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Horticulture Research 2023年第2期10卷 241-251页

作者： Yuetong Yu Yan liu Gangqiang Dong JinZhu Jiang Liang Leng xianju liu Jun Zhang An liu Sha Chen Key Laboratory of Beijing for Identification and Safety Evaluation of Chinese Medicine Institute of Chinese Materia MedicaChina Academy of Chinese Medical SciencesNo.16NanxiaojieDongzhimenneiBeijing 100700China Amway(China)Botanical R&D Centre Wuxi 214115China

Lotus(Nelumbo nucifera),an ancient aquatic plant,possesses a unique pharmacological activity that is primarily contributed by benzylisoquinoline alkaloids(BIAs).However,only few genes and enzymes involved in BIA biosynthesis in *** have been isolated and *** the present study we identified the regiopromiscuity of an O-methyltransferase,designated NnOMT6,isolated from ***;NnOMT6 was found to catalyze the methylation of monobenzylisoquinoline 6-O/7-O,aporphine skeleton 6-O,phenylpropanoid 3-O,and protoberberine *** further probed the key residues affecting NnOMT6 activity via molecular docking and molecular dynamics *** using site-directed mutagenesis revealed that residues D316,N130,L135,N176A,D269,and E328 were critical for BIA O-methyltransferase activities;furthermore,N323A,a mutant of NnOMT6,demonstrated a substantial increase in catalytic efficiency for BIAs and a broader acceptor scope compared with wild-type *** the best of our knowledge,this is the first study to report the O-methyltransferase activity of an aporphine skeleton without benzyl moiety substitutions in *** study findings provide biocatalysts for the semisynthesis of related medical compounds and give insights into protein engineering to strengthen O-methyltransferase activity in plants.

关键词： benzyl residues skeleton

Basic leucine zipper gene VvbZIP61 is expressed at a quantitative trait locus for high monoterpene content in grape berries

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Horticulture Research 2023年第9期10卷 55-67页

作者： Yuyu Zhang Cuixia liu xianju liu Zemin Wang Yi Wang Gan-yuan Zhong Shaohua Li Zhanwu Dai Zhenchang Liang Peige Fan Beijing Key Laboratory of Grape Science and Enology and CAS Key Laboratory of Plant ResourcesInstitute of BotanyChinese Academy of SciencesBeijing 100093China University of Chinese Academy of Sciences Beijing 100049China Centre for Special Economic Plant Studies Guangxi Institute of BotanyGuangxi Zhuang Autonomous Region and Chinese Academy of SciencesGuilin 541006GuangxiChina College of Life Science and Technology Gansu Agricultural UniversityLanzhou 730070China Grape Genetics Research Unit USDA-ARSGeneva 14456USA

The widely appreciated muscat flavor of grapes and wine is mainly attributable to the monoterpenes that accumulate in ripe grape *** identify quantitative trait loci(QTL)for grape berry monoterpene content,an F1 mapping population was constructed by a cross between two grapevine genotypes,one with neutral aroma berries(cv.‘Beifeng’)and the other with a pronounced muscat aroma(elite Vitis vinifera line‘3–34’).A high-density genetic linkage map spanning 1563.7 cM was constructed using 3332 SNP markers that were assigned to 19 linkage *** were extracted from the berry of the F1 progeny,then identified and quantified by gas chromatography–mass *** stable QTLs associated with the amounts of 11 monoterpenes in berries were thus *** parallel,the levels of RNA in berries from 34 diverse cultivars were estimated by RNA sequencing and compared to the monoterpene content of the *** expression of five genes mapping to stable QTLs correlated well with the monoterpene content of *** genes,including the basic leucine zipper VvbZIP61 gene on chromosome 12,are therefore considered as potentially being involved in monoterpene *** of VvbZIP61 in Vitis amurensis callus through Agrobacterium-mediated transformation significantly increased the accumulation of several monoterpenes in the callus,including nerol,linalool,geranial,geraniol,β-myrcene,and *** is hypothesized that VvbZIP61 expression acts to increase muscat flavor in *** results advance our understanding of the genetic control of monoterpene biosynthesis in grapes and provide important information for the marker-assisted selection of aroma compounds in grape breeding.

关键词： content linkage neutral

Serological detection of Sendai virus by western blot in laboratory rats

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Serological detection of Sendai virus by western blot in lab...

