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CD9 negatively regulates collective electrotaxis of the epidermal monolayer by controlling and coordinating the polarization of leader cells

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Burns & Trauma 2023年第1期11卷 361-374页

作者： Xiaoqiang Liu Jinrui Yang Meng Kong Min jiang Luojia Liu Jinghong Zhang Ying Chen Xu Chen Ze Zhang Chao Wu xupin jiang Jie Liu Jiaping Zhang Department of Plastic Surgery State Key Laboratory of TraumaBurns and Combined InjurySouthwest HospitalThird Military Medical University(Army Medical University)29 Gaotan Yan StreetShapingba400038 ChongqingChina

Background:Endogenous electric fields(EFs)play an essential role in guiding the coordinated collective migration of epidermal cells to the wound centre during wound *** polarization of leadercells is essential for collective migration,the signal mechanisms responsible for the EF-induced polarization of leader cells under electrotactic collective migration remain *** study aims to determine how the leader cells are polarized and coordinated during EF-guided collective migration of epidermal cell ***:Collective migration of the human epidermal monolayer(human immortalized ker-atinocytes HaCaT)under EFs was observed via time-lapse *** involvement of tetraspanin-29(CD9)in EF-induced fibrous actin(F-actin)polarization of leader cells as well as electrotactic migration of the epidermal monolayer was evaluated by genetic ***,rescue and co-culture experiments were conducted to explore the downstream signalling of ***:EFs guided the coordinated collective migration of the epithelial monolayer to the anode,with dynamic formation of pseudopodia in leader cells at the front edge of the monolayer along the direction of migration.F-actin polarization,as expected,played an essential role in pseudopod formation in leader cells under *** confocal microscopy,we found that CD9 was colocalized with F-actin on the cell surface and was particularly downregulated in leader cells by ***,genetic overexpression of CD9 abolished EF-induced F-actin polarization in leader cells as well as collective migration in the epidermal ***,CD9 determined the polarization of F-actin in leader cells by downregulating a disintegrin and metalloprotease 17/heparin-binding epidermal growth factor-like growth factor/epidermal growth factor receptor(ADAM17/HB-EGF/EGFR)*** abolished polarization of leader cells due to CD9 overex-pression could be restored in a co-culture monolayer where normal c

关键词： CD9 Electric fields Collective migration Wound healing F-actin polarization leader cells

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不同时间低氧处理对人表皮细胞株HaCaT运动和增殖的影响

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中华烧伤杂志 2014年第3期30卷 231-236页

作者：闫甜甜张东霞江旭品张琼黄跃生第三军医大学西南医院全军烧伤研究所、创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400038

目的探讨低氧处理人表皮细胞株HaCaT不同时间对其运动和增殖的影响. 方法（1）取对数生长期HaCaT细胞,用含体积分数10％ FBS的RPMI 1640培养液（培养方法下同）培养,按随机数字表法（分组方法下同）分为正常对照组（常规培养,下同）... 详细信息

