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Study on molecular interac-tion between NifA and NifL of Pseudomonas stutzeri A1501 by using the yeast two-hybrid system

引用

Chinese Science Bulletin 2005年第2期50卷 190-192页

作者： xiezhihong YANGYi PINGShuzheng CHENMing ZHANGwei LUWei XUYuquan LIUHongjuan WANGGuoying E.Claudine LINMin StateKeyLaboratoryofAgrobiotechnology ChinaAgriculturalUniversityBeijing100094China CollegeofLifeScience SichuanUniversityChengdu610065China BiotechnologyResearchInstitute ChineseAcademyofAgriculturalSciencesBeijing100081China InstitutdesSciencesduVégétal CNRSUPR235591198GifsurYvetteFrance

Pseudomonas stutzeri A1501 (formerly Alcaligenes faecalis A1501), which wasisolated from rice paddies in South China in 1980, can colonize tightly on rhizoplane of the hostplants or invade the roots of plants for growth and nitrogen fixation. But A1501 can fix nitrogenonly under the micro-aerobic and nitrogen-free conditions. The oxygen concentration and theavailability of fixed nitrogen are therefore important factors in the regulation of nitrogenasebiosynthesis of associative nitrogen-fixing bacteria. In the model diazotrophs Azotobactervinelandii and Klebsiella pneumoniae, nitrogen fixation is controlled at the tran-scriptional levelby the regulatory proteins encoded by nifLA. A 30 kb DNA region containing complete nifLA genescluster (GenBank Accession No. AJ297529) from A1501 has been previously characterized. Geneticanalysis showed that A1501 had similar nifLA operon to that in K. pneumoniae. Evidence suggests thatin P. stutzeri A1501, NifA is the transcriptional activator and NifL acts as a negative regulatorof nif genes in the presence of oxygen and ammonia (unpublished data). Inhibition of NifA activityby NifL requires stoichiometric amounts of two proteins, implying that the mechanism of inhibitionis by direct protein-protein interaction rather than by catalytic modification of the NifA proteinin the model diazotrophs A. vinelandii In this study, we used the yeast two-hybrid system toidentify NifL-NifA protein-protein interaction in vivo.

关键词：分子相互作用 NifA NifL 假单胞菌 A1501 酵母无性繁殖

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