检索结果-南通市图书馆

河南科学 2000年第1期18卷 59-62页

作者：胡轶红吉爱玲徐存拴河南师范大学生命科学学院河南新乡453002

用聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS -PAGE)技术分析了大鼠脑、心脏、肺、肝脏、胃、肾脏、脾脏和肌肉的蛋白质图谱 ,为以大鼠为材料的实验研究提供了一些基础资料。

关键词：大鼠器官蛋白质图谱 SDS-PAGE 肝脏脑心脏

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Hr基因敲除小鼠模型的构建和表型分析

中国比较医学杂志 2016年第8期26卷 75-78页

作者：朱奎成徐存拴陈莹莹王纯耀章金涛河南师范大学生命科学学院新乡453007 郑州大学实验动物中心郑州450052

目的建立基因敲除小鼠以深入研究无毛基因(hairless,Hr)的功能。方法利用类转录激活因子效应因子核酸酶(transcription activator-like effector nucleases,TALENs)技术,制备Hr基因敲除小鼠,观察基因敲除小鼠毛发生长发育规律,并取部分... 详细信息

目的建立基因敲除小鼠以深入研究无毛基因(hairless,Hr)的功能。方法利用类转录激活因子效应因子核酸酶(transcription activator-like effector nucleases,TALENs)技术,制备Hr基因敲除小鼠,观察基因敲除小鼠毛发生长发育规律,并取部分皮肤组织石蜡切片,显微镜下分析结果。结果获得一个在Hr基因编码区86~87位有2个碱基缺失的首建鼠,产生了TGA终止密码子。通过与野生型鼠杂交获得阳性子代,进行同窝交配,传至第2代小鼠14 d开始脱发,30 d左右毛发脱净,并终身保持无毛。皮肤组织学观察发现真皮内形成大小不等的包囊。研究结果表明成功建立的Hr基因敲除小鼠表现出毛发生长异常。结论证明了无毛基因与毛发生长发育的密切关系,为研究Hr基因的精确功能提供了良好的动物模型。

关键词：无毛基因基因敲除小鼠表型

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大鵟消化系统蛋白水解酶种类和活性分析

动物学杂志 2006年第3期41卷 102-105页

作者：牛红星卜艳珍王艳梅姬生栋余燕卢全伟徐存拴河南师范大学生命科学学院新乡453007

采用蛋白水解酶复性电泳(G-PAGE)技术对大(Buteo hemilasius)消化系统5种器官腺胃、胰脏、十二指肠、空肠、大肠蛋白水解酶的种类和性质进行了研究,以期为研究野生鸟类的分类地位、系统演化提供基础资料,结果表明,①受pH值的影响和制约... 详细信息

采用蛋白水解酶复性电泳(G-PAGE)技术对大(Buteo hemilasius)消化系统5种器官腺胃、胰脏、十二指肠、空肠、大肠蛋白水解酶的种类和性质进行了研究,以期为研究野生鸟类的分类地位、系统演化提供基础资料,结果表明,①受pH值的影响和制约,大消化系统蛋白水解酶的活性在碱性、中性与酸性条件下递减;②在酸性条件下,45 ku蛋白水解酶存在于除腺胃外的各受检器官;③pH 7.0时,腺胃、胰脏酶谱相似,均含有683、5、342、0 ku的蛋白水解酶;④pH 8.0时,空肠和十二指肠的蛋白水解酶种类最多、活性最强,分别检出8种和7种蛋白水解酶。总之,pH值对蛋白水解酶的活性有明显的制约作用,46、41ku蛋白水解酶随着pH值的增高而失去活性,为酸性蛋白水解酶,250、2064、5 ku蛋白水解酶随着pH值的增高活性逐渐增强,为碱性蛋白水解酶。十二指肠和空肠的蛋白水解酶种类多、活性强,可能为蛋白质消化的主要场所。

关键词：蛋白水解酶活性电泳(G-PAGE) 消化系统大(狂鸟)

