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Knock-in of exogenous sequences based on CRISPR/Cas9 targeting autosomal genes and sex chromosomes in the diamondback moth,Plutella xylostella

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Journal of Integrative Agriculture 2024年第9期 3089-3103页

作者： shanyu li Guifang lin Haoqi Wen Haiyan Lu Anyuan Yin Chanqin Zheng Feifei li Qingxuan Qiao Lu Jiao ling lin Yi Yan Xiujuan Xiang Huang liao Huiting Feng Yussuf Mohamed Salum Minsheng You Wei Chen Weiyi He State Key Laboratory for Ecological Pest Control of Fujian and Taiwan Crops/Ministerial and Provincial Joint Innovation Centre for Safety Production of Cross-Strait Crops/International Joint Research Laboratory of Ecological Pest Control Ministry of EducationInstitute of Applied EcologyFujian Agriculture and Forestry University Ganzhou Key Laboratory of Greenhouse Vegetable Gannan Normal University

Genetic pest control strategies based on precise sex separation and only releasing sterile males can be accomplished by site-specific genome editing. In the current study, we showed that the mutation of single-allele Pxfl(2)d can significantly impair the normal mating behavior and testis development in male adults of the notorious cruciferous insect pest Plutella xylostella, in addition to its known functions in the ovarian development in female adults and egg hatching. Subsequent CRISPR/Cas9-based knock-in experiments revealed that site-specific integration of an exogenous green fluorescent protein(GFP) gene into autosomal Pxfl(2)d for labelling mutants could be achieved. However, this gene is not a suitable target for GFP insertion to establish a genetically stable knock-in strain because of the severe decline in reproductive capacity. We further screened for the W-chromosomelinked and Z-chromosome-linked regions to test the knock-in efficiency mediated by CRISPR/Cas9. The results verified that both types of chromosomes can be targeted for the site-specific insertion of exogenous sequences. We ultimately obtained a homozygous knock-in strain with the integration of both Cas9 and cyan fluorescent protein(CFP) expression cassettes on a Z-linked region in P. xylostella, which can also be used for early sex detection. By injecting the sgRNA targeting Pxfl(2)d alone into the eggs laid by female adults of the Z-Cas9-CFP strain, the gene editing efficiency reached 29.73%, confirming the success of expressing a functional Cas9 gene. Taken together, we demonstrated the feasibility of the knock-in of an exogenous gene to different genomic regions in P. xylostella, while the establishment of a heritable strain required the positioning of appropriate sites. This study provides an important working basis and technical support for further developing genetic strategies for insect pest control.

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Proteomics Dissection of Cold Responsive Proteins Based on PEG Fractionation in Arabidopsis

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Chemical Research in Chinese Universities 2014年第2期30卷 272-278页

作者： li shanyu liU Xiangguo WANG Shang HAO Dongyun XI Jinghui College of Plant Science Jilin University Changchun 130062 P.R.China The First Hospital of Jilin University Changchun 130021 P.R.China Biotechnology Research Centre Jilin Academy of Agricultural Sciences Changchun 130124 P.R.China

Proteome profiling was performed on Arabidopsis plant exposed to cold stress at 4 ℃ for 24 h in an attempt to explore the mechanisms of plant climate *** polyethylene glycol（PEG） fractionation protocol developed in this lab was used to identify as many differentially expressed low-abundance proteins as *** comparison with those of the biological controls,67 protein spots with at least two-fold difference in expression were identified for the plant exposed to cold temperatures; and from these spots,50 proteins were successfully identified by matrix-assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry（MALDI-TOF MS）.Bioinformatics studies on these proteins show that 57.8％ of these proteins were localized in the *** these proteins,8 ones have functions in photosynthesis,including glycine hydroxymethyltransferase,Rubisco large subunit,Rubisco activase,PSBO2,fructose-1,6-bisphosphate aldolase,NADP-dependent malate dehydrogenase,sedoheptulose bisphosphatase and photosystem Ⅱ reaction center PsbP family protein,suggesting that photosynthesis is greatly affected by cold *** identified proteins were validated by quantitative real-time polymerase chain reaction（qPCR）.Taken together,our results suggest that the chloroplast might also act as a cold stress sensor and that photosynthesis-related proteins may play important roles in cold acclimation for Arabidopsis.

