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蛋白质相互作用网络指导下青黄散治疗慢性粒细胞白血病的机制探究

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中华中医药学刊 2018年第7期36卷 1629-1633,I0012,I0013页

作者：刘存刘丽娟周超庄静孙月王璐朱帅孙长岗山东中医药大学山东济南250014 潍坊市中医院山东潍坊261041 潍坊医学院山东潍坊261000

目的：通过慢性粒细胞白血病（chronic myelogenous leukemia,CML）蛋白质相互作用网络的构建、分析与体外实验验证两部分,探讨青黄散治疗CML的有效分子学机制。方法：筛选在线人类孟德尔遗传数据库（OMIM）获得CML相关基因,STRING用于... 详细信息

目的：通过慢性粒细胞白血病（chronic myelogenous leukemia,CML）蛋白质相互作用网络的构建、分析与体外实验验证两部分,探讨青黄散治疗CML的有效分子学机制。方法：筛选在线人类孟德尔遗传数据库（OMIM）获得CML相关基因,STRING用于进一步文本挖掘并构建CML蛋白质相互作用网络,互作数据读入Cytoscape后,插件Centi Sca Pe和Cluster Viz用于实现拓扑和聚类分析,DAVID数据库富集关键通路信息。然后针对关键基因c-myc设计体外实验,制备青黄散含药血清,MTT法检测阴性对照组（无药血清）与实验组（5%、10%和20%青黄散含药血清）在24、48、72 h对K562细胞的增殖抑制率,Western Blot法检测c-myc蛋白的表达情况。结果：构建了由416个节点（蛋白质）和2792条边（相互作用）组成的蛋白质相互作用网络,分析得出关键基因c-myc。实验结果表明,与阴性对照组相比,实验组能有效的抑制K562细胞增殖,且青黄散含药血清能有效抑制c-myc的表达,两者具有统计学意义（P〈0.05）。结论：CML是一个受多基因调控、多信号通路传导的复杂疾病,c-myc很可能是关键节点,而青黄散对K562细胞增殖的抑制作用机制之一是降低c-myc的表达。

关键词：青黄散慢性粒细胞白血病蛋白质相互作用网络 c-myc

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胡萝卜品种及栽培模式对比试验初报

长江蔬菜 2008年第16期 46-48页

作者：罗国亮努尔比燕王辉霞华敏玉日姑丽新疆喀什地区园艺蚕桑特产技术推广中心 844000 喀什市农业技术推广中心 844000

为提高喀什地区胡萝卜产量及品质,在春播胡萝卜上选择沁黄胡萝卜、红胡萝卜、黄胡萝卜3个品种进行比较试验,结果表明黄胡萝卜适应性好、产量高、品质好。在复播胡萝卜上开展了小畦条播、小畦撒播、起垄条播和起垄撒播4种栽培模式对比试... 详细信息

为提高喀什地区胡萝卜产量及品质,在春播胡萝卜上选择沁黄胡萝卜、红胡萝卜、黄胡萝卜3个品种进行比较试验,结果表明黄胡萝卜适应性好、产量高、品质好。在复播胡萝卜上开展了小畦条播、小畦撒播、起垄条播和起垄撒播4种栽培模式对比试验,结果表明适于我区胡萝卜生产的最佳栽培模式为起垄撒播。

关键词：胡萝卜春播复播品种栽培模式

基于转录组测序揭示青黄散治疗骨髓增生异常综合征的作用机制

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世界中西医结合杂志 2023年第4期18卷 698-704页

作者：凌志明付中学王德秀杨秀鹏杜宇谷晓丽麻柔许勇钢中国中医科学院西苑医院血液科北京100091

目的研究青黄散治疗骨髓增生异常综合征(Myelodysplasticsyndrome, MDS)的潜在分子靶点及作用机制。方法研究纳入15例MDS患者,在治疗前以及青黄散治疗6个月后提取骨髓样本,以转录组测序检测治疗前后骨髓单个核细胞基因的差异表达,并... 详细信息

