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PADI3 induces cell cycle arrest via the Sirt2/AKT/p21 pathway and acts as a tumor suppressor gene in colon cancer

Cancer Biology & Medicine 2019年第4期16卷 729-742页

作者： xiaotian chang Zhengbin Chai Jiaorui Zou Hongxing Wang Yao Wang Yabing Zheng Hui Wu Chunyan Liu Medical Research Center The First Affiliated Hospital of Shandong First Medical UniversityJinan 250014 Medical Research Center of the Hospital Affiliated to Qingdao University Qingdao 266000China Department of Laboratory Medicine Jinan Infectious Disease HospitalShandong UniversityJinan 250021China

Objective:As a member of the peptidyl arginine deiminase(PAD)family,PADI3 is weakly expressed in colon cancer tissues and highly expressed in adjacent colon cancer ***,the role of PADI3 in colon cancer is *** this study,we investigated the function and molecular mechanism of PADI3 in colon cancer ***:Western blot and real-time PCR were used to detect the expression levels of several ***-8,flow cytometry(FCM)and colony formation assays were used to examine cell proliferation,the cell cycle and colony formation *** analysis was used to study the molecular mechanism of PADI3 in tumorigenesis.A truncation mutation experiment was performed to determine the key functional domain of ***:PADI3 overexpression inhibited cell proliferation and colony formation and led to G1 phase arrest in both HCT116(originating from primary colon cancer)and LoVo(originating from metastatic tumor nodules of colon cancer)***3-expressing HCT116 cells had a lower tumor formation rate and produced smaller tumors than control ***3 significantly decreased Sirtuin2(Sirt2)and Snail expression and AKT phosphorylation and increased p21 expression,and Sirt2 overexpression partly reversed the effects induced by PADI3 *** showed that PADI3 is mainly localized in the *** mutation experiments showed that the C-domain is the key domain involved in the antitumor activity of ***:PADI3 suppresses Snail expression and AKT phosphorylation and promotes p21 expression by downregulating Sirt2 expression in the cytoplasm,and the C-domain is the key domain for its antitumor activity.

关键词： PADI3 Sirt2 colon cancer cell cycle C-domain

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miR-573 is a negative regulator in the pathogenesis of rheumatoid arthritis

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Cellular & Molecular Immunology 2016年第6期13卷 839-848页

作者： Lin Wang Guanhua Song Yabing Zheng Dan Wang Hongyan Dong Jihong Pan xiaotian chang Research Center for Medicinal Biotechnology Key Laboratory for Rare & Uncommon Diseases of Shandong Province Shandong Academy of Medicinal Sciences Jinan People's Republic of China Institute of Basic Medicine Shandong Academy of Medical Sciences Jinan People's Republic of China Medical Research Center of Shandong Provincial Qianfoshan Hospital Shandong University Jinan People's Republic of China Department of pathology Linyi People's Hospital Linyi People's Republic of China

Rheumatoid arthritis （RA） is a chronic autoimmune disease characterized by abnormal inflammation, angiogenesis, and cartilage destruction. Our previous study demonstrated an increased expression of thioredoxin domain containing 5 （TXNDC5） in the synovial tissues of RA, and its overexpression was implicated in RA pathology. Although TXNDC5 variation is linked to genetic susceptibility to RA, the regulation of its abnormal expression has not been well defined. Here, we show that TXNDC5 is directly targeted by microRNA （miR）-573, and TXNDC5, in turn, mediates the suppressive effect of miR-573 on the invasion of synovial fibroblasts of RA （RASFs）. miR-573 overexpression suppressed the expression of interleukin 6 （I L-6） and cyclooxygenase 2 in RASFs, as well as the production of tumor necrosis factor-alpha and interleukin- 1 beta by activated THP-1 cells in response to lipopolysaccharide （LPS） stimulation. Moreover, treatment with conditioned medium of RASFs transfected with miR-573 mimic inhibited the angiogenic ability of human umbilical vein endothelial cells （HUVECs）. Of note, epidermal growth factor receptor and Toll-like receptor 2 were validated as new direct targets of miR-573, and mediate the regulation of miR-573 on IL-6 production as well as the angiogenesis of HUVECs. In addition, exogenous miR-573 expression suppressed the activation of mitogen-activated protein kinase （MAPK）, signal transducer and activator of transcription 3, and phosphatidylinositol-3 kinase/activate protein kinase B in RASFs in response to LPS. Indeed, MAPK signaling was essential to ensure the function of miR-573. Taken together, our study points toward the protective roles of miR-573 in the pathological process of RA and suggests a potential target in the treatment of RA.

