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Evaluation of Holstein cows with different tongue‑rolling frequencies:stress immunity,rumen environment and general behavioural activity

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Journal of Animal Science and Biotechnology 2023年第6期14卷 2686-2700页

作者： Fuyu Sun Xiaoyang Chen Yongfeng Li guangyong Zhao xianhong gu State Key Laboratory of Animal Nutrition Institute of Animal ScienceChinese Academy of Agricultural SciencesHaidian DistrictNo.2 Yuanmingyuan West RoadBeijingChina. College of Animal Science and Technology China Agricultural UniversityHaidian DistrictNo.2 Yuanmingyuan West RoadBeijingChina. Agricultural Information Institute Chinese Academy of Agriculture SciencesHaidian DistrictNo.12 Zhongguancun South StreetBeijingChina

Background The tongue-rolling behaviour of cows is regarded as an outward sign of stressed animals in a low welfare status.The primary aim of this observational study was to evaluate the association between the frequency of tongue-rolling behaviour and its physiological function.The secondary aim was to explore the relationship between general activities and the frequency of tongue-rolling behaviour of cows.A total of 126 scan sampling behavioural observations were collected over 7 d on 348 Holstein cows with the same lactation stage in the same barn.The tongue-rolling frequency was defined as the number of tongue-rolling observations as a percentage to the total observations per individual cow.According to their tongue-rolling frequency,the cows were grouped into the CON(no tongue-rolling),LT(frequency 1%),MT(frequency 5%),and HT(frequency 10%)groups.Six cows from each group were randomly selected for sampling.Serum samples,rumen fluid,milk yield,and background infor-mation were collected.The general behaviour data during 72 continuous hours of dairy cows,including eating time,rumination time,food time(eating time+rumination time),and lying time,were recorded by the collar sensor.Results Cortisol(P=0.012),γ-hydroxybutyric acid(P=0.008),epinephrine(P=0.030),and dopamine(P=0.047)levels were significantly higher in tongue-rolling groups than in the CON group.Cortisol levels and tongue-rolling frequency had a moderate positive correlation(linearly r=0.363).With the increase in tongue-rolling frequency,the rumen pH decreased first and then increased(P=0.013),comparing to the CON group.HT cows had significantly less food time than CON cows(P=0.035).The frequency of tongue-rolling had a moderate negative relationship with rumination time(r=-0.384)and food time(r=-0.492).Conclusions The tongue-rolling behaviour is considered as a passive coping mechanism,as the stress response in cows with high tongue-rolling frequency increased.Food intake and rumination activities were all closely related to the occurrence of tongue-r

关键词： General activity Holstein cow Rumen fermentation Stress immunity Tongue rolling

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人畜互动对新生犊牛生长性能及血清免疫、应激和生化指标的影响

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动物营养学报 2024年第6期36卷 3781-3788页

作者：方婷婷孙福昱陈晓阳李晨阳顾宪红中国农业科学院北京畜牧兽医研究所动物营养学国家重点实验室北京100193

本试验旨在研究人畜互动对新生犊牛生长性能及血清免疫、应激和生化指标的影响。选取32头初生重相近的健康荷斯坦母犊牛,随机分为4组,每组8个重复,每个重复1头牛。按摩组(HM组)由试验人员用手持续按摩犊牛颈下部(60次/min),刷拭组(HB组... 详细信息

