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Journal of Ocean University of China 2017年第3期16卷 509-516页

作者： teng shuangshuang FANG Jun CAI Yilong CHAI Xueliang XIAO Guoqiang Zhejiang Mariculture Research Institute Wenzhou 325005 P. R. China Engineering Research Center for Marine Bivalves Chinese Academy of Fishery Sciences Wenzhou 325005 P. R China Zhejiang Key Laboratory of Exploitation and Preservation of Coastal Bio-Resource Wenzhou 325005 P. R. China

Blood clam, Tegillarca granosa, is an important shellfish in Chinese mariculture industry. Investigative research in this species, such as genetic linkage mapping, requires a large panel of molecular markers. In present study, a total of 89 polymorphic microsatellite markers were developed in T. granosa using the sequence database of Life Sciences Technology 454 next generation sequencing technology. All 89 loci were characterized in 20 individual clams from a natural population inhabiting Yueqing Gulf, Zhejiang Province, China. The number of alleles per polymorphic locus varied between 2 and 15, while the observed heterozygosity, expected heterozygosity and polymorphic information content varied between 0.000 and 1.000, 0.102 and 0.921, and 0.048 and 0.886, respectively. Of the 89 loci identified, 32 loci deviated significantly from Hardy-Weinberg equilibrium following Bonferroni correction. Thirty nine markers, which were shown to be polymorphic in a full-sibling family, were tested in Mendelian segregations. As expected, 32 loci were co-dominantly segregated in a Mendelian fashion. These novel developed microsatellite markers represent useful research tools for investigation of population genetic structure and genetic diversity in this species.

关键词： Tegillarca granosa expressed sequence tag microsatellite

Microbial community changes in the digestive tract of the clam Meretrix petechialis in response to Vibrio parahaemolyticus challenge

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Journal of Oceanology and Limnology 2021年第1期39卷 329-339页

作者： Hongxia WANG Xin YUE Jiajia YU Rui WANG shuangshuang teng Jun FANG Baozhong LIU CAS Key Laboratory of Experimental Marine Biology Institute of OceanologyCenter for Ocean Mega-ScienceChinese Academy of SciencesQingdao 266071China Laboratory for Marine Biology and Biotechnology Qingdao National Laboratory for Marine Science and TechnologyQingdao 266000China Zhejiang Mariculture Research Institute Wenzhou 325005China Zhejiang Key Laboratory of Exploitation and Preservation of Coastal Bio-resource Wenzhou 325005China

Disease in clams frequently occurred over the last decade and has become a serious threat to the clam aquaculture industry and natural *** clam mortality events were reported to be associated with the presence of opportunistic pathogen ***,the complexity of infection that occurs in the natural environment remains poorly *** this study,we smulated a natural disease outbreak by vibrio immersion infection to study the diversity and dynamics of microbiota in the digestive tract of clam Meretrix petechialis during the infection *** changes in operational taxonomic unit richness and phylum composition of the bacterial communities were observed during pathogen *** addition,we investigated the potential relationship between microbiota dynamics and host status during disease *** reveal that,at the end stage of vibrio infection,interindividual variation in the digestive tract microbiota increased,as did the diff erence in individual health *** moribund clams displayed signs of microbial community shifts to low diversity,and the microbial community was characterized by mass proliferation of a few operational taxonomic units.

关键词： Meretrix petechialis vibrio challenge 16S ribosomal RNA bacterial community digestive tract

Identification of quantitative trait loci for growth-related traits in the blood clam(Tegillarca granosa)

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Aquaculture and Fisheries 2024年第4期9卷 566-572页

作者： Jun Fang Yanqing Shao shuangshuang teng Guoqiang Xiao Bo Liu School of Marine Science and Engineering Qingdao Agricultural UniversityQingdao266109PR China Zhejiang Mariculture Research Institute Wenzhou325000PR China

The blood clam(Tegillarca granosa)is an economically important marine shellfish in the southeast coastal area of *** *** breeding practice,growth-related traits are most important phenotypic selection *** order to increase the breeding efficiency,we used a previously published genetic linkage map of *** to map quantitative trait loci(QTL)for growth-related traits in a single full sibling F1 *** growth-related traits including shell length(SL),shell height(SH),shell width(SW),shell weight(Swi),shell umbo width(SUW),as well as outer ligament length(OLL),meat weight(MW)and total weight(TW)of *** were measured for QTL *** estimated phenotypic correlations between any 2 of the 8 growth-related traits were significant(P<0.001).Twenty-nine QTL were identified for growth-related traits,including 13 QTL with the phenotypic variance of 4.20-15.63%in the female map and 16 QTL of 3.99%-14.58%in the male *** amplification fragment length polymorphism(AFLP)markers were validated to closely link to seven QTL except the shell *** is the first report of QTL mapping on growth-related traits in *** QTL and their tightly linked markers present the initial step towards the goal of marker-assisted selection in ***.