关键词： Arabidopsis thaliana Cold stress Proteome Protein fractionation

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肾上腺罕、少见肿瘤CT表现及文献回顾

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临床放射学杂志 2024年第4期43卷 646-650页

作者：鲁珊妤钱怡颖郭立昆明医科大学第二附属医院放射科 650101

目的对肾上腺罕、少见肿瘤的CT表现进行探讨。方法回顾性分析经手术病理证实的17例肾上腺罕、少见肿瘤(节细胞神经瘤4例,神经鞘瘤5例,畸胎瘤3例,淋巴瘤2例,神经鞘瘤合并节细胞神经瘤、血管肉瘤、骨外尤文肉瘤各1例)的CT影像资料,并复... 详细信息

目的对肾上腺罕、少见肿瘤的CT表现进行探讨。方法回顾性分析经手术病理证实的17例肾上腺罕、少见肿瘤(节细胞神经瘤4例,神经鞘瘤5例,畸胎瘤3例,淋巴瘤2例,神经鞘瘤合并节细胞神经瘤、血管肉瘤、骨外尤文肉瘤各1例)的CT影像资料,并复习文献。结果 17例肾上腺罕、少见肿瘤的男女比例为12∶5,年龄7~70岁。节细胞神经瘤多呈水滴形,较大可呈钻缝样生长,即“尖角征”,增强动脉期无明显强化,延迟期可无强化或轻度强化;神经鞘瘤具有完整的纤维包膜,常呈渐进性不均匀强化;畸胎瘤可含脂肪成分及钙化等;血管肉瘤中心常见大面积坏死,增强与血管瘤强化方式相似;淋巴瘤双侧好发,体积较大则密度欠均;骨外尤文肉瘤多为密度欠均的较大肿块,易囊变、坏死,强化不均匀。结论肾上腺罕、少见肿瘤在CT上具有一定影像特点,可为临床对肾上腺疾病的诊断提供帮助。

关键词：肾上腺肿瘤计算机体层摄影

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意面腕损伤的诊断与治疗

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国际骨科学杂志 2022年第3期43卷 147-150页

作者：张睿李善语王飞燕上海交通大学附属第六人民医院骨科 200233

意面腕损伤是一类前臂远段及腕部掌侧深开放伤的总称,患者以中青年男性居多,主要累及惯用手,但其定义尚存争议。有学者建议根据损伤结构数量、损伤机制和接受修复手术的时间等因素对意面腕损伤加以分型。患者多于急诊就诊,一期手术治疗... 详细信息

意面腕损伤是一类前臂远段及腕部掌侧深开放伤的总称,患者以中青年男性居多,主要累及惯用手,但其定义尚存争议。有学者建议根据损伤结构数量、损伤机制和接受修复手术的时间等因素对意面腕损伤加以分型。患者多于急诊就诊,一期手术治疗常不可避免。规律而持续的术后康复训练能够促进患肢功能恢复,但伴有神经损伤时功能恢复较差。接诊此类患者,应当详细告知疾病严重性和手术治疗、规律随访的必要性。

关键词：腕切割伤诊断治疗评估

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先天性上尺桡关节融合发病机制与诊治进展

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国际骨科学杂志 2022年第2期43卷 65-68页

作者：李善语张睿徐佳康庆林上海交通大学附属第六人民医院骨科 200233

先天性上尺桡关节融合(CRUS)是一种由胚胎发育障碍引起的前臂旋转受限畸形,可严重影响患者的日常生活。CRUS的发病机制尚不明确,但有证据表明与骨形态发生蛋白(BMP)信号通路的上游信号异常有关。近年来CRUS的手术指征仍存争议,须综合考... 详细信息

