特征均符合准二级动力学方程(R2>0.99),反映出活体微藻对Cd^(2+)的富集主要是一种化学行为;活体微藻对Cd^(2+)的富集主要是离子交换形式的化学吸附,富集比例均在60%以上,其中小球衣藻最高,达86.51%。除化学吸附外,还包括物理吸附与生物吸收,生物吸收所占富集比例为6.75%~18.96%,而物理吸附量最少,为3.02%~14.63%。

关键词：活体微藻重金属动力学物理吸附化学吸附生物吸收