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基于白木香转录组的SSR序列特征分析

分子植物育种 2024年第9期22卷 2971-2978页

作者：向琳曾军王昊李薇董文化戴好富梅文莉华中农业大学植物科学技术学院武汉430070 中国热带农业科学院热带生物技术研究所海南省沉香工程技术研究中心海口市热带天然产物研究与利用重点实验室海口571101 海南热带农业资源研究院海南省热带农业生物资源保护与利用重点实验室海口571101

为探究白木香的简单重复序列特征,开发SSR分子标记用于白木香种质资源的遗传分化和分子鉴定,本研究鉴定了白木香转录组unigene序列的SSR位点,对其SSR的分布及序列特征进行统计分析,进而设计SSR引物,并验证其SSR引物的多态性。结果表明,... 详细信息

为探究白木香的简单重复序列特征,开发SSR分子标记用于白木香种质资源的遗传分化和分子鉴定,本研究鉴定了白木香转录组unigene序列的SSR位点,对其SSR的分布及序列特征进行统计分析,进而设计SSR引物,并验证其SSR引物的多态性。结果表明,在128712条unigene中共鉴定到9362个SSR位点,分布频率为7.27%。SSR序列中双碱基重复序列最多,占总SSR的54.90%;白木香双碱基重复序列以AG/CT、AC/GT为主,占34.22%。SSR位点重复次数主要集中在5~11次,占总SSR位点数的96.56%,其中三碱基重复5次的SSR位点数最多,共有1925个。设计并合成50对引物,其中35对引物可扩增出预期大小条带,扩增效率达到70%。以24个不同白木香个体对35对引物进行扩增,采用8%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测SSR引物多态性,表明SSR引物具有多态性。研究表明,白木香转录组SSR重复基元类型丰富,分布密度高,多态性高,可用于白木香资源的遗传多样性评价、遗传分化、种质鉴定和分子育种等后续研究。

关键词：白木香转录组简单重复序列序列特征种质资源

具有明显肌电图特征的13例莫旺综合征患者临床特点与预后分析

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中华神经医学杂志 2024年第5期23卷 471-477页

作者：董泽钦梅文丽左绍敏徐佳佳袁丽品李玮刘慧勤河南大学人民医院(河南省人民医院)神经内科郑州450003 郑州大学人民医院(河南省人民医院)肌电图科郑州450003

目的总结莫旺综合征(MoS)临床表现、神经电生理特征及治疗转归情况,为尽早确诊疾病及进一步改善患者预后提供参考。方法回顾性收集河南省人民医院神经内科自2018年1月至2023年10月收治入院的13例MoS患者资料,包括患者临床症状、治疗方... 详细信息

目的总结莫旺综合征(MoS)临床表现、神经电生理特征及治疗转归情况,为尽早确诊疾病及进一步改善患者预后提供参考。方法回顾性收集河南省人民医院神经内科自2018年1月至2023年10月收治入院的13例MoS患者资料,包括患者临床症状、治疗方案及预后等临床数据,实验室检查结果及电生理检查结果。结果13例MoS患者临床主要表现为肌颤搐、疼痛、肢体麻木、周身瘙痒、多汗症、尿便障碍、心动过速、失眠、焦虑抑郁等。10例完成自身免疫脑炎抗体检测,3例仅抗接触蛋白相关蛋白2(CASPR2)抗体阳性,2例仅抗富含亮氨酸的胶质瘤失活蛋白1(LGI1)抗体阳性,2例双抗体阳性。11例完成肿瘤筛查,有4例肿瘤患者,2例患胸腺瘤、1例患肺鳞癌、1例患肾上腺非霍奇金淋巴瘤。10例完成心电图检查,其中3例静息性心动过速,2例ST段抬高样改变。所有患者均完成肌电图检查,12例出现异常运动单位电位,如肌颤搐电位、束颤电位和神经性肌强直电位;F波检查均可见F波和(或)M波后发放电位。随访1~12个月,9例非肿瘤患者中6例行免疫治疗,其中5例症状好转;余3例对症治疗患者中1例症状好转。4例肿瘤患者中3例接受免疫治疗,仅1例症状好转。结论肌颤搐、疼痛、多汗、尿便障碍、严重失眠为MoS典型症状。血清抗CASPR2/LGI1抗体及神经电生理检查可为诊断MoS提供依据。早期免疫治疗可改善MoS预后,合并肿瘤患者临床预后差。