关键词： Tegillarca granosa Quantitative trait loci Simple sequence repeat Amplification fragment length polymorphism

泥蚶JNK基因在哈维氏弧菌感染下的表达特征及其对激活蛋白-1的调控分析

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中国水产科学 2023年第1期30卷 60-74页

作者：王秋金肖国强滕爽爽浙江省海洋水产养殖研究所浙江省近岸水域生物资源开发与保护重点实验室温州市海洋生物遗传育种重点实验室上海海洋大学水产科学国家级实验教学示范中心

泥蚶(Tegillarca granosa)作为我国常见的滩涂养殖贝类，具有较高的经济价值。以弧菌为代表的条件致病菌一直以来是困扰双壳贝类健康养殖的一大难题。为了探讨泥蚶感染弧菌过程中,c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)介导... 详细信息

泥蚶(Tegillarca granosa)作为我国常见的滩涂养殖贝类，具有较高的经济价值。以弧菌为代表的条件致病菌一直以来是困扰双壳贝类健康养殖的一大难题。为了探讨泥蚶感染弧菌过程中,c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)介导的激活蛋白-1(activating protein-1,AP-1)先天免疫防御通路的作用及机制,本研究采用PCR技术克隆了泥蚶JNK基因(TgJNK)的c DNA序列,并对TgJNK和TgAP-1在弧菌感染下的表达和调控关系进行了分析。结果显示, TgJNK基因c DNA全长2696 bp,开放阅读框1332 bp,编码了443个氨基酸;蛋白多重比较和邻近系统发育树分析表明, TgJNK相对保守,存在一个STKc-JNK结构域,与长牡蛎(Crassostrea gigas)和紫贻贝(Mytilus edulis)的同源相似度较高。q RT-PCR和WB结果表明TgJNK在泥蚶的鳃中表达最高。哈维氏弧菌（Vibrio harveyi）的浸泡感染可显著上调TgJNK的转录水平(P<0.05)和磷酸化水平,并增加TgAP-1的蛋白丰度; JNK抑制后TgJNK和TgAP-1的转录水平显著降低(P<0.05), TgJNK磷酸化水平和TgAP-1蛋白丰度也降低。CoIP分析显示,磷酸化的JNK蛋白能与TgAP-1蛋白相互结合。研究表明, TgJNK和TgAP-1共同参与了泥蚶感染弧菌后的先天免疫反应,TgJNK蛋白磷酸化是激活TgAP-1蛋白的重要因素, TgJNK能够正向调控TgAP-1的表达。本研究阐明了泥蚶先天免疫通路JNK介导的AP-1途径在弧菌感染过程中的信号传递机制,丰富了泥蚶等双壳贝类先天免疫理论知识。

关键词：泥蚶 JNK AP-1 弧菌感染磷酸化调控

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温度升高和游离余氯对泥蚶的氧化胁迫效应

水产学报 2024年第6期48卷 131-143页

作者：陈琳滕爽爽胡高宇肖国强黄晓林浙江省海洋水产养殖研究所浙江省近岸水域生物资源开发与保护重点实验室温州市海洋生物遗传育种重点实验室浙江海洋大学国家海洋设施养殖工程技术研究中心

为了研究核电站温排水污染对水生动物长期胁迫的影响，实验通过室内模拟核电站温排水的游离余氯残留和温升效应，研究了不同温度和不同游离余氯浓度耦合下对泥蚶的氧化胁迫效应。设置水温为19和29°C，游离余氯浓度分别为0.33和6.66 mg/... 详细信息

