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枣瘿蚊微卫星标记筛选及微卫星多态性分析

新疆农业科学 2020年第5期57卷 888-894页

作者：马光皇康淑媛李莉肖海兵熊仁次杨明禄塔里木大学植物科学学院新疆阿拉尔843300 南疆农业有害生物综合治理兵团重点实验室新疆阿拉尔843300 农业部阿拉尔作物有害生物科学观测实验站新疆阿拉尔843300

【目的】研究枣瘿蚊基因遗传变异程度,分析基因多态性。【方法】从枣瘿蚊部分基因组序列中搜索SSR并设计相应引物,挑选引物48对进行有效筛选。枣瘿蚊样本来自新疆阿拉尔市、昆玉市、且末县等地区,以枣瘿蚊DNA为模板进行PCR扩增,筛选特... 详细信息

【目的】研究枣瘿蚊基因遗传变异程度,分析基因多态性。【方法】从枣瘿蚊部分基因组序列中搜索SSR并设计相应引物,挑选引物48对进行有效筛选。枣瘿蚊样本来自新疆阿拉尔市、昆玉市、且末县等地区,以枣瘿蚊DNA为模板进行PCR扩增,筛选特异性微卫星引物;通过琼脂糖凝胶电泳进行定性检测,再以毛细管电泳检测其多态性。【结果】有42对引物能扩增出条带,选择其中20对特异性较好的引物进行多态性分析。观测杂合度(Observed heterozygosity,ho)、期望杂合度(Expected heterozygosity,He)和多态信息含量(PIC)平均值分别是0.358、0.649和0.635,其中18对引物PIC值>0.5,具有较高的多态性。【结论】开发的微卫星标记多态性较高,可用于枣瘿蚊种群遗传多样性及遗传结构研究。

关键词：枣瘿蚊微卫星(SSR) 多态性遗传多样性

蛋白质精氨酸甲基转移酶5对人卵巢癌ho8910细胞增殖能力的影响

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医学研究生学报 2018年第6期31卷 565-572页

作者：魏野王冉冉韩田田赵康荣林琼邵根宝江苏大学医学院镇江医学硕士研究生212013

目的蛋白质精氨酸甲基转移酶5(PRMT5)可通过表观遗传或翻译后甲基化修饰的方式参与众多的生物学调控。文中旨在探讨PRMT5对卵巢癌ho8910细胞增殖能力的影响。方法利用瞬时转染的方法获得PRMT5过表达的ho8910细胞株,分为空白对照组(野生... 详细信息

目的蛋白质精氨酸甲基转移酶5(PRMT5)可通过表观遗传或翻译后甲基化修饰的方式参与众多的生物学调控。文中旨在探讨PRMT5对卵巢癌ho8910细胞增殖能力的影响。方法利用瞬时转染的方法获得PRMT5过表达的ho8910细胞株,分为空白对照组(野生型ho8910细胞株)、阴性对照组(转染p CMV-myc质粒的ho8910细胞)、实验组(转染p CMV-myc-PRMT5质粒的ho8910细胞)。Western blot检测3组细胞标签蛋白myc的表达,qRT-PCR检测3组细胞PRMT5mRNA的表达。另利用shRNA干扰方法建立诱导型稳定敲低PRMT5基因的ho8910细胞株,分为p LKO对照组(感染空载体慢病毒)、p LKO+Dox(100 ng/m L)组、sh PRMT5组(感染PRMT5-shRNA慢病毒组)和sh PRMT5+Dox(100 ng/m L)组。用不同浓度梯度的Dox诱导敲低(Dox 0 ng/m L、1 ng/m L、10 ng/m L、100 ng/m L)48 h,Western blot、qRT-PCR检测PRMT5的蛋白和mRNA的表达。克隆形成实验、Ed U实验、CCK-8实验检测细胞增殖能力;实验细胞分为Dox-组、Dox+组、p CMV-myc组、p CMV-mycPRMT5组。Western blot检测细胞PRMT5的表达对增殖相关蛋白的影响。结果 Western blot结果显示,空白对照组和阴性对照组均无标签蛋白myc的表达,而实验组检测到myc的表达,qRT-PCR检测实验组PRMT5 mRNA表达远高于空白对照组和阴性对照组(P<0.01)。与p LKO对照组细胞中PRMT5的蛋白表达水平(1.05±0.11)比较,sh PRMT5+Dox组(0.32±0.25)和sh PRMT5组PRMT5的蛋白表达(0.89±0.18)显著减少(P<0.05)。qRT-PCR结果同样显示,sh PRMT5+Dox较sh PRMT5组PRMT5 mRNA表达显著降低(P<0.01)。Western blot和qRT-PCR证实PRMT5在用Dox 10 ng/m L(0.21±0.24)和100 ng/m L(0.08±0.15)诱导后相较于无Dox处理显著下调(P<0.05)。Dox-组细胞形成的克隆数[(161±15)个]显著高于Dox+组细胞克隆数[(73±8)个],差异具有统计学意义(P<0.01)。p CMV-myc-PRMT5组克隆数[(193±15)个]明显高于p CMV-myc组克隆数[(102±12)个],差异有统计学意义(P<0.01)。Dox-组正在进行DNA复制的细胞数[(35±10)个]明显高于Dox+组[(16±8)个],差异具有统计学意义(P<0.05)。p CMV-myc-PRMT5组正在进行DNA复制的细胞数[(46±8)个]显著高于p CMVmyc组[(24±8)个],差异有统计学意义(P<0.05)。CCK-8结果显示,细胞铺板第4天以后Dox+组细胞增殖率显著低于Dox-组(P<0.05)。p CMV-myc-PRMT5组细胞的增殖率从第4天也显著高于对应天数的p CMV-myc组(P<0.05)。结论PRMT5对卵巢癌细胞的增殖能力有重要作用。下调PRMT5可以抑制细胞的增殖能力,而上调PRMT5促进细胞的增殖能力。

