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Real-time in situ observation of P53-mediated cascade activation of apoptotic pathways with nucleic acid multicolor fluorescent probes based on symmetrical gold nanostars

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Nano Research 2023年第4期16卷 5391-5400页

作者： Chenbiao Li Peifang Chen Xiaoyuan Ma xichi lin Shan Xu Sobia Niazi Zhouping Wang State Key Laboratory of Food Science and Technology Jiangnan UniversityWuxi 214122China School of Food Science and Technology Jiangnan UniversityWuxi 214122China International Joint Laboratory on Food Safety Jiangnan UniversityWuxi 214122China Collaborative Innovation Center of Food Safety and Quality Control in Jiangsu Province Jiangnan UniversityWuxi 214122China

T-2 toxin,one of the most dangerous natural pollutants,induces apoptosis through multiple ***,P53 mediated apoptosis pathway,an important collection of molecules,plays a key role in cell vital ***-time monitoring of upstream and downstream activation relationships of P53 mRNA,Bax mRNA,and cytochrome c(Cyt c)in signaling pathways is of great significance for understanding the apoptotic machinery in human *** this work,a novel nucleic acid multicolor fluorescent probe,based on silica-coated symmetric gold nanostars(S-AuNSs@SiO_(2)),was developed for highly sensitive in situ real-time imaging of P53 mRNA,Bax mRNA,and Cyt c during T-2 toxin-induced *** nucleic acid chains modified with carboxyl groups were modified on the surface of S-AuNSs@SiO_(2)by amide *** complementary chains of targeted mRNA and the aptamer of targeted Cyt c were modified with different fluorophores,respectively,and successfully hybridized on S-AuNSs@SiO_(2)*** targets were present,the fluorescent chains bound to the targets and detached from the material,resulting in the quenched fluorescence being *** probes based on S-AuNSs showed excellent performance is partly ascribed to the presence of 20 symmetric“hot spots”.Notably,the amide-bonded probe exhibited excellent anti-interference capability against biological agents(nucleases and biothiols).During the real-time fluorescence imaging of T-2 toxin-induced apoptosis,the corresponding fluorescence signals of P53 mRNA,Bax mRNA,and Cyt c were observed ***,S-AuNSs@SiO_(2)probe not only provides a novel tool for real-time monitoring of apoptosis pathways cascade but also has considerable potential in disease diagnosis and pharmaceutical medical.

关键词： nucleic acid multicolor fluorescent probe symmetric gold nanostars T-2 toxin P53 mediated apoptosis pathway living cells imaging

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表没食子儿茶素没食子酸酯对大鼠干细胞成骨分化作用的研究

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右江民族医学院学报 2022年第3期44卷 315-319,335页

作者：程琳姚洁隋萍李兵陈习驰靳攀长江大学医学部湖北荆州434023

目的通过比较表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对大鼠干细胞的直接作用和与成骨诱导液的协同作用,探究EGCG在成骨分化中的作用。方法利用全骨髓贴壁法分离大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)。培养至第三代,将细胞分为4组:A组(BMSCs):单纯用完... 详细信息

目的通过比较表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对大鼠干细胞的直接作用和与成骨诱导液的协同作用,探究EGCG在成骨分化中的作用。方法利用全骨髓贴壁法分离大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)。培养至第三代,将细胞分为4组:A组(BMSCs):单纯用完全培养基培养BMSCs;B组(BMSCs+EGCG):将BMSCs在添加10μmol/L EGCG的完全培养基中培养;C组(BMSCs+Osteoinductive fluid):用成骨诱导液培养BMSCs;D组(BMSCs+Osteoinductive fluid+EGCG):将BMSCs在添加10μmol/L EGCG的成骨诱导液中培养。培养7 d和14 d,通过CCK-8检测细胞增殖情况,通过碱性磷酸酶(ALP)检测、ALP染色和成骨相关基因骨钙素(Ocn)、Ⅰ型胶原(Col1a1)、骨涎蛋白(Bsp)、Runt相关转录因子2(Runx2)等的表达水平评估EGCG在大鼠干细胞成骨分化中的作用。结果CCK-8检测发现C组和D组细胞增殖均明显低于A组和B组,但是C组与D组差异不显著,说明EGCG对大鼠干细胞的增殖影响不明显;ALP检测中A组与B组差异不显著,D组与C组比较差异有统计学意义,且ALP染色中D组染色明显高于C组,同时在成骨相关基因表达的检测中D组mRNA表达水平也明显高于C组,这些结果说明单纯EGCG对干细胞成骨作用比较微弱,但是在成骨诱导液存在时其成骨作用大大增强。结论EGCG发挥促进成骨作用需要依赖其它因素,其自身不能启动成骨过程。

关键词：表没食子儿茶素没食子酸酯干细胞成骨分化骨质疏松症

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