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心阳片通过调节RAGE介导的自噬改善心力衰竭小鼠心功能的作用研究

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中药新药与临床药理 2021年第3期32卷 316-321页

作者：何嘉琪高文斌张璐梁碧容吴晗琴冼绍祥汪朝晖王陵军广州中医药大学第一临床医学院广州中医药大学第一附属医院广州中医药大学岭南医学研究中心广东省普通高校慢性心力衰竭中医药防治重点实验室广州市慢性心力衰竭中医药防治重点实验室广东广州510405

目的探讨心阳片通过调节晚期糖基化终产物受体(RAGE)介导的自噬改善心力衰竭小鼠心功能的作用。方法将60只C57BL/6J小鼠随机分为6组,分别为假手术组、模型组、3-甲基腺嘌呤组(自噬抑制剂,15 mg·kg^(-1))以及心阳片低、中、高剂量组(455... 详细信息

目的探讨心阳片通过调节晚期糖基化终产物受体(RAGE)介导的自噬改善心力衰竭小鼠心功能的作用。方法将60只C57BL/6J小鼠随机分为6组,分别为假手术组、模型组、3-甲基腺嘌呤组(自噬抑制剂,15 mg·kg^(-1))以及心阳片低、中、高剂量组(455、910、1 820 mg·kg^(-1)),每组10只;另将10只经基因型鉴定确认为RAGE-/-的小鼠作为RAGE敲除组。采用主动脉弓缩窄术(TAC)建立压力负荷性心力衰竭小鼠模型。模型复制成功后,按上述剂量对心阳片各剂量组小鼠进行灌胃给药,3-甲基腺嘌呤组进行腹腔注射给药,其余组别灌胃等容积生理盐水,每天给药1次,连续4周。采用心脏彩超检测各组小鼠心功能,采集小鼠左室射血分数(LVEF)及左室短轴缩短率(LVFS);使用Masson染色观察小鼠心肌组织纤维化程度;采用蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测小鼠心脏左室心肌组织中的RAGE蛋白及自噬相关蛋白Beclin-1、LC3BⅡ/Ⅰ的表达情况。结果与假手术组比较,模型组小鼠的LVEF及LVFS明显降低(P<0.05),心肌纤维化面积明显增加(P<0.05),RAGE蛋白及自噬相关蛋白Beclin-1、LC3BⅡ/Ⅰ的表达明显上调(P<0.05);与模型组比较,RAGE敲除组、3-甲基腺嘌呤组及心阳片低、中、高剂量组小鼠的LVEF和LVFS明显升高(P<0.05),心肌纤维化面积明显减少(P<0.05),RAGE、Beclin-1、LC3BⅡ/Ⅰ蛋白表达明显下调(P<0.05)。结论心阳片可能通过调节RAGE介导的自噬,从而改善心力衰竭小鼠的心功能。

关键词：心阳片晚期糖基化终产物受体(RAGE) 自噬心力衰竭 Beclin-1 LC3BⅡ/Ⅰ 小鼠

暖心康对心肌缺血再灌注模型小鼠心肌细胞凋亡的影响

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中医杂志 2021年第18期62卷 1622-1627页

作者：董鑫温蕊嘉陈梓欣江佳林林祉均关卓骥李玄王陵军冼绍祥广州中医药大学第一临床医学院广东省广州市510405

目的探讨暖心康治疗心力衰竭的可能作用机制。方法30只C57BL/6雄性小鼠随机分为假手术组、模型组、暖心康组,每组10只。暖心康组和模型组采用可逆性结扎冠状动脉左前降支的方法建立心肌缺血再灌注模型。暖心康组给予暖心康1.65 g/kg灌胃... 详细信息

