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联合应用FISH和巢式RT-PCR技术检测慢性髓系白血病bcr/abl融合基因

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中华血液学杂志 2003年第5期24卷 235-237页

作者：吴彬周淑芸刘晓力宋兰林张燕第一军医大学南方医院血液科广州510515

目的　检测慢性髓系白血病 (CML)bcr/abl融合基因 ,协助临床诊断。方法　联合应用荧光原位杂交 (FISH)、Northern杂交和巢式RT PCR技术。结果　在 16例被检测的CML患者中 ,有 3例两种方法的结果不一致 ,经Northern杂交验证发现 ,RT PCR... 详细信息

目的　检测慢性髓系白血病 (CML)bcr/abl融合基因 ,协助临床诊断。方法　联合应用荧光原位杂交 (FISH)、Northern杂交和巢式RT PCR技术。结果　在 16例被检测的CML患者中 ,有 3例两种方法的结果不一致 ,经Northern杂交验证发现 ,RT PCR较FISH更敏感 ,但存在假阳性 ;另外 ,FISH较容易检测到bcr/abl融合的少见类型 ,而巢式RT PCR需要同时设计多对特殊引物 ,否则极易漏诊。结论　联合应用FISH和巢式RT PCR技术检测CMLbcr/abl融合基因可以优势互补 ,使结果更加准确、可靠 ,更适合于临床诊断、疗效判定以及对微量残留病的监测。

关键词：慢性髓系白血病 bcr/abl融合基因荧光原位杂交 Northem杂交巢式RT-PCR技术

多重RT-PCR方法同时检测29种白血病融合基因

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中华血液学杂志 2003年第5期24卷 256-258页

作者：李志刚吴敏媛赵玮李彬杨静朱平胡亚美北京儿童医院血液病中心 100045 北京大学第一医院

目的　探讨同时检测白血病 2 9种染色体结构畸变形成的融合基因与MIC分型的关系。方法　采用多重巢式RT PCR方法对 191例儿童白血病 2 9种染色体结构畸变形成的融合基因进行分析。结果　 191例白血病患者骨髓或外周血标本中 ,86例 ( 45 ... 详细信息

目的　探讨同时检测白血病 2 9种染色体结构畸变形成的融合基因与MIC分型的关系。方法　采用多重巢式RT PCR方法对 191例儿童白血病 2 9种染色体结构畸变形成的融合基因进行分析。结果　 191例白血病患者骨髓或外周血标本中 ,86例 ( 45 .0 %)具有 14种染色体结构畸变产生的融合基因 ,包括SIL/TAL1、MLL/AF1q、E2A/PBX1、MLL/AF6、AML1/ETO、MLL/AF9、TEL/ABL、BCR/ABL、MLL/AF10、dupMLL、MLL/ENL、TEL/AML1、PML/RARα、CBFβ/MYH11。在 31例患者中检出HOX11原癌基因活化 ,其中 15例 ( 7.8%)伴有其它染色体结构畸变产生的融合基因 ,16例 ( 8.4%)只检出HOX11原癌基因的活化 ,未伴有其它融合基因。结论　采用多重巢式RT PCR方法 ,可快速分析 2 9种染色体结构畸变产生的融合基因 ,可同时筛选出 2 9种急性白血病的常见染色体易位 ,帮助化疗和骨髓移植后微量残留病的检测。

关键词：白血病染色体结构畸变融合基因多重巢式RT-PCR法

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CD_(117)在白血病细胞上的表达分析

中华血液学杂志 2003年第5期24卷 228-230页

作者：沈红强汤永民杨世隆钱伯芹宋华石淑文徐卫群浙江大学医学院附属儿童医院杭州310003

目的　探讨细胞表面分化抗原CD117在各型白血病细胞上的表达规律及其意义。方法　采用CD4 5/SSC双参数散点图设门方法进行三色流式细胞术细胞表面分化抗原分析。结果　急性髓系白血病 (AML)患者CD117表达率为 6 8%,慢性粒细胞白血病急变... 详细信息

