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鸽新城疫病毒毒力致弱株的拯救及免疫原性分析

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中国预防兽医学报 2018年第11期40卷 1037-1042页

作者：蒋艳玉赵莎莎孙娜娜孙军峰孔宪刚刘胜旺刘怀然中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/禽呼吸道病研究创新团队黑龙江哈尔滨150069

为快速获得鸽新城疫(ND)疫苗株,本研究构建了鸽NDV/Pi/CH/LHLJ/110822株反向遗传操作平台,拯救得到2株亲本病毒株r0822-21A、r0822-17A,以及1株F蛋白裂解位点突变为La Sota相应位点的病毒株r0822-FCS。ha/HI试验结果显示r0822-FCS毒力... 详细信息

为快速获得鸽新城疫(ND)疫苗株,本研究构建了鸽NDV/Pi/CH/LHLJ/110822株反向遗传操作平台,拯救得到2株亲本病毒株r0822-21A、r0822-17A,以及1株F蛋白裂解位点突变为La Sota相应位点的病毒株r0822-FCS。ha/HI试验结果显示r0822-FCS毒力已致弱,将其灭活乳化后免疫SPF鸡可刺激其产生高滴度HI抗体。安全性评价试验结果显示其安全性良好,但接种14 d时SPF鸡的HI抗体滴度仅达3 log2,对基因Ⅶ型鸡源强毒CK/CH/HLJ/01/06攻毒保护率小于50%;免疫效力试验显示,r0822-FCS分别以10~5EID_(50)/0.1 mL、10~6EID_(50)/0.1 mL剂量接种14日龄SPF鸡,未检测到明显的抗体阳转。基因组测序分析结果显示,3株拯救病毒均在L基因的不同位置与新城疫病毒(NDV) V4株高度同源的外源基因片段重组,推测在实验条件下的细胞内拯救病毒过程中,病毒L基因与辅助质粒中的L基因发生了随机同源重组。综上所述,本研究获得的r0822-FCS株作为弱毒疫苗效果不佳,但可作为鸽ND灭活疫苗候选株。此外,本研究首次报道了反向遗传操作实验条件下,NDV基因组与V4株辅助质粒之间发生了基因重组,且L基因是决定病毒复制的关键基因。此次基因重组现象应为实验条件下的偶发事件,其机制和风险尚需后继实验研究分析。

关键词：鸽新城疫病毒反向遗传致弱毒株 L基因重组

地震作用下高原多年冻土区高填方路基动力响应

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长安大学学报（自然科学版） 2017年第4期37卷 67-75页

作者：汪水银沙爱民穆柯朱东鹏金龙长安大学公路学院陕西西安710064 中交第一公路勘察设计研究院有限公司陕西西安710068

针对青藏高原多年冻土区路基在地震作用下出现大量破坏这一实际问题,以G214公路工程地质条件为基础,以西宁台站、大武台站、都兰台站等实测地震加速度数据作为边界条件,建立有限元模型,计算地震荷载下多年冻土区路基动力学响应。计算了-... 详细信息

针对青藏高原多年冻土区路基在地震作用下出现大量破坏这一实际问题,以G214公路工程地质条件为基础,以西宁台站、大武台站、都兰台站等实测地震加速度数据作为边界条件,建立有限元模型,计算地震荷载下多年冻土区路基动力学响应。计算了-0.2℃、-0.5℃、-0.8℃年平均地温工况下路基动力响应,并以此为基础研究温度对路基动力响应影响;以1、4、7、10月温度场计算结果为依托,计算了不同季节工况对路基动力响应影响;以5、10、15m高填路基为样本,通过动力分析,确定填方高度对路基动力响应影响;同时考虑阴阳坡效应对路基稳定性影响,对比分析阴阳坡侧动力响应差异,并对比分析各因素对路基动力稳定性影响权重,确定其中主要因素。研究结果表明:地震荷载作用下,填土高度对路基稳定性的影响大于季节及温度的影响;受路基阴阳坡效应的影响,阳坡侧路基位移峰值大于阴坡侧,路肩处阳坡侧水平位移峰值比阴坡侧高42.9%,阳坡侧坡脚水平位移比阴坡侧高42.8%;10月份为路基体受力及变形最不利季节,冻土地温越高,路基顶面及坡脚点位移幅值越大,且地温对坡脚点位移的影响大于路基中心点;在地震作用下,有明显阴阳坡效应的多年冻土路基坡脚位移差别较大,路基阳坡侧较阴坡侧有更高的失稳风险。