关键词：蛋白质精氨酸甲基转移酶5 卵巢癌增殖

基于微卫星标记的洞庭青鲫与三个鲫品系群体遗传多样性分析

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海洋与湖沼 2016年第3期47卷 647-654页

作者：刘良国陈海康许倩杨品红谢春华李梦军水产高效健康生产湖南省协同创新中心动物学湖南省高校重点实验室湖南文理学院生命科学学院常德415000

选取12个微卫星标记对洞庭青鲫(Carassius auratus ***)、野生二倍体和三倍体鲫(***)、彭泽鲫(*** ***)4个鲫品系群体进行遗传多样性检测。在12个基因座位中,共检测出78个等位基因,其中14个为共有等位基因;每个座位检测到等位基因4—12... 详细信息

选取12个微卫星标记对洞庭青鲫(Carassius auratus ***)、野生二倍体和三倍体鲫(***)、彭泽鲫(*** ***)4个鲫品系群体进行遗传多样性检测。在12个基因座位中,共检测出78个等位基因,其中14个为共有等位基因;每个座位检测到等位基因4—12个,平均等位基因数6.58个;4个鲫品系群体的平均观测杂合度(ho)分别为0.633、0.750、0.800、0.717;平均期望杂合度(He)分别为0.502、0.713、0.757、0.602;平均多态信息含量(PIC)分别为0.364、0.599、0.637、0.470。上述结果表明,野生二倍体和三倍体鲫的遗传多样性较为丰富,以三倍体鲫的遗传多样性为最高;而洞庭青鲫和彭泽鲫养殖群体存在杂合度降低,遗传多样性下降的现象,以洞庭青鲫的遗传多样性为最低。基于遗传距离构建的UPGMA聚类树表明,洞庭青鲫与彭泽鲫两个养殖群体聚为一支,而二倍体与三倍体野鲫群体聚为另一支,说明洞庭青鲫与彭泽鲫之间亲缘关系较近,野生二倍体与三倍体鲫之间的亲缘关系较近。研究不同倍性鲫品系的遗传多样性,对于探讨鲫的多倍体起源演化以及鲫品系的种质资源保护和选育种实践具有重要意义。

关键词：洞庭青鲫鲫品系微卫星遗传多样性

靶向融合肽MAP2K6-FP联合紫杉醇干预的卵巢癌细胞增殖、侵袭、迁移能力变化及其机制

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山东医药 2022年第8期62卷 6-10页

作者：袁金康佳丽王小霞广州市第一人民医院华南理工大学附属第二医院妇产科广州510180

目的观察靶向融合肽MAP2K6-FP联合紫杉醇对卵巢癌细胞ho8910增殖、侵袭、迁移的影响,并探讨其相关机制。方法以不同浓度MAP2K6-FP(0、0.3、0.6、1.0μg/mL)和紫杉醇(0、5、10、15、20、25μmol/L)分别作用ho8910细胞,CCK-8法测算细胞... 详细信息