地塞米松对大鼠肝细胞BRL-3A增殖和凋亡的影响

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解剖学报 2016年第2期47卷 197-202页

作者：常翠芳赵卫明杨婧李晓芳陈莎莎王改平徐存拴河南师范大学生命科学学院河南新乡453007 河南省-科技部共建细胞分化国家重点实验室培育基地和河南省生物工程重点实验室河南新乡453007 河南省生物工程药物开发实验室河南新乡453007

目的探讨地塞米松对体外培养大鼠肝细胞BRL-3A增殖和凋亡的影响。方法用不同浓度的地塞米松处理BRL-3A细胞,于12、24、48、72、120 h后用MTT检测地塞米松对BRL-3A细胞活性的影响,同时分别用Annexin V-FITC双染法、PI单染色法、实时定量... 详细信息

目的探讨地塞米松对体外培养大鼠肝细胞BRL-3A增殖和凋亡的影响。方法用不同浓度的地塞米松处理BRL-3A细胞,于12、24、48、72、120 h后用MTT检测地塞米松对BRL-3A细胞活性的影响,同时分别用Annexin V-FITC双染法、PI单染色法、实时定量-聚合酶链反应(Real-time PCR)等方法检测地塞米松对BRL-3A细胞周期和凋亡的影响。结果 MTT检测表明,地塞米松能够抑制BRL-3A细胞的活性;Annexin V-FITC双染法分析显示,地塞米松具有显著促进BRL-3A细胞凋亡的效果;PI单染色法检测细胞周期分布情况表明,地塞米松处理后的细胞与对照组相比增殖能力减弱;用Real-time PCR检测促细胞凋亡基因Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9和促增殖基因Ccnd1和Jun的mRNA表达情况,结果显示,用地塞米松处理后的细胞中Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9均表达上调,而Ccnd1和Jun均表达下调,说明地塞米松能促进BRL-3A细胞的凋亡。结论地塞米松可以促进BRL-3A细胞的凋亡,并抑制其增殖。

关键词：地塞米松 BRL-3A细胞流式细胞术实时定量-聚合酶链反应大鼠

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液压转基因技术应用于大鼠肝脏转基因实验

解剖学报 2009年第1期40卷 103-107页

作者：徐存拴邢雪琨谢来峰张明方方崔胜男王磊张富春河南师范大学生命科学学院河南省-科技部共建细胞分化调控重点实验室河南新乡453007 新疆大学生命科学学院乌鲁木齐830046

目的探讨液压转基因技术（HDT）应用于大鼠肝脏转基因的条件、方法。方法以不同速度从大鼠尾静脉注射不同体积、浓度的含绿色荧光蛋白基因质粒pEGFP—C1，于注射后不同时间取大鼠（各4只）各肝叶制备玲冻切片，在波长488nm的荧光显微镜... 详细信息

目的探讨液压转基因技术（HDT）应用于大鼠肝脏转基因的条件、方法。方法以不同速度从大鼠尾静脉注射不同体积、浓度的含绿色荧光蛋白基因质粒pEGFP—C1，于注射后不同时间取大鼠（各4只）各肝叶制备玲冻切片，在波长488nm的荧光显微镜下观察、计数各肝叶的绿色荧光蛋白表达情况。结果在一次性注射浓度为30mg／L质粒、注射速度为2ml／s、注射体积为大鼠体重9％的条件下，注射pEGFP-C1质粒后6h，绿色荧光蛋白阳性细胞比例最高，占肝脏总细胞的20％以上，从24h起绿色荧光蛋白的表达量逐渐减少，至72h时各肝叶均基本难以检出绿色荧光蛋白阳性细胞。在上述最佳条件下，绿色荧光蛋白在各肝叶的表达情况是：蒂状叶的绿色荧光蛋白阳性细胞约为30％，左叶、中叶、右叶约为20％，尾状叶约为10％。结论液压转基因技术可应用于大鼠肝脏转基因，其适宜条件是：质粒溶液的浓度为30mg／L，注射量为大鼠体重的9％，注射速度为2ml／s，观察转染率的适宜时间是转基因后6～24h。