关键词：莫旺综合征自身免疫疾病神经电生理接触蛋白相关蛋白2 富亮氨酸胶质瘤失活蛋白1 周围神经过度兴奋

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重唇石斛地上部分化学成分及其生物活性研究

热带亚热带植物学报 2024年第2期32卷 287-293页

作者：郭东昇杨理宋希强梅文莉陈惠琴戴好富热带特色林木花卉遗传与种质创新教育部重点实验室海南大学林学院海口570228 中国热带农业科学院热带生物技术研究所海南省黎药资源天然产物研究与利用重点实验室海南热带农业资源研究院海南省热带农业生物资源保护与利用重点实验室海口571101

为了解重唇石斛(Dendrobium hercoglossum)的化学成分,利用硅胶、Sephadex LH-20柱色谱和半制备高效液相色谱等方法,从其地上部分分离了14个化合物,经波谱分析,其结构分别鉴定为:3,4,5-三甲氧基苯酚(1)、3-hydroxy-1-(4-hydroxy-3,5-dim... 详细信息

为了解重唇石斛(Dendrobium hercoglossum)的化学成分,利用硅胶、Sephadex LH-20柱色谱和半制备高效液相色谱等方法,从其地上部分分离了14个化合物,经波谱分析,其结构分别鉴定为:3,4,5-三甲氧基苯酚(1)、3-hydroxy-1-(4-hydroxy-3,5-dimethoxyphenyl)-propan-1-one(2)、methyl 3-(p-hydroxyphenyl)propionate(3)、justiciresinol(4)、榕醛(5)、异落叶松脂素(6)、threo-2,3-bis-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-3-methoxypropanol(7)、(+)-松脂素(8)、aloifolⅠ(9)、dendrocandin T(10)、3-甲氧基-4-羟基苯丙酮(11)、1,3,5-三甲氧基苯酚(12)、香草醇(13)和丁香脂素(14),其中化合物1~12,14均为首次从重唇石斛中分离得到,化合物7、10和14为首次从石斛属植物中分离得到。化合物4、8和10具有显著的酪氨酸酶抑制活性,IC50值分别为(10.40±0.36)、(12.16±0.18)和(9.46±0.78)μmol/L。

关键词：兰科重唇石斛化学成分酪氨酸酶

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中华神经科杂志 2024年第8期57卷 881-889页

作者：张玉薇张杰文娄桂予张冰陈玉升梅文丽祁娜雷星星杨科河南省人民医院医学遗传研究所郑州450003 河南省人民医院神经内科郑州450003 河南省人民医院神经外科郑州450003 河南省人民医院神经电生理科郑州450003

目的分析3个在儿童期起病的复杂型遗传性痉挛性截瘫(HSP)5型家系先证者的临床表型和遗传学特征,同时对HSP5型的遗传学诊断方法进行探索,以提高临床对此病的诊断及鉴别诊断能力。方法收集2020年6月至2023年1月就诊于河南省人民医院的3个H... 详细信息

目的分析3个在儿童期起病的复杂型遗传性痉挛性截瘫(HSP)5型家系先证者的临床表型和遗传学特征,同时对HSP5型的遗传学诊断方法进行探索,以提高临床对此病的诊断及鉴别诊断能力。方法收集2020年6月至2023年1月就诊于河南省人民医院的3个HSP5型家系的临床资料,对家系中的患者进行全外显子组测序(WES),分析与表型相关的基因变异类型,包括单核苷酸变异(SNV)和小片段插入/缺失变异(INDEL)分析,同时对特定基因的动态突变区域进行分析。结果3个家系中的先证者均为复杂型HSP:家系1先证者临床表现为双下肢无力、尿急、共济失调;家系2先证者表现为智力稍低、双下肢无力、构音障碍,头颅磁共振成像示脑白质病变;家系3先证者表现为双下肢肌无力、痉挛、尿频、共济失调。测序结果显示:先证者1及其弟弟存在CYP7B1基因c.1171G>T(父源)及c.1249C>T(母源)复合杂合变异;先证者2及其妹妹存在CYP7B1基因c.334C>T(父源)及c.259+2T>C(母源)复合杂合变异;先证者3存在CYP7B1基因c.334C>T(父源)及c.1082G>A(母源)复合杂合变异。其中c.1171G>T为未报道过的新变异。基因动态突变分析结果显示,患儿的ATXN1/2/3/6/7/8/12、DRPLA、TBP基因的CAG重复次数均在正常范围内。根据患儿的临床表现及基因检测结果,HSP5型诊断明确。结论本研究中的3个家系均为CYP7B1基因复合杂合变异导致的复杂型HSP5型。WES可同时分析SNV、INDEL和动态突变进而明确相关疾病的诊断,可以作为HSP5型的一种有效的检测方法。