为了研究核电站温排水污染对水生动物长期胁迫的影响，实验通过室内模拟核电站温排水的游离余氯残留和温升效应，研究了不同温度和不同游离余氯浓度耦合下对泥蚶的氧化胁迫效应。设置水温为19和29°C，游离余氯浓度分别为0.33和6.66 mg/L，进行为期20 d的胁迫实验。结果显示：(1)单一温升条件下，温度升高可以显著影响泥蚶ROS水平。温度越高，ROS水平越高。(2) 0.33 mg/L浓度组泥蚶ROS水平和DNA损伤在第20天时显著升高，19和29°C下分别为对照组的2.2、2.9倍和1.8、2.2倍；细胞活性、SOD活性、ATP酶活性均下降；6.66 mg/L浓度组ROS水平在第20天时显著上升，19和29°C下分别为对照组的6.2、3.6倍，DNA损伤增加，细胞活性、血细胞吞噬率和ATP酶活性下降，SOD酶活性在第20天、29°C时降至最小值(36.4±8.4) U/(mg·prot)。(3)双因素方差分析结果显示，水温和游离余氯对泥蚶ROS水平、DNA损伤、血细胞吞噬活性、ATP酶活性具有显著交互作用。研究表明，游离余氯能够显著增加泥蚶ROS水平和DNA损伤，温度升高和游离余氯复合暴露对泥蚶造成更大的胁迫压力，影响了其机体内氧化响应相关生理过程，余氯排放海域夏季相比冬季会对泥蚶产生更大的氧化胁迫。本研究可为温度升高和游离余氯复合污染中的海洋生物氧化胁迫毒性研究提供参考，并且为生态风险评估提供科学依据。

关键词：泥蚶核电站温排水温度升高游离余氯氧化响应活性氧 DNA损伤

Cd胁迫对泥蚶Cd积累及相关生理代谢的影响

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中国水产科学 2021年第11期28卷 1436-1446页

作者：李宗访滕爽爽张炯明方军肖国强谢尚庶浙江海洋大学瑞安市农业农村局浙江省海洋水产养殖研究所浙江省近岸水域生物资源开发与保护重点实验室温州市海洋生物遗传育种重点实验室

为了探讨镉(Cd)胁迫对泥蚶(Tegillarca granosa)体内重金属Cd含量积累、相关酶活力变化及基因表达水平的影响,本研究将泥蚶暴露于Cd质量浓度为0 mg/L、0.05 mg/L、0.1 mg/L、0.5 mg/L的海水中,对其软体部Cd含量,超氧化物歧化酶(SOD)和... 详细信息

为了探讨镉(Cd)胁迫对泥蚶(Tegillarca granosa)体内重金属Cd含量积累、相关酶活力变化及基因表达水平的影响,本研究将泥蚶暴露于Cd质量浓度为0 mg/L、0.05 mg/L、0.1 mg/L、0.5 mg/L的海水中,对其软体部Cd含量,超氧化物歧化酶(SOD)和三磷酸腺苷酶(ATP)的酶活力,丙二醛(MDA)含量以及ATP结合盒转运子A家族(ABCA3)、金属硫蛋白(MT)、ATP合酶(ATP)、超氧化物歧化酶(SOD)基因表达等指标的变化进行分析。结果显示, Cd胁迫后泥蚶软体部Cd含量明显增加,呈现明显的时间–剂量效应;Cd胁迫后0.05 mg/L和0.1 mg/L质量浓度组中鳃和外套膜Cd含量显著高于其他组织(P<0.05), 0.5 mg/L组内脏团Cd含量最高。Cd胁迫后泥蚶内脏团中SOD酶和ATP酶活力及MDA含量前期呈上升趋势,后期呈现下降趋势,且均高于对照组。Cd胁迫后ABCA3、SOD、MT基因表达上调,ATP合酶基因的表达与对照组相比没有显著变化。胁迫后泥蚶软体部Cd大量增加,诱导机体产生氧化应激反应,泥蚶通过调整自身酶活力和相关基因表达水平的变化,减少Cd胁迫产生的氧自由基对自身的毒害作用。

关键词：泥蚶 Cd胁迫 Cd积累酶活力基因表达

基于COI基因序列的泥蚶遗传多样性和种群结构分析

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科技通报 2017年第8期33卷 66-72页

作者：程雪艳柴雪良肖国强滕爽爽浙江省海洋水产养殖研究所浙江温州325005 浙江省近岸水域生物资源开发与保护重点实验室浙江温州325005 中国水产科学研究院海洋贝类工程技术研究中心浙江温州325005 温州医科大学检验医学院生命科学学院浙江温州325035

为了研究泥蚶不同地理群体的遗传多样性和它们的系统进化关系,以采自来自7个地理群体的150个泥蚶个体为材料,对其线粒体细胞色素氧化酶亚基I(COI)的部分序列进行PCR扩增和序列比对,分析泥蚶群体的遗传多样性;计算泥蚶不同地理群体间的... 详细信息