目的研究青黄散治疗骨髓增生异常综合征(Myelodysplasticsyndrome, MDS)的潜在分子靶点及作用机制。方法研究纳入15例MDS患者,在治疗前以及青黄散治疗6个月后提取骨髓样本,以转录组测序检测治疗前后骨髓单个核细胞基因的差异表达,并通过基因本体(GO)富集分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析对差异表达基因进行功能富集分析。利用Cytoscape 3.9.1软件构建差异表达基因蛋白质-蛋白质相互作用网络(PPI);为了验证体内结果,选取MDS细胞株MUTZ-1作为实验对象作体外实验,以青黄散主要有效成分硫化砷为干预手段,使用实时定量PCR验证测序结果。结果转录组分析证实,与治疗前比较,经青黄散治疗6个月后MDS患者骨髓有核细胞有2841个差异表达基因,包括1892上调基因和949个下调基因,GO功能富集分析发现这些差异表达基因参与了组蛋白修饰这一与MDS高度相关的生物过程。KEGG分析发现,HIF-1、TNF-α及VEGF等信号通路可能是青黄散治疗MDS的潜在通路。根据GO富集分析结果,组蛋白修饰差异表达基因被用于构建PPI蛋白互作网络并进行核心基因的筛选,进一步体外验证实验发现,硫化砷干预MDS细胞株后EP300、HDAC7与SETD2较对照组显著上调,HDAC6显著下调,与测序结果一致。结论组蛋白修饰是青黄散治疗MDS的重要作用机理,可能涉及EP300、HDAC6、HDAC7与SETD2等分子靶点。

关键词：青黄散硫化砷骨髓增生异常综合征组蛋白修饰转录组测序

小剂量青黄散及补肾健脾方联合雄激素治疗儿童难治性血细胞减少

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中医学报 2019年第12期34卷 2626-2629页

作者：王德秀付中学麻柔李柳许勇钢杨秀鹏杜宇王洪志中国中医科学院研究生院北京100700 中国中医科学院西苑医院北京100091

目的:分析小剂量青黄散及补肾健脾方联合雄激素对儿童难治性血细胞减少(refractory cytopenia of children,RCC)患儿的疗效及安全性。方法:回顾分析2012年1月至2018年1月就诊于中国中医科学院西苑医院血液科门诊被诊断为RCC,且首次接受... 详细信息

目的:分析小剂量青黄散及补肾健脾方联合雄激素对儿童难治性血细胞减少(refractory cytopenia of children,RCC)患儿的疗效及安全性。方法:回顾分析2012年1月至2018年1月就诊于中国中医科学院西苑医院血液科门诊被诊断为RCC,且首次接受小剂量青黄散及补肾健脾方联合雄激素治疗3个月及以上的27例患儿资料。比较治疗前及治疗6、12个月后外周血白细胞(white blood cell,WBC)计数、中性粒细胞(neutrophile granulocyte,ANC)计数、血红蛋白(hemoglobin,HGB)计数、血小板(platelet,PLT)计数及骨髓原始细胞数的变化,分析患儿治疗反应及外周血三系细胞的改善情况,并记录期间发生的不良反应及相应处理方案。结果:小剂量青黄散及补肾健脾方联合雄激素治疗RCC患儿6、12个月时有效率分别为70.4%和81.5%(P>0.05)。治疗6个月时,总体外周血三系细胞的获效率HGB>PLT>ANC(P0.05)。治疗12个月内,HGB计数持续且显著升高(P<0.01),PLT、ANC计数仅在治疗前6个月时较治疗前升高(P<0.01,P<0.05)。治疗12个月内,轻度不良反应发生率为11.1%。结论:小剂量青黄散及补肾健脾方联合雄激素可作为RCC患儿一种行之有效的治疗方案;本方案治疗RCC患儿可使外周血HGB获效率更早,计数提升也更显著。

