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fcl基因对须糖多孢菌丁烯基多杀菌素生物合成及生长发育的影响

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生物工程学报 2019年第9期35卷 1662-1675页

作者：彭胜男何昊城苑爽芹穰杰胡胜标孙运军余子全黄伟涛胡益波丁学知夏立秋省部共建淡水鱼类发育生物学国家重点实验室湖南师范大学生命科学学院微生物分子生物学湖南省重点实验室

fcl基因编码的GDP-岩藻糖合成酶(GDP fucose synthetase,GFS),能催化由GDP-D-甘露糖合成GDP-L-岩藻糖过程中的两步差向异构酶和还原酶反应;还参与氨基糖和核糖的生物合成,是调控生物体糖代谢、核苷酸代谢的关键酶之一。通过前期基因组... 详细信息

fcl基因编码的GDP-岩藻糖合成酶(GDP fucose synthetase,GFS),能催化由GDP-D-甘露糖合成GDP-L-岩藻糖过程中的两步差向异构酶和还原酶反应;还参与氨基糖和核糖的生物合成,是调控生物体糖代谢、核苷酸代谢的关键酶之一。通过前期基因组测序表明须糖多孢菌Saccharopolyspora pogona中存在fcl基因。利用基因工程技术构建了fcl基因的过表达菌株S. pogona-fcl和敲除菌株S. pogona-Δfcl。结果表明该基因对菌株生长发育、蛋白表达及其转录水平、杀虫活性、丁烯基多杀菌素的生物合成均存在影响。经HPLC分析显示,S. pogona-Δfcl的丁烯基多杀菌素产量增加为野生型菌株的130%,***-fcl的丁烯基多杀菌素产量降低了25%。生测结果显示,与野生型菌株相比***-Δfcl对棉铃虫的杀虫活性明显增强,而***-fcl的杀虫活性降低。利用扫描电镜观察发现,S. pogona-Δfcl菌丝体表面出现褶皱,呈现短棒状,S. pogona-fcl菌丝形态与野生型菌株一致。以上结果表明,fcl基因的敲除影响菌丝体的生长发育,能促进丁烯基多杀菌素的生物合成和增强杀虫活性,该基因的过表达抑制了丁烯基多杀菌素的生物合成和降低了杀虫活性。SDS-PAGE结果表明,三株菌株在96 h时蛋白表达差异最为明显。对差异蛋白通过实时荧光定量聚合酶链式反应结果显示,三菌株蛋白的转录水平存在显著表达差异。通过研究结果构建了网络代谢调控图,分析fcl基因对须糖多孢菌生长发育及丁烯基多杀菌素生物合成代谢调控网络途径的影响,初步构建了fcl基因调控的代谢途径,为揭示丁烯基多杀菌素生物合成的调控机制及相关后续研究提供了实验依据。

关键词：须糖多孢菌丁烯基多杀菌素 fcl基因生物合成生长发育

库车前陆盆地中生界烃源岩有机质成熟度演化及影响因素

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石油与天然气地质 2005年第6期26卷 770-777,785页

作者：杨树春卢庆治宋传真袁玉松王红军胡圣标中国海洋石油研究中心河北高碑店074000 中国科学院地质与地球物理研究所北京100029 中国石化石油勘探开发研究院北京100083 中国石油勘探开发研究院北京100083

库车前陆盆地侏罗系烃源岩Ro值为0.55%～1.88%,均值为0.93%,主体处于生油高峰期;三叠系烃源岩Ro值的分布范围为0.60%～2.59%,均值为1.1%,主体处于生油晚期.现有钻井测温资料表明,库车前陆盆地2 000 m深度实测温度变化范围为40～60℃,4 0... 详细信息

库车前陆盆地侏罗系烃源岩Ro值为0.55%～1.88%,均值为0.93%,主体处于生油高峰期;三叠系烃源岩Ro值的分布范围为0.60%～2.59%,均值为1.1%,主体处于生油晚期.现有钻井测温资料表明,库车前陆盆地2 000 m深度实测温度变化范围为40～60℃,4 000 m深度实测温度变化范围为60～90℃,6 000 m深度实测温度变化范围为100～150℃.经热史恢复,库车前陆盆地自三叠纪以来,始终处于较低热流状态,表现为中生代相对较热(50～55 mW/m2),新生代以来,地表热流处于持续缓慢降低过程,最终降至现今的40～50 mW/m2.三叠系、侏罗系烃源岩分别于160～170 Ma及100 Ma进入低成熟阶段,进入生气阶段的时间是145 Ma及75 Ma,最早进入低成熟阶段的区域在克拉苏地区,其次为秋里塔格构造带,最晚进入低成熟阶段的地区在拜城凹陷.自23 Ma后有机质成熟度开始显著增高,三叠系、侏罗系现今均处于生气阶段.烃源岩成熟度状态主要由盆地沉积埋藏史及热史所决定.逆冲推覆和含膏岩层对烃源岩的成熟度也有一定的影响,其影响幅度取决于逆冲的断距、含膏岩层的厚度及其侧向变化幅度.