目的探讨低氧处理人表皮细胞株HaCaT不同时间对其运动和增殖的影响. 方法（1）取对数生长期HaCaT细胞,用含体积分数10％ FBS的RPMI 1640培养液（培养方法下同）培养,按随机数字表法（分组方法下同）分为正常对照组（常规培养,下同）以及低氧1、3、6h组,每组6孔,后3组细胞于含体积分数5％二氧化碳、2％氧气、93％氮气的环境中（低氧培养条件下同）分别培养相应时间.活细胞工作站下观察各组细胞在3h内的运动范围,计算细胞曲线运动速度及直线运动速度.（2）取对数生长期HaCaT细胞分为正常对照组以及低氧1、3、6、9、12、24 h组,每组20孔,后6组细胞分别行相应时间低氧培养.采用细胞计数试剂盒与酶标仪检测细胞增殖情况（以吸光度值表示）.（3）取对数生长期HaCaT细胞分为正常对照组以及低氧1、3、6、24 h组,每组5孔,后4组细胞分别行相应时间低氧培养.蛋白质印迹法检测增殖细胞核抗原（PCNA）蛋白水平.对数据行单因素方差分析、Dunnett-t检验. 结果（1）与正常对照组比较,低氧1、3、6h组细胞的运动范围明显增大,低氧培养时间越长,增加幅度越大.低氧1、3、6h组细胞在观察1、2、3h的曲线运动速度分别为（43±18）、（44±17）、（43±16） μm/h,（44±16）、（44±14）、（45±14） μm/h,（55±19）、（54±17）、（56±18） μm/h,显著高于正常对照组的（33±13）、（33±12）、（33±10） μm/h（t值为2.840～9.330,P＜0.05或P＜0.01）;低氧6h组细胞曲线运动速度显著高于低氧1、3 h组（t值为3.474～ 4.545,P＜0.05或P＜0.01）.各组内各观察时相点间细胞曲线运动速度相近（F值为0.012～0.195,P值大于0.05）.低氧1h组观察1h细胞直线运动速度为（22±11） μm/h,显著高于正常对照组的（15±10）μm/h（t=2.697,P＜0.01）;观察1、2、3h,低氧3、6 h组细胞直线运动速度分别为（19±14）、（12±8）、（10±6）μm/h,（32±19）、（21±13）、（17±12） μm/h,显著高于正常对照组[观察2、3h分别为（9±7）、（6±5） μm/h,t值为1.990 ～8.231,P＜0.05或P＜0.01];低氧6h组细胞直线运动速度显著高于低氧1、3h组（t值为3.394～6.008,P＜0.05或P＜0.01）.与观察1h比较,各组观察2、3h细胞直线运动速度均显著降低（t值为-8.208 ～-4.232,P值均小于0.01）;正常对照组观察2、3h细胞直线运动速度差异明显（t=-1.967,P＜0.05）.（2）正常对照组以及低氧1、3、6、9、12、24 h组细胞增殖水平分别为1.11±0.08、1.36±0.10、1.39±0.05、1.38±0.05、1.10±0.14、1.06±0.09、0.99±0.06（F=39.19,P＜0.01）.与正常对照组比较,低氧1、3、6h组细胞增殖水平显著升高（t值分别为6.639、7.403、7.195,P值均小于0.01）,低氧24 h组细胞的增殖水平显著降低（t=-3.136,P＜0.05）;与低氧1、3、6h组比较,低氧9、12、24 h组细胞的增殖水平均显著降低（t值为-10.538～-6.775,P值均小于0.01）.（3）正常对照组以及低氧1、3、6、24 h组细胞PCNA蛋白水平分别为0.93±0.12、0.97±0.14、1.62±0.18、0.95±0.09、0.66±0.21（F=20.11,P＜0.01）.与正常对照组比较,低氧1、3、6h组细胞PCNA蛋白水平显著升高（t值分别为2.339、5.783、2.235,P＜0.05或P＜0.01）,低氧24 h组细胞PCNA蛋白水平显著降低（t=-1.998,P＜0.05）.低氧3h组细胞PCNA蛋白水平显著高于低氧1、6h组（￡值分别为4.312、3.947,P值均小于0.01）,该3组细胞PCNA蛋白水平均显著高于低氧24 h组（￡值分别为2.011、6.193、3.287,P＜0.05或P＜0.01）.结论短时（1、3、6h）低氧处理可对HaCaT细胞的运动及增殖发挥促进作用,处理6h后细胞运动能力提高幅度最大,处理3、6 h对细胞增殖能力的促进作用更明湿.

