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人卵巢癌细胞及小鼠MTX抗性细胞中DMs大小的测定

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国际遗传学杂志 2006年第4期29卷 241-245页

作者：张钰邓新宇白静李璞傅松滨哈尔滨医科大学医学遗传学教研室

目的测定肿瘤细胞及耐药性细胞中双微体(double minutes,DMs)的大小。方法应用PFGE(Pulsed field gradient gel electrophoresis)与Southern印迹杂交技术,对人卵巢癌细胞UACC-1598及氨甲蝶呤(Methotrexate,MTX)抗性的小鼠胚胎成纤维细胞中DMs的大小进行检测。结果发现UACC- 1598细胞中存在2．8Mb、2．1Mb及1．4Mb的DMs群体,提示多拷贝的扩增基因及其邻近的染色体区域经染色体断裂、易位及重排形成较大的DMs。同时,用浓度逐渐增高的MTX对小鼠胚胎成纤维细胞进行体外诱导,分离出富含DMs的不同MTX抗性程度的细胞群体。在MTX抗性细胞中检测到2．5Mb及1．4Mb的DMs群体,MTX100细胞中以1．4Mb的DMs群体为主,而MTX500细胞中以2．5Mb的DMs群体为主。结论MTX细胞中产生的扩增子结构在演化过程中趋向于寡聚化或多聚化形成较大片段的DMs。

关键词：基因扩增双微体 PFGE Southern印迹

CRISPR-Cas9——RNA介导的基因组编辑技术研究进展

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国际遗传学杂志 2017年第3期40卷 137-140页

作者：徐璐崔晓波张春玉傅松滨哈尔滨医科大学医学遗传学研究室

成簇规律间隔短回文重复RNA-CRISPR相关蛋白质9系统(clustered regularly interspersed short palindromic repeat RNA/CRISPR-associated 9,CRISPR-Cas9)来源于Ⅱ型CRISPR-Cas系统,在自然条件下为细菌抵抗噬菌体侵袭的获得性免疫防御系统。改造后的CRISPR-Cas9系统可作为基因组编辑的有效工具,是最具前景的新一代基因修饰策略。CRISPR-Cas9系统不仅能对基因组进行单个位点的特异性识别,还可同时对基因组的多个位点进行修饰,实现对基因组的编辑如基因敲除、基因敲入的功能。目前,CRISPR-Cas9技术已在斑马鱼、哺乳动物细胞和小鼠动物模型中,通过可编程RNA实现了基因的精确修饰。可以预见,CRISPR-Cas9技术将在基础医学和临床医学领域发挥重要的作用。

关键词： CRISPR-Cas9 基因组编辑基因敲除基因敲入

Rho GTPases与肿瘤侵袭转移相关性的研究进展

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国际遗传学杂志 2016年第1期39卷 15-21页

作者：庞博孙冬琳孙海明金焰傅松滨哈尔滨医科大学医学遗传学研究室

Rho GTPases属小分子量GTPases,作为信号传导通路中重要的"分子开关",调控细胞形态、骨架重建、迁移及细胞周期与凋亡等诸多过程。近来的研究表明,Rho GTPases家族成员在多种恶性肿瘤中异常表达,并通过调控上皮细胞极性丧失、细胞-细胞... 详细信息

Rho GTPases属小分子量GTPases,作为信号传导通路中重要的"分子开关",调控细胞形态、骨架重建、迁移及细胞周期与凋亡等诸多过程。近来的研究表明,Rho GTPases家族成员在多种恶性肿瘤中异常表达,并通过调控上皮细胞极性丧失、细胞-细胞间的连接及黏附、细胞骨架重组和迁移运动、细胞外基质的重塑、细胞进入血管淋巴管的能力等方面参与肿瘤细胞的侵袭转移。深入研究Rho GTPases在肿瘤侵袭转移中的作用意义重大,Rho GT—Pases将有望成为判断肿瘤侵袭转移性发展的新指标,并为肿瘤治疗提供新靶点、新方向。

