检索结果-南通市图书馆

果蝇心脏发育标记基因Kruppel的多克隆抗体制备

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

激光生物学报 2012年第3期21卷 252-256页

作者：黄婷雷旻音朱玲刘腾江志钢吴秀山邓云湖南师范大学蛋白质化学及鱼类发育生物学教育部重点实验室心脏发育研究中心湖南长沙410081

Kruppel在果蝇发育过程中起着重要的调控作用。为了进一步研究Kruppel的功能,需要制备Kruppel蛋白及其抗体.对已有的Kruppel序列进行分析,选取适当区域进行引物设计,从果蝇心脏cDNA文库中PCR扩增得到Kruppel部分编码区序列,并其连接到pE... 详细信息

Kruppel在果蝇发育过程中起着重要的调控作用。为了进一步研究Kruppel的功能,需要制备Kruppel蛋白及其抗体.对已有的Kruppel序列进行分析,选取适当区域进行引物设计,从果蝇心脏cDNA文库中PCR扩增得到Kruppel部分编码区序列,并其连接到pET-28a载体上。将重组质粒(pET-28a-Kruppel)转化rosetta受体菌,通过IPTG(Isopropylβ-D-thiogalactoside)诱导表达融合蛋白,用镍柱进行亲和纯化。将纯化得到的融合蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,并用Western blot检测抗体的效价。

关键词： Kruppel 融合蛋白果蝇多克隆抗体

果蝇心脏发育标记基因Lbe抗体的制备与应用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

激光生物学报 2021年第4期30卷 333-338页

作者：赵梦婧覃彬陈宇吴秀山江志钢万永奇湖南师范大学生命科学学院心脏发育研究中心长沙410081

黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)的心脏发育调控基因与人类的相关基因具有高度同源性。Lbe基因是果蝇心脏发育的重要调控基因。为了深入研究Lbe基因在心脏发育中的调控功能,采用DNA免疫技术制备了抗果蝇Lbe蛋白的多克隆抗体。通过PC... 详细信息

黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)的心脏发育调控基因与人类的相关基因具有高度同源性。Lbe基因是果蝇心脏发育的重要调控基因。为了深入研究Lbe基因在心脏发育中的调控功能,采用DNA免疫技术制备了抗果蝇Lbe蛋白的多克隆抗体。通过PCR扩增Lbe基因序列,将该序列与真核表达载体pCAGGS-P7同源重组,以该同源重组载体免疫4周龄小鼠,获得含有抗Lbe多克隆抗体的血清。蛋白质印迹(Western blot)和胚胎抗体染色结果表明,该抗体的特异性较好。该抗体为随后的Lbe功能的研究奠定了基础。

关键词：果蝇心脏发育 Lbe DNA免疫多克隆抗体

利用CRISPR/Cas9技术构建斑马鱼Hand2基因敲除模型

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

激光生物学报 2022年第2期31卷 142-148页

作者：谭志霞张健吕丹江志钢袁婺洲吴秀山叶湘漓湖南师范大学医学院长沙410013 湖南师范大学生命科学学院长沙410081 长沙市第九医院检验科长沙410004

心脏神经脊衍生物表达转录因子2(Hand2)是bHLH家族的成员,也称为dHand、Hed和Thing2,可在人以及鼠、鸡、斑马鱼、果蝇等模式动物中表达。国内外的研究显示,Hand2主要影响右心室的发育,在维持右心室祖细胞和右心室形态发生中起关键作用... 详细信息

心脏神经脊衍生物表达转录因子2(Hand2)是bHLH家族的成员,也称为dHand、Hed和Thing2,可在人以及鼠、鸡、斑马鱼、果蝇等模式动物中表达。国内外的研究显示,Hand2主要影响右心室的发育,在维持右心室祖细胞和右心室形态发生中起关键作用。为了进一步研究Hand2基因参与心脏发育的作用机制,拟通过CRISPR/Cas9基因编辑技术构建斑马鱼Hand2基因敲除品系。根据生物信息学网站的分析筛选出最优的两个靶位点,设计并合成引物,利用PCR扩增得到Hand2基因sgRNA的cDNA,再转录为mRNA,将两个靶位点sgRNA的mRNA和Cas9蛋白共同注射到斑马鱼胚胎的Ⅰ-细胞期。在斑马鱼的胚胎和成鱼时期进行基因敲除的有效性检测,发现在靶位点附近有碱基的缺失和插入,表明CRISPR/Cas9对斑马鱼Hand2基因敲除是有效的。本研究利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建了斑马鱼的Hand2基因敲除模型,为后期研究Hand2基因在人类疾病中的作用机制和新型治疗靶点的临床开发等奠定了基础。