关键词：缺氧细胞运动细胞增殖 HaCaT细胞

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生物强度电场对人表皮细胞株HaCaT和小鼠表皮细胞运动性及CD9表达的影响

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中华烧伤杂志 2021年第1期37卷 34-41页

作者：冀然张泽王文平张琼吕艳玲江旭品滕苗重庆医科大学附属第一医院整形烧伤外科 400016 陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院全军烧伤研究所创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400038

目的探讨生物强度电场对人表皮细胞株HaCaT和小鼠表皮细胞运动性及CD9表达的调节作用。方法采用实验研究方法。取对数生长期人永生化表皮细胞株HaCaT细胞及分离自16只1~3 d龄雌雄不拘BALB/c小鼠的原代表皮细胞进行实验。将HaCaT细胞分为... 详细信息

目的探讨生物强度电场对人表皮细胞株HaCaT和小鼠表皮细胞运动性及CD9表达的调节作用。方法采用实验研究方法。取对数生长期人永生化表皮细胞株HaCaT细胞及分离自16只1~3 d龄雌雄不拘BALB/c小鼠的原代表皮细胞进行实验。将HaCaT细胞分为200 mV/mm电场强度处理3 h的加电组和模拟处理的假电组,在活细胞工作站中观察细胞迁移(运动方向、位移速度、轨迹速度,加电组样本数为46、假电组样本数为34)及排列,免疫荧光法检测CD9蛋白的分布及表达。将HaCaT细胞与小鼠表皮细胞均分为假电组(模拟处理)和进行相应电场强度处理3 h的50 mV/mm组、100 mV/mm组、200 mV/mm组、400 mV/mm组,将HaCaT细胞与小鼠表皮细胞均分为未行处理的空白对照组和用200 mV/mm电场强度分别处理相应时间点的1 h组、3 h组、6 h组,蛋白质印迹法检测CD9的蛋白表达(样本数为3)。对数据行Mann-Whitney U检验、单因素方差分析、独立样本t检验及LSD检验。结果处理3 h内,加电组HaCaT细胞明显趋向负极移动,假电组HaCaT细胞围绕原点随机运动;与假电组比较,加电组HaCaT细胞方向性显著增强,位移速度、轨迹速度显著加快(Z=-3.975、-6.052、-6.299,P<0.01)。处理3 h后,加电组HaCaT细胞长轴与电场方向垂直,假电组HaCaT细胞呈任意取向排列。处理3 h后,加电组HaCaT细胞CD9蛋白(均位于细胞膜上)相对表达量明显低于假电组(t=4.527,P<0.01)。处理3 h后,假电组、50 mV/mm组、100 mV/mm组、200 mV/mm组、400 mV/mm组HaCaT细胞、小鼠表皮细胞CD9蛋白表达量分别为0.332±0.021、0.283±0.032、0.254±0.020、0.231±0.041、0.212±0.031与0.565±0.021、0.453±0.022、0.389±0.020、0.338±0.021、0.233±0.011。对于2种细胞而言,与假电组比较,电场处理4组细胞CD9蛋白表达量均明显降低(P<0.01);与50 mV/mm组比较,另外3个电场强度处理组细胞CD9蛋白表达量均明显降低(P<0.01);与100 mV/mm组比较,200 mV/mm组、400 mV/mm组细胞CD9蛋白表达量均明显降低(P<0.01);与200 mV/mm组比较,400 mV/mm组细胞CD9蛋白表达量明显降低(P<0.01)。空白对照组、1 h组、3 h组、6 h组HaCaT细胞、小鼠表皮细胞CD9蛋白表达量分别为0.962±0.031、0.784±0.020、0.531±0.021、0.409±0.011与0.963±0.031、0.872±0.031、0.778±0.040、0.591±0.041。对于2种细胞而言,与空白对照组比较,1 h组、3 h组、6 h组细胞CD9蛋白表达量均明显降低(P<0.01);与1 h组比较,3 h组、6 h组细胞CD9蛋白表达量均明显降低(P<0.05或P<0.01);与3 h组比,6 h组细胞CD9蛋白表达量明显降低(P<0.01)。结论生物强度电场可使HaCaT细胞发生定向迁移和排列,可下调HaCaT细胞和小鼠表皮细胞中CD9的表达,且呈电场强度与处理时间依赖性。