为了研究泥蚶不同地理群体的遗传多样性和它们的系统进化关系,以采自来自7个地理群体的150个泥蚶个体为材料,对其线粒体细胞色素氧化酶亚基I(COI)的部分序列进行PCR扩增和序列比对,分析泥蚶群体的遗传多样性;计算泥蚶不同地理群体间的遗传距离及遗传分化系数,基于泥蚶群体平均遗传距离构建UPGMA聚类树;以毛蚶Anadara sativa为外群,用MEGA6.0软件中的ML法构建了泥蚶单倍型之间的系统进化树以及用Network4.6软件分析了所有单倍型的中介网络图。结果表明,泥蚶线粒体COI的基因片段的PCR产物大小约为509 bp。在目的序列片段中检测到了14个多态性位点,包括6个简约信息位点和8个单变异多态性位点,组成16个单倍型。群体中的核苷酸多态性和单倍型多态性均处于较低的水平,日本、海南、韩国三个群体的遗传变异程度相对较高。7个群体间的遗传距离在0.0002~0.0022之间,种群遗传分化系数(FST)值在-0.01646~0.34422之间。通过构建UPGMA聚类树,发现广西、江苏、山东三个群体聚成一个小支,之后依次和浙江、海南、韩国、日本聚在一起,但总体而言泥蚶的不同地理群体之间并没有形成明显的遗传分化。ML系统进化树和中介网络图表明在16个单倍型中,各单倍型之间未形成与其地理群体空间分布相对应的聚类单元,也不存在明显的进化关系。

关键词：泥蚶 COI基因种群结构遗传多样性

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人工蓄养斧文蛤的生殖周期及早期发育

中国水产科学 2017年第1期24卷 82-90页

作者：邵艳卿张炯明方军肖国强滕爽爽柴雪良浙江省海洋水产养殖研究所浙江省近岸水域生物资源开发与保护重点实验室中国水产科学研究院海洋贝类工程技术研究中心

为了探讨斧文蛤(Meretrix lamarkii Deshayes)的繁殖规律和胚胎发育过程,自2012年1月至2013年1月,每月采集样品,采用组织学方法对浙南海区移养的斧文蛤性腺发育、生殖周期和性成熟率周年变化进行了研究,并结合室内人工育苗试验对其胚胎... 详细信息

为了探讨斧文蛤(Meretrix lamarkii Deshayes)的繁殖规律和胚胎发育过程,自2012年1月至2013年1月,每月采集样品,采用组织学方法对浙南海区移养的斧文蛤性腺发育、生殖周期和性成熟率周年变化进行了研究,并结合室内人工育苗试验对其胚胎发育过程进行了显微观察。结果表明,该地区斧文蛤的性腺发育以1年为1个周期,可分为增殖期、生长期、成熟期、排放期和休止期5个时期,雌雄性比约为1:1,性腺发育时间基本同步,均始于2月,随着水温的升高而发育,大部分个体在6月至7月发育成熟,7月下旬至8月底是繁殖盛期,可用阴干加流水刺激方法诱导其排放精卵,受精卵在水温29℃、盐度28、p H 7.88.5条件下,经1620 h孵化成D形幼虫,壳长为100110μm,浮游幼虫经56d培育进入匍匐幼虫期,壳长约200μm,最后发育变态为稚贝。本研究为斧文蛤的人工繁育、养殖开发以及种质资源保护提供了基础资料。

关键词：斧文蛤性腺发育繁殖周期胚胎发育

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水温和余氯对拟穴青蟹幼蟹的急性毒性研究

水产科学 2023年第5期42卷 830-838页

作者：陈琳滕爽爽陆振肖国强蔡景波浙江省海洋水产养殖研究所浙江省近岸水域生物资源开发与保护重点实验室温州市海洋生物遗传育种重点实验室浙江温州325005 浙江海洋大学浙江舟山316022

为探明三门湾核电站温排水对海区甲壳类生物的急性致死效应,笔者通过室内模拟三门湾核电站温排水的余氯残留和温升效应,设计3×12的正交试验,研究温度和游离余氯耦合、温度和化合余氯耦合下对拟穴青蟹幼蟹死亡率的影响。试验水温为25、3... 详细信息

