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The construction of drug-resistant cancer cell lines by CRISPR/Cas9 system for drug screening

Science Bulletin 2018年第21期63卷 1411-1419页

作者： Lingmin Zhang Ying Li Qinghua chen Yong Xia wenfu Zheng Xingyu Jiang CAS Center for Excellence in Nanoscience Beijing Engineering Research Center for BioNanotechnologyCAS Key Laboratory for Biological Effects of Nanomaterials and NanosafetyNational Center for NanoScience and TechnologyBeijing 100190China University of Chinese Academy of Sciences Beijing 100049China Guangdong Provincial Key Laboratory of Molecular Target &Clinical Pharmacology School of Pharmaceutical Sciences and the Third &Fifth Affiliated HospitalGuangzhou Medical UniversityGuangzhou 511436China

Cancer therapy is often hampered by the rapid emergence of drug resistance. Drug-resistant cellular models are essential for understanding the drug resistance and developing new therapeutics. The low efficiency and long time required in creating these models are major obstacles hindering drug resistance research and drug screening. Herein, we report an approach that can accelerate(shortening the time from years to 3 weeks) the establishment of cancer cell line-based, inheritable drug resistance models by specific knockout of MED12 gene using CRISPR/Cas9 system. The resultant MED12^(KO) A375(melanoma)cell line was resistant to inhibitors of B-Raf proto-oncogene, serine/threonine kinase(BRAF), whereas the resultant MED12^(KO) PC9(non-small cell lung cancer) cell line was resistant to inhibitors of epidermal growth factor receptor(EGFR). Evaluation of anti-cancer drugs and their combinations shows that certain combinations of BRAF inhibitors and TGF-β receptor(TGF-βR) inhibitors are active in suppressing the growth of MED12^(KO) A375 cells, and a few combinations of EGFR inhibitors and TGF-βR inhibitors were active in suppressing the growth of MED12^(KO) PC9 cells. The drug-resistant models will be useful in screening novel drugs and drug combinations for multi-drug-resistant cancer therapy.

关键词： CRISPR/Cas9 Drug resistance Cancer Cell line Gene editing

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水稻糙米蛋白质含量的QTL定位

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分子植物育种 2009年第1期7卷 67-72页

作者：张涛郑家奎吴先军蒋开锋杨乾华陈温福杨莉四川农业科学院水稻高粱研究所德阳618000 国家水稻改良中心四川泸州分中心泸州646000 四川农业大学水稻研究所温江611130 沈阳农业大学农学院沈阳110161

蛋白质含量是评价稻米品质的一项重要指标,控制水稻糙米蛋白质含量的基因位点是数量性状,检测水稻糙米蛋白质含量的QTL并进行遗传效应分析对于水稻品质遗传育种具有重要的意义。本研究以中优早/丰锦重组自交系群体作为定位群体,结合构... 详细信息

蛋白质含量是评价稻米品质的一项重要指标,控制水稻糙米蛋白质含量的基因位点是数量性状,检测水稻糙米蛋白质含量的QTL并进行遗传效应分析对于水稻品质遗传育种具有重要的意义。本研究以中优早/丰锦重组自交系群体作为定位群体,结合构建的遗传连锁图谱利用Windows QTL Cartogtapher2.0软件,采用复合区间作图法对水稻糙米蛋白质含量进行QTL定位和效应分析。检测到控制糙米蛋白质含量的QTL6个(qPc-3、qPc-6、qPc-7、qPc-8-1、qPc-8-2和qPc-11),分别位于第3、6、7、8和11连锁群上。单个QTL对群体表型变异的贡献率为3.79%～19.41%,联合贡献率为61.07%。在这些QTL的区间中,第8染色体的qPc-8-1基因区域对糙米蛋白质含量具有主效作用。进一步分析和比较了相关研究结果,讨论了研究结果对开展稻米品质遗传育种的意义。

关键词：糙米蛋白质含量数量性状座位(QTL) 重组自交系(RIL)