关键词：细胞运动生物强度电场表皮细胞 CD9

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基于“MRIS”原则采用扩张皮瓣美学整复颏颈部瘢痕挛缩畸形

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中华烧伤与创面修复杂志 2022年第4期38卷 306-312页

作者：张家平袁希江旭品刘杰陈卓李娅萍王红霞陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院整形外科创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400038

目的以获得更好的美学效果为目标,探讨颏颈部瘢痕挛缩畸形的手术整复策略。方法采用回顾性观察性研究方法。2017年12月—2021年4月,陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院整形外科收治34例烧伤后颏颈部瘢痕挛缩畸形患者(男13例、女21... 详细信息

目的以获得更好的美学效果为目标,探讨颏颈部瘢痕挛缩畸形的手术整复策略。方法采用回顾性观察性研究方法。2017年12月—2021年4月,陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院整形外科收治34例烧伤后颏颈部瘢痕挛缩畸形患者(男13例、女21例,年龄12~54岁),其中单纯颏部受累者4例、单纯颈部受累者7例、颏部和颈部均受累者23例。瘢痕面积48~252 cm2。对所有患者均采用扩张皮瓣进行手术治疗,治疗遵循修复皮瓣色泽与厚度匹配(match)、亚单位美学特征重构(reconstruction)、按整形原则设计切口(incision)和预防手术切口瘢痕(scar)的“MRIS”原则。Ⅰ期埋置额定容量为80~400 mL长方形或肾形皮肤软组织扩张器(以下简称扩张器),常规扩张至扩张器额定容量的3~5倍。Ⅱ期行瘢痕切除+切取扩张皮瓣修复继发创面,将供瓣区直接缝合。记录扩张器的扩张倍数(计算平均值)、采用皮瓣类型、局部美学形态重构情况、术后切口外观与皮瓣成活情况及随访观察的供受区情况。结果34例患者埋置扩张器的平均扩张倍数为扩张器额定容量的3.82倍。3例患者采用单纯扩张局部带蒂皮瓣、19例患者采用单纯扩张肩胸部穿支带蒂皮瓣、10例患者采用扩张局部带蒂皮瓣联合扩张肩胸部穿支带蒂皮瓣、2例患者采用扩张局部带蒂皮瓣联合扩张胸廓内动脉第2肋间穿支游离皮瓣。瘢痕切除后,重构下唇形态和颏唇沟者10例、重构下颏突起和延长下颏长度者16例、重构颈颏角和下颌缘轮廓线者28例。手术切口较为隐蔽,多数位于颏部和颈部亚单位自然交界或转折处;颈部垂直方向切口呈Z字形或鱼尾状。34例患者术后扩张皮瓣均成活,其中8例患者扩张皮瓣术后1~3 d出现远端边缘或尖端少许坏死,换药后愈合。随访3~18个月,扩张皮瓣色泽、厚度与颏颈部皮肤差异小,颏颈部美学形态显著改善,手术切口瘢痕增生较轻。结论基于“MRIS”原则采用扩张皮瓣整复颏颈部瘢痕挛缩畸形有利于提升手术质量,获得较好的美学效果。

关键词：瘢痕扩张术外科皮瓣颏颈部美学修复 “MRIS”原则

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瘢痕癌性溃疡诊断与治疗专家共识(2020年版)

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感染．炎症．修复 2020年第3期21卷 156-159页

作者：张家平江旭品黄跃生陆军军医大学(原第三军医大学)第一附属医院整形美容科创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400038 陆军军医大学(原第三军医大学)第一附属医院深圳市人民医院(南方科技大学第一附属医院暨南大学第二临床医学院)创面修复科创面修复研究所518020

瘢痕癌,又被称为马氏溃疡,往往是在瘢痕溃疡的基础上恶变而成,其临床表现为溃疡长期不能愈合。瘢痕癌的致病因素与发生机制尚不十分清楚,但瘢痕反复破溃、糜烂、合并感染等慢性刺激在其病理发展中具有重要意义。目前,有关瘢痕癌的诊疗... 详细信息