葡萄辅助因子VvVQ10负调控白藜芦醇生物合成分子机理研究

第十届中国实验动物科学年会

作者： Zhiguang Xiang Wei Tong Yuhan Li xianju liu Lifang Zhang Yunbo liu Qiang Wei Institute of Laboratory Animal Science Chinese Academy of Medical Science

Objective Sendai virus(SeV) infection is strictly controlled in laboratory *** serological detection methods including ELISA and immunofluorescence Assay(IFA) are used in monitoring SeV *** some extent,the uncertainty of ELISA results and the subjective IFA judgment may affect the diagnoses of the SeV *** the current study,a serological immune-blot method was developed to analyze the SeV infection in *** The SeV antigens were harvested from SeV infected BHK-21 cells by supersonic lysis and were separated on an SDS-PAGE,and then transferred to an NC-membrane.1:100 diluted rat serum samples were incubated with the ***-anti-Rat antibody was used to detect the specific *** Two specific bands were shown in positive samples but no in *** indeterminate samples by IFA and ELISA showed the weak SeV specific *** the western blot(WB) serological analysis shows its possible application in the monitoring of rat SeV infection.

关键词： Sendai virus western blot

来源： cnki会议评论

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中外葡萄与葡萄酒 2023年第3期 18-23页

作者：刘先菊刘安姜金铸中国中医科学院中药研究所/中药鉴定与安全性评估北京市重点实验室北京100700

为探究葡萄辅助因子VvVQ10在调控白藜芦醇生物合成中的作用机制,通过分析已发表转录组数据、叶片瞬时遗传转化及酵母双杂交等方法进行作用机制解析。结果表明,葡萄VQ家族成员中VvVQ10在正常生长状况下呈高表达,紫外光处理呈上调表达,而... 详细信息

为探究葡萄辅助因子VvVQ10在调控白藜芦醇生物合成中的作用机制,通过分析已发表转录组数据、叶片瞬时遗传转化及酵母双杂交等方法进行作用机制解析。结果表明,葡萄VQ家族成员中VvVQ10在正常生长状况下呈高表达,紫外光处理呈上调表达,而伤害与霜霉菌侵染处理则显著下调;在山葡萄叶片中瞬时沉默VvVQ10,白藜芦醇及其糖苷(虎杖苷)含量显著升高;酵母双杂交分析表明,VvVQ10蛋白可与VvWRKY8蛋白互作,且结合位点在VvWRKY8的N段或包含DNA结合区的C段。以上结果表明,VvVQ10可通过与VvWRKY8蛋白互作的方式负调控葡萄白藜芦醇的生物合成。

关键词：葡萄辅助因子白藜芦醇 VQ蛋白负调控

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习作教学与评改一体化之策略

家长 2020年第25期 162-163页

作者：刘先菊重庆市沙坪坝区烈士墓小学

习作教学是语文教学中的重要组成部分,良好的作文评改活动是提升学生习作能力的重要手段,新课改非常重视小学生评价能力与自我反思能力的形成与发展,所以教师应革新作文评改活动方式,使习作教学与评改活动有机结合,形成一体化。

关键词：练笔设计习作教学评改方式

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丹参萜类合酶基因家族的鉴定和表达模式分析

中国实验方剂学杂志 2024年第3期30卷 142-151页

作者：高颖姜金铸高营营杨洪涛刘先菊刘安中国中医科学院中药研究所北京100700 中国科学院植物研究所北京100093 中国化学品安全协会北京100013

目的:利用生物信息学方法从基因组层面对丹参萜类合酶(SmTPS)基因家族成员进行全面鉴定和功能预测。方法:从国家基因组科学数据中心(NGDC)、美国国家生物技术信息中心(NCBI)、拟南芥信息资源中心(TAIR)和番茄功能基因组学数据库(TFGD)... 详细信息

目的:利用生物信息学方法从基因组层面对丹参萜类合酶(SmTPS)基因家族成员进行全面鉴定和功能预测。方法:从国家基因组科学数据中心(NGDC)、美国国家生物技术信息中心(NCBI)、拟南芥信息资源中心(TAIR)和番茄功能基因组学数据库(TFGD)分别获取丹参、拟南芥和番茄基因组与转录组数据。借助Perl语言、TBtools等工具对SmTPS进行全基因组鉴定与生物信息学分析。结果:共鉴定出52个TPS成员分布在丹参的8条染色体上;编码氨基酸数目在207~822 aa;等电点在4.76~9.16,分子质量为24.11~94.81 kDa,所有成员均为亲水蛋白。基因结构分析表明不同亚族成员之间内含子数差异明显,72.6%TPS-a、TPS-b、TPS-g亚族成员为6,88.9%TPS-c、TPS-e/f亚族成员>10;蛋白motif相对保守。顺式作用元件分析表明,SmTPSs启动子区均含有大量光响应元件,大多数SmTPSs启动子区含有激素响应元件。基因表达模式分析显示SmTPS家族成员存在组织表达特异性,24个基因响应外源茉莉酸甲酯。结论:基于已发表丹参基因组,鉴定得到52个SmTPS家族成员,结合系统进化与表达模式对其功能进行了预测。该文为丹参中萜类化合物生物合成及调控机制全面解析提供了参考信息。