关键词： Rho GTPases 肿瘤侵袭转移

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错配修复蛋白在DNA双链断裂修复中的作用

国际遗传学杂志 2015年第3期38卷 132-135页

作者：周静李春香孟祥宁傅松滨哈尔滨医科大学医学遗传学研究室

DNA双链断裂(DSBs)是最严重的DNA损伤之一,近年来受到人们广泛的关注。错配修复(MMR)系统广泛存在于生物体中,是细胞复制后的一种修复方式,通过矫正在DNA复制和重组过程中产生的碱基对错配和小的核苷酸插入或缺失而保持基因组的稳定性... 详细信息

DNA双链断裂(DSBs)是最严重的DNA损伤之一,近年来受到人们广泛的关注。错配修复(MMR)系统广泛存在于生物体中,是细胞复制后的一种修复方式,通过矫正在DNA复制和重组过程中产生的碱基对错配和小的核苷酸插入或缺失而保持基因组的稳定性。研究发现MMR系统在DSBs修复中起着重要的作用,MMR蛋白通过与同源重组(HR)和非同源末端连接(NHEJ)修复相互作用参与DSBs修复。本文重点关注MMR通路几种关键蛋白在DSBs修复中的作用。

关键词：错配修复 DNA双链断裂肿瘤

Structure and function of Double minute chromosomes

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Structure and function of Double minute chromosomes

RNA干扰技术沉默Stat3基因对胃癌细胞SGC7901生物学行为影响的实验研究

遗传学进步与人口健康高峰论坛

作者： songbin fu (1.Laboratory of Medical Genetics,Harbin Medical University.Harbin,China 150081 2.Bio-pharmaceutical Key Laboratory of Heilongjiang Province.Harbin.China 150081)

To investigate the Origin,structure and function of DMs,we used CHEF and Southem blot found that DMs populations of 2.8 Mb,2.1 Mb and 1.4 Mb in UACC-1598 cells and DMs populations of 2.5 Mb and 1.4 Mb in MTX-resistant cells.In UACC-1598 cells,FISH analysis showed DMs originated from 3q26 and 2p24.The coamplification of candidate oncogene E1F5A2(3q26.2)and oncogene MYCN(2p24.3)which corresponding amplicons are 280 kb and 388 kb respectively was characterized by Southern blot hybridization and bioinformatics methods.Markedly increased expression of MYCN mRNA found by RT-PCR analysis in the present study,together with known E1F5A2 overexpressed in UACC-1598 cells.Significant

关键词：

来源： cnki会议评论

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cnki会议

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中国肿瘤临床 2008年第6期35卷 348-352页

作者：赵亮赵家宏孙凌宇于旸刘锋张岂凡张玉宝董新舒傅松滨崔滨滨哈尔滨医科大学附属第三医院腹外二科哈尔滨市150040 哈尔滨医科大学附属第四医院肿瘤防治中心哈尔滨医科大学遗传学教研室

目的:构建Stat3-siRNA表达载体,探讨转染Stat3-siRNA表达载体阻断人胃癌细胞系SGC7901的Stat3信号传导通路对人胃癌细胞增殖和凋亡的影响。方法:利用RNAi技术,构建Stat3-siRNA表达载体,稳定转染胃癌细胞系SGC7901,利用Real-time PCR、We... 详细信息