本试验旨在研究人畜互动对新生犊牛生长性能及血清免疫、应激和生化指标的影响。选取32头初生重相近的健康荷斯坦母犊牛,随机分为4组,每组8个重复,每个重复1头牛。按摩组(HM组)由试验人员用手持续按摩犊牛颈下部(60次/min),刷拭组(HB组)由试验人员使用小型体毛刷持续刷拭犊牛颈下部(60次/min),简单互动组(HI组)由试验人员靠近犊牛站立间歇触碰其背部10次(5次/min),对照组(CON组)犊牛不进行人畜互动。试验期为14 d,每天2次(10:00和16:00)人畜互动,每次2 min。试验期间测定犊牛生长性能,在试验第1天和第14天收集血样,检测血清免疫、应激和生化指标。结果表明:1)各组之间犊牛生长性能无显著差异(P>0.05)。2)刷拭组血清免疫球蛋白A(IgA)含量显著高于对照组(P<0.05)。3)相比1日龄,经过14 d人畜互动后,刷拭组、按摩组和对照组犊牛血清IgA含量增加幅度显著高于简单互动组(P<0.05),刷拭组和按摩组犊牛血清白细胞介素-10含量增加幅度显著高于简单互动组(P<0.05),刷拭组、按摩组和简单互动组犊牛血清皮质醇含量下降幅度显著高于对照组(P<0.05)。综上所述,体毛刷刷拭可以增强新生犊牛免疫力,降低新生犊牛的应激水平,提示体毛刷刷拭可能是一种改善新生犊牛健康和福利的有效互动方式。

关键词：人畜互动新生犊牛按摩刷拭

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免疫沉淀联合LC-MS/MS筛选猪肝星状细胞中葡萄糖调节蛋白GRP94的互作蛋白

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中国农业科学 2023年第15期56卷 3020-3031页

作者：王枭鸿邢明杰顾宪红郝月中国农业科学院北京畜牧兽医研究所/畜禽营养与饲养全国重点实验室

【背景】随着规模化、集约化生产程度的不断提高，养殖过程中饲养空间受限、冷热环境不适等因素常使猪处于应激状态。内质网应激（endoplasmic reticulum stress, ERS）可能是最早期的应激反应，与细胞凋亡、代谢等方面有密切联系。肝... 详细信息

【背景】随着规模化、集约化生产程度的不断提高，养殖过程中饲养空间受限、冷热环境不适等因素常使猪处于应激状态。内质网应激（endoplasmic reticulum stress, ERS）可能是最早期的应激反应，与细胞凋亡、代谢等方面有密切联系。肝脏是机体的主要代谢器官，猪养殖过程中由于人工操作（如断奶）、饲料霉变、温度变化和吸入有害气体等因素都会造成猪肝脏的ERS，不仅会造成肝脏损伤，还会引发肝脏的脂肪代谢紊乱和广泛的炎症反应，影响生产性能和繁殖性能。因此，深入探讨缓解ERS的有效措施，有助于减少猪养殖过程中的隐性损失。【目的】利用免疫沉淀联合质谱技术，从猪肝星状细胞中筛选在ERS条件下与葡萄糖调节蛋白94(GRP94)相互作用的细胞蛋白，为进一步探讨GRP94对猪肝星状细胞生物学功能的保护作用机理奠定基础。【方法】首先将GRP94抗体固定在谷胱甘肽亲和磁珠上，用亲和磁珠与ERS条件下或正常条件下猪肝星状细胞总蛋白进行孵育，与GRP94诱饵蛋白结合的蛋白复合物洗脱收集后，进行SDS-PAGE凝胶电泳验证。将验证成功的样品洗脱液进行液相色谱串联质谱（LC-MS/MS）检测，鉴定出正常条件和ERS条件下GRP94的互作蛋白。运用生物信息学在线软件对筛选的互作细胞蛋白进行GO富集、KEGG信号通路注释和蛋白互作网络分析，并对其中的互作蛋白之一波形蛋白（vimentin）进行免疫共沉淀验证。【结果】筛选到正常条件下与GRP94存在互作关系的蛋白146个，ERS条件下与GRP94存在互作关系的蛋白76个，在两种情况下都存在互作关系的蛋白44个。ERS条件下有互作关系的76个蛋白质主要参与凋亡过程负调控、肽段交联、泛素依赖型ERAD(endoplasmic reticulum associated degradation)过程和过氧化氢分解代谢等过程。其中参与凋亡过程负调控的GRP94互作蛋白有albumin、catalase、filament A、heat shock protein family A member 5、keratin 18和prohibin 2，说明GRP94可能与这些蛋白共同发挥抗凋亡作用。除此之外组成中间丝纤维的vimentin蛋白参与多个GO富集的通路，可能与GRP94有重要的互作关系。进一步的免疫共沉淀试验也证实，ERS条件下vimentin和GRP94之间确实存在互作关系。此外，某些ERS条件下特异性表达的GRP94互作蛋白（如peroxiredoxin、death inducer obliterator 1、catalase、glandular kallikrein、pyruvate kinase等）与抗凋亡有密切联系。【结论】ERS条件下，猪肝脏GRP94互作蛋白主要参与抗凋亡、对未折叠蛋白进行折叠和维护细胞内稳态相关的信号通路。该结论为下一步开展GRP94参与肝脏ERS调控机制的研究打下基础。