关键词：儿童难治性血细胞减少青黄散补肾健脾方雄激素白细胞中性粒细胞血红蛋白血小板

复方青黄散治疗骨髓增生异常综合征安全性分析

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国际中医中药杂志 2014年第12期36卷 1074-1077页

作者：王月方苏宋敏敏胡晓梅北京中医药大学 100029 中国中医科学院西苑医院血液科北京100091 北京市昌平区南口铁路医院 102202

目的：评价复方青黄散治疗骨髓增生异常综合征（myelodysplastic syndromes，MDS）的安全性。方法108例MDS患者中，60例用青黄散治疗（青黄散组），48例用复方青黄散治疗（复方青黄散组）。3个月为1个疗程，治疗均在1个疗程以上。治疗... 详细信息

目的：评价复方青黄散治疗骨髓增生异常综合征（myelodysplastic syndromes，MDS）的安全性。方法108例MDS患者中，60例用青黄散治疗（青黄散组），48例用复方青黄散治疗（复方青黄散组）。3个月为1个疗程，治疗均在1个疗程以上。治疗后，青黄散组出现不良反应的患者更换为复方青黄散。记录治疗过程中的不良反应发生情况。结果复方青黄散组总不良反应发生率为18.8%，低于青黄散组的41.7%（χ^26.492，P＜0.05）。复方青黄散组无中度以上不良反应者，但青黄散组有3例。复方青黄散组各种不良反应发生率均低于青黄散组，尤其是下肢浮肿（4.2%比25%；χ^29.205，P＜0.05）；胃脘不适（18.8%比41.7%降为；χ^26.492，P＜0.05）。青黄散组出现不良反应的20例更换为复方青黄散后仍有5例存在不良反应，较换药前显著降低（25.0%比100.0%；χ^224.000，P＜0.05）。各种不良反应均较换药前下降，尤其是面部浮肿（10.0%比30.0%；χ^22.500，P＜0.05）、下肢肿胀（5.0%比45.0%；χ^28.533，P＜0.05）、腹痛腹泻（10.0%比30.0%；χ^22.500，P＜0.05）。复方青黄散治疗后，肝肾功能均未见异常。结论治疗MDS时，复方青黄散较青黄散更安全。

关键词：骨髓增生异常综合征青黄散雄黄砷中药不良反应

以雄黄为主方案治疗骨髓增生异常综合征伴多系病态造血患者的远期疗效

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世界中医药 2019年第10期14卷 2787-2789页

作者：周庆兵王洪志王德秀朱千赜杨秀鹏许勇钢胡晓梅麻柔中国中医科学院西苑医院老年医学研究所北京100091 中国中医科学院西苑医院血液病研究所北京100091

目的:观察雄黄为主方案治疗骨髓增生异常综合征伴多系病态造血(MDS-MLD)患者的远期疗效。方法:选取2007年8月至2015年4月中国中医科学院西苑医院收治的MDS-MLD患者130例作为研究对象并进行回顾性分析,给予青黄散(雄黄、青黛)、健脾补肾... 详细信息

目的:观察雄黄为主方案治疗骨髓增生异常综合征伴多系病态造血(MDS-MLD)患者的远期疗效。方法:选取2007年8月至2015年4月中国中医科学院西苑医院收治的MDS-MLD患者130例作为研究对象并进行回顾性分析,给予青黄散(雄黄、青黛)、健脾补肾汤药,治疗36个月及以上,以患者治疗前后外周血中性粒细胞(ANC)、血红蛋白(Hb)、血小板(PLT)为观察指标,评价治疗前后血液学改善情况,并比较不同遗传学分型疗效。结果:130例患者完全缓解、血液学进步、稳定、疾病进展分别为18例(13.84%)、80例(61.54%)、24例(18.46%)、8例(6.15%);130例患者治疗前后外周血细胞ANC、Hb及PLT计数差异有统计学意义(P0.05);不同遗传学分型血液学改善程度比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:以雄黄为主方案能改善MDS-MLD外周血象,对红系改善更为明显。