关键词：丹参萜类合酶(TPS) 生物信息学功能分析基因家族

金匮肾气丸对2型糖尿病模型大鼠脂肪代谢及胰岛素抵抗的影响

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中医药导报 2011年第11期17卷 22-25页

作者：刘仙菊胡方林湖南中医药大学湖南长沙410208

目的:探讨金匮肾气丸对2型糖尿病胰岛素抵抗大鼠脂肪代谢和胰岛素敏感性的影响。方法:40只SD大鼠采用高脂高糖饲料喂养3周,小剂量链脲佐菌素(STZ)腹腔注射诱导2型糖尿病胰岛素抵抗大鼠,随机分为模型组、二甲双胍组、肾气丸高剂量组、肾... 详细信息

目的:探讨金匮肾气丸对2型糖尿病胰岛素抵抗大鼠脂肪代谢和胰岛素敏感性的影响。方法:40只SD大鼠采用高脂高糖饲料喂养3周,小剂量链脲佐菌素(STZ)腹腔注射诱导2型糖尿病胰岛素抵抗大鼠,随机分为模型组、二甲双胍组、肾气丸高剂量组、肾气丸低剂量组,每组10只。另设正常组10只,饲以普通饲料。给药6周后处死大鼠,末次给药后禁食12 h,测体重及体长,检测空腹血糖、血清胰岛素含量、血脂,计算体重指数(BMI),胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)和胰岛素敏感指数(ISI)。结果:肾气丸高、低剂量组TG、LDL-C较模型组明显降低(P<0.05),肾气丸高剂量组CHO较模型组明显降低(P<0.01)。与正常组比较,模型组BMI明显增高(P<0.01);与模型组比较,二甲双胍组、高、低剂量组降低,但差异无统计学意义,以高剂量组降低明显。二甲双胍组、肾气丸高、低剂量组FBG、FINS水平较模型组均明显降低(P<0.05,P<0.01),HOMA-IR均明显降低(P<0.01)I,SI有明显升高(P<0.05)。结论:金匮肾气丸可改善大鼠血脂代谢,降低HOMA-IR,提高ISI,增强胰岛素的敏感性。

关键词： 2型糖尿病金匮肾气丸胰岛素抵抗血脂

脱落酸对‘京香玉’葡萄果实单萜物质合成的影响

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园艺学报 2023年第2期50卷 237-249页

作者：王晓晨聂子页刘先菊段伟范培格梁振昌中国科学院植物研究所葡萄科学与酿酒技术北京市重点实验室中国科学院北方资源植物重点实验室中法葡萄与葡萄酒联合实验室北京100093 国家植物园北京100093 中国科学院大学北京101400

为探究脱落酸(Abscisic acid,ABA)对葡萄果实中单萜物质合成的影响,以玫瑰香型鲜食葡萄品种‘京香玉’为试材,在果实始熟前1周和始熟期用300 mg·L^(-1)ABA浸泡果实2次,测定处理后7、14、21、28和35 d果实中游离态单萜化合物含量以及AB... 详细信息

为探究脱落酸(Abscisic acid,ABA)对葡萄果实中单萜物质合成的影响,以玫瑰香型鲜食葡萄品种‘京香玉’为试材,在果实始熟前1周和始熟期用300 mg·L^(-1)ABA浸泡果实2次,测定处理后7、14、21、28和35 d果实中游离态单萜化合物含量以及ABA合成和信号转导通路、单萜合成通路中相关基因的表达量。在果实中共检测到28种单萜类化合物,并随果实的发育成熟不断积累。外源ABA处理的成熟果实中游离态单萜含量比对照提高45.20%。通过实时荧光定量PCR发现,ABA合成基因(VvNCED1、VvGT)在处理后7 d表达量明显高于对照,VvβG1相对表达量在处理后持续上升;ABA信号受体基因VvPYL1、信号转导相关基因VvPP2C2、VvSnRK2.1、VvABI5的转录水平分别在处理后21和35d明显高于对照;单萜合成通路上游关键酶基因(VvDXS2、VvDXS3、VvDXR、VvGPPS)以及单萜合酶基因VvPNLinNer的表达水平在处理后7d明显高于对照。根据以上结果,推测外源ABA处理可增强果实内部ABA信号的转导,进而引起单萜合酶底物水平的提升,加快向单萜类化合物的转变,改善玫瑰香型葡萄的品质。