关键词：斑马鱼 Hand2基因 CRISPR/Cas9 基因敲除治疗靶点

同方期刊数据库博看期刊评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

原子吸收法测定氯化镍

山东科学 1994年第3期7卷 42-46页

作者：江克铮张国庆林美菊张敏王绪科车秀山山东省分析测试中心

样品加蒸馏水溶解、定容、过滤即可直接进行测定．方法简单，快速而且没有任何干扰，测定相对误差约为±０．１～０．３％，能满足一般工业分析要求．

关键词：氯化镍原子吸收法测定

增强CT与非小细胞肺癌临床病理特征及预后的关系

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

影像科学与光化学 2020年第4期38卷 734-738页

作者：吴涛陈江重庆市秀山土家族苗族自治县人民医院放射科重庆409900 重庆市黔江区中医院放射科重庆409000

本研究分析增强CT参数和非小细胞肺癌临床病理特征、预后之间的关系,并探讨影响非小细胞肺癌预后的因素。结果发现,肿瘤大小、CT强化、淋巴结肿大数量和淋巴结大小与非小细胞肺癌的分化程度、TNM分期,以及淋巴结转移相关;肿瘤体积大、... 详细信息

本研究分析增强CT参数和非小细胞肺癌临床病理特征、预后之间的关系,并探讨影响非小细胞肺癌预后的因素。结果发现,肿瘤大小、CT强化、淋巴结肿大数量和淋巴结大小与非小细胞肺癌的分化程度、TNM分期,以及淋巴结转移相关;肿瘤体积大、淋巴结肿大、肿瘤CT强化及淋巴结转移,与不良预后相关并是判断其预后的独立危险因素。表明增强CT参数与非小细胞肺癌患者临床病理特征相关,并可预测非小细胞肺癌患者的预后。

关键词：增强CT 非小细胞肺癌临床病理特征预后

斑马鱼Foxp4基因多克隆抗体的制备及检测

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

激光生物学报 2011年第4期20卷 556-559,489页

作者：刘华友朱玲李帆王琨江志钢吴秀山李永青湖南师范大学蛋白质化学及鱼类发育生物学教育部重点实验室心脏发育研究中心湖南长沙410081

Foxp4为Fox基因家族的一员,目前研究发现其与怖、肠、心脏以及中枢神经系统的发育有关。为了在斑马鱼模型中进一步研究该基因的功能,有必要制备其多克隆抗体。按照巢式PCR原理,经过两次PCR扩增出亲水性和特异性均好的斑马鱼Foxp4基因片... 详细信息

Foxp4为Fox基因家族的一员,目前研究发现其与怖、肠、心脏以及中枢神经系统的发育有关。为了在斑马鱼模型中进一步研究该基因的功能,有必要制备其多克隆抗体。按照巢式PCR原理,经过两次PCR扩增出亲水性和特异性均好的斑马鱼Foxp4基因片段,将其克隆入表达载体pGEX4T-1,转化至大肠杆菌BL21中,再通过IPTG进行诱导表达GST-Foxp4融合蛋白。融合蛋白先经谷胱甘肽琼脂糖珠亲和纯化,再经切胶纯化回收,然后免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,分别进行Western-blot实验检测抗体效价和特异性。所得结果显示获得了较高效价和特异性好的斑马鱼Foxp4多克隆抗体,为Foxp4功能的进一步研究奠定了基础。

关键词： Foxp4 原核表达多克隆抗体

利用CRISPR/Cas9技术构建斑马鱼prkd1基因敲除品系

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

生命科学研究 2024年第1期28卷 18-25页

作者：吕丹陈宇谭志霞李永青吴秀山江志钢叶湘漓湖南师范大学医学院中国湖南长沙410013 湖南师范大学生命科学学院中国湖南长沙410081 长沙市第九医院检验科中国湖南长沙410004

蛋白激酶D1 (protein kinase D1, PKD1;也称作PRKD1)是蛋白激酶家族成员之一,该家族由3种结构相关的应激激活酶组成,可调节机体多种生物学功能,主要涉及细胞增殖、分化、凋亡、免疫调节、心脏收缩、血管生成和癌症等,其中PRKD1与心脏肥... 详细信息