目的探讨暖心康治疗心力衰竭的可能作用机制。方法30只C57BL/6雄性小鼠随机分为假手术组、模型组、暖心康组,每组10只。暖心康组和模型组采用可逆性结扎冠状动脉左前降支的方法建立心肌缺血再灌注模型。暖心康组给予暖心康1.65 g/kg灌胃,模型组和假手术组给予生理盐水0.1 ml/10 g灌胃。各组每日灌胃1次,连续6周。采用超声评定小鼠心功能;qPCR法检测心脏组织心房钠尿肽(ANP)、B型钠尿肽(BNP)mRNA表达;HE染色观察心脏组织病理形态,TUNEL染色观察心肌细胞凋亡程度,计算心肌细胞凋亡率;Western blot法检测小鼠心脏组织凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、活化半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)表达。结果与假手术组比较,模型组小鼠心功能左室射血分数(EF)、心输出量(CO)、左室舒张末期前壁厚度(LVAWd)及左室收缩末期前壁厚度(LVAWs)明显降低,心脏组织ANP mRNA、BNP mRNA及Bax、活化Caspase-3蛋白表达水平明显上升,Bcl-2、Bcl-2/Bax值下降,心肌细胞凋亡率明显增加(P<0.01);与模型组比较,暖心康组EF、CO、LVAWd及LVAWs明显升高,心脏组织ANP mRNA、BNP mRNA表达水平及Bax、活化Caspase-3蛋白表达明显降低,Bcl-2、Bcl-2/Bax值显著升高,心肌细胞凋亡率明显下降(P<0.05或P<0.01)。HE染色结果显示,与模型组比较,暖心康组小鼠心肌细胞轻微肿胀,细胞边界相对清晰,心肌纤维排列相对整齐,炎性细胞浸润减少。结论暖心康可能通过下调心脏组织Bax、活化Caspase-3蛋白表达,上调Bcl-2蛋白表达,抑制ANP、BNP基因表达,而减少心肌细胞凋亡,从而改善心力衰竭。

关键词：心力衰竭心肌缺血再灌注暖心康细胞凋亡 Bcl-2相关X蛋白 B淋巴细胞瘤2 活化半胱氨酸蛋白酶3

基于生物信息学分析早期液体复苏改善脓毒症休克的核心基因及通路

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中国呼吸与危重监护杂志 2022年第2期21卷 102-111页

作者：康锦花宁怡乐龙文杰刘晴晴王陵军冼绍祥杨忠奇广州中医药大学第一附属医院广东广州510405 广州中医药大学岭南医学研究中心广东广州510405

目的通过生物信息学分析鉴定脓毒症休克早期的潜在核心基因及通路。方法基因表达谱GSE110487数据集从基因表达综合数据库下载,使用R项目的DESeq2软件包鉴定差异基因。构建《京都基因与基因组百科全书》(Kyoto Encyclopedia of Genes and... 详细信息

目的通过生物信息学分析鉴定脓毒症休克早期的潜在核心基因及通路。方法基因表达谱GSE110487数据集从基因表达综合数据库下载,使用R项目的DESeq2软件包鉴定差异基因。构建《京都基因与基因组百科全书》(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)和《基因本体论》(Gene Ontology,GO)分析,使用clusterProfiler程序包研究途径和生物过程。使用ggnetwork软件包对蛋白质–蛋白质相互作用(proteinprotein interaction,PPI)网络进行映射,并使用Cytoscape软件进行分子复合物检测(molecular complex detection,MCODE)分析以进一步研究差异基因的相互作用。结果在接受早期液体复苏治疗后出现不同反应性脓毒症休克患者中共鉴定出468个差异基因,包括255个上调基因和213个下调基因,通过对差异基因进行KEGG和GO富集分析,发现表达上调的基因涉及的生物过程主要与免疫过程有关,而表达下调的基因则涉及与有机含氮化合物有关的生物过程、多细胞有机体生物过程以及离子转运有关。经PPI网络构建和MCODE分析,从这些差异基因中筛选出23个核心基因,除CD28、CD3D、CD8B、CD8A、CD160、CXCR6、CCR3、CCR8、CCR9、TLR3、EOMES、GZMB、PTGDR2、CXCL8、GZMA、FASLG、GPR18、PRF1、IDO1等表达上调基因通过各种免疫过程参与早期脓毒症休克的改善外,CNR1、GPER1、TMIGD3、GRM2等表达下调的基因在早期液体复苏改善脓毒症休克中也有显著变化。KEGG通路富集分析和GO功能分析显示差异基因富集的信号通路与细胞因子与细胞因子受体的相互作用、自然杀伤细胞介导的细胞毒性、造血细胞谱、T淋巴细胞受体信号传导途径、磷脂酶D信号通路、细胞黏附分子等有关。结论T淋巴细胞、自然杀伤细胞等淋巴细胞及相关的细胞因子、趋化因子等参与的免疫过程在脓毒症休克的早期治疗中起着重要作用,CD160、CNR1、GPER1、GRM2等核心基因可能是治疗早期脓毒症休克的新靶点。

