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作者： takami sho 上海交通大学

学位级别：硕士

本文研究了2株乳杆菌的抗氧化能力,明确了植物乳杆菌Lactobacillus plantarum CGMCC 1.557和干酪乳杆菌Lactobacillus casei CGMCC 1.570的全发酵培养物及其组分的自由基清除率和抗氧化酶活性。考察了植物乳杆菌对diquat诱导的鼠肠道氧... 详细信息

本文研究了2株乳杆菌的抗氧化能力,明确了植物乳杆菌Lactobacillus plantarum CGMCC 1.557和干酪乳杆菌Lactobacillus casei CGMCC 1.570的全发酵培养物及其组分的自由基清除率和抗氧化酶活性。考察了植物乳杆菌对diquat诱导的鼠肠道氧化应激及炎症反应的影响,并进一步探究了其可能的作用机制。首先,就上述2株乳杆菌的抗氧化能力,本研究测定了2株乳杆菌全发酵培养物及其不同组分(发酵上清液、菌体悬浮液、胞内提取物)的1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)、O·和·OH的清除率以及总超氧化物歧化酶(T-SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性。结果表明,2株乳杆菌的全发酵培养物对3种自由基的清除率均显著高于阳性对照维生素C(P0.05);模型组小鼠血清和结肠内丙二醛(MDA)和O·含量显著增加(P0.05);小鼠回结肠在diquat诱导下发生了严重的炎症性组织损伤,并且不同剂量的植物乳杆菌可以不同程度地保护粘膜层,组织病理学评分差异有显著性(P<0.05);小鼠回结肠内IL-1β、IL-18和TNF-α的含量在diquat诱导下整体没有显著增加;在diquat诱导下,小鼠回结肠内NLRP3炎性小体激活通路的上游蛋白NF-κB在转录水平上被显著激活(P<0.05),但中下游通路蛋白NLRP3、ASC、Caspase-1等都没有被显著激活。综上研究,植物乳杆菌在体内外都具有良好的抗氧化能力,可以有效缓解diquat诱导的小鼠肠道氧化应激及炎症反应,以高剂量处理的效果更明显,但具体缓解机制有待进一步研究。

关键词：乳杆菌小鼠肠道氧化应激炎症反应 NLRP3

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微生物源性抗氧化剂对diquat诱导的小鼠肝脏氧化应激、内质网应激和功能的影响

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中华肝脏病杂志 2020年第5期28卷 441-445页

作者：徐雪 takami sho 张京徐维娜徐建雄上海交通大学农业与生物学院上海市兽医生物技术重点实验室200240

目的以diquat诱导的小鼠氧化应激为模型,研究微生物源性抗氧化剂(MA)对小鼠肝脏氧化应激、内质网应激、细胞凋亡和功能的影响。方法选择体质量16~18 g的C57BL/6雌性小鼠18只,随机分为3组,每组6只。抗氧化剂组小鼠灌胃MA,对照组和模型组... 详细信息