关键词：热历史逆冲推覆膏盐岩层有机质成熟度库车前陆盆地

Meso-Cenozoic tectonothermal evolution of Ordos basin,central China:Insights from newly acquired vitrinite reflectance data and a revision of existing paleothermal indicator data

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Meso-Cenozoic tectonothermal evolution of Ordos basin,centra...

聚磷酸激酶基因的阻断对刺糖多孢菌生长及多杀菌素合成的影响

中国科学院地质与地球物理研究所2007学术年会

作者： Yusong Yuan~(a,*),shengbiao hu~a,Hongjun Wang~b,Fenjing Sun~c a Institute of Geology and Geophysics,Chinese Academy of Sciences,Beijing 100029,China b Research Institute of Petroleum Exploration,PetroChina,Beijing 100083,China c Langfang Branch,Research Institute of Petroleum Exploration and Development,CNPC,Langfang 065007,China

Thermal history reconstruction using paleogeothermal indicators,including vitrinite reflectance(Ro) and apatite fission track (AFT) dating in the Ordos basin indicates that the lower subsection,consisting of the Paleozoic to Middle Triassic sediments, reached its maximum paleotemperatures at the end of the Middle Triassic(T) and experienced a paleogeothermal gradient of 42-63℃/km with a mean of 49±9℃/km,while the upper subsection from the Late Triassic to Middle Jurassic,experienced its maximum paleotemperatures at the beginning of Late Jurassic(J3) and a paleogeothermal gradient of 25-39℃/km with a mean of 31±6℃/***,at least two heating events are recorded in the Ordos basin since the Mesozoic:the first and most intensive in Middle Triassic as recorded by the lower subsection,the other is a moderate Jurassic thermal event as recorded by the upper *** heating events were followed by a Cenozoic rapid cooling starting at about 21 *** the regional geodynamic context,the Triassic thermal event might be ascribed to hydrothermal activity related to the Triassic collision between the North China Block(NCB) and the South China Block(SCB);the Jurassic thermal event to the Pacific subduction and the Cenozoic rapid cooling event to the Indo-Asian collision,respectively.

关键词： Ordos basin Thermal history Paleo-geothermal gradient Tectonics Hydrothermal activity

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中国生物防治学报 2014年第5期30卷 703-712页

作者：杨燕罗林根唐斯佳徐妙丁学知胡胜标孙运军夏立秋湖南师范大学生命科学学院/微生物分子生物学国家重点实验室培育基地长沙410081

聚磷酸激酶基因(Polyphosphate kinase gene,ppk)是放线霉菌中的一种影响抗生素合成的全局性负调控因子,阻断该基因能显著提高其次级代谢产物产量。本文利用PCR扩增了刺糖多孢菌中的ppk基因中间片段,经酶切连接技术将其克隆到大肠杆菌-... 详细信息

聚磷酸激酶基因(Polyphosphate kinase gene,ppk)是放线霉菌中的一种影响抗生素合成的全局性负调控因子,阻断该基因能显著提高其次级代谢产物产量。本文利用PCR扩增了刺糖多孢菌中的ppk基因中间片段,经酶切连接技术将其克隆到大肠杆菌-链霉菌穿梭载体pOJ260上,构建阻断型载体pOJ260-ppk;通过接合转移将该功能质粒导入刺糖多孢菌中,获得了遗传性能稳定的重组菌株***-△ppk。对工程菌株的PCR检测结果显示,ppk基因片段已整合到刺糖多孢菌染色体上并成功阻断了该基因的表达。摇瓶发酵结果显示,工程菌株多杀菌素产量较原始菌株提高了122%。阻断聚磷酸激酶基因的表达对刺糖多孢菌的菌丝形态及生长发育产生了影响,并有效地促进该菌多杀菌素的生物合成。

关键词：刺糖多孢菌聚磷酸激酶基因阻断多杀菌素接合转移

Geothermal field and thermotectonic evolution in Southern South Yellow Sea Basin

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Geothermal field and thermotectonic evolution in Southern So...