为探明三门湾核电站温排水对海区甲壳类生物的急性致死效应,笔者通过室内模拟三门湾核电站温排水的余氯残留和温升效应,设计3×12的正交试验,研究温度和游离余氯耦合、温度和化合余氯耦合下对拟穴青蟹幼蟹死亡率的影响。试验水温为25、30、35℃,初始游离余氯质量浓度为5.0、6.0、7.0、8.0、9.0 mg/L,以砂滤海水为对照组;化合余氯质量浓度为30.0、36.0、42.0、48.0、54.0 mg/L,以1.575×10^(-3)mg/L NH_4OH为加氨对照组。试验结果显示,单一温度胁迫对拟穴青蟹幼蟹存活率无显著性影响(P>0.05);温度耦合下游离余氯和化合余氯对拟穴青蟹幼蟹的致死率进一步提高。游离余氯和化合余氯的96 h半致死质量浓度随温度升高逐渐降低,且均在35℃时达到最低,35℃时其96 h半致死质量浓度分别为4.455 mg/L和27.290 mg/L,每1℃温升和1 mg/L余氯增加导致死亡率分别提高了0.316%和0.027%。同时,确定了25-35℃游离余氯安全质量浓度为0.446~0.544 mg/L,化合余氯安全质量浓度为2.729^(3).294 mg/L。试验结果表明,化合余氯对拟穴青蟹幼蟹的96 h半致死质量浓度约为游离余氯的6倍,游离余氯和温度耦合导致的拟穴青蟹幼蟹死亡率为化合余氯的11.7倍。本试验结果可为评估三门湾核电站海区中余氯排放对甲壳类生物的影响提供科学依据,也可为制订沿海电厂温排水排放标准提供数据参考。

关键词：水温余氯拟穴青蟹幼蟹急性毒性温排水

五氯酚钠胁迫对凡纳滨对虾生理生化和组织结构的影响

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水产科学 2024年第6期43卷 875-884页

作者：刘志伟李敏滕爽爽黄晓林肖国强浙江海洋大学海洋科学与技术学院浙江舟山316022 浙江省海洋水产养殖研究所全省近岸生物种质资源保护与利用重点实验室温州市海洋生物遗传育种重点实验室浙江温州325005

采用生物毒性测试的方法,将体质量(13.41±1.97)g的凡纳滨对虾暴露于五氯酚钠质量浓度为0(对照组)、0.87、8.74 mg/L的海水中20 d,分别在第1、10和20天从每组随机取15尾凡纳滨对虾,测定耗氧率、排氨率以及肝胰腺中的超氧化物歧化酶、过... 详细信息

采用生物毒性测试的方法,将体质量(13.41±1.97)g的凡纳滨对虾暴露于五氯酚钠质量浓度为0(对照组)、0.87、8.74 mg/L的海水中20 d,分别在第1、10和20天从每组随机取15尾凡纳滨对虾,测定耗氧率、排氨率以及肝胰腺中的超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、酸性磷酸酶、碱性磷酸酶、Na^(+)-K+-ATP酶活性和丙二醛含量,并在第20天时采用苏木精-伊红染色观察肝胰腺和鳃组织结构变化。结果显示:五氯酚钠胁迫后,低质量浓度组和高质量浓度组的耗氧率、排氨率显著降低(P<0.05);氧氮比逐渐增大,在第20天出现最大值,分别为(59.2±4.4)和(18.9±6.1);试验组对虾肝胰腺中丙二醛含量显著升高(P<0.05),超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、酸性磷酸酶、碱性磷酸酶、Na^(+)-K+-ATP酶活性显著降低(P<0.05);两个试验组的肝胰腺和鳃可见明显病理变化,具体表现为肝胰腺小管肿大、基膜破损、空泡化严重、星状管腔变形,鳃上皮细胞脱落、鳃角质层结构受到破坏,鳃局部空泡化等。试验结果表明:五氯酚钠胁迫能够显著影响凡纳滨对虾的呼吸、排泄以及酶活性,使其供能方式由蛋白质分解转变为脂肪和蛋白质混合分解;五氯酚钠胁迫后,凡纳滨对虾肝胰腺和鳃均出现不同程度的病变,说明其代谢系统和呼吸系统受到严重损伤。本试验结果揭示了五氯酚钠对凡纳滨对虾生理代谢、酶活性和组织结构的影响,为甲壳类对五氯酚钠胁迫的响应机制提供基础数据。

关键词：五氯酚钠凡纳滨对虾生理生化组织结构