先天性上尺桡关节融合(CRUS)是一种由胚胎发育障碍引起的前臂旋转受限畸形,可严重影响患者的日常生活。CRUS的发病机制尚不明确,但有证据表明与骨形态发生蛋白(BMP)信号通路的上游信号异常有关。近年来CRUS的手术指征仍存争议,须综合考虑患肢功能受限程度、畸形程度、患者年龄和手术预期才能做出判断。CRUS常用手术方式包括分离融合区重建术、旋转截骨术和Ilizarov技术等,各有利弊。随着筛检手段的进步和手术技术的发展,CRUS的早期诊断与治疗效果将会逐步改善。该文就CRUS发病机制与诊治进展进行综述。

关键词：先天性上尺桡关节融合发病机制诊断治疗进展

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我国矿山生态修复标准规范体系建设研究

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上海国土资源 2024年第2期45卷 36-40页

作者：姜杉钰李小雨自然资源部咨询研究中心北京100035 中国地质大学(北京)土地科学技术学院北京100083

标准规范是矿山生态修复技术和政策双轮驱动的重要衔接。通过系统梳理矿山生态修复相关的176项标准规范,分析了标准体系建设现状及存在的问题,进而提出针对性的对策建议。研究表明,我国矿山山生态修复工作基本形成了一套多层次、全覆盖... 详细信息

标准规范是矿山生态修复技术和政策双轮驱动的重要衔接。通过系统梳理矿山生态修复相关的176项标准规范,分析了标准体系建设现状及存在的问题,进而提出针对性的对策建议。研究表明,我国矿山山生态修复工作基本形成了一套多层次、全覆盖、有特色的标准规范体系,国家标准发挥基石作用,行业标准突出专业优势,地方标准体系区域特点,团体标准作为有效补充。研究认为,应从6个方面强化矿山生态修复标准规范体系建设:强化基础理论建设,建立统一术语体系;系统把握工作需求,完善关键标准研制;重视生产矿山修复,补齐标准规范短板;结合区域矿产特征,健全地方标准体系建设;提升标准可操作性,强化实际应用效果;深化综合评估研究,形成科学验收标准。

关键词：矿山生态修复标准规范绿色矿山生产矿山

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钨铜复合材料制备工艺研究

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热喷涂技术 2024年第2期16卷 88-98页

作者：李乃拥王芦燕刘山宇北矿新材科技有限公司北京102206 矿冶科技集团有限公司北京100160

分别采用直接机械合金化法及氧化物共还原法制备了W-10Cu和W-20Cu复合材料,研究了钨粉粒度、烧结温度和保温时间对钨铜合金显微组织、致密度和电导率的影响。结果表明:随着W粉粒度的增大,直接机械合金化法制备的钨铜合金组织中W晶粒逐... 详细信息

分别采用直接机械合金化法及氧化物共还原法制备了W-10Cu和W-20Cu复合材料,研究了钨粉粒度、烧结温度和保温时间对钨铜合金显微组织、致密度和电导率的影响。结果表明:随着W粉粒度的增大,直接机械合金化法制备的钨铜合金组织中W晶粒逐渐增大,致密度逐渐降低,电导率逐渐增大。在相同烧结条件下,氧化物共还原法较直接机械合金化法制备的钨铜合金组织中W晶粒尺寸细小,分布均匀,致密度和电导率更高。随着烧结温度的升高,钨铜合金组织中W晶粒尺寸逐渐增大,致密度和电导率逐渐增加。当烧结温度由1500℃增加至1600℃时,氧化物共还原法制备的W-10Cu合金中W平均晶粒尺寸由2.1μm增加至3.6μm,致密度由98.2%增加至98.5%,电导率由39.3%IACS增加至39.8%IACS;W-20Cu合金中W平均晶粒尺寸由2.3μm增加至3.5μm,致密度由98.4%增加至99.2%,电导率由40.8%IACS增加至41.6%IACS。此外,钨铜合金组织中W晶粒尺寸随着保温时间的增加而逐渐增大。