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北方超级粳稻育种研究进展与前景

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北方水稻 2007年第1期37卷 1-8页

作者：陈温福徐正进张文忠马殿荣张龙步沈阳农业大学水稻研究所辽宁沈阳110161

从育种理论、育种技术及新品种选育等方面,综合评述了中国北方超级粳稻育种研究的进展与前景,认为培育和推广超级稻是继株型育种和杂交稻之后,提高北方粳稻综合生产能力,实现北方水稻生产跨越式发展的重要途径。在“利用籼粳稻杂交创造... 详细信息

从育种理论、育种技术及新品种选育等方面,综合评述了中国北方超级粳稻育种研究的进展与前景,认为培育和推广超级稻是继株型育种和杂交稻之后,提高北方粳稻综合生产能力,实现北方水稻生产跨越式发展的重要途径。在“利用籼粳稻杂交创造新株型和强优势,通过回交或复交优化性状组配,聚合有利基因,进而选育理想株型与优势利用相结合的超级稻”育种理论与技术路线确立之后,常规超级梗稻育种已取得了重大突破,成功地培育出一批优质抗病的超级稻新品种并已广泛应用于生产。与常规超级稻育种相比,超级杂交粳稻育种研究进展相对较缓慢。这一方面是由于北方气候与生态条件的限制,另一方面是育种技术研究相对落后。解决优势与生育期的矛盾、产量与品质的矛盾以及提高制种产量等问题,仍然是北方超级杂交粳稻育种所面临的严峻挑战。讨论了与超级粳稻育种有关的生理和遗传问题。

关键词：水稻理想株型超级稻育种

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特高拱坝施工期多维信息模型研究与实践

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清华大学学报（自然科学版） 2022年第12期62卷 1884-1895页

作者：谭尧升陈文夫林恩德林鹏周天刚周孟夏刘春风裴磊梁程尚超杨鹏博姚孟迪李向前李俊平中国长江三峡集团有限公司北京100038 中国三峡建工(集团)有限公司成都610041 清华大学水利水电工程系北京100084 武汉英思工程科技股份有限公司武汉430071

信息模型是一种应用于现代工程设计、建造与项目管理的新型协同管理工具。基于水利水电工程施工期信息模型表达不全面、信息数据流通不畅等问题,在物联网、区块链和人工智能等信息技术迭代更新日益频繁的背景下,将先进信息技术与特高拱... 详细信息

信息模型是一种应用于现代工程设计、建造与项目管理的新型协同管理工具。基于水利水电工程施工期信息模型表达不全面、信息数据流通不畅等问题,在物联网、区块链和人工智能等信息技术迭代更新日益频繁的背景下,将先进信息技术与特高拱坝建造过程深度融合,提出一种使用建筑信息模型(building information modeling, BIM)的项目协作管理方法。该文通过借鉴BIM技术和信息模型理念,构建了特高拱坝施工期多维信息模协作管理体系,研究多维信息模型构建方法与实现过程;采用Visual C#网络编程技术,研发了涵盖工程进度、质量、安全和合同等内容的特高拱坝施工期多维信息模型管理平台。以白鹤滩300 m级特高拱坝为例,在应用实践中实现了大坝设计与施工全过程的信息化与智能化管理。该平台改善了传统水电工程信息散乱、流动效率低的问题,利于控制施工进度和工程建设质量、辅助精准施工和技术优化,推动项目管理水平和行业技术发展。

关键词：水利水电工程特高拱坝多维信息模型施工期信息管理平台

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服务乡村振兴强化新农科人才“农匠”精神培养

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高等农业教育 2021年第3期 3-7页

作者：陈温福周宇飞李晓安马殿荣于海秋沈阳农业大学水稻研究所辽宁沈阳110161 沈阳农业大学农学院辽宁沈阳110161

乡村振兴战略对我国农业、农村现代化的实现提出了新的要求,全方位服务乡村振兴,高等农林教育迫切需要强化以新农科建设为主线的高等教育教学改革。新农科建设的根本任务在于人才培养,在新农科人才培养中应融入对"农匠"精神的培养,"农匠... 详细信息

