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Efficacy of Dangua Fang(丹瓜方) on endothelial cells damaged by oxidative stress

Journal of Traditional Chinese Medicine 2022年第6期42卷 900-907页

作者： HENG Xianpei LI Liang YANG Liuqin WANG Zhita Department of Endocrinology People's Hospital Affiliated to Fujian University of Traditional Chinese MedicineFuzhou 350004China

OBJECTIVE: To evaluate the protective effects of serum containing Dangua Fang( 丹瓜方) on vascular endothelium damaged by oxidative stress. METHODS: Five experiments were completed in this paper. In the first experiment, we found the most suitable serum containing Dangua Fang by comparing groups with different serum containing Dangua Fang. In the second experiments we analyzed Dangua Fang influencing endothelial cell viability and apoptosis and cell cycle. The third experiment on Dangua Fang intervention of mitochondrial respiratory chain. The fourth experiment on Dangua Fang intervention of mitochondrial membrane potential. And finally, on the fifth experiment we researched the mechanism of Dangua Fang improving mitochondrial function by comparing the Na~+-k~+-ATPase and peroxisome proliferator-activated receptor-gamma coactivator-1alpha(PGC-1α) in the Dangua group with the diazoxide group and Co Q+Vit C group. RESULTS: We compared the control group in the first experiments and the OD values in DZ1 group was the most significant in all intervening groups. The recipe of DZ1(5% serum containing Dangua Fang) was used in the following experiments. Compared with the control group, cell viability, cell cycle(G2 + S), cytochrome c oxidase(COX), R3 red/green, R2 red/green, R1 red/green decreased and apoptosis, succinate dehydrogenase(SDH), green(R2 + R3), Na+-k+-ATPase, PGC-1α increased in the model group. Compared with the model group, cell viability, G2+S, COX, R3 red/green, R2 red/green, R1 red/green raised and apoptosis, green(R2 + R3), Na-K-ATPase decreased in the Dangua group;G2 + S, R3 red/green, R2 red/green, R1 red/green raised and green(R2 + R3) decreased in the Co Q + Vit C group. Na-K-ATPase increased in the combined group(P < 0.05 or < 0.01). CONCLUSIONS: Dangua Fang protects oxidative stressinduced endothelial cells damaged by promotion of mitochondrial biogenesis, reduction of Na~+-K~+-ATPase activity and regulation of mitochondrial respiratory chain function restoring mitochondrial membrane potential.

关键词： mitochondria oxidative stress endothelial cells peroxisome proliferator-activated receptor gamma coactivator 1-alpha Dangua Fang

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Dangua Fang(丹瓜方)regulating tricarboxylic acid cycle and respiratory chain and its mechanism in diabetic rats

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Journal of Traditional Chinese Medicine 2023年第6期43卷 1150-1159页

作者： HENG Xianpei WANG Zhita YANG Liuqing LI Liang HUANG Suping Department of Endocrinology People's Hospital Affiliated to Fujian University of Traditional Chinese MedicineFuzhou 350004China Academy of Integrative Medicine Fujian Fujian University of Traditional Chinese MedicineFuzhou 350122China

OBJECTIVE:To investigate the influence and possible targets of Dangua Fang(丹瓜方)on tricarboxylic acid(TCA)cycle and respiratory chain to enrich the prescription’s mechanism of effective intervention on glycolipid metabolic diseases such as type 2 diabetes.METHODS:After interventional rats were fed with high glucose and high fat diet ad libitum for 4 weeks,intraperitoneally injected streptozotocin to induce diabetic model.According to blood glucose level,28 diabetic rats were selected and continued to be fed with high glucose and high fat diet,were stratified by body weight,and divided randomly by blood glucose into Model group(was given sterile water by gastric perfusion and injected aquae pro injection intraperitoneally),Dangua group[Dangua liquor(丹瓜方液)20.5 g·kg^(-1)·d^(-1) by perfusion and aquae pro injection intraperitoneally],Inhibitor group[sterile water by perfusion and nicotinamide phosphoribosyl transferase(Nampt)specific blocker GEN-6171.25 mg/kg intraperitoneally],DanInhit group(Dangua liquor and GEN-617 synchronously).Control group were continuously fed with ordinary diet.The intervention was last for 10 weeks.Body weight(BW),liver index(LI),glycosylated hemoglobin(HbA1c),TC,TG,free fatty acids(FFA),creatinine(Cr),and A-ketoglutarate(α-KG),Iso-citric acid(ICA),oxaloacetic acid(OAA)were tested.The cytochrome C oxidase(COX)and Succinate dehydrogenase(SDH)were evaluated by Colorimetry;Nampt protein,Adenosine triphosphate(ATP)synthase(ATPs),Nicotinamide adenine dinucleotide(NAD^(+))and its reduced(NADH)in liver were measured by enzyme linked immunosorbent assay.The expressions of Nampt and mitochondrialnadhdehydrogenase-1(mt-ND1)gene in liver was assessed by real-time polymerase chain reaction.Hepatic tissue staining was also completed.RESULTS:The levels of BW,ICA,α-KG and Nampt-mRNA in the Model group are lower than that in the Normal group(P<0.05),conversely,liver weight,LI,TC,HbA1c,SDH and ATPs,mt-ND1-mRNA,and Nampt protein in the Model group are higher(P<0.01,P<0.05).Compared with Model group,the levels