目的　探讨细胞表面分化抗原CD117在各型白血病细胞上的表达规律及其意义。方法　采用CD4 5/SSC双参数散点图设门方法进行三色流式细胞术细胞表面分化抗原分析。结果　急性髓系白血病 (AML)患者CD117表达率为 6 8%,慢性粒细胞白血病急变期 (CML BC)患者CD117表达率为 80 %,而在急性淋巴细胞白血病中表达率极低 ,仅为 2 %。在慢性淋巴细胞白血病、CML慢性期中阴性。在AML中CD117主要表达在M0 /M1( 72 %)、M2 ( 88%)、M4 ( 5 0 %)、M5a( 75 %)、M6( 10 0 %) ,但在M3 和M5b中表达率较低 (分别为 39%和 2 9%) ,在M3 中CD117的表达率高于CD34 及HLA DR。CD117与CD14 在AML中的表达呈负相关。结论　CD117有助于淋巴系与髓系白血病的鉴别 ,并有助于白血病克隆与正常细胞的区分。

关键词：急性髓系白血病慢性粒细胞白血病急性淋巴细胞白血病细胞表面分化抗原 CD117 流氏细胞术

血管内皮细胞生长因子及其受体KDR、Flt1在急性髓系白血病中的表达及其意义

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中华血液学杂志 2003年第5期24卷 249-252页

作者：王一肖志坚刘澎杨晨杨仁池蔡英林韩忠朝中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院天津300020

目的　分析血管内皮生长因子 (VEGF)及其受体KDR、Flt1在急性髓系白血病 (AML)中的表达和意义。方法　用RT PCR方法检测VEGF及其受体KDR、Flt1mRNA表达 ,ELISA法检测血浆中VEGF水平。结果　 13个髓系白血病细胞系VEGF、KDR及Flt1mRNA表... 详细信息

目的　分析血管内皮生长因子 (VEGF)及其受体KDR、Flt1在急性髓系白血病 (AML)中的表达和意义。方法　用RT PCR方法检测VEGF及其受体KDR、Flt1mRNA表达 ,ELISA法检测血浆中VEGF水平。结果　 13个髓系白血病细胞系VEGF、KDR及Flt1mRNA表达阳性率分别为 10 0 %、5 3 8%和 92 .3 %;39例治疗前AML患者有 32例检测了骨髓单个核细胞 (BMMNC)VEGF、KDR及Flt1mRNA的表达 ,其阳性例数分别为 2 1例 ( 6 5 .6 %)、1例 ( 3.1%)和 17例 ( 5 3 .1%) ,3名健康献髓者BMMNC及 2名健康人骨髓CD34 +细胞均不表达VEGF及其受体。 39例治疗前AML患者血浆VEGF水平为 ( 135 .3±87.9)ng/L ,较 15例治疗后获完全缓解 (CR)的AML患者 [( 80 .6± 36 .9)ng/L]及 12名正常对照 [( 80 .6± 33 .1)ng/L]明显升高 (P =0 .0 2 8,0 .0 0 7)。 39例患者中有 35例接受常规化疗 ,2个疗程后未达CR的15例患者血浆VEGF水平为 ( 188.2± 118.6 )ng/L ,明显高于 2个疗程内获CR的 2 0例患者血浆VEGF水平 [( 10 4.2± 30 .9)ng/L](P =0 .0 0 4)。结论　AML白血病细胞不同程度表达VEGF及其受体mRNA ,AML患者血浆VEGF水平升高 ,VEGF水平影响患者化疗的疗效。

关键词：急性髓系白血病血管内皮生长因子受体 KDR Hlt1 RT-PCR方法

红细胞生成素诱导白血病K562细胞分化时WT1 mRNA表达的变化

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中华血液学杂志 2003年第5期24卷 259-260页