乡村振兴战略对我国农业、农村现代化的实现提出了新的要求,全方位服务乡村振兴,高等农林教育迫切需要强化以新农科建设为主线的高等教育教学改革。新农科建设的根本任务在于人才培养,在新农科人才培养中应融入对"农匠"精神的培养,"农匠"精神具有技艺追求、个人价值和社会责任等方面的深刻内涵。培养"农匠"精神可以采取专业素质教育升级与通识教育融通,产业、科研与专业教育融通,多维度的教育资源与素质教育融通的机制,通过加强课程思政教育,建设"双师型"教师队伍,整合多重教育行动等途径实现。

关键词：乡村振兴新农科 “农匠”精神培养

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北方粳稻分子育种研究进展

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分子植物育种 2005年第5期3卷 613-618页

作者：王嘉宇徐正进孟军徐海陈温福周淑清沈阳农业大学水稻研究所沈阳110161

本文介绍了北方粳稻分子育种课题的研究情况和所取得的研究成果。目前主要进行两方面的研究,一方面为特异基因型的鉴定:主要有筛选鉴定出抗旱性材料86份,苗期抗寒性材料40份,后期抗寒性材料629份,抗稻瘟病材料28份,对筛选出的抗旱性材... 详细信息

本文介绍了北方粳稻分子育种课题的研究情况和所取得的研究成果。目前主要进行两方面的研究,一方面为特异基因型的鉴定:主要有筛选鉴定出抗旱性材料86份,苗期抗寒性材料40份,后期抗寒性材料629份,抗稻瘟病材料28份,对筛选出的抗旱性材料进行了第二轮聚合杂交,共配组合171个。另一方面是关于遗传与生理基础研究,对穗部性状、粒形、产量和品质以及它们之间的关系进行了深入的研究。另外本文对北方粳稻分子育种材料构建过程中存在的问题进行了综合讨论,并讨论北方粳稻分子育种今后的发展方向。

关键词：粳稻分子育种研究进展北方粳稻育种研究育种材料筛选鉴定产量和品质研究成果抗稻瘟病

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大白菜低温胁迫转录因子BcICE1的克隆及表达分析

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分子植物育种 2011年第3期9卷 364-369页

作者：向殿军殷奎德满丽莉陈温福赵明辉徐正进沈阳农业大学水稻研究所/农业部作物生理生态遗传育种重点开放试验室/辽宁省北方粳稻育种重点实验室沈阳110161 黑龙江农业经济职业学院牡丹江157041 黑龙江八一农垦大学生命科学学院大庆163319

本研究采用RT-PCR结合SON-PCR技术从大白菜(Brassica pekinensis)中分离了BcICE1基因的cDNA序列(GenBank登录号为HQ902162)。该基因全长1591bp,含有一个1494bp长的开放阅读框,编码497个氨基酸。序列比对表明,该蛋白C端含有一个典型的bHL... 详细信息

本研究采用RT-PCR结合SON-PCR技术从大白菜(Brassica pekinensis)中分离了BcICE1基因的cDNA序列(GenBank登录号为HQ902162)。该基因全长1591bp,含有一个1494bp长的开放阅读框,编码497个氨基酸。序列比对表明,该蛋白C端含有一个典型的bHLH结构域,与其他植物的ICE1蛋白具有较高的同源性。进化树分析表明,BcICE1蛋白与盐芥和山嵛菜的bHLH蛋白处在同一进化分枝。半定量RT-PCR分析表明,BcICE1基因是冷诱导条件下差异表达的基因。利用所构建的大肠杆菌表达载体,实现了BcICE1基因在原核系统的特异性表达。

关键词：大白菜 BcICE1基因单侧寡聚核苷酸巢式PCR 序列分析表达分析

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粳稻颖果石蜡切片中染色时间的摸索及其解剖结构的观察

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作物杂志 2010年第5期 80-83,129,130页