目的观察靶向融合肽MAP2K6-FP联合紫杉醇对卵巢癌细胞ho8910增殖、侵袭、迁移的影响,并探讨其相关机制。方法以不同浓度MAP2K6-FP(0、0.3、0.6、1.0μg/mL)和紫杉醇(0、5、10、15、20、25μmol/L)分别作用ho8910细胞,CCK-8法测算细胞增殖率,筛选用于侵袭、迁移实验的最佳作用浓度。将细胞分为空白对照组(仅有培养基和细胞,未加药)、MAP2K6-FP组(0.3μg/mL MAP2K6-FP)、紫杉醇组(15μmol/L紫杉醇)、联合用药组(0.3μg/mL MAP2K6-FP+15μmol/L紫杉醇)。采用划痕实验检测细胞侵袭能力,Transwell小室实验检测细胞迁移能力,Western blotting法检测细胞中的JNK、Beclin-1、LC3、HSP27蛋白。将空白对照组、MAP2K6-FP组、紫杉醇组、联合用药组分别设置抑制剂亚组和对照亚组,抑制剂亚组给予SP600125(JNK抑制剂)预作用1 h,对照亚组无预处理,采用Western blotting法检测JNK、Beclin-1、LC3蛋白。结果随着MAP2K6-FP和紫杉醇浓度增高,卵巢癌细胞ho8910细胞增殖率下降。联合用药组划痕愈合率和穿膜细胞数低于空白对照组、MAP2K6-FP组、紫杉醇组(P均<0.05)。联合用药组、MAP2K6-FP组、紫杉醇组细胞中JNK、Beclin-1、LC3蛋白表达高于空白对照组,HSP27蛋白表达低于对照组(P均<0.05);联合用药组细胞中JNK、Beclin-1、LC3蛋白表达高于MAP2K6-FP组、紫杉醇组,HSP27蛋白表达低于MAP2K6-FP组、紫杉醇组(P均<0.05)。各组细胞给予JNK抑制剂后,抑制剂亚组细胞中JNK、Beclin-1、LC3蛋白表达均低于对照亚组(P均<0.05)。结论 MAP2K6-FP联合紫杉醇可明显抑制卵巢癌细胞增殖、侵袭、迁移能力,其机制可能与提高JNK信号通路相关蛋白及HSP蛋白表达、增强细胞自噬有关。

关键词：卵巢肿瘤重组融合蛋白质类细胞增殖细胞侵袭细胞迁移自噬 JNK信号通路热休克蛋白27

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H_2O_2对DNA影响的拉曼光谱分析

南京师范大学学报（工程技术版） 2006年第3期6卷 83-85页

作者：周殿凤柯惟中衡航籍康盐城师范学院物理系江苏盐城224002 江苏省光电技术重点实验室南京师范大学分析测试中心江苏南京210097

检测了鲱精DNA水溶液及其经过1%、2%和3%H2O2处理48h的拉曼光谱图.实验结果表明DNA在水溶液中同时具有A、B两种构象,但以B型构象为主.经H2O2处理后,DNA水溶液的A型构象有所增强,碱基堆积程度下降.H2O2对碱基和脱氧核糖几乎没有损伤,对DN... 详细信息

检测了鲱精DNA水溶液及其经过1%、2%和3%H2O2处理48h的拉曼光谱图.实验结果表明DNA在水溶液中同时具有A、B两种构象,但以B型构象为主.经H2O2处理后,DNA水溶液的A型构象有所增强,碱基堆积程度下降.H2O2对碱基和脱氧核糖几乎没有损伤,对DNA的主链结构也只造成很轻微的损伤.由此可见H2O2本身对DNA的损伤是很小的,只有在外界因素诱发下H2O2经反应生成ho.才会给DNA造成严重损伤.

关键词：拉曼光谱 DNA H2O2

莱菔硫烷对过氧化氢诱导人脐静脉血内皮细胞损伤的保护作用及机制研究

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中国循证心血管医学杂志 2018年第9期10卷 1062-1065页

作者：康小荣张明升秦纲山西医科大学第一临床医学院太原030001 山西医科大学药理机能实验室太原030001 山西医科大学第一医院心内科太原030001

目的探讨莱菔硫烷(Sulforaphane,SFN)对过氧化氢(H_2O_2)诱导的人脐静脉血内皮细胞(HUVEC)氧化损伤的保护作用,并进一步研究莱菔硫烷在保护内皮细胞损伤中的机制。方法复苏由中国科学院上海细胞库提供的人脐静脉内皮细胞株,37℃、5%CO2... 详细信息