关键词： ERS 肝细胞 GRP94 互作蛋白猪

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IL-15过表达对猪骨骼肌细胞成肌分化的影响

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中国农业科学 2022年第18期55卷 3652-3663页

作者：邢明杰顾宪红王枭鸿郝月中国农业科学院北京畜牧兽医研究所/动物营养学国家重点实验室

【目的】研究肌肉因子IL-15(interleukin 15)对猪骨骼肌成肌细胞增殖与凋亡的影响，为进一步研究IL-15在动物肌肉品质调控和骨骼肌疾病治疗提供依据。【方法】构建IL-15过表达慢病毒载体GV-492-IL-15，体外无菌分离培养猪骨骼肌卫星细... 详细信息

【目的】研究肌肉因子IL-15(interleukin 15)对猪骨骼肌成肌细胞增殖与凋亡的影响，为进一步研究IL-15在动物肌肉品质调控和骨骼肌疾病治疗提供依据。【方法】构建IL-15过表达慢病毒载体GV-492-IL-15，体外无菌分离培养猪骨骼肌卫星细胞，诱导分化，并通过免疫荧光染色进行成肌细胞验证。将成肌细胞转染IL-15过表达重组慢病毒载体，试验分别设置空白对照组（Control）、转染阴性对照病毒组（IL-15-）和转染GV-492-IL-15(IL-15+)慢病毒试验组（n=3）。培养72 h后，收集细胞和培养上清液。分别采用实时定量PCR(qRT-PCR)和Western Blot技术分析目的基因和蛋白的表达情况，采用ELISA试剂盒分析培养液中IL-15含量，采用CCK-8试剂盒分析成肌细胞活力，采用流式细胞术分析细胞周期和细胞凋亡，采用Western Blot技术检测与细胞凋亡密切相关的caspase-3蛋白表达水平的变化。【结果】（1）经鉴定后的质粒转染293T细胞，细胞内可观察到明显的绿色荧光，经Western Blot检测，可以观察到20 kD附近处有特征条带；（2）分离培养的猪骨骼肌卫星细胞呈梭形或纺锤形，诱导后可分化为呈管状的成肌细胞。将分化后的成肌细胞，进行α-SMA单克隆抗体免疫荧光染色，视野中90%的细胞呈阳性反应，胞浆染成红色，表明细胞为骨骼肌成肌细胞。（3）转染GV-492-IL-15慢病毒后，与对照细胞组相比，成肌细胞内IL-15 mRNA和蛋白相对表达量均极显著升高（P0.05）。CCK-8结果显示，过表达IL-15可增强细胞的增殖能力（P0.05），但细胞晚期凋亡率显著下降（P0.05）。此外，转染IL-15过表达慢病毒可使G1期细胞比例显著下降，S期和G2/M期细胞比例显著升高（P<0.05）。【结论】在正常生理条件下，IL-15是定位在细胞内并发挥作用的，IL-15过表达对猪骨骼肌成肌细胞早期凋亡没有显著影响，但可以抑制其晚期凋亡，并促进细胞增殖。这一研究将为IL-15正向调控猪骨骼肌肌肉品质和治疗相关肌肉疾病提供技术和理论依据。