中国科学院地质与地球物理研究所2003学术年会

作者： YANG Shuchun~1,hu shengbiao~1,CAI Dongsheng~2, FENG Xiaojie~2,GAO Le~2 & LU Jingmei~2 1.Institute of Geology and Geophysics.Chinese Academy of Sciences. Beijing 10029.China 2.China Offshore Oil and Development Research Center,Gaobeidian 074010,China

Based on the available borehole temperature data and measurements of thermal conductivities on 10 core samples in the Southern South Yellow Sea Basin,8 heat flow values are *** results show that the mean values of temperature gradient and heat flow are 28.6℃/km and 69 mW/m,*** thermal history reconstruction from the inversion of vitrinite reflectance data,using the temperature-gradient method,indicates that the highest paleo-heat flow occurred at the end of the Mesozoic,and then the basin began to cool to present *** subsidence analysis shows that the basin experienced at least four episodes of quick subsidence since the late Paleozoic and that the tectonic evolution was quite strong and complex.

关键词： Southern South Yellow Sea Basin heat flow thermal history thermo-tectonic evolution

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侧扫声呐在海底管道路由调查中的应用

工程地球物理学报 2016年第5期13卷 627-631页

作者：肖志广潘广山刘圣彪胡庆辉中国海洋大学环境科学与工程学院山东青岛266100 山东省第四地质矿产勘查院山东潍坊261021

在复杂的海洋环境中,海底管道局部悬空和周围土层的冲刷是影响管道安全的重要因素。本文针对某海域海底输油管道的安全状态问题,利用侧扫声呐对管道在役状态及管道区海底地形、地貌特征开展了探测工作;结合管道区水动力条件和海底沉积... 详细信息

在复杂的海洋环境中,海底管道局部悬空和周围土层的冲刷是影响管道安全的重要因素。本文针对某海域海底输油管道的安全状态问题,利用侧扫声呐对管道在役状态及管道区海底地形、地貌特征开展了探测工作;结合管道区水动力条件和海底沉积物工程性质,分析了未冲刷海底、局部冲刷海底、塌陷凹坑和管道局部裸露悬空时的侧扫声呐图像特征。结果表明,声强度对各种异常海底都有明显的反映,当海底未冲刷时,声波强度很弱,图像中呈现出亮色区域;当声波强度增强时,为局部冲刷海底,图像表现为深暗色调;当出现塌陷凹坑时,声波强度会突然很弱,甚至没有,图像中上部为深色调,下部为浅色调;而当管道局部裸露悬空时,声波强度很强,在图像中呈现黑色的深色调。同时也证实了侧扫声呐探测法在海底管道安全状态调查中是可行的、有效的。

关键词：海底管道侧扫声呐图像特征在役状态冲刷

Heat flow study at the Chinese Continental Scientific Drilling site:Borehole temperature,thermal conductivity,and radiogenic heat production

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Heat flow study at the Chinese Continental Scientific Drilli...

中国科学院地质与地球物理研究所2008学术年会

作者： Lijuan He,shengbiao hu,Shaopeng huang,Wencai Yang,Jiyang Wang, Yusong Yuan,and Shuchun Yang 1 Institute of Geology and Geophysics,Chinese Academy of Sciences, Beijing,China. 2 Department of Geological Sciences,University of Michigan,Ann Arbor,Michigan,USA. 3 Institute of Geology,Chinese Academy of Geological Sciences, Beijing,China.

[1]The Chinese Continental Scientific Drilling(CCSD) Project offers a unique opportunity for studying the thermal regime of the Dabie-Sulu ultrahigh-pressure metamorphic *** this paper,we report measurements of borehole temperature,thermal conductivity,and radiogenic heat production from the 5158 m deep main hole (CCSD MH).We have obtained six continuous temperature profiles from this borehole so *** temperature logs show a transient mean thermal gradient that has increased from 24.38 to 25.28 K km over a period of about 1.5 *** measured thermal conductivities and radiogenic heat productions on more than 400 core samples from CCSD *** measured thermal conductivities range between 1.71 and 3.60 W m K,and the radiogenic heat productions vary from 0.01μW m to over 5.0μW m, with a mean value of 1.23±0.82μW m for the upper 5-km layer of the crust. The heat productions in CCSD MH appear to be more rock-type than depth-dependent and,over the depth range of CCSD MH,do not fit the popular model of heat production decreasing exponentially with increasing *** measured heat flow decreases with depth from～75 mW m near the surface to～66 mW m at a depth of 4600 m. High heat flow anomalies occur at～1000 and～2300 m,and low anomalies occur at 3300-4000 m.A preliminary two-dimensional numerical model suggests that both radiogenic heat production and thermal refraction due to structural heterogeneity are at least partially responsible for the vertical variation of heat flow in CCSD MH.

