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中药新药与临床药理 2005年第3期16卷 159-161页

作者：黎晖周健洪陈东风杜少辉李伊为邓汝东张赛霞广州中医药大学解剖学教研室广州510405 深圳市中医院内科广东深圳518033

目的探讨益肾中药龟板对大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymalstemcells,MSCs)体外向成骨分化的影响。方法使用密度梯度法分离成年大鼠骨髓间充质干细胞,观察在培养液中添加不同浓度龟板血清条件下MSCs的成骨变化。应用形态学、碱性磷酸酶... 详细信息

目的探讨益肾中药龟板对大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymalstemcells,MSCs)体外向成骨分化的影响。方法使用密度梯度法分离成年大鼠骨髓间充质干细胞,观察在培养液中添加不同浓度龟板血清条件下MSCs的成骨变化。应用形态学、碱性磷酸酶组织化学染色、VonKossa染色、骨钙素测定等方法观察细胞成骨活性。结果形态学表明,MSCs贴壁细胞呈集落生长,有成纤维细胞外观。龟板组碱性磷酸酶、钙化结节、骨钙素明显升高,与对照组比较具有显著性差异(P<0.05)。结论MSCs受龟板诱导高效地向成骨细胞分化,可以为体内骨组织工程提供种子细胞。

关键词：龟板骨髓间充质干细胞成骨细胞药理学

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小鼠高迁移率族蛋白B1启动子的构建与转录活性检测

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广州中医药大学学报 2014年第5期31卷 810-813,820页

作者：温泉杜少辉田瑞敏黎晖白晔李菲雷航陈东风李伊为周健洪张赛霞邓汝东余曜广州中医药大学解剖学教研室广东广州510006 广州中医药大学附属深圳市中医院广东深圳518033 上海吉凯基因化学技术有限公司上海201203

【目的】构建小鼠高迁移率族蛋白B1(high-mobility group box 1 protein,HMGB1)启动子全长序列的荧光素酶报告基因用于药物筛选。【方法】采用PCR技术扩增小鼠HMGB1基因启动子全长序列,用GV238载体构建报告质粒GV238-HMGB1-P-Luc,以pGL3... 详细信息

【目的】构建小鼠高迁移率族蛋白B1(high-mobility group box 1 protein,HMGB1)启动子全长序列的荧光素酶报告基因用于药物筛选。【方法】采用PCR技术扩增小鼠HMGB1基因启动子全长序列,用GV238载体构建报告质粒GV238-HMGB1-P-Luc,以pGL3-basic作为阴性对照质粒,与内参质粒pRL共转染Hela细胞,以内毒素(LPS,0.2μg/mL)作为激活剂,以正丁酸钠(SB,10 mmol/L)作为抑制剂,分组处理24 h后检测荧光素酶活性。【结果】经酶切、PCR及测序鉴定证实克隆的HMGB1基因启动子全长2 140 bp,DNA序列正确无突变。与pGL3-basic组比较,GV238-HMGB1-P-Luc组荧光素酶活性显著增强(P<0.05);与GV238-HMGB1-P-Luc组比较,LPS组荧光素酶活性显著增强(P<0.01);与LPS组比较,SB组荧光素酶活性显著降低(P<0.01)。【结论】HMGB1基因启动子报告基因构建成功,LPS可以增强其表达,SB则可以抑制LPS刺激下的HMGB1启动子表达增强,可为下一步筛选具有调控HMGB1启动子活性的药物奠定基础。

关键词：高迁移率族蛋白B1 启动子荧光素酶报告基因

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牛珀至宝微丸对内毒素急性肺损伤胶原纤维表达的影响

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深圳中西医结合杂志 2004年第4期14卷 196-198页

作者：黎晖刘望姣李志新杜少辉李伊为陈东风周健洪张赛霞广州中医药大学广东广州510405 深圳市中医院广东深圳518033

目的观察牛珀至宝微丸对内毒素急性肺损伤时胶原纤维表达的影响。方法静脉注射内毒素(LPS)1.5mg/kg、腹腔注射 D-氨基半乳糖(D-GalN)100mg/kg造成内毒素休克模型,用牛珀至宝微丸和 AG作对照干预处理,VanGieson 法染色检测胶原纤维在... 详细信息

目的观察牛珀至宝微丸对内毒素急性肺损伤时胶原纤维表达的影响。方法静脉注射内毒素(LPS)1.5mg/kg、腹腔注射 D-氨基半乳糖(D-GalN)100mg/kg造成内毒素休克模型,用牛珀至宝微丸和 AG作对照干预处理,VanGieson 法染色检测胶原纤维在肺组织内的表达。结果内毒素造成严重的急性肺损伤,肺组织胶原纤维染色显著增强;牛珀至宝微丸能减轻肺损伤,肺组织胶原纤维染色明显减弱。结论牛珀至宝微丸能减轻内毒素急性肺损伤和纤维化,可能有治疗急性肺损伤纤维化的作用。

关键词：牛珀至宝微丸肺纤维化急性肺损伤内毒素胶原纤维

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