目的探讨莱菔硫烷(Sulforaphane,SFN)对过氧化氢(H_2O_2)诱导的人脐静脉血内皮细胞(HUVEC)氧化损伤的保护作用,并进一步研究莱菔硫烷在保护内皮细胞损伤中的机制。方法复苏由中国科学院上海细胞库提供的人脐静脉内皮细胞株,37℃、5%CO2条件下培养细胞至80%以上融合度时,分组进行干预。实验分组:(1)空白对照组(对照组):细胞正常培养2.5 h;(2)过氧化氢组(H_2O_2组):分别给予100、200、400、600、800μmol/L浓度培养细胞2 h,选择400μmol/L为其最佳干预浓度(后续各组如未特殊注明,默认H_2O_2浓度为400μmol/L);(3)莱菔硫烷+过氧化氢组(SFN+H_2O_2组):不同浓度SFN(2.5、5、10μmol/L)预孵育30 min后,加入400μmol/L的H_2O_2继续培养2 h。收集干预后的各组细胞,用MTT法比较细胞活性,流式细胞技术测定细胞内ROS水平,逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR法)测定细胞内转录因子核因子E2(Nrf2)m RNA和血红素加氧酶-1(ho-1) mRNA表达情况。结果与对照组相比,H_2O_2组MTT法测定的细胞吸光光度值(A值)降低(Pho-1 mRNA表达水平低于对照组(Pho-1 mRNA表达水平高于H_2O_2组(Pho-1表达有关。

关键词：莱菔硫烷氧化应激人脐静脉血内皮细胞

尼可地尔在经皮冠状动脉介入治疗不稳定心绞痛时对心肌的保护作用

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首都食品与医药 2017年第24期24卷 160-160页

作者： Ju Han Kim Myung ho Jeong Kyung ho Yun Kye Hun Kim Dong Koo kang Seo Na hong Sang Yup Lim Sang Hyun Lee Yun Sang Lee Young Joon hong Hyung Wook Park Weon Kim Young Keun Ahn Jeong Gwang Cho Jong Chun Park Jung Chaee kang 田玉敬北京四环科宝制药有限公司 100070

心肌损伤通常在经皮冠状动脉介入治疗(PCI)过程中出现,并且损伤可以通过对心肌酶的测试使之容易被监控。众所周知,尼可地尔是三磷酸腺苷ATP-敏感的K+通道的开启器,通过减小作用电位从而具有抗心律失常效应和保护心脏作用。比如,通过松... 详细信息

心肌损伤通常在经皮冠状动脉介入治疗(PCI)过程中出现,并且损伤可以通过对心肌酶的测试使之容易被监控。众所周知,尼可地尔是三磷酸腺苷ATP-敏感的K+通道的开启器,通过减小作用电位从而具有抗心律失常效应和保护心脏作用。比如,通过松弛血管平滑肌以减少微冠状动脉血流阻力。研究尼可地尔的心肌保护作用,IONA研究(尼可地尔对心绞痛的作用)即大规模对稳定型心绞痛进行的研究表明,尼可地尔口服给药能够减少冠心病致死率和非致命型心肌梗塞或胸痛意外住院治疗。目前已经对数个不稳定心绞痛(UAP)或急性心肌梗塞病人进行了尼可地尔心脏保护效应的研究评估,但还没有进行大规模研究。此研究的目的在于通过对经尼可地尔注射并PCI治疗12~48h后的不稳定心绞痛患者的心肌酶进行评估来预期考察尼可地尔的心脏保护作用。

关键词：尼可地尔介入治疗不稳定心绞痛心肌保护

尼可地尔在经皮冠状动脉介入治疗不稳定心绞痛时对心肌的保护作用

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首都食品与医药 2018年第1期25卷 104-104页

（接2017年12月下）3讨论PCI治疗中的冠状动脉疾病患者均出现了心肌肌钙蛋白浓度升高的现象,这是由于PCI过程中心肌细胞被破坏所致。然而,心肌肌钙蛋白浓度并没有很好地被用于监测成功PCI之后对心肌细胞的破坏作用。心肌肌钙蛋白是控制... 详细信息

（接2017年12月下）3讨论PCI治疗中的冠状动脉疾病患者均出现了心肌肌钙蛋白浓度升高的现象,这是由于PCI过程中心肌细胞被破坏所致。然而,心肌肌钙蛋白浓度并没有很好地被用于监测成功PCI之后对心肌细胞的破坏作用。心肌肌钙蛋白是控制心肌收缩的一种蛋白,且在正常的血液中不会被检测到,因为它是心脏特性指标,

关键词：经皮冠状动脉介入治疗心肌细胞不稳定心绞痛保护作用尼可地尔心肌肌钙蛋白蛋白浓度冠状动脉疾病

Compositions,Densities,and Refractive Indices for the Ternary Systems of PEG 400+CsCl+H2O at (15,25 and 35)℃

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Compositions,Densities,and Refractive Indices for the Ternar...