关键词：猪 IL-15 成肌细胞细胞凋亡细胞周期

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家猫外出应激行为及影响因素

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家畜生态学报 2023年第1期44卷 62-67页

作者：舒航顾宪红崔永坤中国农业科学院北京畜牧兽医研究所北京100193 上海弗艾柏生物有限公司上海200092

为了系统探明家猫外出期间应激行为的发生规律及其影响因素,本研究通过微信小程序筛选到健康且外出时至少发生一种应激行为的家猫222只,并调研了这些猫外出期间10种应激行为的发生情况,采用卡方检验和多因素Logistic回归分析了品种、性... 详细信息

为了系统探明家猫外出期间应激行为的发生规律及其影响因素,本研究通过微信小程序筛选到健康且外出时至少发生一种应激行为的家猫222只,并调研了这些猫外出期间10种应激行为的发生情况,采用卡方检验和多因素Logistic回归分析了品种、性别、绝育状态、年龄、外出场景对外出应激行为发生率的影响。结果表明:家猫外出期间喵喵惊叫、躲藏发生率较高(63.1%,40.5%);相比英短猫、没有绝育猫,田园猫、绝育猫喵喵惊叫发生率分别极显著或显著升高(70.9%vs.47.3%,P2岁,≤2岁)、外出场景(室内,室外)对家猫喵喵惊叫发生率有影响趋势(71.1%vs.58.9%,P2岁家猫躲藏、眼睛睁大/瞳孔放大发生率分别显著升高(43.6%vs.26.8%,P<0.05;40.8%vs.27.4%,P<0.05);田园猫相比英短猫、室内测试场景家猫相比室外测试场景家猫、室内测试场景田园猫相比室外测试场景田园猫和室内外测试场景英短猫,外出喵喵惊叫发生风险分别升高157%、131%、324%(P<0.01,P<0.05,P<0.01)。结果表明,家猫外出时容易发生喵喵惊叫、躲藏的应激行为,室内测试场景的田园猫外出发生喵喵惊叫的风险极高,这些结果可以提示猫主人带猫外出时应采取措施减少家猫外出应激。

关键词：外出应激行为影响因素家猫

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Research Progress of Extraction Technology and Application of Chemical Substances in Perilla Seed

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Animal Husbandry and Feed Science 2016年第2期8卷 113-118页

作者： Shi Yilin gu xianhong Mao Wei Wang Zhanbin Forage Resources Exploration and Animal Health Cultivation Academician Workstation of Henan Province College of Animal Science and Technology Henan University of Science and Technology Luoyang 471003 China State Key Laboratory of Animal Nutrition Institute of Animal Science Chinese Academy of Agricultural Sciences Beijing 100193 China Zhenzhou Railway Vocational & Technical College Zhenzhou 450000 China

Perilla seed is one of the traditional Chinese herbs normally used both as food and medicine for its various functional ingrediems such as protein, amino acids, ct-linolenic acid, flavones, rosmarinic acid, terpenes, polysaccharides, etc.. Pefilla seed is with physiological features in slowing down decrepitude, lower- ing blood pressure, cholesterol, inhibiting cancer cell differentiation, and improving body immune. The present paper summarized research progress at home and abroad on chemical component analysis, extraction technology and application status of perilla seed in the fields of feed, health care, food and chemical industry in recent years, in order to provide a reference basis for reasonable development of perilla seed.