关键词：痉挛性截瘫,遗传性 CYP7B1基因突变

植物内生真菌Purpureocillium lilacinum的生物碱类次级代谢产物

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菌物学报 2024年第4期43卷 95-103页

作者：唐官美张丽韦媛付姣陈惠琴张雪晴梅文莉戴好富郭志勇三峡大学天然产物研究与利用湖北省重点实验室生物与制药学院湖北宜昌443002 中国热带农业科学院热带生物技术研究所海南省黎药资源天然产物研究与利用重点实验室海南海口571101

从蛛毛苣苔叶片中分离一株内生真菌GZY-Z-02,经分子生物学方法鉴定为Purpureocillium lilacinum,以大米固体培养基于室温培养30d,经乙酸乙酯浸提,以正向硅胶、凝胶色谱及HPLC等手段分离得到12个化合物,通过核磁共振、质谱及CD谱等手段... 详细信息

从蛛毛苣苔叶片中分离一株内生真菌GZY-Z-02,经分子生物学方法鉴定为Purpureocillium lilacinum,以大米固体培养基于室温培养30d,经乙酸乙酯浸提,以正向硅胶、凝胶色谱及HPLC等手段分离得到12个化合物,通过核磁共振、质谱及CD谱等手段鉴定其结构,12个化合物均为生物碱类次级代谢产物,其中新化合物1个,为lilacinumopin(1),5个环二肽类衍生物(2–6),2个简单吲哚类衍生物(7–8),3个核苷类衍生物(9–11)及核黄素(12)。通过抗菌活性筛选,发现化合物1,7和8有中等强度地抑制金黄葡萄球菌的活性。

关键词：植物内生真菌生物碱抗菌活性淡紫拟青霉

Qualitative and Quantitative Analysis of Flidersiachromones in Three Agarwood Samples by HPLC-MS/MS

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Chemical Research in Chinese Universities 2018年第3期34卷 389-396页

作者： YANG Jinling DONG Wenhua CHEN Huiqin KONG Fandong WANG Jun mei wenli DAI Haofu Hainan Engineering Research Center of Agarwood Institute of Tropical Bioscience and Biotechnology Chinese Academy of Tropical Agricultural Sciences Haikou 571101 P. R. China

HPLC/ESI/MS2 was used in the qualitative and quantitative analysis of flidersiachromones（FTPECs） in three agarwood samples ofAquilaria sinensis, including an artificial holing agarwood, a wild agarwood, and a high quality agarwood named ＂Qi Nan＂. From these three agarwood samples, totally forty-six FTPECs were identified, and twenty-five of which were tentatively identified by the analysis of MS fragmentation ions, the others were indentiffed via comparing the retention time and MS fragmentation ions of them with those of the reference compounds. Besides, quantitative determination of five characteristic FTPECs（F14, F16 and F18-F20） in the three agarwoods was carried out, and it was found that the absolute content of each compound of these five FTPECs showed positive correlation with the quality of agarwood samples. Due to the wide distribution of four of these FTPECs（F16 and F18-F20） in the chemical constituents of agarwood, it is suggested that the total absolute content of these four FTPECs may be set as one of basis for agarwood quality evaluation.

关键词： Agarwood Aquilaria sinensis HPLC/DAD/ESI/MS/MS Flidersiachromone Quantitative determination

HPLC-ESI-MS Analysis of Flavonoids Obtained from Tissue Culture of Dracaena cambodiana

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Chemical Research in Chinese Universities 2015年第1期31卷 38-43页

作者： WANG Hui WANG Jiayuan WU Xiaopeng SHEN Haiyan LUO Ying DAI Haofu mei wenli Hainan Key Laboratory for Research and Development of Natural Products from Li Folk Medicine Key Laboratory of Tropical Crop Biotechnology Ministry of Agriculture Institute of Tropical Bioscience and Biotechnology Chinese Academy of Tropical Agricultural Sciences Haikou 571101 P. R. China