关键词：肝脏绿色荧光蛋白液压转基因技术大鼠

枯否细胞对大鼠再生肝细胞转录活性和LDH的影响

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四川动物 2008年第5期27卷 929-930,F0003页

作者：贾永芳王卫华张国俊李莉张顺利徐存拴河南师范大学生命科学学院新乡医学院

目的与方法SD大鼠随机分成3组,即C组(切除2/3肝叶)、L组(切除2/3肝叶后注射LPS)和G组(GdCl3预处理后切除2/3肝叶),研究大鼠肝再生期间(0～144h)再生肝重量比、AgNORs数量、乳酸脱氢酶的变化。结果L组肝重量比在16～48h低于C组(P<0.05),A... 详细信息

目的与方法SD大鼠随机分成3组,即C组(切除2/3肝叶)、L组(切除2/3肝叶后注射LPS)和G组(GdCl3预处理后切除2/3肝叶),研究大鼠肝再生期间(0～144h)再生肝重量比、AgNORs数量、乳酸脱氢酶的变化。结果L组肝重量比在16～48h低于C组(P<0.05),AgNORs的数量在48h达到最大值(P<0.01,与正常对照组相比)。G组再生肝重量比在16～36h低于C组(P<0.05),AgNORs的数量在36h即达到高峰,乳酸脱氢酶新增一条LDH4谱带,其平均密度在36h达到最高值。结论肝切除后注射LPS,抑制了早期的肝再生进程,注射GdCl灭活枯否细胞后利于肝脏的早期再生。

关键词：大鼠肝再生 AgNORs 乳酸脱氢酶枯否细胞

DNA3′,5′-磷酸二酯键骨架结构稳定的热力学基础分析

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河南科学 2007年第4期25卷 554-556页

作者：徐霆赵茜怡吕庆章杨林徐存拴河南师范大学化学与环境科学学院新乡453007 河南师范大学生命科学学院新乡453007

为了解大自然选择3′,5′-磷酸二酯键作为DNA结构骨架的必然性,从热力学角度模拟和计算了磷酸、2′-脱氧核糖、胞嘧啶及它们在不同位置结合形成的磷酸-2′-脱氧核糖、胞嘧啶-2′-脱氧核糖、磷酸-2′-脱氧核糖-胞嘧啶的能量,发现3′-磷... 详细信息

为了解大自然选择3′,5′-磷酸二酯键作为DNA结构骨架的必然性,从热力学角度模拟和计算了磷酸、2′-脱氧核糖、胞嘧啶及它们在不同位置结合形成的磷酸-2′-脱氧核糖、胞嘧啶-2′-脱氧核糖、磷酸-2′-脱氧核糖-胞嘧啶的能量,发现3′-磷酸-2′-脱氧核糖、5′-磷酸-2′-脱氧核糖、1′(-4-胞嘧啶)-2′-脱氧核糖、3′-磷酸-1′(-4-胞嘧啶)-2′-脱氧核糖、5′-磷酸-1′(-4-胞嘧啶)-2′-脱氧核糖的能量比其他相应形式结合物的能量低.表明磷酸与2′-脱氧核糖形成的3′,5′-磷酸二酯键有作为DNA结构骨架的热力学依据.

关键词： 2′-脱氧核糖胞嘧啶 DNA结构骨架热力学

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环状RNA及其在肝病中的作用

解剖学报 2019年第5期50卷 690-697页

作者：王棋文李盼王嵩雲郭学强张春艳杨亚军李剑勇徐存拴河南师范大学生命科学学院省部共建细胞分化调控国家重点实验室培育基地河南新乡453007 中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所农业部兽用药物创制重点实验室/甘肃省新兽药工程重点实验室兰州730050