关键词： Dangua Fang diabetes mellitus citric acid cycle electron transport nicotinamide phosphoribosyltransferase

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Mechanisms of Dangua Fang(丹瓜方)in multi-target and multi-method regulation of glycolipid metabolism based on phosphoproteomics

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Journal of Traditional Chinese Medicine 2024年第2期44卷 334-344页

作者： HENG Xianpei WANG Zhita LI Liang YANG Liuqing HUANG Suping JIN Lang HE Weidong Department of Endocrinology People's Hospital Affiliated to Fujian University of Traditional Chinese MedicineFuzhou 350004China Academy of Integrative Medicine Fujian University of Traditional Chinese MedicineFuzhou 350122China Faculty of Humanities and Management Fujian University of Traditional Chinese MedicineFuzhou 350122China Department of Geriatrics People's Hospital Affiliated to Fujian University of Traditional Chinese MedicineFuzhou 350004China

OBJECTIVE:To explore the mechanism of Dangua Fang(丹瓜方,DGR)in multi-target and multi-method regulation of glycolipid metabolism based on phosphoproteomics.METHODS:Sprague-Dawley rats with normal glucose levels were randomly divided into three groups,including a conventional diet control group(Group A),high-fat-highsugar diet model group(Group B),and DGR group(Group C,high-fat-high-sugar diet containing 20.5 g DGR).After 10 weeks of intervention,the fasting blood glucose(FBG),2 h blood glucose[PBG;using the oral glucose tolerance test(OGTT)],hemoglobin A1c(HbA1c),plasma total cholesterol(TC),and triglycerides(TG)were tested,and the livers of rats were removed to calculate the liver index.Then,hepatic portal TG were tested using the Gross permanent optimization-participatiory action planning enzymatic method and phosphoproteomics was performed using liquid chromatography with tandem mass spectrometry(LC-MS/MS)analysis followed by database search and bioinformatics analysis.Finally,cell experiments were used to verify the results of phosphoproteomics.Phosphorylated mitogen-activated protein kinase kinase kinase kinase 4(MAP4k4)and phosphorylated adducin 1(ADD1)were detected using western blotting.RESULTS:DGR effectively reduced PBG,TG,and the liver index(P1.2),DGR upregulated the modification of 228 phosphorylation sites involving 204 corresponding function proteins,and downregulated the modification of 358 phosphorylation sites involving 358 corresponding function proteins,which included correcting 75 phosphorylation sites involving

关键词： phosphoproteomics glycolipid metabolism therapeutic mechanism compound formula Dangua Fang

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丹瓜方调节糖脂代谢紊乱大鼠氨基酸代谢研究

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福建中医药 2022年第1期53卷 12-16页

作者：衡先培王志塔李亮黄苏萍杨柳清福建中医药大学附属人民医院福建福州350004 福建中医药大学福建福州350122

目的研究痰瘀同治丹瓜方对糖脂代谢紊乱大鼠氨基酸代谢的影响。方法将SD大鼠随机分为对照组和造模组,对照组饲以普通饲料,造模组饲以高脂、高糖饲料4周建立糖脂代谢紊乱模型。将造模成功的大鼠随机分为模型组和丹瓜方组,丹瓜方组以丹瓜... 详细信息