蛋白激酶D1 (protein kinase D1, PKD1;也称作PRKD1)是蛋白激酶家族成员之一,该家族由3种结构相关的应激激活酶组成,可调节机体多种生物学功能,主要涉及细胞增殖、分化、凋亡、免疫调节、心脏收缩、血管生成和癌症等,其中PRKD1与心脏肥大、收缩和缺血再灌注损伤的底物磷酸化有关。相关研究报道,先天性心脏病患者存在PRKD1基因突变,但其在心脏中的特异性功能和分子机制并未阐明。为了便于后期研究PRKD1基因在人类早期心脏发育的作用机制,本文拟利用CRISPR/Cas9技术构建斑马鱼prkd1基因敲除品系。首先,通过生物信息学网站筛选出两个最佳的基因敲除靶位点,合成相应靶位点的单链向导RNA (single guide RNA,sg RNA)和引物;然后,将两个靶位点的sg RNA进行体外转录,并将其与Cas9蛋白混合后共同注射到斑马鱼的1-细胞期;最后,对基因敲除后的F0、F1、F2及F3代斑马鱼的胚胎和成鱼进行有效性鉴定及表型观察。结果显示,靶位点附近出现了不同程度的碱基缺失;成功构建了F1代能够稳定遗传的prkd1基因敲除的3个亚系;与野生型相比, F3代纯合子胚胎表现出不同程度的心腔膨大、环化异常及心管线性化等畸形现象。综上可知,本研究利用CRISPR/Cas9技术成功构建了斑马鱼prkd1基因敲除品系,为进一步研究该基因在人类心脏发育中的特异性功能提供了有益参考,并为后期的先天性心脏病筛查和精准医疗提供了重要依据。

关键词： prkd1基因 CRISPR/Cas9技术基因敲除先天性心脏病(CHD)

同方期刊数据库博看期刊评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

10例原发性气管肿瘤的外科诊断及手术治疗

西南国防医药 2012年第7期22卷 760-761页

作者：俞永康姜建青刘新凤郑轶峰李卫杨列郑秀山成都军区总医院胸外科解放军77118部队卫生队

目的总结外科手术治疗原发性气管肿瘤的临床经验。方法回顾分析本院1993年10月～2010年1月收治的10例气管肿瘤的诊断和治疗经验。结果本组鳞癌3例,腺癌3例,腺鳞癌1例,良性肿瘤3例;临床治愈9例,术后3 d死亡1例。本组3例鳞癌患者分别于手... 详细信息

目的总结外科手术治疗原发性气管肿瘤的临床经验。方法回顾分析本院1993年10月～2010年1月收治的10例气管肿瘤的诊断和治疗经验。结果本组鳞癌3例,腺癌3例,腺鳞癌1例,良性肿瘤3例;临床治愈9例,术后3 d死亡1例。本组3例鳞癌患者分别于手术后3年和8个月复发死亡;3例腺癌,1例术后1年出现肺转移,另2例存活10个月。结论手术切除是治疗气管肿瘤最有效的方法:(1)纤维支气管镜检查与多排CT增强三维成像对确定气管肿瘤范围有互补作用;(2)充分的术前呼吸道准备,是术中安全、术后顺利康复的保障;(3)手术者和麻醉医师密切配合,选择视野较宽的纤维支气管镜引导气管插管是麻醉安全的重要保障。

关键词：气管肿瘤诊断外科手术

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

食管、贲门癌术后早期肠内营养的临床应用

西南军医 2008年第5期10卷 3-4页

作者：姜建青刘宝玉张秀雄俞永康郑轶峰郑琇山杨列成都军区总医院心胸外科四川成都610083 巴中市中医院外科四川巴中636000

目的探讨早期肠内营养在食管、贲门癌术后的实施方法与临床效果。方法对378例食管、贲门癌患者在术中留置鼻肠管或行空肠造瘘留置营养管,术后经鼻肠管或空肠造瘘管给予瑞素营养治疗。结果所有食管、贲门癌术中均顺利留置鼻肠管或营养管... 详细信息

目的探讨早期肠内营养在食管、贲门癌术后的实施方法与临床效果。方法对378例食管、贲门癌患者在术中留置鼻肠管或行空肠造瘘留置营养管,术后经鼻肠管或空肠造瘘管给予瑞素营养治疗。结果所有食管、贲门癌术中均顺利留置鼻肠管或营养管,早期肠内营养患者吻合口瘘、肺部感染、胸腔感染、切口感染、术后胸胃排空障碍等并发症发生率较传统常规补液组明显减少,无一例死亡发生。术后肠鸣音恢复时间、肛门排气和排便时间明显缩短。结论食管癌、贲门癌术后早期应用肠内营养,能促进胃肠功能恢复,改善患者营养状况,减少并发症,提高手术成功率。而且肠内营养支持简便、经济、无严重并发症,是临床手术后简便、安全、有效地营养补给方法。

关键词：食管癌贲门癌肠内营养