关键词：

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中国海域深水区油气地质

石油学报 2013年第S2期34卷 1-14页

作者：张功成米立军屈红军张厚和谢晓军胡圣标张义娜中海油研究总院北京100027 中国海洋石油有限公司勘探部北京100010 西北大学大陆动力学国家重点实验室陕西西安710069 中国科学院地质与地球物理研究所北京100029

中国海域深水区(水深大于300 m)沉积盆地主要分布在南海海域。南海经历古南海、新南海两大边缘海构造旋回,形成中央洋壳、大陆坡和大陆架。各大陆边缘具有"西、北张;东、南压;南沙漂移"特征。深水区沉积盆地呈环型沿陆坡和南沙地块分布... 详细信息

中国海域深水区(水深大于300 m)沉积盆地主要分布在南海海域。南海经历古南海、新南海两大边缘海构造旋回,形成中央洋壳、大陆坡和大陆架。各大陆边缘具有"西、北张;东、南压;南沙漂移"特征。深水区沉积盆地呈环型沿陆坡和南沙地块分布,东部深水区盆地不甚发育。南海西、北部大陆边缘深水区盆地经历了古近纪的裂谷作用和新近纪的拗陷及新构造作用。南沙地块经历了始新世—早渐新世断陷、晚渐新世—早中新世漂移和晚中新世以来的挤压阶段。南海南部大陆边缘渐新世以来长期处于挤压状态。南海东部大陆边缘晚中新世末以来处于挤压造岛阶段,导致南海封闭和俯冲带盆地发育。南海深水区盆地烃源岩发育层系多,包括白垩系、古新统、始新统、渐新统、中新统,其中白垩系—始新统烃源岩主要分布在南沙地块,渐新统—中新统烃源岩分布在大陆坡,呈现中央时代老、周缘时代新的格局。烃源岩类型主要是海陆过渡相煤层、碳质泥岩、暗色泥岩和海相泥岩,主要盆地现今为热盆—超热盆,历史热流值更高,十分有利于沉积有机质向油气转化。南海深水区主要生烃凹陷呈"C"型沿北部大陆边缘—西部大陆边缘—南部大陆边缘和南沙地块分布,发育10多个面积大、基底顶面埋藏深度大、地层厚度大、资源潜力大的凹陷,其中部分凹陷已被证实为富生烃凹陷。南海深水区储集体主要有大型深水扇体系、生物礁、三角洲相砂岩等。深水区盖层优良,多为厚层泥岩。圈闭类型有大型构造圈闭、生物礁、大型地层岩性圈闭。深水区油气大多为晚期生排烃,晚期聚集、近源成藏,普遍具有"下生、中储、上盖"的优越成藏组合。深水区油气勘探策略是尽快优选最有利的生烃凹陷及其最优的区带和目标,尽快发现一批骨干大油气田。

关键词：深水区边缘海构造旋回沉积盆地生烃凹陷储层勘探领域中国南海

大肠杆菌-链霉菌穿梭表达载体pMF的构建及其应用

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微生物学报 2010年第9期50卷 1251-1257页

作者：全梅芳余凯夏立秋丁学知曾凡军寇笑笑王海龙胡胜标余子全李敬业湖南师范大学生命科学学院微生物分子生物学湖南省重点实验室

【目的】构建能定点整合到链霉菌（Streptomyces）染色体上的高效表达载体。【方法】以链霉菌自杀型表达载体pLSB2为基础,通过插入链霉菌噬菌体ΦC31整合酶基因int和attP位点（Phage attachment site）,构建了能在大肠杆菌和链霉菌之间... 详细信息

【目的】构建能定点整合到链霉菌（Streptomyces）染色体上的高效表达载体。【方法】以链霉菌自杀型表达载体pLSB2为基础,通过插入链霉菌噬菌体ΦC31整合酶基因int和attP位点（Phage attachment site）,构建了能在大肠杆菌和链霉菌之间进行接合转移并定点整合到链霉菌染色体上的表达载体pMF。将pMF转化大肠杆菌ET12567（pUZ8002）,并分别接合转移天蓝色链霉菌（Streptomyces coelicolorM145）、变铅青链霉菌（Streptomyces lividansTK24）和红色糖多孢菌（Saccharopolyspora erythraea2338）,挑取接合子进行PCR和Southern杂交检测。将来自刺糖多孢菌S08-4的S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因（SAM-s）克隆到载体pMF的启动子下游,接合转移到天蓝色链霉菌中。【结果】表明pMF成功整入链霉菌染色体,并且检测到目的蛋白的表达。【结论】构建的pMF载体可作为外源基因定点整合表达的有效工具,为后续的基因功能研究以及链霉菌的遗传改造奠定了基础。

关键词：链霉菌整合酶表达载体接合转移