关键词：道路工程多年冻土有限元法地震高填方路基动力响应

巯基功能化蛋壳膜对水溶液中As(Ⅴ)的吸附去除研究

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西南大学学报（自然科学版） 2015年第7期37卷 170-173页

作者：王娟邹雪王厦黄玉明三峡库区生态环境教育部重点实验室/西南大学化学化工学院重庆400715

研究了巯基功能化蛋壳膜(TESM)对水溶液中As(Ⅴ)的吸附去除性能.考察了溶液pH值、离子强度、腐殖酸(ha)等的影响,并用Freundlich和Langmuir等温模型对实验数据进行拟合.结果表明,当pH值为8.0时,TESM对As(Ⅴ)的吸附效果最好;NaCl的加入... 详细信息

研究了巯基功能化蛋壳膜(TESM)对水溶液中As(Ⅴ)的吸附去除性能.考察了溶液pH值、离子强度、腐殖酸(ha)等的影响,并用Freundlich和Langmuir等温模型对实验数据进行拟合.结果表明,当pH值为8.0时,TESM对As(Ⅴ)的吸附效果最好;NaCl的加入显著降低了TESM对As(Ⅴ)的吸附量;ha的存在降低TESM对As(Ⅴ)的吸附能力,但进一步增大腐植酸质量浓度对TESM吸附As(Ⅴ)无显著影响;TESM对As(Ⅴ)的吸附符合Langmuir吸附模型和准二级动力学模型,最大吸附量为21.51mg/g,为未功能化蛋壳膜吸附量的9倍.

关键词：蛋壳膜巯基功能化 As(Ⅴ) 吸附

甲型H1N1流感病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立

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中国预防兽医学报 2013年第1期35卷 36-39页

作者：尹航杨焕良陈艳孟沙沙刘丽萍辛晓光陈化兰乔传玲中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物国家重点开放实验室黑龙江哈尔滨150001 东北农业大学黑龙江哈尔滨150030

为建立快速检测甲型H1N1流感病毒[Influenza A(H1N1)pdm09]的TaqMan荧光定量PCR方法,本研究根据甲型H1N1流感病毒血凝素(ha)基因保守序列,设计并合成了特异性引物和TaqMan MGB探针,采用实时荧光定量PCR技术检测甲型H1N1流感病毒。使用... 详细信息

为建立快速检测甲型H1N1流感病毒[Influenza A(H1N1)pdm09]的TaqMan荧光定量PCR方法,本研究根据甲型H1N1流感病毒血凝素(ha)基因保守序列,设计并合成了特异性引物和TaqMan MGB探针,采用实时荧光定量PCR技术检测甲型H1N1流感病毒。使用含有选定检测序列的重组质粒pMD-ha标准品绘制标准曲线,其相关系数为0.999,敏感性可达50 TCID50。本研究中,甲型H1N1流感病毒TaqMan荧光定量RT-PCR方法与经典H1N1、类禽H1N1、类人H1N1、H1N2、H3N2、H5N1和H9N2流感病毒无交叉反应。结果表明,该方法可以在人类和动物间有效地检测甲型H1N1流感病毒。

关键词：猪流感病毒 H1N1亚型 TaqMan MGB探针实时荧光定量PCR

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赣榆地区国土资源与环境特征

江苏地质 2003年第1期27卷 25-30页

作者：张祥云江苏省地质调查研究院

概述了苏北赣榆地区的国土资源 (包括矿产资源、水资源、旅游资源等 )与地质环境 (包括水体环境、工程地质环境及灾害地质等 )特征。总体上该地区资源丰富 ,生态环境保持得较好 ,但客观上地区差异明显 ,存在一些资源和地质环境问题 ,并... 详细信息