关键词：骨髓增生异常综合征伴多系病态造血雄黄远期疗效青黄胶囊中医药髓毒劳健脾补肾回顾性分析

含砷中药青黄散对骨髓增生异常综合征患者线粒体DNA拷贝数的影响

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世界中西医结合杂志 2019年第9期14卷 1185-1187,1202页

作者：杨秀鹏麻柔王洪志郭小青杜宇朱千赜王德秀许勇钢中国中医科学院西苑医院北京100091 中国中医科学院研究生院北京100700

目的探讨含砷中药青黄散治疗前后骨髓增生异常综合征(Myelodysplastic Syndromes,MDS)患者的线粒体DNA(Mitochondrial DNA,mtDNA)拷贝数的变化,并对其作用机理进行初步研究。方法收集2016年4月至2018年7月中国中医科学院西苑医院血液科... 详细信息

目的探讨含砷中药青黄散治疗前后骨髓增生异常综合征(Myelodysplastic Syndromes,MDS)患者的线粒体DNA(Mitochondrial DNA,mtDNA)拷贝数的变化,并对其作用机理进行初步研究。方法收集2016年4月至2018年7月中国中医科学院西苑医院血液科门诊的MDS患者40例为治疗组,以青黄散为主联合补肾健脾方治疗6个月。以RT-PCR方法检测青黄散治疗前后MDS患者骨髓单个核细胞的mtDNA拷贝数,同时以9例健康体检者的外周血有核细胞mtDNA拷贝数为正常对照组;以试剂盒检测青黄散治疗前后MDS患者骨髓上清液中超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)、谷胱甘肽(Glutathione,GSH)和丙二醛(Malondialdehyde,MDA)的变化。结果与正常对照组比较,治疗组治疗前MDS患者的mtDNA拷贝数明显增高(P<0.05);治疗组经青黄散治疗后mtDNA拷贝数与治疗前比较明显减低(P<0.05)。治疗组MDS患者经青黄散治疗后MDA的表达增加与治疗前比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论含砷中药青黄散治疗MDS的机理之一是改变mtDNA的拷贝数,而这种拷贝数的改变可能与砷制剂引起的氧化应激有关。

关键词：青黄散髓增生异常综合征线粒体DNA拷贝数氧化应激

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骨髓增生异常综合征的中医辨证论治

世界中医药 2017年第10期12卷 2339-2342,2346页

作者：赵攀邓中阳王明镜宋敏敏胡晓梅中国中医科学院西苑医院血液科北京100091 中国中医科学院研究生院北京100700 北京市昌平区南口铁路医院北京102202

目的:探讨骨髓增生异常综合征(MDS)辨证论治的临床意义。方法:选取2014年6月至2016年6月中国中医科学院西苑医院血液科门诊MDS患者43例,辨证分为肝肾阴虚与脾肾阳虚2个证型,接受复方青黄散治疗2个疗程,分析2个证型患者在遗传学、危度分... 详细信息

目的:探讨骨髓增生异常综合征(MDS)辨证论治的临床意义。方法:选取2014年6月至2016年6月中国中医科学院西苑医院血液科门诊MDS患者43例,辨证分为肝肾阴虚与脾肾阳虚2个证型,接受复方青黄散治疗2个疗程,分析2个证型患者在遗传学、危度分层、基因突变等精准指标下的客观化差异以及对复方青黄散的治疗反应。结果:1)2个证型患者临床特征:***亚型:脾肾阳虚组RAEB患者(5/31)显著高于肝肾阴虚组(0/12)(P<0.05)。b.遗传学:脾肾阳虚组预后好的核型(正常核型、+8、-Y)患者比例(22/31,)明显低于肝肾阴虚组(11/12)(P<0.05)。c.危度分层:脾肾阳虚组低危患者比例(4/31)明显低于肝肾阴虚组(3/12)(P<0.05)。d.基因测序:脾肾阳虚组合并突变者(11/14)较肝肾阴虚组(1/4)多见(P<0.05)。2)患者对复方青黄散的治疗反应:患者总有效率为90.69%。a.有效率:脾肾阳虚组(30/31)显著高于肝肾阴虚组(9/12)(P<0.05)。b.外周血细胞计数:脾肾阳虚组HB、NEUT显著升高(P<0.05)。输血量:48%患者摆脱输血(12/25)。2组患者人均月输血量显著下降(P<0.05)。结论:在遗传学、危度分层以及基因测序等层面上,脾肾阳虚型MDS较肝肾阴虚型更容易伴随预后较差的客观指标,但脾肾阳虚型患者对复方青黄散的治疗反应好于肝肾阴虚型。辨证分型有利于提供精准治疗方案。