关键词：脓毒症休克早期液体复苏生物信息学核心差异基因

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中医药疗法治疗高血压合并失眠的进展

中国中医药现代远程教育 2019年第24期17卷 128-130页

作者：顾颖敏冼绍祥黄宇新林凯冬黄香君广州市中医医院五羊门诊部广东广州510130 广州中医药大学第一附属医院院办广东广州510405 广州中医药大学第二附属医院ICU 广东广州510000

在心血管疾病患者中,失眠的比例较普通人群更高。失眠直接影响心血管疾病的治疗及预后。临床观察发现,高血压病的患者合并失眠症状,会导致收缩压和舒张压的异常波动,即使加大了降压药的用量也难以使血压稳定到正常范围。寻求多种不同作... 详细信息

在心血管疾病患者中,失眠的比例较普通人群更高。失眠直接影响心血管疾病的治疗及预后。临床观察发现,高血压病的患者合并失眠症状,会导致收缩压和舒张压的异常波动,即使加大了降压药的用量也难以使血压稳定到正常范围。寻求多种不同作用机理的降血压、安眠手段来治疗高血压并失眠,具有现实的意义,中医在这方面作了很多有益的探索。中医治疗高血压合并失眠的手段多样,医者根据辨证结果,可单独运用方药或者联合使用中医外治法,如耳穴疗法、穴位贴敷、针灸、推拿、足浴等。相对于西医常规治疗方案,中医的医疗手段在改善患者症状、辅助降血压等方面可能具有更大的优势。

关键词：高血压病失眠中医药疗法综述

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试论毒邪致病与慢性心力衰竭发病的相关性

中医杂志 2016年第16期57卷 1375-1378页

作者：袁天慧杨忠奇李小兵汪朝晖于扬文申啸笑冼绍祥广州中医药大学第一附属医院广东省广州市机场路16号510405 广州中医药大学

从"毒"邪致病和慢性心力衰竭(简称慢性心衰)发病探讨两者的相关性。"毒"邪致病具有发病急骤,传变迅速,复杂多变,顽固难治,病症缠绵难愈,败坏机体形质,损伤脏腑结构功能,对人体造成严重危害的特点。慢性心衰发病具有多邪合并,顽固不化;... 详细信息

从"毒"邪致病和慢性心力衰竭(简称慢性心衰)发病探讨两者的相关性。"毒"邪致病具有发病急骤,传变迅速,复杂多变,顽固难治,病症缠绵难愈,败坏机体形质,损伤脏腑结构功能,对人体造成严重危害的特点。慢性心衰发病具有多邪合并,顽固不化;病情复杂,牵涉多脏;易于变化,危及生命等特征。从发病特点的相似性,说明在慢性心衰发病的过程中,有"毒"邪存在的可能。在治疗中,应予以解毒药物,并根据"毒"邪形成机制及所依附邪气的不同予以辨证施治。研究提示,中医药治疗有改善心功能不全动物的血流动力学指标,抑制心肌细胞的凋亡,防止心肌肥厚,抑制氧化酶的表达和肾素-血管紧张素系统过度激活等作用,还能够改善慢性心衰患者的生活质量及心功能。

关键词：毒邪慢性心力衰竭发病特点益气活血利水法清热解毒

基于网络药理学和分子对接探讨真武汤治疗扩张型心肌病的作用机制

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中西医结合心脑血管病杂志 2022年第7期20卷 1173-1183页

作者：孙斯嘉冼绍祥杨忠奇尹克春袁天慧广州中医药大学广州510006 广州中医药大学第一附属医院广州510405 广东省中医院广州510120

目的基于网络药理学和分子对接的方法探讨真武汤治疗扩张型心肌病的作用机制。方法通过中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)和Swiss Target Prediction网站获取真武汤有效化合物成分及相应的靶点,利用UniProt数据库将获得的靶点名称... 详细信息