关键词： EGFR miR-573 rheumatoid arthritis TLR2 TXNDC5

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TXNDC5研究的新进展

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中华医学遗传学杂志 2017年第3期34卷 448-450页

作者：李健常晓天山东大学千佛山医院中心实验室济南250014

TXNDC5基因编码的蛋白质属于蛋白质二硫键异构酶家族，可催化二硫键的重排，并且作为分子伴侣减少异常蛋白质的合成。它具有抗氧化、抑制细胞凋亡、促进血管形成、参与细胞炎症、能量代谢等多种生物功能。研究表明，TXNDC5在宫颈癌、胃... 详细信息

TXNDC5基因编码的蛋白质属于蛋白质二硫键异构酶家族，可催化二硫键的重排，并且作为分子伴侣减少异常蛋白质的合成。它具有抗氧化、抑制细胞凋亡、促进血管形成、参与细胞炎症、能量代谢等多种生物功能。研究表明，TXNDC5在宫颈癌、胃癌和结直肠癌等多种肿瘤中高表达，同时也与类风湿关节炎、糖尿病、肝脂肪变性、白癜风等疾病密切相关。本文主要就TXNDC5的生化作用、与疾病的关系及其作用机制的研究进展进行综述。

关键词： TXNDC5蛋白肿瘤类风湿关节炎生化功能

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PADI2与人多种肿瘤的遗传易感性的关系

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山东大学学报（医学版） 2017年第11期55卷 47-53页

作者：李昌张倩马芳解奇常晓天山东省滕州市中心人民医院病理科山东滕州277500 山东大学附属千干佛山医院医学研究中心山东济南250014 北大医疗鲁中医院检验科山东淄博255400 山东省创新制药有限公司山东济南250101

目的探讨肽基精氨酸脱亚氨酶(PAD)家族成员之一PADI2基因对肿瘤的遗传易感性及其在肿瘤组织和患者血液中的表达情况。方法采用Sequenom Mass ARRAY基因分型技术分析PADI2编码基因上的标签单核苷酸多态性(SNP)rs2746533、rs79395834、rs2... 详细信息

目的探讨肽基精氨酸脱亚氨酶(PAD)家族成员之一PADI2基因对肿瘤的遗传易感性及其在肿瘤组织和患者血液中的表达情况。方法采用Sequenom Mass ARRAY基因分型技术分析PADI2编码基因上的标签单核苷酸多态性(SNP)rs2746533、rs79395834、rs2076616和rs10788656位点与乳腺癌、宫颈癌、食管癌、胃癌、肝癌、肺癌、卵巢癌和直肠癌患者是否存在遗传易感性。采用免疫组化技术检测PADI2在乳腺癌、宫颈癌、食管癌、胃癌、肝癌、肺癌、卵巢癌、结肠癌、直肠癌和甲状腺癌组织内的表达。采用ELISA技术检测PADI2在乳腺癌、宫颈癌、食管癌、胃癌、肝癌、肺癌、卵巢癌、直肠癌患者外周血中的表达水平。结果 Sequenom Mass ARRAY基因分型实验显示,PADI2基因的rs2746533、rs2076616、rs10788656位点与乳腺癌、宫颈癌、胃癌、肺癌、直肠癌发病明显相关。免疫组化实验发现,PADI2在95%的乳腺浸润性导管癌、97.5%的结肠腺癌、88%的食管癌、92.5%的肺癌和90%甲状腺乳头状癌组织高表达。除了一些间充质样细胞和内皮细胞外,PADI2在正常宫颈组织、肺组织、卵巢组织或甲状腺组织中不表达,在乳腺、结肠、食管、胃、肝和直肠正常组织的上皮细胞中低表达。ELISA实验发现PADI2在86%的肝癌、38%宫颈癌和32%胃癌患者外周血中表达水平上升2倍以上。结论 PADI2与多种肿瘤遗传易感性相关并在多种肿瘤组织和血液中高表达,提示PADI2可能与这些肿瘤的发病有关。