作者：张敬东刘云鹏王萍萍罗颖刘世洲卢香兰中国医科大学第一附属医院肿瘤内科沈阳110001

近年来的研究表明，在白血病及某些实体瘤细胞中存在野生型解1基因（WilmS'tumorgene）的过度表达，提示W可能具有癌基因功能「'2，而且从皿在白血病细胞增殖与分化中的作用仍有争议。我们应用红细胞生成素（Epo ）促进血病K562细胞增... 详细信息

近年来的研究表明，在白血病及某些实体瘤细胞中存在野生型解1基因（WilmS'tumorgene）的过度表达，提示W可能具有癌基因功能「'2，而且从皿在白血病细胞增殖与分化中的作用仍有争议。我们应用红细胞生成素（Epo ）促进血病K562细胞增殖及诱导分化时，WTlmRNA表达被上调而没有随着细胞分化降低，提示WT1可能参与白血病细胞增殖，EPo诱导K562细胞向红系分化时不需要WTImRNA的下调。

关键词：白血病 WT1基因红细胞生成素 K562细胞细胞增殖

滞后给药提高粉防己碱耐药逆转效果的体外研究

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中华血液学杂志 2003年第5期24卷 269-270页

作者：李意婷周庚寅张莉萍蔡毅然靳英牟坤甄军晖山东大学医学院病理教研室济南250012

粉防己碱（Tetralldrine，TTD ）作为一种具有钙离子拮抗用的双节基异哇琳类生物碱，是近年来新发现的针对多药耐药（MDR）相关蛋白P－糖蛋白（P一Glycoprotein，P一gp）的药物，其作用正日益得到厂泛的关注[1] 。我们通过设立不的给药... 详细信息

粉防己碱（Tetralldrine，TTD ）作为一种具有钙离子拮抗用的双节基异哇琳类生物碱，是近年来新发现的针对多药耐药（MDR）相关蛋白P－糖蛋白（P一Glycoprotein，P一gp）的药物，其作用正日益得到厂泛的关注[1] 。我们通过设立不的给药方案，初步探讨了TTD 不同给药顺序对逆转效果的响。为探索低毒高效的化疗方案提供启示。

关键词：粉防已碱多药耐药性 P-糖蛋白滞后给药法化学疗法

t(16;21)(p11;q22)急性髓系白血病一例

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中华血液学杂志 2003年第5期24卷 264-264页

作者：汪健孙自敏沈雪英安徽省立医院中心实验室合肥230001

患者女，15个月，因进行性面色发黄2个月余，于1998年4月6日人我院。患儿2个月前无明显诱因出现面色发黄，夜间发热（37～38℃），咳嗽，当地医院诊断为重度贫血，输全血2次，共400ml ，并给予先锋霉素V 、丁氨卡那霉抗感染治疗，咳嗽... 详细信息

患者女，15个月，因进行性面色发黄2个月余，于1998年4月6日人我院。患儿2个月前无明显诱因出现面色发黄，夜间发热（37～38℃），咳嗽，当地医院诊断为重度贫血，输全血2次，共400ml ，并给予先锋霉素V 、丁氨卡那霉抗感染治疗，咳嗽好转，但患儿出现黑便，进行性贫血加重，来我院就诊）查体：体温37．3℃，神志清，精神较差，贫血面容，浅表淋巴结未触及，全身散在出血点、痪斑，胸骨无压痛，双肺呼吸音清，未闻及「罗音，心率94次/ min，肝肋缘下2．0CM，质软，无压痛，脾未触及，神经系统无异常人院血常示：Hb 81g /L WBC1 0．5／l0~9/L，BPC 27×l0~9/L，网0．01。分类：原始粒细胞0．05，早幼粒细胞0．04，中幼粒细胞0．02，分叶核细胞0．21，单核细胞0．07，淋巴细胞0．61。尿蛋白（＋）〔骨髓涂片检查示：骨髓增生减低，粒、红细胞比例为18．8：l，粒系增生活跃，原始粒细胞0．220，早幼粒细胞0．020，中幼粒细胞0．045，晚幼粒细胞0．020，杆状核细胞0．020，分叶核细胞0．135，嗜酸粒细胞0．010，嗜碱粒细胞0．005。红系、巨核系增生减低，血小板少见组化染色：过化物酶阳性率为16％，阳性指数为27；非特异性酷酶82％，指数156；氟化钠抑制阳性率72％，指数138；碱性磷酸酶7％，指数8。骨髓细胞经24h短期培养，常规G显带染色，用CytOvision染色体图像分析系统分析40个中期分裂相，色体核型为46，XX，t（16；21）（Pll：q22）仁34〕247，XX，＋8，＊（16；21）（Pll；q22）［6］·）RT-PCR检测TLS/FUS一ERG融合NA转录本，20g/L琼脂凝胶电泳上可见176 bP、211饰、255三条带。依据当时的分型标准诊断为骨髓增生异常综合征（MDS）RAEB一t，但依照现在明D介绍的髓系造血组织肿瘤类应诊断为急性髓系白血病（AML）。应患儿家属要求给予对症处理，输注新鲜全血looml及O．5U浓缩红细胞后自动出院，1周后全身衰竭死亡。