瘢痕癌,又被称为马氏溃疡,往往是在瘢痕溃疡的基础上恶变而成,其临床表现为溃疡长期不能愈合。瘢痕癌的致病因素与发生机制尚不十分清楚,但瘢痕反复破溃、糜烂、合并感染等慢性刺激在其病理发展中具有重要意义。目前,有关瘢痕癌的诊疗方案尚未形成统一认识。本文以国内外文献为基础,以全国相关领域专家的临床经验与观点为主要依据,在瘢痕癌性溃疡的病因、病理、临床表现、诊断与鉴别诊断、预防和治疗等方面汇集形成专家共识,为瘢痕癌性溃疡的防治提供参考。

关键词：瘢痕癌慢性溃疡诊断与治疗专家共识

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瘢痕癌性溃疡诊断与治疗专家共识(2020年版)

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中华损伤与修复杂志（电子版） 2020年第4期15卷 264-267页

作者：张家平江旭品黄跃生陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院整形美容科重庆400038 陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院深圳市人民医院(南方科技大学第一附属医院暨南大学第二临床医学院)创面修复科创面修复研究所518020

关键词：瘢痕癌慢性溃疡诊断与治疗专家共识

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借鉴住院医师规范化培训改进临床实习的探讨

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中华医学教育探索杂志 2018年第6期17卷 576-579页

作者：江旭品张家平黄跃生陆军军医大学(第三军医大学)西南医院烧伤科重庆400038

为探讨住院医师规范化培训对临床实习教学的借鉴意义，本研究从临床教学现状分析人手，立足教学管理的不同层次；论述教学管理体系、师资培训、教学内涵建设等方面的借鉴改进方案。旨在通过规范教学管理提高临床教学质量，实现从实习到... 详细信息

为探讨住院医师规范化培训对临床实习教学的借鉴意义，本研究从临床教学现状分析人手，立足教学管理的不同层次；论述教学管理体系、师资培训、教学内涵建设等方面的借鉴改进方案。旨在通过规范教学管理提高临床教学质量，实现从实习到住培的无缝衔接。

关键词：实习教学住院医师规范化培训教学管理

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生物强度电场对人皮肤成纤维细胞转化的调节作用

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中华烧伤与创面修复杂志 2022年第4期38卷 354-362页

作者：王文平冀然张泽邬亚婷张恒术张琼江旭品滕苗重庆医科大学附属第一医院整形烧伤外科重庆400016 陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院全军烧伤研究所创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室重庆400038

目的探讨生物强度电场对人皮肤成纤维细胞(HSF)转化的调节作用。方法采用实验研究方法。取HSF,分为经200 mV/mm电场处理6 h的200 mV/mm电场组和置于电场装置中不通电处理6 h的模拟电场组,在活细胞工作站中观察细胞形态和排列变化;记录处... 详细信息