目的:构建Stat3-siRNA表达载体,探讨转染Stat3-siRNA表达载体阻断人胃癌细胞系SGC7901的Stat3信号传导通路对人胃癌细胞增殖和凋亡的影响。方法:利用RNAi技术,构建Stat3-siRNA表达载体,稳定转染胃癌细胞系SGC7901,利用Real-time PCR、Western Blot、MTT、流式细胞技术等方法分别检测Stat3基因mRNA和蛋白表达及细胞增殖和凋亡的变化情况。结果:成功构建Stat3-siRNA表达载体,经测序验证无误。Western Blot及Real-time PCR结果显示:Stat3基因的表达水平均下降,其中以SGC7901-siRNA3干扰效果最明显,差异具有显著性(P<0.05)。MTT法结果显示:稳定转染SGC7901细胞后,细胞的增殖能力明显下降,与对照组相比差别显著(P<0.05)。流式细胞技术显示:Stat3-siRNA3实验组较对照组出现了明显的细胞凋亡,在G1期前出现的亚二倍峰即为凋亡峰。结论:Stat3基因的RNAi重组体可以有效的抑制Stat3基因的表达,RNA干扰技术沉默Stat3基因能够抑制胃癌细胞的生长,促进其凋亡。

关键词： Stat3 RNA干扰胃肿瘤基因治疗

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常染色体显性多囊肾病的发病机制及治疗

国际遗传学杂志 2019年第1期42卷 56-62页

作者：朱思齐董科显苗欢欢孙文靖傅松滨哈尔滨医科大学医学遗传学研究室哈尔滨医科大学附属第二医院住院超声科

常染色体显性多囊肾病(autosomal dominant polycystic kidney disease,ADPKD)是一种常见的单基因遗传性疾病,可在任何年龄发病,无明显种族和性别差异。普遍认为PKD1和PKD2是ADPKD的致病基因,但仍有少数ADPKD患者的致病基因不能确定。P... 详细信息

常染色体显性多囊肾病(autosomal dominant polycystic kidney disease,ADPKD)是一种常见的单基因遗传性疾病,可在任何年龄发病,无明显种族和性别差异。普遍认为PKD1和PKD2是ADPKD的致病基因,但仍有少数ADPKD患者的致病基因不能确定。PKD1和PKD2基因分别编码多囊蛋白1(polycystin 1,PC1)和多囊蛋白2(polycystin 2,PC2),二者可相互结合形成PC1/PC2蛋白复合物,参与调节多条常见的细胞信号转导通路。目前对ADPKD的治疗主要为延缓疾病的发生发展,临床上手术治疗较普遍并有所成效。

关键词：常染色体显性多囊肾病致病基因发病机制药物治疗

亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性与冠心病关系的研究

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中华医学遗传学杂志 1998年第5期15卷 300-302页

作者：陈白滨王新春于佳梅张贵寅陈峰邓静傅松滨李璞曹唯于汉力哈尔滨医科大学医学遗传研究室

目的探讨Ｎ５－亚甲基四氢叶酸还原酶（ＭＴＨＦＲ）基因多态性与冠状动脉粥样硬化性心脏病的关系。方法利用聚合酶链反应和限制性片段长度多态性（ＰＣＲ－ＲＦＬＰ）方法，检测了７９名健康人和６９名冠心病患者ＭＴＨＦＲ基因的６７... 详细信息

目的探讨Ｎ５－亚甲基四氢叶酸还原酶（ＭＴＨＦＲ）基因多态性与冠状动脉粥样硬化性心脏病的关系。方法利用聚合酶链反应和限制性片段长度多态性（ＰＣＲ－ＲＦＬＰ）方法，检测了７９名健康人和６９名冠心病患者ＭＴＨＦＲ基因的６７７碱基多态性突变Ｃ→Ｔ情况，并加以对照分析。结果冠心病患者ＭＴＨＦＲ基因突变型Ｖ６７７基因的频率，明显高于健康人，差异极显著（Ｐ＜０．０１）。结论提示ＭＴＨＦＲ基因突变型Ｖ６７７基因可能是冠心病的又一个遗传风险因子。

关键词：冠心病 MTHFR 基因多态性 PCR-RFLP

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FAK overexpression is correlated with tumour metastasis in lung cancer

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FAK overexpression is correlated with tumour metastasis in l...