关键词：肽基精氨酸脱亚氨酶2 易感基因肿瘤基因分型基因表达

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筛选肿瘤细胞中的瓜氨酸化蛋白

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中华肿瘤杂志 2015年第3期37卷 165-169页

作者：张伟马立宁隋赟常晓天山东省济南市第二人民医院内科 250001 山东省千佛山医院医学研究中心

目的：筛选肿瘤细胞中的瓜氨酸化蛋白。方法培养食管癌、肝癌、卵巢癌、乳腺癌、肺癌、宫颈癌、结肠癌、肾癌、胰腺癌和胃癌细胞系，用2张相同凝胶在相同条件下对肿瘤细胞系中提取的蛋白进行二维电泳（2－DE）分析；将其中1张2－DE凝胶... 详细信息

目的：筛选肿瘤细胞中的瓜氨酸化蛋白。方法培养食管癌、肝癌、卵巢癌、乳腺癌、肺癌、宫颈癌、结肠癌、肾癌、胰腺癌和胃癌细胞系，用2张相同凝胶在相同条件下对肿瘤细胞系中提取的蛋白进行二维电泳（2－DE）分析；将其中1张2－DE凝胶上的蛋白印迹转印至聚偏氟乙烯膜上，用抗瓜氨酸抗体杂交后检测免疫信号。将二维蛋白质印迹法（2－D WB）结果与另外1张2－DE蛋白图谱进行对比，将显示瓜氨酸免疫信号的蛋白从第2张2－DE凝胶中收集并进行质谱鉴定，以确定瓜氨酸蛋白。用免疫共沉淀法验证各肿瘤细胞系中瓜氨酸化蛋白的表达。结果2－DWB和质谱分析结果显示，培养的肿瘤细胞系中存在瓜氨酸化的α－烯醇化酶（ ENO1）、热休克蛋白60（ HSP60）、细胞角蛋白8（KRT8）、微管蛋白β（TUBB）、T细胞受体β链（TCRβ）、波形蛋白和蛋白质二硫化物异构酶。免疫共沉淀法分析结果显示，肿瘤细胞中有ENO1、HSP60、KRT8和TUBB的瓜氨酸化和表达。结论肿瘤细胞系中存在ENO1、HSP60、KRT8和TUBB被瓜氨酸化的现象。

关键词：肿瘤蛋白质瓜氨酸化二维蛋白质印迹法

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试论和谐文化的构建——从文化冲突看构建和谐文化的必要性

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齐齐哈尔师范高等专科学校学报 2007年第6期 13-14页

作者：刘杨常晓天长安大学人文社会科学学院西安710054

文化冲突是影响文化和谐的重要因素,它主要表现为传统文化与现代文化、本土文化与西方文化的冲突。文化冲突具有深层次的历史原因和社会原因,深化文化体制改革、借鉴吸收其他文化优秀成果、协调利益群体关系、强化整体意识等是解决文化... 详细信息

文化冲突是影响文化和谐的重要因素,它主要表现为传统文化与现代文化、本土文化与西方文化的冲突。文化冲突具有深层次的历史原因和社会原因,深化文化体制改革、借鉴吸收其他文化优秀成果、协调利益群体关系、强化整体意识等是解决文化冲突,进而促进和谐文化构建的有效手段。

关键词：文化冲突和谐文化构建

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78c治疗胶原诱导性关节炎并促进类风湿关节炎免疫平衡恢复的实验研究

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中华风湿病学杂志 2023年第4期27卷 217-224,I0002页

作者：张小钰王洪星房克华常晓天青岛大学附属医院医学研究中心青岛266000 山东大学齐鲁医院检验科济南250012

目的:探索78c对RA和小鼠胶原诱导性关节炎(CIA)的治疗及作用机制。方法:用78c处理小鼠CIA模型和人CD38^(+)NK细胞,用流式细胞术检测小鼠外周血和细胞培养液中各细胞因子浓度及各淋巴细胞亚型。用Miltenyi细胞分离试剂盒从健康志愿者外... 详细信息