概述了苏北赣榆地区的国土资源 (包括矿产资源、水资源、旅游资源等 )与地质环境 (包括水体环境、工程地质环境及灾害地质等 )特征。总体上该地区资源丰富 ,生态环境保持得较好 ,但客观上地区差异明显 ,存在一些资源和地质环境问题 ,并应引起地方各级政府部门的高度重视。

关键词：赣榆地区国土资源地质环境江苏生态环境灾害地质

H7N9流感病毒血凝素ha在毕赤酵母中的表达及免疫原性分析

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军事医学 2015年第6期39卷 448-452页

作者：王莎唱韶红刘波巩新徐威吴军军事医学科学院生物工程研究所北京100071 沈阳药科大学生命科学与生物制药学院沈阳110016

目的利用毕赤酵母表达制备H7N9流感病毒血凝素[ha 1-525个氨基酸（aa）],并对其免疫原性进行研究。方法经全基因合成获得H7N9流感病毒[A/hangzhou/1/2013（H7N9）]全长ha,以其为模板,PCR得到片段ha^1-525,通过NspⅤ和NotⅠ双酶切连入pP... 详细信息

目的利用毕赤酵母表达制备H7N9流感病毒血凝素[ha 1-525个氨基酸（aa）],并对其免疫原性进行研究。方法经全基因合成获得H7N9流感病毒[A/hangzhou/1/2013（H7N9）]全长ha,以其为模板,PCR得到片段ha^1-525,通过NspⅤ和NotⅠ双酶切连入pPICZαA载体,转入毕赤酵母X33,ELISA筛选阳性克隆。发酵培养后,表达上清经PEG20000沉淀获取ha^1-525,并用糖苷内切酶H（endo H）酶切分析其N-糖链。将制备的ha^1-525免疫BALB/c小鼠,经ELISA检测特异性ha7抗体滴度,红细胞凝集抑制实验分析血抑活性。结果培养上清用抗ha7抗体经ELISA检测,重组菌成功表达ha7,且Western印迹检测发现有特异性弥散条带,经endo H酶切后,ha^1-525为均一条带,相对分子质量约58×10^3,与理论大小相当,表明ha^1-525存在甘露糖基化结构。ha^1-525两次免疫小鼠后可产生1∶36 000的抗体滴度。以H7N9裂解苗为抗原,检测其血抑活性为1∶700。结论利用毕赤酵母表达的H7N9流感病毒ha1-525可以诱导小鼠产生针对ha7的中和抗体。

关键词： H7N9流感病毒血凝素类毕赤酵母红细胞凝集抑制

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一种新的海面空气动力学粗糙度方案

计算物理 2008年第6期25卷 725-732页

作者：沙文钰潘玉萍朱首贤王巨华葛苏放蔡美琼解放军理工大学气象学院江苏南京211101 南京信息工程大学江苏南京210044 南京军区空军气象中心江苏南京210018 南京空军司令部气象处江苏南京210018

综合利用6个国际海洋观测试验资料,共同验证Charnock参数与无因次粗糙度长度(z0/Hs)对波龄的依赖性,建立粗糙度回归模型,并对其进行显著性和适用性检验,从而导出粗糙度无因子形式与有效波高有关.利用研制的粗糙度方案(SP07)研究充分发... 详细信息

综合利用6个国际海洋观测试验资料,共同验证Charnock参数与无因次粗糙度长度(z0/Hs)对波龄的依赖性,建立粗糙度回归模型,并对其进行显著性和适用性检验,从而导出粗糙度无因子形式与有效波高有关.利用研制的粗糙度方案(SP07)研究充分发展风浪与风区、风时和水深的关系,及粗糙度长度对摩擦速度和波龄的敏感度.把SP07方案引入国际上最先进的计算海气通量的COARE(V3.0)算法中,选择1985年12月在北海的FPN平台上的试验资料,进一步检验SP07方案的适用性.得出目前国际上最先进的O02和TY01方案较高估计了摩擦速度,YT96方案略偏低估计了摩擦速度,文中研制的方案计算结果与实测结果最接近.