关键词：钨铜复合材料机械合金化氧化物共还原显微组织致密度电导率

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现代信息技术构建高校教学质量监控体系研究

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现代科学仪器 2024年第2期41卷 173-179页

作者：尚善禹李德金中国人民武装警察部队后勤学院天津300309

随着现代化技术的发展,越来越多的信息技术被运用到教育领域。高校教学质量监控是教育教学中的关键环节,保障了教育资源的合理分配与教学正常运行。但监控系统复杂多样,传统的方式已经不能满足监控系统的正常运行。因此,此次研究在现代... 详细信息

随着现代化技术的发展,越来越多的信息技术被运用到教育领域。高校教学质量监控是教育教学中的关键环节,保障了教育资源的合理分配与教学正常运行。但监控系统复杂多样,传统的方式已经不能满足监控系统的正常运行。因此,此次研究在现代信息技术的基础上,构建高校教学质量监控体系。实验测试结果显示,质量监控系统登录响应时间较短,仅1.7982s。问卷调查结果显示,四个质量监控体系满意程度较高,达99.25%;线上评分结果显示,教学日常会议、教学工作报告、学生反馈与教师反馈评分均在85分以上。验证了此次设计体系的合理性,为高校教学质量监控体系提供了理论基础。

关键词：现代信息技术教学质量监控体系学生反馈高校教学

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微量元素硒、锰、砷与小儿支气管哮喘的关系

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中国妇幼保健 2006年第11期21卷 1537-1539页

作者：宋涛鲁继荣李善玉大连大学附属中山医院儿科辽宁大连116001 吉林大学第一医院儿科长春130021

目的:探讨微量元素硒(Se)、锰(Mn)、砷(As)与支气管哮喘的关系。方法:用石墨炉原子吸收分光光度法及氢化物原子荧光光度法对60例发作期支气管哮喘患儿及60例正常儿童进行Se、Mn、As的检测。结果:哮喘组患儿Se、Mn含量低于正常对照组(P<0... 详细信息

目的:探讨微量元素硒(Se)、锰(Mn)、砷(As)与支气管哮喘的关系。方法:用石墨炉原子吸收分光光度法及氢化物原子荧光光度法对60例发作期支气管哮喘患儿及60例正常儿童进行Se、Mn、As的检测。结果:哮喘组患儿Se、Mn含量低于正常对照组(P<0.05)。As含量高于对照组(P<0.05)。结论:哮喘发作期患儿Se、Mn含量低,As增高。发作期支气管哮喘患儿血清Se、As含量呈负相关。发作期患儿血清Se和Mn含量无相关性,Mn、As含量无相关性。

关键词：支气管哮喘硒锰砷

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通天口服液治疗脑梗死有效性及安全性的meta分析

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中国医药科学 2024年第1期14卷 180-183页

作者：史敏刘珊余李钊颖成都中医药大学附属医院神经内科四川成都610075

目的系统评价通天口服液治疗脑梗死的有效性和安全性。方法全面检索中国知网、万方、维普等数据库,搜索通天口服液治疗脑梗死的临床研究,只纳入随机对照试验(RCT)。检索时间从建库至2023年4月。由2名研究者独立完成筛选文献、数据提取... 详细信息

目的系统评价通天口服液治疗脑梗死的有效性和安全性。方法全面检索中国知网、万方、维普等数据库,搜索通天口服液治疗脑梗死的临床研究,只纳入随机对照试验(RCT)。检索时间从建库至2023年4月。由2名研究者独立完成筛选文献、数据提取及偏倚风险评估。meta分析使用RevMan 5.3软件完成。结果共纳入9个RCT,共计1148例患者。meta分析结果显示,通天口服液治疗脑梗死的总有效率高于对照组,差异有统计学意义(OR=2.18,95%CI:1.53~3.12,P0.05)。结论循证医学分析表明通天口服液治疗脑梗死有效性和安全性较好。

关键词：通天口服液脑梗死疗效 meta分析

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