环状RNA(circRNA)是一种不具有5’末端帽子结构和3’末端的poly(A)尾巴的新型非编码RNA,是由非共价键形成的反向连接的闭合环状结构。circRNA由于其具有作为miRNA分子海绵及生物标志物的作用,可用于肝脏疾病的治疗和诊断,因此,circ RNA... 详细信息

环状RNA(circRNA)是一种不具有5’末端帽子结构和3’末端的poly(A)尾巴的新型非编码RNA,是由非共价键形成的反向连接的闭合环状结构。circRNA由于其具有作为miRNA分子海绵及生物标志物的作用,可用于肝脏疾病的治疗和诊断,因此,circ RNA已逐渐成为当今的研究热点。我们针对circRNA以及circRNA在肝病中的研究进行了综述,以期对未来的肝脏疾病的研究和治疗提供理论基础和新思路。

关键词：环状RNA 生物学功能肝脏疾病

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液压转基因技术应用于大鼠再生肝转基因实验

解剖学报 2009年第4期40卷 599-603页

作者：徐存拴邢雪琨杨献光朱秋实窦磊刘帅帅李幼张富春河南师范大学生命科学学院河南新乡453007 河南省一科技部共建细胞分化调控重点实验室新乡453007 新疆大学生命科学与技术学院乌鲁木齐830046

目的探讨液压转基因技术（HDT）应用于大鼠再生肝转基因的条件和方法。方法以2ml/s的速度将浓度为30mg/L的含目的基因的质粒注射入大鼠尾静脉,于注射前/后不同时间进行大鼠2/3肝切除（PH）,于PH后不同恢复时间称量大鼠体重（g）和再生... 详细信息

目的探讨液压转基因技术（HDT）应用于大鼠再生肝转基因的条件和方法。方法以2ml/s的速度将浓度为30mg/L的含目的基因的质粒注射入大鼠尾静脉,于注射前/后不同时间进行大鼠2/3肝切除（PH）,于PH后不同恢复时间称量大鼠体重（g）和再生肝重（g）,计算肝系数（Lc）,并从Lc±Lc＊0%、＊5%、＊10%、＊15%、＊20%、＊25%、＊30%、＊35%等15组中找出最佳组,作为计算不同恢复时间再生肝最适注射质粒溶液量的校正系数（Trc）;取大鼠肝右叶中部组织制备冷冻切片,在波长488nm的荧光显微镜下观察、计数1万个细胞中的绿色荧光蛋白阳性细胞百分率。结果PH后注射生理盐水和注射空质粒对肝再生的影响与对照（只进行PH）相比无显著差异。PH前液压转基因的合适时间是PH前≥12h;PH后所有时间均可进行液压转基因。PH后对肝再生大鼠进行液压转基因的转基因溶液体积为大鼠体重（g）×9%×1/3×相应的校正系数（Trc）。转入基因在体内的表达时间和丰度既受载体影响,又受插入的目的基因影响。结论液压转基因技术亦可有效地应用于大鼠再生肝转基因研究。

关键词：肝再生液压转基因技术基因表达大鼠

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碱基互补与DNA结构稳定的热力学基础分析

河南科学 2007年第3期25卷 377-378页

作者：赵茜怡徐霆吕庆章杨林徐存拴河南师范大学化学与环境科学学院河南新乡453007 河南师范大学生命科学学院河南新乡453007

DNA在结构和功能统一方面的完美无缺令人赞叹不已.为了解生命形成、进化过程中大自然选择DNA作为遗传物质的必然性,从热力学角度模拟和计算了游离碱基、核苷、核苷酸、多核苷酸及它们的互补体能量大小.发现它们形成互补体后能量会显著降... 详细信息

DNA在结构和功能统一方面的完美无缺令人赞叹不已.为了解生命形成、进化过程中大自然选择DNA作为遗传物质的必然性,从热力学角度模拟和计算了游离碱基、核苷、核苷酸、多核苷酸及它们的互补体能量大小.发现它们形成互补体后能量会显著降低.表明DNA有形成稳定大分子和经受巨大选择压的热力学基础.

关键词：碱基 DNA 互补链热力学