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Self-sustainable Catalytic Nucleic Acid Circuit Powered Hybrid CRISPR-Cas Systems for Point-of-Care Diagnosis of Circadian Clock Gene from Cell Lysates

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Journal of Analysis and Testing 2025年第01期 1-11页

作者： Zhiyuan Feng Ran liu Enming Yang Rui lian Jingjing Zhang State Key Laboratory of Analytical Chemistry for life Science School of Chemistry and Chemical Engineering Chemistry and Biomedicine Innovation Center (ChemBIC)Nanjing University

The CRISPR-Cas13 systems have opened a new avenue for RNA detection due to their exceptional programmable collateral activity against ssRNA. However, most high-performance Cas13-based RNA sensors still suffer from some drawbacks because of the tradeoffs between readout device complexity and analytical sensitivity, which can limit their viability at the point-of-care(POC). To overcome these shortcomings, we herein report a novel target-responsive POC platform for translating RNA detection into a glucose test. Specifically, this platform combines the advantages of three techniques: a hybrid Cas13a/Cas12a system for both RNA recognition with single-base resolution and cascade enzymatic amplification, a self-sustainable catalytic nucleic acid circuit(SCC) with embedded uracil-base and poly-T bulges for Cas13a-and Cas12amediated collateral cleavage, respectively, and a portable glucose meter(PGM) for simple signal readout. The incorporation of an engineered ssDNA–invertase conjugate in SCC led to RNA-to-glucose signal transduction through the hydrolysis of sucrose to glucose. By targeting a 20-nt conserved region of BMAL1 mRNA(mBMAL1), a key circadian clock gene, we demonstrate that SCC can serve as an excellent CRISPR reporter, enabling the direct detection of unamplified mBMAL1 as low as 0.864 fM concurrently with good discrimination ability for single-base mismatch. More importantly, this integrated platform was successfully applied for POC diagnosis of mBMAL1 from different cell lysates, with results that strongly correlate with RT-PCR. Given its wide adaptability, we anticipate that such a CRISPR-SCC system can be easily modified to quantify other RNA biomarkers associated with circadian rhythm.

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失去的十年:日本应对广场协议的政策效应研究

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中山大学学报(社会科学版) 2025年第1期65卷 185-196页

作者：连玉君李鑫中山大学岭南学院广州510275 云南民族大学经济与管理学院昆明650500

在贸易摩擦中,被遏制方如何应对是各国政策制定者和学者关注的焦点。本文采用合成控制法,在“反事实”框架下讨论日本应对“广场协议”的政策效应。研究发现,日本政府在“广场协议”签订后实施的产业转移和产业升级政策具有积极作用,其... 详细信息

在贸易摩擦中,被遏制方如何应对是各国政策制定者和学者关注的焦点。本文采用合成控制法,在“反事实”框架下讨论日本应对“广场协议”的政策效应。研究发现,日本政府在“广场协议”签订后实施的产业转移和产业升级政策具有积极作用,其人均GDP处理效应由1987年的188.48国际元增加到1991年的2302.95国际元。然而,在此过程中,过度金融自由化和货币政策不稳定,导致资产价格剧烈波动,金融市场缺乏稳定性。这些变化导致传统主银行制度部分失效,并进而阻碍了经济结构的转型升级,表现为人均GDP处理效应自1992年开始不断下降至1996年的787.16国际元。以史为鉴,我们认为中国的应对措施——逐步释放金融市场风险,具有合理性。

关键词：广场协议合成控制法金融市场稳定中美贸易摩擦

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Comparison and Suggestions on the Registration and Regulation of Biosimilars between China and the USA

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Asian Journal of Social Pharmacy 2025年第1期20卷 28-37页

作者： Cao Yizhi lian Guiyu School of Business Administration Shenyang Pharmaceutical UniversityShenyang 110016China

Objective To put forward some suggestions for improving the registration and regulation,the efficiency of evaluation,and approval of biosimilar in China so as to promote the development of biopharmaceutical industry and increase the accessibility of therapeutic drugs in *** literature related to the registration and regulation,evaluation and approval of biosimilars were sorted out to analyze the differences in China and the *** and Conclusion Based on the analysis of the current situation of registration and regulation of biosimilars between China and the USA,it is suggested to improve the registration and regulation of biosimilars in China from the following four aspects:Establishing a biosimilar regulatory department,expanding the professional evaluation personnel,scientifically simplifying the registration and approval procedures,and constantly refining the types of communication meetings.