关键词： Perilla seed Chemical components Extraction technology Application

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Spatial variability of irrigation factors and their relationships with “corridor-barrier” functions in the Longitudinal Range-Gorge Region

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Chinese Science Bulletin 2007年第A2期52卷 33-41页

作者： gu ShiXiang HE DaMing CUI YuanLai XIE xianhong LI YuanHua State Key Laboratory of Water Resources and Hydropower Engineering Science Wuhan University Wuhan 430072 China Yunnan Institute for Investigation Design and Research of Water Resources & Hydropower Engineering Kunming 650021 China Asian International Rivers Center Yunnan University Kunming 650091 China Department of Irrigation Drainage and Rural Water Supply Ministry of Water Resources P. R. China Beijing 100053 China

在纵的范围峡区域( LRGR )和包围区域从 1971～2000 在 58 个气象学的车站基于每月气象学的数据，包括每年的 et 0 的六个因素，最大的每月的 et 0 (5月)，最小的每月的 et 0 (12月)，稻灌溉限额和全部的农业灌溉限额(到6月的从4月... 详细信息

在纵的范围峡区域( LRGR )和包围区域从 1971～2000 在 58 个气象学的车站基于每月气象学的数据，包括每年的 et 0 的六个因素，最大的每月的 et 0 (5月)，最小的每月的 et 0 (12月)，稻灌溉限额和全部的农业灌溉限额(到6月的从4月的每年、主要的灌溉时期)被选择用一条 geostatistical 途径检验他们的空间可变性。结果显示 Morans 的系数我，描述空间自相关的紧张，比在另外的方向在纵的方向是更大的；六个参数的空间可变性被结构的因素财务主要为 60.2%87.9% 引起；et 0 的最大的可变性(每年，在 5 月和 12 月) 出现在西北东南和东北西南方向。由于夏天季风从印度洋和太平洋的大气的环流，和大陆人在冬季，最小的分数维的尺寸和 et 0 的最大的空间可变性的温暖干燥的电流(每年，在 5 月和 12 月) 发生在西南东北和东南西北方向。稻和全部的农业灌溉要求的最高的可变性由于纵的河的走廊功能引起的蒸汽和精力散开发生在南方北方方向。最小的空间自相关在东方西方方向，它证明农业灌溉要求的六个参数被走廊障碍功能在 LRGR 和它的包围区域影响。

关键词：空间可变性灌溉影响因素纵向岭谷区

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饮水温度和环境富集对断奶仔猪生产性能及营养素利用的影响

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动物营养学报 2009年第5期21卷 640-644页

作者：谭磊顾宪红中国农业科学院北京畜牧兽医研究所动物营养学国家重点实验室北京100193

本文采用2×2双因子两水平试验设计探讨了饮水温度(DWT)和环境富集(EE)对断奶仔猪生产性能以及营养素利用的影响。试验选用30日龄断奶仔猪100头,随机分为对照(DWT11-EE)、温水(DWT30-EE)、环境富集(DWT11+EE)、温水+环境富集(DWT30+EE)4... 详细信息

本文采用2×2双因子两水平试验设计探讨了饮水温度(DWT)和环境富集(EE)对断奶仔猪生产性能以及营养素利用的影响。试验选用30日龄断奶仔猪100头,随机分为对照(DWT11-EE)、温水(DWT30-EE)、环境富集(DWT11+EE)、温水+环境富集(DWT30+EE)4组,每组5个重复,每个重复5头(3母+2公),饲养40 d。结果显示:(1)添加富集材料时,30℃饮水组断奶仔猪平均日饮水量比11℃饮水组增加23.4%(P<0.05);温水温度显著降低断奶仔猪料肉比(F/G)(P<0.05)、饮水温度和环境富集对试验猪平均日增重(ADG)和平均日采食量(ADFI)的交互作用极显著(P<0.01);(2)饮水温水显著提高日粮磷(P)的表观消化率(P<0.05);饮水温度和环境富集对日粮干物质、粗蛋白质、粗脂肪、钙和磷表观吸收量有极显著的交互作用(P<0.01)。由此得出,饮30℃温水可提高断奶仔猪饲料转化效率,增加饮水量;对断奶仔猪,添加环境富集材料时宜饮11℃凉水,不添加环境富集材料时宜饮30℃温水。

关键词：断奶仔猪饮水温度环境富集生产性能营养素

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