目的:探索78c对RA和小鼠胶原诱导性关节炎(CIA)的治疗及作用机制。方法:用78c处理小鼠CIA模型和人CD38^(+)NK细胞,用流式细胞术检测小鼠外周血和细胞培养液中各细胞因子浓度及各淋巴细胞亚型。用Miltenyi细胞分离试剂盒从健康志愿者外周血单核细胞中分离CD4^(+)T细胞和NK细胞,然后用Miltenyi CD38微珠从NK细胞中富集CD38^(+)NK细胞,最后将CD38^(+)NK细胞与CD4^(+)T细胞在Transwell中共培养。单因素方差分析进行多组间显著性差异分析,LSD法进行2组间比较,Pearson法进行秩相关分析。结果:78c注射第21天后,与CIA小鼠[(4.70±0.56)mm]相比,78c明显抑制小鼠CIA足趾厚度[(4.07±0.20)mm](t=5.07,P<0.001);其外周血中白细胞、中性粒细胞、血小板、IFN-γ、IL-6及TNF-α水平明显降低(t=6.10,P<0.001;t=4.00,P=0.002;t=3.09,P=0.012;t=2.31,P=0.043;t=3.58,P=0.005;t=2.68,P=0.002)。CD38^(+)NK细胞的比例从[(3.9±0.9)%]降低到[(2.4±0.3)%](t=2.49,P=0.032),调节性T细胞(Treg)比例从[(0.81±0.33)%]升高到[(1.41±0.26)%](t=2.74,P=0.021),IL-10浓度也从[(99±37)pg/ml]升高到[(199±9)pg/ml](t=2.76,P=0.020)。与CD38^(+)NK细胞共培养后的CD4^(+)T细胞相比,和78c预处理的CD38^(+)NK细胞共培养后CD4^(+)T细胞中Treg比例从[(0.52±0.04)%]上升到[(0.69±0.08)%](t=3.33,P=0.029),辅助性T细胞(Th)17/Treg比值从(4.44±0.26)下降到(2.59±0.64)(t=4.76,P=0.009),Thl/Th2的比值从(14.78+1.58)下降到(8.12±1.26)(t=5.70,P=0.005)。结论:78c可以通过降低CD38^(+)NK细胞比例提升CD4^(+)T细胞分化Treg的能力,恢复免疫平衡和缓解关节炎症,可能是RA潜在的治疗药物。

关键词：关节炎,实验性关节炎,类风湿抗原,CD38 78c

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筛选类风湿关节炎中糖代谢关键基因的探讨

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山东大学学报（医学版） 2016年第3期54卷 30-35,40页

作者：赵琰郑亚冰闫新峰张虎常晓天山东大学医学院山东济南250012 山东大学附属千佛山医院中心实验室山东济南250014 山东大学附属千佛山医院骨科山东济南250014

目的探讨糖代谢关键酶在类风湿关节炎(RA)中的表达,进一步探讨糖代谢与RA的相关性。方法取牛Ⅱ型胶原诱导大鼠(CIA组)和正常大鼠(NCR组)膝关节滑膜组织,提取总RNA,采用Rat Glucose Metabolism RT2ProfilerTMPCR Array筛选表达不一致基因... 详细信息

目的探讨糖代谢关键酶在类风湿关节炎(RA)中的表达,进一步探讨糖代谢与RA的相关性。方法取牛Ⅱ型胶原诱导大鼠(CIA组)和正常大鼠(NCR组)膝关节滑膜组织,提取总RNA,采用Rat Glucose Metabolism RT2ProfilerTMPCR Array筛选表达不一致基因;采用RT-PCR法对CIA组和NCR组进行mRNA水平的检测,采用RT-PCR法和Western blotting法检测RA组和骨关节炎组(OA组)滑膜组织中基因mRNA水平和蛋白水平的表达。收集RA血清(RAB组)和正常献血者血清(NCB组),采用ELISA法检测血清中的表达水平。结果 PCR Array检测显示,CIA组烯醇化酶(ENO1)、己糖激酶2(HK2)、磷酸甘油酸激酶-1(PGK1)较NCR组表达上调(P<0.05),磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶-1(PCK1)和丙酮酸脱氢酶激酶-4(PDK4)表达下调(P<0.05);RT-PCR法和Western blotting法检测显示,RA组与OA组相比,ENO1和PGK1表达上调(P<0.05),ELISA法检测结果显示,RAB组与NCB组相比,PGK1表达升高(P<0.05)。结论牛Ⅱ型胶原诱导大鼠和RA滑膜组织中糖代谢关键酶ENO1和PGK1表达增高,RA血液中PGK1表达增加,均提示RA中糖代谢活动增强,导致相关基因的表达异常。