目的以diquat诱导的小鼠氧化应激为模型,研究微生物源性抗氧化剂(MA)对小鼠肝脏氧化应激、内质网应激、细胞凋亡和功能的影响。方法选择体质量16~18 g的C57BL/6雌性小鼠18只,随机分为3组,每组6只。抗氧化剂组小鼠灌胃MA,对照组和模型组小鼠灌胃等量等渗盐水,饲养22 d后,模型组和抗氧化剂组腹腔注射diquat溶液,对照组小鼠注射等量等渗盐水,处理3h后处死小鼠采集肝组织。肝脏组织制成10%匀浆后,依据试剂盒说明书检测自由基含量、丙二醛(MDA)含量、抗氧化酶活性、天冬氨酸转氨酶(AST)和丙氨酸转氨酶(ALT)活性,用qRT-PCR检测内质网应激和细胞凋亡相关基因表达情况。肝脏组织制成10%匀浆后,依据试剂盒说明书检测自由基含量、丙二醛(MDA)含量、抗氧化酶活性、天冬氨酸转氨酶(AST)和丙氨酸转氨酶(ALT)活性,用qRT-PCR检测内质网应激和细胞凋亡相关基因表达情况。多组间数据比较采用单因素方差分析。结果过氧化氢在对照组、模型组、抗氧化剂组分别为(8.74±1.38)、(11.44±1.01)、(9.81±0.98)mmol/g,组间比较差异有统计学意义(F=7.640,P<0.05)。对照组、模型组和抗氧化剂组MDA的含量分别为(0.65±0.07)、(0.86±0.18)、(0.70±0.05)nmol/mg,组间比较差异有统计学意义(F=5.406,P<0.05)。模型组AST活性为(146.68±4.29)U/g,显著高于对照组的(125.64±15.69)U/g与抗氧化剂组的(126.57±1.82)U/g,F=6.192,P<0.05。实时定量PCR结果显示,与对照组相比,模型组蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)和活化转录因子6(ATF6)基因相对表达量显著升高,分别为1.880±0.442和1.800±0.380(F值分别为7.702、10.815,P值均<0.05);与模型组相比,抗氧化剂组PERK和ATF6基因相对表达量显著降低,分别为1.310±0.333、1.180±0.204(P值均<0.05)。细胞凋亡相关基因表达结果显示,抗氧化剂组caspase3和caspase8基因相对表达量分别为1.136±0.381、1.593±0.407,与模型组的1.572±0.127和2.843±0.973相比,显著降低(F值分别为12.800、7.657,P值均<0.05)。结论微生物源性抗氧化剂减弱diquat诱导的小鼠肝脏氧化应激、内质网应激和肝细胞凋亡,改善肝脏功能。

关键词：细胞凋亡氧化应激肝脏损伤内质网应激微生物源性抗氧化剂

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2株乳杆菌全发酵培养物及其组分的抗氧化能力分析

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生物技术进展 2019年第3期9卷 290-295页

作者：钟丘实李莉陈新丹张京徐维娜徐建雄上海交通大学农业与生物学院上海市兽医生物技术重点实验室上海200240

为了研究植物乳杆菌Lactobacillus plantarum CGMCC 1.557和干酪乳杆菌Lactobacillus casei CGMCC 1.570的全发酵培养物及其组分的抗氧化能力,分别制备2株菌的全发酵培养物、发酵上清液、菌体悬浮液及胞内提取物,随后测定其对3种自由基(... 详细信息

为了研究植物乳杆菌Lactobacillus plantarum CGMCC 1.557和干酪乳杆菌Lactobacillus casei CGMCC 1.570的全发酵培养物及其组分的抗氧化能力,分别制备2株菌的全发酵培养物、发酵上清液、菌体悬浮液及胞内提取物,随后测定其对3种自由基(DPPH·、O_2·^-、·OH)的清除率以及其中3种抗氧化酶的活性,包括总超氧化物歧化酶(total superoxide dismutase,T-SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px),进而评价2株菌的全发酵培养物及其组分的抗氧化能力。结果表明,植物乳杆菌和干酪乳杆菌的全发酵培养物都具有较强的清除自由基的能力和较高的T-SOD、GSH-Px活性;2株菌的发酵上清液对DPPH·、O_2·^-的清除率和T-SOD活性显著高于菌体悬浮液和胞内提取物(P<0.05);2株菌的菌体悬浮液对·OH的清除率显著高于其他组分(P<0.05)。研究表明,植物乳杆菌*** CGMCC 1.557和干酪乳杆菌*** CGMCC 1.570都具有较高的抗氧化能力,而其抗氧化能力主要源于发酵上清液和菌体,研究结果为进一步开发抗氧化乳杆菌产品提供了理论依据。

关键词：乳杆菌培养物及其组分自由基清除率抗氧化酶活性

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