关键词：葡萄玫瑰香型脱落酸单萜基因表达

肾气丸对2型糖尿病胰岛素抵抗模型大鼠血清瘦素的影响

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山西中医学院学报 2012年第3期13卷 46-48页

作者：胡方林刘仙菊龙玲湖南中医药大学中医学院湖南长沙410208

目的:探讨金匮肾气丸对2型糖尿病胰岛素抵抗大鼠血清瘦素的影响。方法:40只SD大鼠采用高脂高糖饲料喂养3周,小剂量链脲佐菌素(STZ)腹腔注射诱导2型糖尿病胰岛素抵抗大鼠,随机分为模型组、二甲双胍组、肾气丸高剂量组、肾气丸低剂量组4组... 详细信息

目的:探讨金匮肾气丸对2型糖尿病胰岛素抵抗大鼠血清瘦素的影响。方法:40只SD大鼠采用高脂高糖饲料喂养3周,小剂量链脲佐菌素(STZ)腹腔注射诱导2型糖尿病胰岛素抵抗大鼠,随机分为模型组、二甲双胍组、肾气丸高剂量组、肾气丸低剂量组4组,每组10只。另设正常组10只,饲以普通饲料。给药6 w后处死大鼠,末次给药后禁食12 h,检测空腹血糖(FBG)、血清胰岛素(FINS)、血清瘦素(LEP),计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。结果:与正常组比较,模型组空腹血糖、血清胰岛素水平、HOMA-IR、血清瘦素水平均明显增高(P<0.01);与模型组比较,二甲双胍组、肾气丸高、低剂量组空腹血糖、血清胰岛素水平、HOMA-IR、血清瘦素水平均明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论:金匮肾气丸可降低LEP、HOMA-IR,增强胰岛素的敏感性。

关键词： 2型糖尿病金匮肾气丸胰岛素抵抗血脂

埃克替尼对一线化疗失败的晚期食管鳞状细胞癌患者的疗效及安全性研究

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实用临床医药杂志 2022年第13期26卷 105-109页

作者：李豪包夏青刘显菊青海大学附属医院肿瘤内科青海西宁810000

目的探讨表皮生长因子受体-酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKI)埃克替尼对一线化疗失败晚期食管鳞状细胞癌(ESCC)患者的疗效及安全性。方法选取2017年10月—2020年1月青海大学附属医院肿瘤科收治的一线化疗(铂类药物联合紫杉醇或氟尿嘧啶类药物... 详细信息

目的探讨表皮生长因子受体-酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKI)埃克替尼对一线化疗失败晚期食管鳞状细胞癌(ESCC)患者的疗效及安全性。方法选取2017年10月—2020年1月青海大学附属医院肿瘤科收治的一线化疗(铂类药物联合紫杉醇或氟尿嘧啶类药物)失败的58例晚期ESCC患者为研究对象,观察口服埃克替尼治疗的客观缓解率(ORR)、疾病控制率(DCR)及不良反应。采用Kaplan-Meier生存曲线计算患者的无进展生存期(PFS)、总体生存期(OS)。结果58例接受埃克替尼治疗的晚期ESCC患者中,4例(6.9%)达到完全缓解(CR),20例(34.5%)达到部分缓解(PR),21例(36.2%)达到病情稳定(SD),13例(22.4%)出现肿瘤进展(PD);ORR、DCR分别为41.4%(24/58)、77.6%(45/58)。所有患者中位PFS为5.6个月(95%CI:1.6~9.6),中位OS为18.5个月(95%CI:10.2~26.8)。乏力(34.5%)、恶心呕吐(29.3%)及腹泻(20.7%)是患者治疗期间最常见的不良反应。结论埃克替尼对一线化疗失败的晚期ESCC患者具有良好的治疗效果与安全性,或可延缓肿瘤进展,进一步提高患者生存获益。

关键词：食管鳞状细胞癌一线化疗埃克替尼表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂疗效安全性