关键词：葡萄糖代谢类风湿关节炎胶原诱导型关节炎磷酸甘油酸酯激1 烯醇化酶α

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雌激素及顺铂对卵巢癌细胞A2780PADI4的表达及其细胞增殖的影响

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山东大学学报（医学版） 2014年第12期52卷 30-34,40页

作者：周静郑亚冰闫莉常晓天赵珊荣风年山东大学医学院山东济南250012 山东大学附属千佛山医院妇产科山东济南250014

目的探讨雌激素及顺铂对卵巢癌细胞A2780中肽酰基精氨酸脱亚胺酶4(PADI4)表达的作用及其对癌细胞增殖的影响。方法在培养的卵巢癌细胞系A2780细胞中加入不同浓度17β-雌激素作用96 h后(10-12、10-10、10-8、10-6、10-4mmol/L),采用实时... 详细信息

目的探讨雌激素及顺铂对卵巢癌细胞A2780中肽酰基精氨酸脱亚胺酶4(PADI4)表达的作用及其对癌细胞增殖的影响。方法在培养的卵巢癌细胞系A2780细胞中加入不同浓度17β-雌激素作用96 h后(10-12、10-10、10-8、10-6、10-4mmol/L),采用实时定量PCR及Western Blotting检测PADI4表达,并用CCK-8试剂盒检测细胞增殖,选取PADI4的表达变化最明显的雌激素浓度,将A2780细胞分为空白对照组、雌激素组、顺铂组、雌激素加顺铂组(联合组),采用上述方法检测各组PADI4的表达和细胞的增殖情况。结果 1雌激素作用96 h后PADI4表达及细胞增殖随雌激素浓度升高而逐渐降低,但当雌激素浓度升至10-4mmol/L时PADI4表达及细胞增殖率开始升高。2与空白对照组比,联合组和顺铂组培养96 h后PADI4表达均明显降低,且联合组细胞增殖率较雌激素组低。结论雌激素可随浓度不同调控卵巢癌细胞A2780中PADI4的表达和细胞增殖;雌激素对卵巢癌细胞增殖的影响可能与PADI4表达有关。

关键词：卵巢肿瘤肽酰基精氨酸脱亚胺酶 4 细胞增殖 17β-雌激素顺铂

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筛选TXNDC5与胰岛素相关信号通路关键基因的探讨

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山东大学学报（医学版） 2017年第3期55卷 88-93页

作者：李健徐冰闫新峰徐万菊常晓天山东大学医学院山东济南250012 山东大学附属千佛山医院医学研究中心山东济南250014 山东大学附属千佛山医院骨科山东济南250014 山东大学附属千佛山医院检验科山东济南250014

目的旨在探讨硫氧还蛋白5(TXNDC5)是否通过胰岛素抵抗或胰岛素信号通路参与类风湿关节炎(RA)发病过程。方法分离培养RA滑膜细胞(RASFs),用小干扰RNA抑制其TXNDC5的表达,提取各样本总RNA组成样本池,采用胰岛素抵抗PCR Array和胰岛素信号... 详细信息

目的旨在探讨硫氧还蛋白5(TXNDC5)是否通过胰岛素抵抗或胰岛素信号通路参与类风湿关节炎(RA)发病过程。方法分离培养RA滑膜细胞(RASFs),用小干扰RNA抑制其TXNDC5的表达,提取各样本总RNA组成样本池,采用胰岛素抵抗PCR Array和胰岛素信号通路PCR Array检测相关基因的表达,采用RT-PCR法和ELISA法分别检测相关基因mRNA和蛋白水平的表达。结果 RASFs中TXNDC5表达被抑制后,PCR Array检测IGF-1、PCK1、SLC2A4、IL1R1和胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP1)的表达明显发生变化。经验证,IGFBP1在mRNA和蛋白水平均显著增高,差异有统计学意义(P均<0.001);而IGF-1、PCK1、SLC2A4和IL1R1的表达差异无统计学意义(P=0.792 7,P=0.713 0,P=0.452 9,P=0.354 2)。胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP3)在RASFs中的表达无明显变化(P=0.511 5)。结论在RASFs中,TXNDC5可能通过抑制胰岛素信号通路IGFBP1表达参与RA病变过程。

关键词：硫氧还蛋白5 胰岛素样生长因子结合蛋白1 类风湿关节炎胰岛素抵抗胰岛素信号通路

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