关键词： biosimilar registration and regulation review approve

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两种清洗机对手术超声刀清洗效果对比研究

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中国医疗器械信息 2023年第21期29卷 165-167页

作者：林雅吴珠芳李小莲福建省肿瘤医院福建医科大学附属肿瘤医院福建福州350014

目的:对比蒸汽清洗机和减压沸腾式清洗机在手术超声刀清洗中的应用效果。方法:随机将使用后的160把超声刀分为蒸汽清洗机组(简称,蒸汽组)和减压沸腾清洗机组(简称,减压组)各80把,统计8个工作日清洗结果。结果:清洗合格率比较,减压组带... 详细信息

目的:对比蒸汽清洗机和减压沸腾式清洗机在手术超声刀清洗中的应用效果。方法:随机将使用后的160把超声刀分为蒸汽清洗机组(简称,蒸汽组)和减压沸腾清洗机组(简称,减压组)各80把,统计8个工作日清洗结果。结果:清洗合格率比较,减压组带光源放大镜目测合格率、隐血试验阴性率显著高于蒸汽组(P<0.01,P<0.01)。每组单人单批量各清洗10把超声刀人工耗时比较,减压组人工耗时显著低于蒸汽组(P<0.01)。结论:减压沸腾式清洗机清洗超声刀能提高清洗质量和清洗效率,减少清洗人工耗时,节约人力成本。

关键词：手术超声刀清洗效果减压沸腾式清洗机蒸汽清洗机手工清洗

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谷子SiSAP基因家族的鉴定与表达分析

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生物技术通报 2025年第1期41卷 143-156页

作者：李禹欣李苗杜晓芬韩康妮连世超王军山西农业大学谷子研究所山西省后稷实验室长治046011 山西农业大学农学院太谷030801

【目的】胁迫相关蛋白(stress associated protein, SAP)是一类具有A20/AN1锌指结构域的蛋白,在植物抵御非生物胁迫方面发挥重要作用,目前,谷子SiSAP基因家族的功能尚不明晰。对SiSAP基因家族进行鉴定和表达模式分析,为探究SiSAP基因的... 详细信息

【目的】胁迫相关蛋白(stress associated protein, SAP)是一类具有A20/AN1锌指结构域的蛋白,在植物抵御非生物胁迫方面发挥重要作用,目前,谷子SiSAP基因家族的功能尚不明晰。对SiSAP基因家族进行鉴定和表达模式分析,为探究SiSAP基因的功能奠定基础。【方法】通过生物信息学方法对该基因家族进行鉴定及分析,经实时荧光定量PCR(RT-qPCR)验证SiSAP基因家族成员在非生物胁迫和激素处理下的表达模式。【结果】谷子SiSAP基因家族有17个成员,不均匀分布在6条染色体上,15个成员没有内含子,另外2个成员均含有1个内含子;氨基酸序列长度为150-291 aa,分子量介于15.05-32.12 kD,等电点为6.62-9.36;SiSAP基因家族成员与单子叶植物的亲缘关系更近;所有成员启动子序列均含有逆境胁迫和激素响应相关作用元件,以及ERF、Dof、C2H2等转录因子结合位点;转录组数据显示,SiSAP1、SiSAP2、SiSAP3、SiSAP4、SiSAP6、SiSAP7、SiSAP8、SiSAP11和SiSAP14等9个基因在各个组织器官中都有表达,其余8个基因几乎不表达;RT-qPCR结果证实,以上9个基因对低温、高盐和干旱3种非生物胁迫,以及脱落酸、茉莉酸甲酯、生长素和赤霉素4种激素处理的响应模式不同。【结论】SiSAP基因家族可能参与谷子抗旱、耐盐和耐低温胁迫的应答。

关键词：谷子 SAP基因家族非生物胁迫激素响应表达分析

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脂肪胺基吲哚-2,3-二腈类DNA嵌入剂合成及抗肿瘤活性

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化学工程 2022年第8期50卷 56-61页

作者：解璐同张冠一崔海超张盛睿陈学惠李晗旭李晓莲大连理工大学化工学院精细化工国家重点实验室辽宁大连116024

以研究含有吲哚-二腈结构的良好抗肿瘤效果的DNA嵌入剂为目标,采用苯胺为原料经过肟化、取代、缩合反应合成了6个新结构脂肪胺基吲哚-2,3-二腈类DNA嵌入剂。目标化合物经过^(1)HNMR,^(13)CNMR和HRMS确认结构。通过紫外-可见吸收光谱、... 详细信息

以研究含有吲哚-二腈结构的良好抗肿瘤效果的DNA嵌入剂为目标,采用苯胺为原料经过肟化、取代、缩合反应合成了6个新结构脂肪胺基吲哚-2,3-二腈类DNA嵌入剂。目标化合物经过^(1)HNMR,^(13)CNMR和HRMS确认结构。通过紫外-可见吸收光谱、荧光光谱、圆二色光谱、黏度测试评价了化合物与小牛胸腺DNA的相互作用。由结果可知,所有目标化合物对DNA均有明显的嵌入作用,其中化合物Ⅳc和Ⅳf的嵌入能力最好。体外抗肿瘤活性测试表明目标化合物对小鼠乳腺癌细胞4T1、小鼠结肠癌细胞CT26、小鼠黑色素瘤细胞B16F10均有明显的抑制活性,其半数抑制浓度(IC_(50))最低可达到8.23μmol/L。对比阳性对照药5-氟尿嘧啶(IC_(50)=0.04μmol/L),化合物Ⅳc、Ⅳf对小鼠免疫细胞RAW264.7没有毒性(IC_(50)>100μmol/L),表现出更高的生物安全性。