关键词：海面空气动力学粗糙度摩擦速度波龄 COARE算法

新疆地区单中心乳腺癌孕激素受体状态与临床病理特征和预后的关系

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临床肿瘤学杂志 2019年第5期24卷 412-417页

作者：刘英敏杨亮迪力夏提·金斯汗哈里旦·伊斯坎德尔吐鲁洪·沙列尔新疆医科大学附属肿瘤医院乳腺外科一病区

目的探讨孕激素受体(PR)在雌激素受体(ER)阳性浸润性乳腺癌中的表达及临床意义。方法回顾性分析2012年12月至2013年12月494例ER阳性浸润乳腺癌患者的临床资料,按照PR表达状态分为阳性表达组和阴性表达组,分析两组的临床病理特征和预后... 详细信息

目的探讨孕激素受体(PR)在雌激素受体(ER)阳性浸润性乳腺癌中的表达及临床意义。方法回顾性分析2012年12月至2013年12月494例ER阳性浸润乳腺癌患者的临床资料,按照PR表达状态分为阳性表达组和阴性表达组,分析两组的临床病理特征和预后情况。预后的多因素分析采用Cox比例风险回归模型。结果 494例ER阳性浸润乳腺癌患者中,PR阴性表达129例(26.1%),PR阳性表达365例(73.9%)。PR表达状态与患者的区域淋巴结转移、月经状况及HER-2表达有关(P<0.05)。PR阴性表达者的5年生存率为87.8%,5年无病生存率为79.8%;PR阳性表达者的5年生存率为94.6%,5年无病生存率为92.1%,差异均有统计学意义(P<0.05)。单因素分析显示,年龄、区域淋巴结转移、月经状况、临床分期、PR表达状态和肿瘤大小与总生存时间(OS)有关(P<0.05),PR表达、民族、肿瘤大小、区域淋巴结转移、临床分期和脉管侵犯与无病生存时间(DFS)有关(P<0.05)。多因素分析显示,影响浸润型乳腺癌OS和DFS的独立因素为PR表达、肿瘤大小和区域淋巴结转移(P<0.05)。结论浸润型乳腺癌的PR表达状态与预后有关,可作为判断患者预后的临床参考指标之一。

关键词：乳腺癌孕激素受体(PR) 雌激素受体(ER) 预后

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雨水自流过滤净化技术实际工程应用效果分析

四川环境 2018年第3期37卷 72-78页

作者：沙木哈尔.吐尔汗拜王红武董敬磊同济大学环境科学与工程学院城市污染控制国家工程研究中心上海200092

我国城市径流所导致的面源污染问题严重,雨水自流过滤设施因其占地面积小、易于维护成为控制径流污染的末端处理设施之一。上海市临港新城某桥下建立雨水自流过滤净化设施示范工程,以控制进入滴水湖引清河道的水质。对该示范工程进行了... 详细信息

我国城市径流所导致的面源污染问题严重,雨水自流过滤设施因其占地面积小、易于维护成为控制径流污染的末端处理设施之一。上海市临港新城某桥下建立雨水自流过滤净化设施示范工程,以控制进入滴水湖引清河道的水质。对该示范工程进行了处理效果监测,在长达一年半的时间里实地取样分析了六次有效降雨和两次模拟降雨数据,得到道路雨水径流经滤井处理前后的水质情况,分析结果表明:该自流过滤净化设施能够有效去除径流中的SS、石油类等污染物,去除率可达60%以上;对TN、COD_(Cr)、NH_4^+-N、TP等污染物有部分去除效果。

关键词：道路雨水径流污染自流过滤雨水净化