目的基于网络药理学和分子对接的方法探讨真武汤治疗扩张型心肌病的作用机制。方法通过中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)和Swiss Target Prediction网站获取真武汤有效化合物成分及相应的靶点,利用UniProt数据库将获得的靶点名称转换成基因名;通过在线人类孟德尔遗传数据库(OMIM)、基因名片数据库(GeneCard)、TTD数据库、毒性与基因比较数据库(CTD)、遗传药理学和药物基因组学数据库(PharmGKB)获取扩张型心肌病相关基因,将真武汤靶点基因和扩张型心肌病相关基因取交集作为真武汤治疗扩张型心肌病的潜在靶点;将交集基因导入STRING数据库进行蛋白互作分析,利用Cytoscape软件绘制真武汤中药-潜在化合物-潜在靶点的可视化网络关系图;应用RStudio的ClusterProfiler包对潜在靶点进行基因本体(GO)功能注释和京都基因和基因组百科全书(KEGG)通路富集分析,使用Pathview包进行代谢途径整合和可视化;最后将筛选的关键靶蛋白进行分子对接验证。结果通过筛选得到真武汤有效化合物成分59个,对应药物靶点259个,扩张型心肌病相关靶点980个,潜在靶点47个,筛选出41个与疾病相关的有效化合物,GO功能注释分析到943条,KEGG富集分析到120条信号通路。其中β-谷甾醇、山奈酚、3β-乙酰氧基苍术酮、去甲乌头碱、芍药新苷、多根乌头碱、茯苓酸B、常春藤皂苷元等为真武汤治疗扩张型心肌病的主要活性化合物,白细胞介素6(IL6)、肿瘤坏死因子(TNF)、转录激活因子3(STAT3)、表皮生长因子受体(EGFR)、内皮一氧化氮合酶(NOS3)等为关键靶点,主要通过调控晚期糖基化终末产物-糖基化终末产物受体(AGE-RAGE)、缺氧诱导因子-1(HIF-1)、弓形虫、脂肪细胞脂解、肾素分泌、钙离子等信号通路发挥治疗作用。结论真武汤可能通过β-谷甾醇、山奈酚、3β-乙酰氧基苍术酮、去甲乌头碱、芍药新苷等关键活性成分作用于IL6、TNF、STAT3、EGFR、NOS3等关键靶点,通过调节AGE-RAGE、HIF-1、弓形虫、脂肪细胞脂解、肾素分泌、钙离子等信号通路,产生抑制氧化应激及炎症、改善心肌能量代谢、调节免疫功能等机制发挥综合治疗作用。

关键词：扩张型心肌病真武汤网络药理学分子对接作用机制

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冼绍祥教授治疗原发性高血压经验介绍

辽宁中医药大学学报 2018年第8期20卷 109-112页

作者：林炜基刘迪继江凯利王陵军冼绍祥广州中医药大学广东广州510405 广州市慢性心力衰竭中医药防治重点实验室广东广州510405 广州中医药大学第一附属医院广东广州510405

冼绍祥教授认为,原发性高血压的病机不外乎本虚标实,虚实夹杂,虚者为肝肾阴亏,水不涵木;实者为风、火、痰、瘀内生,上扰清窍。病位以肝、脾、肾三脏为主,治疗上以化痰祛湿、扶正补虚、镇肝熄风、活血化瘀为法,结合袋泡茶、膏方、沐足等... 详细信息

冼绍祥教授认为,原发性高血压的病机不外乎本虚标实,虚实夹杂,虚者为肝肾阴亏,水不涵木;实者为风、火、痰、瘀内生,上扰清窍。病位以肝、脾、肾三脏为主,治疗上以化痰祛湿、扶正补虚、镇肝熄风、活血化瘀为法,结合袋泡茶、膏方、沐足等其他治疗手段,疗效令患者满意。

关键词：原发性高血压中医经验冼绍祥

心阳片含药血清调控NLRP3介导细胞焦亡保护心肌细胞炎症损伤的作用及机制研究

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中华中医药学刊 2021年第8期39卷 92-96,I0025页

作者：郭依宁刘景王俊岩张璐邹凌冼绍祥杨忠奇王陵军黄育生广州中医药大学第一附属医院广东广州510405 广州中医药大学第一临床医学院广东广州510405 广州中医药大学岭南医学研究中心广东广州510405 广东省普通高校慢性心力衰竭中医药防治重点实验室广东广州510405 广州中医药大学惠州医院广东惠州516001