关键词：吲哚双氰基 DNA嵌入合成抗肿瘤活性

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绿色荧光蛋白滑膜间充质干细胞抑制大鼠骨关节炎的实验研究

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中国医科大学学报 2016年第10期45卷 913-917页

作者：唐涛张继虹孙先润李治王波刘颖李亚国肖壮李连娥李晓云昆明理工大学医学院康复医学教研室昆明650050 云南省第一人民医院康复医学科昆明650032

目的探讨关节腔内注射绿色荧光蛋白(GFP)滑膜间充质干细胞防治骨关节炎的有效性。方法增殖培养GFP滑膜间充质干细胞至第3代,收集并调整细胞浓度至1.0×108/m L后行关节腔内细胞移植。15只SD大鼠经改良Hulth手术造骨关节炎模型,同一大鼠... 详细信息

目的探讨关节腔内注射绿色荧光蛋白(GFP)滑膜间充质干细胞防治骨关节炎的有效性。方法增殖培养GFP滑膜间充质干细胞至第3代,收集并调整细胞浓度至1.0×108/m L后行关节腔内细胞移植。15只SD大鼠经改良Hulth手术造骨关节炎模型,同一大鼠左腿为对照组,右腿为治疗组。于1周、2周时麻醉状态下CT扫描后处死大鼠,取全膝关节置于4%多聚甲醛液固定、制片,番红-O染色后进行病理图像系统分析,经Mankin′s评分,分析评价骨关节炎中2组关节软骨破坏进展。结果 CT显示治疗组较对照组骨赘和软骨下硬化减少,关节软骨破坏轻。第2周时胫骨关节软骨Mankin′s评分对照组为10.07±0.63,治疗组为3.56±0.21,2组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论关节腔内注射GFP滑膜间充质干细胞能有效抑制关节软骨的破坏进展。

关键词：骨关节炎关节软骨绿色荧光蛋白滑膜间充质干细胞移植

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船用柴油机曲轴箱防爆阀的设计研究

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内燃机与配件 2022年第24期 58-60页

作者：李增华李孝连周秀亚沈莉中船动力研究院有限公司上海201208 上海海洋动力工程技术研究中心上海201208

防爆阀作为船用柴油机的重要安全保护装置,具有释放曲轴箱压力、阻止爆炸火焰窜出造成进一步损害的功能,对船用柴油机的安全运行尤为重要。文章根据美国消防协会标准NFPA-68爆炸泄压指南和中国船级社(CCS)规范,结合某型船用柴油机设计,... 详细信息

防爆阀作为船用柴油机的重要安全保护装置,具有释放曲轴箱压力、阻止爆炸火焰窜出造成进一步损害的功能,对船用柴油机的安全运行尤为重要。文章根据美国消防协会标准NFPA-68爆炸泄压指南和中国船级社(CCS)规范,结合某型船用柴油机设计,介绍了曲轴箱防爆阀通流面积的理论计算,防爆阀的设计工程应用,为防爆阀的选型设计提供借鉴。

关键词：船用柴油机曲轴箱防爆阀通流面积

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新生儿脐带再次结扎法在新生儿脐部护理中的效果

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中外医学研究 2014年第12期12卷 91-92页

作者：罗运红谢淑玲李肖莲东莞市东坑医院广东东莞523451

目的：分析新生儿脐带再次结扎法在新生儿脐部护理中的效果。方法：选取了两年内在笔者所在医院出生的新生儿,累计共536例,采用随机数字表法分为两组,每组268例。对照组在娩出后给予传统方式结扎脐带,即气门芯式,然后对脐部进行常规护... 详细信息

目的：分析新生儿脐带再次结扎法在新生儿脐部护理中的效果。方法：选取了两年内在笔者所在医院出生的新生儿,累计共536例,采用随机数字表法分为两组,每组268例。对照组在娩出后给予传统方式结扎脐带,即气门芯式,然后对脐部进行常规护理。观察组则在上述结扎基础上,待新生儿娩出24～38 h后,在原来结扎处再次进行结扎剪去脐带残端。结果：观察组脐残端出血率比对照组低（P〈0.05）,观察组脐带干燥时间小于48 h和脱落时间小于7 d例数多于对照组,脐部感染以及血肿的发生率均比对照组少（P〈0.01）,两组肉芽肿的发生水平相当（P＞0.05）。结论：对于新生儿脐带的处理,在气门芯结扎法基础上进行再次结扎可以促使脐带干燥、脱落,而且脐部并发症也有很大程度的改善,说明该方法切实可行。

关键词：脐带残端新生儿护理气门芯结扎法

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基于三次样条插值的船舶邦戎曲线计算

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山东交通学院学报 2011年第1期19卷 64-67页

作者：王建勋胡以怀李孝廉上海海事大学商船学院上海200135

以船舶型值表为基础,利用三次样条插值函数近似船体曲线,然后用Simpson积分法得出船舶邦戎曲线,提高了邦戎曲线的精度。详细介绍了该方法的计算机算法,并用C#高级编程语言进行了编程计算。

关键词：邦戎曲线三次样条曲线三次样条插值

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