目的探讨生物强度电场对人皮肤成纤维细胞(HSF)转化的调节作用。方法采用实验研究方法。取HSF,分为经200 mV/mm电场处理6 h的200 mV/mm电场组和置于电场装置中不通电处理6 h的模拟电场组,在活细胞工作站中观察细胞形态和排列变化;记录处理0、6 h细胞数,并计算细胞数变化率;观察并计算3 h内细胞运动方向、位移速度、轨迹速度(以上实验模拟电场组样本数为34、200 mV/mm电场组样本数为30);采用免疫荧光法检测处理3 h细胞α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的蛋白表达(样本数为3)。取HSF分为置于电场装置中不通电处理3 h的模拟电场组和经相应强度电场处理3 h的100 mV/mm电场组、200 mV/mm电场组、400 mV/mm电场组,另取HSF分为置于电场装置中不通电处理6 h的模拟电场组和经200 mV/mm电场处理相应时间的电场处理1 h组、电场处理3 h组、电场处理6 h组,采用蛋白质印迹法检测α-SMA、增殖细胞核抗原(PCNA)的蛋白表达(样本数为3)。对数据行Mann-Whitney U检验、单因素方差分析、独立样本t检验及LSD检验。结果处理6 h,与模拟电场组相比,200 mV/mm电场组细胞形态拉长,并产生局部粘连;模拟电场组细胞任意排列,200 mV/mm电场组细胞呈有规律的纵向排列;2组细胞数变化率相近(P>0.05)。处理3 h内,200 mV/mm电场组细胞有明显的向正极运动趋势,模拟电场组细胞绕原点运动;与模拟电场组比较,200 mV/mm电场组细胞位移速度和轨迹速度均明显加快(Z值分别为-5.33、-5.41,P<0.01),方向性显著增强(Z=-4.39,P<0.01)。处理3 h,200 mV/mm电场组细胞α-SMA蛋白表达较模拟电场组明显增加(t=-9.81,P<0.01)。处理3 h,100 mV/mm电场组、200 mV/mm电场组、400 mV/mm电场组细胞α-SMA蛋白表达分别为1.195±0.057、1.606±0.041、1.616±0.039,均明显多于模拟电场组的0.649±0.028(P<0.01)。与100 mV/mm电场组比较,200 mV/mm电场组、400 mV/mm电场组细胞α-SMA蛋白表达均明显增加(P<0.01)。电场处理1 h组、电场处理3 h组、电场处理6 h组细胞α-SMA蛋白表达分别为0.730±0.032、1.561±0.031、1.553±0.045,均明显多于模拟电场组的0.464±0.020(P<0.01);与电场处理1 h组比较,电场处理3 h组、电场处理6 h组细胞α-SMA蛋白表达均明显增加(P<0.01)。处理3 h,与模拟电场组比较,100 mV/mm电场组、200 mV/mm电场组、400 mV/mm电场组细胞PCNA蛋白表达均明显减少(P<0.05或P<0.01);与100 mV/mm电场组比较,200 mV/mm电场组、400 mV/mm电场组细胞PCNA蛋白表达均明显减少(P<0.05或P<0.01);与200 mV/mm电场组比较,400 mV/mm电场组细胞PCNA蛋白表达明显减少(P<0.01)。与模拟电场组比较,电场处理1 h组、电场处理3 h组、电场处理6 h组细胞PCNA蛋白表达均明显减少(P<0.01);与电场处理1 h组比较,电场处理3 h组、电场处理6 h组细胞PCNA蛋白表达均明显减少(P<0.05或P<0.01);与电场处理3 h组比较,电场处理6 h组细胞PCNA蛋白表达明显减少(P<0.01)。结论生物强度电场可诱导HSF迁移、促进Fb向肌Fb转化,且转化有一定的时间及电场强度依赖性。

关键词：皮肤成纤维细胞肌成纤维细胞细胞增殖细胞转化生物强度电场

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面部囊肿型痤疮光动力治疗后瘢痕增生伴慢性创面形成一例

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中国美容医学 2024年第4期33卷 91-94页

作者：唐小清李哲旭陈卓张家平江旭品陆军军医大学第一附属医院整形科重庆400038

报道1例5-氨基酮戊酸光动力治疗面部痤疮后致局部瘢痕增生伴皮肤慢性创面形成的临床案例。患者为25岁的年轻女性,因面部囊肿型痤疮行5-氨基酮戊酸光动力治疗,治疗结束后患者双侧颊部逐渐出现瘢痕增生伴表皮反复结痂渗液,迁延不愈。患者... 详细信息