关键词：急性髓系白血病染色体异常 t(16 21)(p11 q22) ERG基因 TSL/FUG融合基因病例报告

chk1、chk2反义寡核苷酸转染HL-60细胞株增加其放疗后凋亡敏感性

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中华血液学杂志 2003年第5期24卷 253-255页

作者：汤屹刘文励周剑锋万理萍高庆蕾吴剑宏华中科技大学同济医学院附属同济医院武汉430030 上海市第一人民医院血液科

目的　通过反义封闭chk1、chk2基因 ,阻断细胞周期检测点信号传导通路 ,从而增加HL 6 0细胞放疗敏感性。方法　对HL 6 0细胞进行chk1、chk2正义链和反义链的单转染与共转染 ,于转染后 2 4h进行放射线照射 ,照射后 2 4h用Westernblot测量... 详细信息

目的　通过反义封闭chk1、chk2基因 ,阻断细胞周期检测点信号传导通路 ,从而增加HL 6 0细胞放疗敏感性。方法　对HL 6 0细胞进行chk1、chk2正义链和反义链的单转染与共转染 ,于转染后 2 4h进行放射线照射 ,照射后 2 4h用Westernblot测量chk1蛋白的变化 ,用流式细胞仪测定细胞周期及细胞凋亡率。结果　反义封闭chk1可增加HL 6 0细胞放疗后凋亡敏感性 ,细胞凋亡率为 2 6 .31%,明显高于正义链的 10 .34%,二者比较差异有显著性 (P <0 .0 5 )。转染chk1反义链的HL 6 0细胞G2 /M期阻滞现象减弱 ,G2 /M期细胞为 38.42 %,转染chk1正义链为 5 4.6 4%,二者比较差异有显著性 (P <0 0 1)。联合反义封闭chk1、chk2具有协同增效作用。结论　反义封闭chk1、chk2基因可增加HL 6 0细胞放疗后凋亡敏感性。

关键词：白血病放射治疗 HL-60细胞 chk1基因 chk2基因反义寡核苷酸类细胞周期检测点

原发于淋巴结外非霍奇金淋巴瘤75例预后因素探讨

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中华血液学杂志 2003年第5期24卷 276-277页

作者：毕林涛卢振霞孙步彤孙延霞张秀梅杨华田春燕吉林大学中日联谊医院血液肿瘤科长春130031

近年来，结外淋巴瘤有逐年上升的趋势，特别是非霍奇金淋巴瘤（NHL）易侵及淋巴结外组织。我们以1996一20年于我院住院的75例原发于淋巴结外的NHL患者为研究对象，就预后因素进行探讨。

关键词：非霍奇金淋巴瘤结外淋巴瘤预后影响因素原发部位早期诊断血清糖酵解酶病理类型