目的研究痰瘀同治丹瓜方对糖脂代谢紊乱大鼠氨基酸代谢的影响。方法将SD大鼠随机分为对照组和造模组,对照组饲以普通饲料,造模组饲以高脂、高糖饲料4周建立糖脂代谢紊乱模型。将造模成功的大鼠随机分为模型组和丹瓜方组,丹瓜方组以丹瓜方灌胃液灌胃,模型组以清洁自来水灌胃,3组均继续喂食各自原有饲料。药物干预10周后,采用口服葡萄糖负荷试验检测空腹血糖(FBG)和2 h血糖(2 h PBG),采用常规生化法检测血浆胆固醇(TC)、甘油三脂(TG),采用HE染色、油红O脂肪染色和Masson染色观察大鼠肝组织病理改变,采用LC-MS/MS进行蛋白质组学和磷酸化组学分析。结果模型组血糖、血脂显著高于对照组;相对于对照组,肝组织影像学显示模型组肝脏及肝细胞显著脂肪变及纤维化;丹瓜方组显著好于模型组。丹瓜方可直接调节蛋氨酸、胱氨酸、半胱氨酸、高半胱氨酸、精氨酸、N-乙酰谷氨酸、氨甲酰磷酸、谷氨酸的合成,尤其是通过多途径上调谷氨酸的合成,并通过调节胆汁酸代谢和尿素循环,最终影响各种氨基酸的代谢。结论丹瓜方具有显著调控糖脂代谢紊乱大鼠氨基酸代谢作用,其机制与调节D3ZPY2、Q68FT5、P10860、D4A904蛋白表达及P10860、D4A904蛋白的磷酸化有关。

关键词：糖脂代谢丹瓜方痰瘀同治氨基酸代谢

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丹瓜方对糖尿病大鼠胰腺形态及GLUT4、LEP表达的影响

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辽宁中医药大学学报 2022年第12期24卷 5-9页

作者：何卫东杨柳清衡先培王志塔李亮福建中医药大学附属人民医院福建福州350004

目的探讨丹瓜方对糖尿病大鼠胰腺形态及葡萄糖转运蛋白4(glucose transporter 4,GLUT4)、瘦素(leptin,LEP)表达的影响。方法SD大鼠按前期研究方案造模成糖尿病大鼠,随机分为正常组、模型组、二甲双胍组、常规剂量组、高剂量组。干预16... 详细信息

目的探讨丹瓜方对糖尿病大鼠胰腺形态及葡萄糖转运蛋白4(glucose transporter 4,GLUT4)、瘦素(leptin,LEP)表达的影响。方法SD大鼠按前期研究方案造模成糖尿病大鼠,随机分为正常组、模型组、二甲双胍组、常规剂量组、高剂量组。干预16周后分离获取胰腺组织并进行HE染色,检测糖尿病大鼠肌肉和脂肪组织GLUT4、LEP的表达。结果HE染色形态:正常组胰岛细胞外观呈饱满球形,细胞排列匀齐,胞质内含有大量胰岛素分泌颗粒,胰岛细胞占胰岛大部分范围;胰岛数量较多,面积较大,均衡分布并和腺泡分界清楚。与正常组比较,模型组胰岛细胞形态萎缩,排列混乱;胞质内胰岛素分泌颗粒显著减少;胰岛数量较少,面积较小,不均匀分布。与模型组比较,常规剂量组、高剂量组及二甲双胍组胰岛结构较规整,胰岛面积较大,胰岛细胞萎缩程度较轻,胰岛素分泌颗粒较多。与正常组比较,模型组和二甲双胍组大鼠肌肉GLUT4蛋白的表达量显著降低(P<0.01),常规剂量组大鼠肌肉GLUT4蛋白表达显著增加(P<0.01);模型组大鼠脂肪LEP的mRNA表达量显著降低(P<0.01)。和模型组相比,常规剂量组、高剂量组的大鼠肌肉GLUT4蛋白表达显著增加(P<0.01),二甲双胍组、常规剂量组、高剂量组大鼠脂肪LEP的mRNA表达量增加(P<0.05或P<0.01);与二甲双胍组比较,常规剂量组及高剂量组大鼠肌肉GLUT4蛋白表达显著增加(P<0.01),常规剂量组大鼠脂肪LEP的mRNA表达量显著增加(P<0.05)。结论丹瓜方可改善胰岛细胞的形态,丹瓜方可以通过调节GLUT4蛋白及LEP的mRNA表达来影响胰岛素功能达到控制血糖的目的。

关键词：糖尿病痰瘀同治丹瓜方葡萄糖转运蛋白4 瘦素

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丹瓜方治疗2型糖尿病合并非酒精性脂肪性肝病临床观察

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光明中医 2022年第23期37卷 4227-4230页