作者：于晓刚张文忠韩亚东李婧徐海赵明辉高东昌徐正进陈温福沈阳农业大学水稻研究所/教育部北方粳稻遗传育种省部共建重点实验室/农业部北方作物生理生态重点开放实验室/辽宁省北方粳稻遗传育种重点实验室辽宁沈阳110161 呼伦贝尔市农业科学研究所内蒙古扎兰屯162650

以典型粳稻品种辽粳294和盐丰47花后不同天数的颖果为试材,对传统石蜡切片技术中固绿步骤的染色时间进行试验。结果表明,花后不同天数的颖果染色最佳时间差异很大,即发育的前期颖果幼嫩,固绿染色时间反而较长,需要20～25s,而后期随着颖... 详细信息

以典型粳稻品种辽粳294和盐丰47花后不同天数的颖果为试材,对传统石蜡切片技术中固绿步骤的染色时间进行试验。结果表明,花后不同天数的颖果染色最佳时间差异很大,即发育的前期颖果幼嫩,固绿染色时间反而较长,需要20～25s,而后期随着颖果逐渐充实,染色时间相对缩短,只需10～20s。利用改良后的方法,对颖果结构进行观察发现,花后第4天～第22天颖果果皮结构石蜡切片完整清晰,第4天～第12天颖果整体结构完整清晰,染色分明。观测表明,两品种颖果背部维管束截面均近似椭圆形,从整体上看,两品种颖果背部维管束表现为从基部到顶部由粗到细的象牙形管—束状结构,由居中的导管束和周边的若干筛管束构成。通过改进的切片方法可以对颖果的解剖结构进行清晰地观察。

关键词：粳稻石蜡切片染色颖果番红—固绿

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应用德尔菲法构建云南疟疾咨询服务站评价指标探索

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中国卫生标准管理 2023年第16期14卷 15-20页

作者：李建雄孙晓东陈文富尹授钦曾旭灿许建卫云南省寄生虫病防治所蠕虫/原虫病防制科云南普洱665099 云南省寄生虫病防治所疟疾防制科云南普洱665099 普洱市疾控中心应急办云南普洱665099 腾冲市疾控中心地方病防制科云南腾冲679100 云南省寄生虫病防治所应急办云南普洱665099

目的应用德尔菲法构建云南省疟疾咨询服务站的评价指标,为云南消除疟疾后科学、可靠的评估服务站效能提供依据。方法于2016年6月—2018年8月设立研究组,经查阅文献,组内讨论,拟定服务站评价指标池,对22名从事疟疾防治的专家进行3轮问卷... 详细信息

目的应用德尔菲法构建云南省疟疾咨询服务站的评价指标,为云南消除疟疾后科学、可靠的评估服务站效能提供依据。方法于2016年6月—2018年8月设立研究组,经查阅文献,组内讨论,拟定服务站评价指标池,对22名从事疟疾防治的专家进行3轮问卷咨询,用统计学软件处理数据,得出评价指标。结果3轮问卷的有效回收率分别为100%(22/22)、90.9%(20/22)、81.8%(18/22);专家对指标的重要性赋值均数为5.20,权威程度均在0.70以上;专家意见的协调系数分别为0.619、0.600、0.763(P<0.001);最终共筛选出3个一级指标和4个二级指标。结论本研究筛选出的评价指标专家代表性强、权威程度高、专家意见集中、协调性好,如何科学、合理、有针对性地使用该评价指标,是保证服务站发挥其应有效能,为疟疾防控提供有效保障的关键。

关键词：公共卫生热带传染病消除疟疾边境防控 “三道防线” 疟疾咨询服务站德尔菲法评价指标问卷调查

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甜柿品种引种栽培的研究

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经济林研究 1999年第1期17卷 13-15页

作者：龚范武柏文富吴思政陈升高张贻次湖南省森林植物园

对４个甜柿品种在长沙地区的引种栽培及其生长发育和产量情况进行研究，证明甜柿可在长沙地区进行栽培，对４个甜柿品种的品比试验表明，湖南丘陵红壤地区宜选用富友和禅寺丸为主栽品种。

关键词：甜柿引种栽培生长发育

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