Dragon＇s blood is a traditional medicine and used in many countries with different cultures because of its various therapeutic properties. The main bioactive constituents of dragon＇s blood are flavonoids, which exhibit various pharmaceutical activities, such as haemostatic, analgesic, anticoagulant, and antimicrobial activities and so on, and have attracted the attention of researchers on the development of new drugs. However, the formation process of dragon＇s blood in nature is very slow, which cannot meet the demand of pharmaceutical uses. Dracaena cambodiana （D. cambodiana） is one of the resource plants of dragon＇s blood na, 6-benzylaminopurine was added in the medium, then red During the course of tissue culture of D. cambodiasecretion was discovered in the cultured medium. Twelve compounds（1--12）, including 11 flavonoids, were determined via the analysis of constituents of the cultured medium by high performance liquid chromatography-electrospray ionization-mass spectrometry（HPLC-ESI-MS） and the results were compared with that of the standards isolated from dragon＇s blood. Among compounds 1-12, 4,4＇- dihydroxy-2-methoxydihydrochalcone（5）, 4,4＇-dihydroxy-2,6-dimethoxydihydrochalcone（6） and （2S）-7,3＇-dihydroxy- 4＇-methoxyflavane（9） were major compounds of the red secretion, with contents of 15.70, 7.10 and 57.23 mg/L, respectively. Therefore, it is promising that flavonoids from dragon＇s blood can be obtained from the tissue culture of its resource plants for the purpose of drug development.

关键词： Flavonoid Dragon's blood High performance liquid chromatography-electrospray ionization-mass spectrometry(HPLC-ESI-MS) Dracaena cambodiana Tissue culture

斯里兰卡瓦拉沉香中2个新的5,6,7-三羟基-2-(2-苯乙基)-5,6,7,8-四氢色酮

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热带亚热带植物学报 2024年第4期32卷 549-554页

作者：陈乐瑶盖翠娟蔡彩虹王昊李薇戴好富梅文莉陈惠琴中国热带农业科学院热带生物技术研究所沉香国际联合研究中心海南省黎药资源天然产物研究与利用重点实验室海口571101 海南大学林学院海口570228

为了解斯里兰卡来源瓦拉(Aquilaria walla)沉香中的化学成分,采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱及半制备高效液相色谱法从其乙醇提取物中分离得到2个2-(2-苯乙基)色酮类化合物,通过质谱、核磁共振等现代波谱学方法分别鉴定为(5R... 详细信息

为了解斯里兰卡来源瓦拉(Aquilaria walla)沉香中的化学成分,采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱及半制备高效液相色谱法从其乙醇提取物中分离得到2个2-(2-苯乙基)色酮类化合物,通过质谱、核磁共振等现代波谱学方法分别鉴定为(5R,6S,7S)-5,6,7-三羟基-2-(2-苯乙基)-5,6,7,8-四氢色酮(1)和(5R,6S,7S)-5,6,7-三羟基-2-[2-(4-甲氧基)苯乙基]-5,6,7,8-四氢色酮(2),均为新化合物。化合物1和2对脂多糖诱导小鼠单核巨噬细胞RAW264.7产生NO无抑制作用,MTT法表明对5株人肿瘤细胞不具有体外生长抑制作用,200μg/m L的化合物2对酪氨酸酶具有弱抑制作用,抑制率为(21.67±1.67)%。

关键词：瓦拉沉香 5,6,7-三羟基-2-(2-苯乙基)-四氢色酮酪氨酸酶抑制新化合物

闭鞘姜7个部位α-葡萄糖苷酶抑制活性及其乙醚提取物的GC-MS分析

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武汉大学学报（理学版） 2024年第2期70卷 164-168页

作者：陈乐瑶王雅丽蔡彩虹郭东昇梅文莉戴好富陈惠琴中国热带农业科学院热带生物技术研究所/海南省黎药资源天然产物研究与利用重点实验室海南海口571101 海南热带农业资源研究院海南海口571101

用乙醚和乙醇对闭鞘姜7个部位进行提取后,用pNPG(4-硝基苯基-β-D-吡喃葡萄糖苷)法测试α-葡萄糖苷酶体外抑制活性,并通过气相色谱-质谱(GC-MS)联用方法分析测定其乙醚相中的化学成分。共检出化学成分125个,通过峰面积归一化法确定各化... 详细信息

用乙醚和乙醇对闭鞘姜7个部位进行提取后,用pNPG(4-硝基苯基-β-D-吡喃葡萄糖苷)法测试α-葡萄糖苷酶体外抑制活性,并通过气相色谱-质谱(GC-MS)联用方法分析测定其乙醚相中的化学成分。共检出化学成分125个,通过峰面积归一化法确定各化学成分的相对含量,结果显示,闭鞘姜7个部位化学成分差异较大。活性测试结果表明:花瓣、花萼和须根的乙醚提取物的酶抑制率均超过70%,茎的乙醚提取物和根茎的乙醇提取物的酶抑制率在50%左右。因此,闭鞘姜不同部位挥发性成分差异较大,花瓣、花萼和须根的乙醚提取物具有相对较强的α-葡萄糖苷酶抑制活性,可为闭鞘姜全株的资源利用提供参考。

关键词：中草药闭鞘姜 α-葡萄糖苷酶气相色谱-质谱(GC-MS)