关键词：骨髓增生异常综合征细胞遗传学二代基因测序雄黄砷辨证论治

定量PCR检测TRAF3通路基因变化在青黄散治疗骨髓增生异常综合征中的机制

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天津中医药 2019年第11期36卷 1121-1125页

作者：唐旭东张路杨秀鹏唐玉凤王德秀中国中医科学院西苑医院血液科北京100091 北京中医药大学管理学院北京100029 中国中医科学院西苑医院检验科北京100091 北京中医药大学研究生院北京100029

[目的]应用定量聚合酶链式反应(PCR)检测人骨髓增生异常综合征细胞(MUTZ-1)在明雄黄和靛玉红(青黛提取物)治疗后肿瘤坏死因子受体相关因子3(TRAF3)通路基因的变化,揭示青黄散治疗骨髓增生异常综合征(MDS)的机制。[方法]MUTZ-1培养,按A... 详细信息

[目的]应用定量聚合酶链式反应(PCR)检测人骨髓增生异常综合征细胞(MUTZ-1)在明雄黄和靛玉红(青黛提取物)治疗后肿瘤坏死因子受体相关因子3(TRAF3)通路基因的变化,揭示青黄散治疗骨髓增生异常综合征(MDS)的机制。[方法]MUTZ-1培养,按A组为空白对照,B组为雄黄组(浓度1μmol/L),C组为雄黄(浓度1μmol/L)+低剂量靛玉红(浓度0.05μmol/L)组,D组为雄黄(浓度1μmol/L)+高剂量靛玉红(浓度50μmol/L)组等4组进行处理,定量PCR检测IFN-γ、TRAF3、白介素-10(IL-10)、IRF3、RIP、GAPDH基因。[结果]TRAF3基因在B组表达较低,在C和D组表达较高,B、C和D组皆低于A组(P<0.05)。RIP基因在B组表达较高,在C和D组表达较低,B、C和D组皆高于A组(P<0.05)。IRF3基因在B和C组表达较低,在D组表达较高,B、C和D组皆低于A组(P<0.05)。IL-10基因在C组表达较高,在B组次之,在D组表达较低,B、C和D组皆低于A组(P<0.05)。IFN-γ在D组表达较高,在C组次之,在B组较低,D组高于A组(P<0.05)。[结论]青黄散(明雄黄和靛玉红的组合)在青黛浓度较低时可以引起RIP基因表达增加,TRAF3、IRF3、IL-10、IFN-γ基因表达减低,在青黛浓度较高时可以引起RIP、IFN-γ基因表达增加,IRF3、TRAF3、IL-10基因表达减低,都可以促进机体产生IFN-γ,增强NK细胞对肿瘤细胞的杀伤能力。随着青黛浓度增加,IFN-γ基因继续上调,IL-10继续下调,NK细胞对肿瘤细胞的杀伤能力继续增强。所以,未来可能通过调整青黛溶液的浓度,影响MUTZ-1人细胞株的TRAF3及其信号通路,从而达到良好的治疗目的。

关键词：骨髓增生异常综合征肿瘤坏死因子受体相关因子定量聚合酶链式反应