目的通过观察心阳片含药血清调控NLRP3介导的细胞焦亡对心肌细胞炎症损伤的保护作用,探讨心阳片防治心力衰竭的作用机制。方法随机将40只雄性SD大鼠分成空白组、心阳片低、中、高剂量组,分别给予临床等效剂量的1、2、4倍心阳片(0.24、0... 详细信息

目的通过观察心阳片含药血清调控NLRP3介导的细胞焦亡对心肌细胞炎症损伤的保护作用,探讨心阳片防治心力衰竭的作用机制。方法随机将40只雄性SD大鼠分成空白组、心阳片低、中、高剂量组,分别给予临床等效剂量的1、2、4倍心阳片(0.24、0.48、0.96 g/kg)灌胃;空白组给予等量蒸馏水进行灌胃。各组大鼠灌胃2次/d, 2 mL/次,连续灌胃7 d。末次给药灌胃后,腹主动脉取血,分离血清。用LPS/ATP(1μg/mL LPS刺激细胞24 h,再用5 mmol/L ATP刺激细胞4 h)处理HL-1心肌细胞,并分为:空白组(NC)、模型组(LPS/ATP+空白血清)、心阳片低剂量组(LPS/ATP+低剂量心阳片血清)、心阳片中剂量组(LPS/ATP+中剂量心阳片血清)、心阳片高剂量组(LPS/ATP+高剂量心阳片血清)。CCK8检测细胞活性,免疫荧光检测各组细胞NLRP3的表达情况,RT-qPCR检测NLRP3、GSDMD、IL-1β、Caspase-1mRNA转录水平,Western Blot检测心肌细胞NLRP3、pro-IL-1β、IL-1β、IL-18、cleaved-GSDMD、pro-Caspase-1、Caspase-1、ASC蛋白表达情况。结果与空白组相比,LPS/ATP组HL-1细胞活力明显降低,NLRP3、GSDMD、IL-1β、Caspase-1mRNA水平升高(P<0.05),NLRP3、pro-IL-1β、IL-1β、IL-18、cleaved-GSDMD、pro-Caspase-1、Caspase-1、ASC蛋白表达明显升高(P<0.05);与LPS/ATP组相比,心阳片含药血清低、中、高剂量组细胞活力增加,NLRP3、GSDMD、IL-1β、Caspase-1mRNA水平降低(P<0.05),NLRP3、pro-IL-1β、IL-1β、IL-18、cleaved-GSDMD、pro-Caspase-1、Caspase-1、ASC蛋白表达明显降低(P<0.05)。结论心阳片含药血清能改善LPS/ATP诱导HL-1细胞炎症损伤,其机制可能是通过抑制NLRP3/IL-1β介导的细胞焦亡发挥作用。

关键词： NLRP3 心肌细胞 HL-1 LPS 细胞焦亡心阳片

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归脾汤加减治疗心律失常的Meta分析

中西医结合心脑血管病杂志 2018年第13期16卷 1793-1797页

作者：邹凌龙文杰唐雅琴冼绍祥杨忠奇广州中医药大学广州510000 广州中医药大学第一附属医院

目的运用Meta分析评价归脾汤治疗心律失常的有效性及安全性。方法通过计算机检索中国知网(CNKI)、中国生物医学文献数据库、万方数据库,时间截至2017年1月。收集归脾汤加减治疗心律失常的随机对照试验/半随机对照试验文献,按纳入和排除... 详细信息

目的运用Meta分析评价归脾汤治疗心律失常的有效性及安全性。方法通过计算机检索中国知网(CNKI)、中国生物医学文献数据库、万方数据库,时间截至2017年1月。收集归脾汤加减治疗心律失常的随机对照试验/半随机对照试验文献,按纳入和排除标准由2名评价者独立选择试验、提取资料,交叉核对并进行文献质量评价,最后纳入研究的文献使用RevMan5.3软件进行Meta分析。结果共纳入9项研究,均为中文文献,总计772例病人。Meta分析结果显示:归脾汤加规范西药治疗心律失常在临床疗效及心电图改善方面优于规范西药治疗[RR=1.28,95%CI(1.18,1.40),P<0.000 01;RR=1.30,95%CI(1.19,1.41),P<0.000 01]。结论归脾汤加减联合使用西药治疗效果优于单用西药治疗。

关键词：心律失常归脾汤心电图 Meta分析系统评价