作者：杨柳清衡先培李亮王志塔陈敏灵福建中医药大学附属人民医院内分泌科福建福州350004

目的观察丹瓜方对痰瘀型2型糖尿病合并非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)患者肝纤维化评分(NFS)和血清肝纤维化指标的影响。方法将112例痰瘀型2型糖尿病合并NAFLD且NFS>0.676的患者用随机数字表法随机分为对照组55例、治疗组57例。对照组予健... 详细信息

目的观察丹瓜方对痰瘀型2型糖尿病合并非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)患者肝纤维化评分(NFS)和血清肝纤维化指标的影响。方法将112例痰瘀型2型糖尿病合并NAFLD且NFS>0.676的患者用随机数字表法随机分为对照组55例、治疗组57例。对照组予健康教育、饮食控制、运动治疗、降糖和降脂治疗。治疗组在对照组干预基础上加用丹瓜方。2组均连续治疗12周。观察治疗前后2组FBG、2 h-BG、HbA1c、血脂、肝功、NFS、肝纤维化指标及证候积分的变化。结果与对照组相比,治疗组治疗后FBG、Hb A1c、AST、TC、C-IV、HA、NFS和证候积分明显降低(P0.05)。结论丹瓜方能够改善及延缓2型糖尿病合并NAFLD患者的肝纤维化的进展,同时具有改善糖脂代谢、保护肝功能的作用。

关键词： 2型糖尿病非酒精性脂肪性肝病丹瓜方痰瘀同治中医药疗法

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内生痰湿对2型糖尿病大鼠造模的影响

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辽宁中医杂志 2015年第12期42卷 2453-2455页

作者：王志塔陈依楚黄苏萍李亮衡先培福建中医药大学福建福州350122 福建中医药大学附属人民医院福建福州350004

目的:通过以高脂饲料模拟过食肥甘酿生痰湿,观察其对低剂量链脲佐菌素塑造2型糖尿病动物模型的成模情况的影响,为用祛痰除湿法治疗2型糖尿病提供借鉴。方法:12只正常雄性SD大鼠,按体重随机分成痰湿组和对照组。其中痰湿组喂食高脂饲料,... 详细信息

目的:通过以高脂饲料模拟过食肥甘酿生痰湿,观察其对低剂量链脲佐菌素塑造2型糖尿病动物模型的成模情况的影响,为用祛痰除湿法治疗2型糖尿病提供借鉴。方法:12只正常雄性SD大鼠,按体重随机分成痰湿组和对照组。其中痰湿组喂食高脂饲料,对照组喂食普通饲料。4周后,早晨8:00至下午20:00禁食不禁水12 h,称量大鼠体重,测空腹血糖。将链脲佐菌素按30 mg/kg的剂量腹腔注射,连续3 d。于最后1日注射后48 h及72 h测空腹血糖。以空腹血糖≥11.1 mmol/L为该模型糖尿病诊断切点。结果:痰湿组成模率高于对照组。结论:内生痰湿是2型糖尿病发病的重要因素,其能够稳定提高2型糖尿病大鼠造模成模率。适当祛痰除湿,能有效防治2型糖尿病。

关键词：祛痰除湿 2型糖尿病链脲佐菌

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丹瓜护脉口服液对2型糖尿病合并非酒精性脂肪性肝病患者血管内皮功能及氧化应激指标的影响

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中国医院用药评价与分析 2021年第8期21卷 918-921页

作者：陈敏灵王志塔杨柳清李亮衡先培福建中医药大学附属人民医院内分泌科福建福州350004

目的:探讨痰瘀同治指导下丹瓜护脉口服液对2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)合并非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)患者血管内皮功能及氧化应激指标的影响。方法:选取2018年1月至2020年7月福建中... 详细信息

目的:探讨痰瘀同治指导下丹瓜护脉口服液对2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)合并非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)患者血管内皮功能及氧化应激指标的影响。方法:选取2018年1月至2020年7月福建中医药大学附属人民医院收治的T2DM合并NAFLD患者92例,按照入院先后顺序分为对照组46例和观察组46例。对照组患者给予常规治疗,观察组患者在对照组的基础上根据痰瘀同治指导理论予以丹瓜护脉口服液,均治疗3个月。比较两组患者的疗效,治疗前后血糖[空腹血糖(FBG)、餐后2 h血糖(2 hBG)及糖化血红蛋白(HbA lc)]、血脂[总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)及低密度脂蛋白(LDL)]、肝功能[丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)及γ-谷氨酰转移酶(GGT)]、血管内皮功能[血管内皮生长因子(VEGF)、内皮素(ET-1)]及氧化应激[丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)]等指标水平。结果:观察组患者的总有效率为89.13%(41/46),明显高于对照组的71.74%(33/46),差异有统计学意义(P0.05),2 hBG、TC、TG、LDL、ET-1及MDA水平明显低于对照组,HDL、VEGF及SOD水平明显高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:痰瘀同治指导下使用丹瓜护脉口服液治疗,能够更好地调节T2DM合并NAFLD患者的血脂和血糖代谢,改善其血管内皮功能,减轻氧化应激反应,提高治疗效果,且无明显不良反应。