报道1例5-氨基酮戊酸光动力治疗面部痤疮后致局部瘢痕增生伴皮肤慢性创面形成的临床案例。患者为25岁的年轻女性,因面部囊肿型痤疮行5-氨基酮戊酸光动力治疗,治疗结束后患者双侧颊部逐渐出现瘢痕增生伴表皮反复结痂渗液,迁延不愈。患者曾口服异维A酸、外用呋喃西林溶液、甲硝唑乳膏、多磺粘多糖乳膏及脉冲激光等方式治疗,效果均不理想,颊部瘢痕及表皮剥脱、渗液情况无明显好转。给予患者行面部瘢痕分次切除治疗,术后创面愈合良好,未见明显瘢痕增生及渗液等情况出现。光动力治疗面部痤疮后是否会导致治疗区域瘢痕增生、皮肤愈合不佳等长期不良反应值得进一步探究。

关键词：痤疮 5-氨基酮戊酸光动力瘢痕创面不愈

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生物强度电场对人表皮细胞株HaCaT微管乙酰化的调节作用

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中华烧伤与创面修复杂志 2022年第11期38卷 1066-1072页

作者：邬亚婷张泽冀然张书豪王文平武潮张家平江旭品张恒术重庆医科大学附属第一医院烧伤整形外科重庆400016 陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院整形外科重庆400038

目的探讨生物强度电场对人表皮细胞株HaCaT方向性迁移及微管乙酰化水平的调节作用,以期为临床创面修复提供分子理论依据。方法采用实验研究方法。取HaCaT细胞,分为置于电场装置中不通电处理3 h的模拟电场组和用强度200 mV/mm电场处理3 ... 详细信息

目的探讨生物强度电场对人表皮细胞株HaCaT方向性迁移及微管乙酰化水平的调节作用,以期为临床创面修复提供分子理论依据。方法采用实验研究方法。取HaCaT细胞,分为置于电场装置中不通电处理3 h的模拟电场组和用强度200 mV/mm电场处理3 h的电场处理组(处理方法下同,样本数分别为54、52),在活细胞工作站中观察处理3 h内细胞运动的方向并计算细胞运动的位移速度、轨迹速度及运动方向性cosθ。取2批HaCaT细胞,分为模拟电场组和用强度200 mV/mm的电场处理相应时间的电场处理1 h组、电场处理2 h组、电场处理3 h组及模拟电场组和用相应强度的电场处理3 h的100 mV/mm电场组、200 mV/mm电场组、300 mV/mm电场组,采用蛋白质印迹法检测乙酰化α-微管蛋白的表达(样本数均为3)。取HaCaT细胞,分为模拟电场组和电场处理组,采用免疫荧光法观测乙酰化α-微管蛋白的表达及定位(样本数为3)。对数据行Kruskal-Wallis H检验、Mann-Whitney U检验、Bonferroni校正、单因素方差分析、LSD检验及独立样本t检验。结果处理3 h内,与模拟电场组相比,电场处理组细胞有明显定向迁移的趋势,位移速度、轨迹速度均明显加快(Z值分别为-8.53、-2.05,P0.05),电场处理3 h组细胞乙酰化α-微管蛋白表达量(3.37±0.36)明显增高(Z=-3.06,P<0.05)。处理3 h,100 mV/mm电场组、200 mV/mm电场组、300 mV/mm电场组细胞乙酰化α-微管蛋白表达量分别为1.63±0.05、2.24±0.08、2.00±0.13,均较模拟电场组的0.95±0.27明显增高(P<0.01);200 mV/mm电场组、300 mV/mm电场组细胞乙酰化α-微管蛋白表达量均较100 mV/mm电场组明显增高(P<0.01);300 mV/mm电场组细胞乙酰化α-微管蛋白表达量较200 mV/mm电场组明显降低(P<0.05)。处理3 h,电场处理组细胞中乙酰化α-微管蛋白的分布较模拟电场组更具有方向性,电场处理组细胞乙酰化α-微管蛋白的表达量较模拟电场组明显增高(t=5.78,P<0.01)。结论生物强度电场可促进HaCaT细胞定向迁移,在200 mV/mm电场强度下处理3 h可明显促进微管乙酰化水平。

关键词：皮肤细胞运动微管蛋白乙酰化作用生物强度电场表皮细胞

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