关键词： 2型糖尿病非酒精性脂肪性肝病痰瘀同治丹瓜护脉口服液血管内皮功能氧化应激血糖肝功能

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丹瓜方对糖尿病大鼠离体心脏垂体后叶素所致心肌缺血模型的影响

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辽宁中医杂志 2017年第6期44卷 1300-1303页

作者：邹平平衡先培李亮杨柳清王志塔徐睿熙福建中医药大学福建福州350122 福建中医药大学附属人民医院福建福州350004

目的:观察中药复方丹瓜方对高脂糖尿病大鼠离体心脏的垂体后叶素所致心肌缺血模型的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:选取SD大鼠,随机分出正常组大鼠,其余大鼠经糖尿病造模后,随机分为模型组、糖脉康组及丹瓜方低、中、高剂量组。干... 详细信息

目的:观察中药复方丹瓜方对高脂糖尿病大鼠离体心脏的垂体后叶素所致心肌缺血模型的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:选取SD大鼠,随机分出正常组大鼠,其余大鼠经糖尿病造模后,随机分为模型组、糖脉康组及丹瓜方低、中、高剂量组。干预12周后采用Langendorff恒流灌流装置及加有垂体后叶素的K-H液灌注离体心脏,分别观察并记录各时间段的冠脉流量、心率及心肌收缩幅度。结果:与正常组相比,中、高剂量组第30分钟心肌收缩幅度均升高(P<0.05);与高剂量组相比,低剂量组和模型组第10分钟心率均降低(P<0.05),低剂量组、模型组及正常组第30分钟心率均降低(P<0.05);与中剂量相比,正常组及模型组第15分钟心肌收缩幅度均下降(P<0.05或P<0.01)。结论:丹瓜方对糖尿病缺血缺氧心肌有一定的保护作用。

关键词：糖尿病心肌缺血心脏灌流丹瓜方痰瘀同治

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丹瓜方对肥胖糖尿病大鼠PPARγ、CPT-1表达的影响

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福建中医药 2022年第9期53卷 41-43页

作者：何卫东衡先培杨柳清翁淑琴李亮王志塔福建中医药大学附属人民医院福建福州350004

目的探讨丹瓜方对肥胖糖尿病大鼠肝组织过氧化物酶体增殖物活化受体γ(PPARγ)和肾周脂肪肉碱棕榈酰转移酶-1(CPT-1)表达的影响。方法参照前期造模方案建立肥胖糖尿病大鼠模型,按随机化原则将SD大鼠分为对照组、模型组、二甲双胍组、常... 详细信息

目的探讨丹瓜方对肥胖糖尿病大鼠肝组织过氧化物酶体增殖物活化受体γ(PPARγ)和肾周脂肪肉碱棕榈酰转移酶-1(CPT-1)表达的影响。方法参照前期造模方案建立肥胖糖尿病大鼠模型,按随机化原则将SD大鼠分为对照组、模型组、二甲双胍组、常规剂量丹瓜方组(简称常规剂量组)和高剂量丹瓜方组(简称高剂量组)。二甲双胍组予二甲双胍药液灌胃,常规剂量组、高剂量组予不同浓度的丹瓜方药液灌胃,对照组和模型组以等量无菌水灌胃,共连续灌胃16周。ELISA法检测各组大鼠肝组织PPARγ及肾周脂肪CPT-1含量。结果与对照组比较,模型组大鼠肝组织PPARγ和肾周脂肪CPT-1含量明显降低(P<0.01);与模型组比较,高剂量组大鼠肝PPARγ含量明显升高(P<0.05),二甲双胍组、常规剂量组和高剂量组大鼠肾周脂肪CPT-1含量均明显升高(P<0.05,P<0.01)。结论丹瓜方可能通过调节机体PPARγ、CPT-1水平改善糖尿病脂代谢。

关键词：糖尿病肥胖丹瓜方脂代谢痰瘀同治

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