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寒旱农业科学 2024年第7期3卷 676-679页

作者：王晨冰王发林牛茹萱王卫成王鸿张帆张译文程进成常毅甘肃省农业科学院林果花卉研究所甘肃兰州730070 秦安县果业管理局甘肃秦安741600

桃树经济寿命短,品种更新换代快,重茬栽培是产业可持续发展面临的主要障碍之一。在多年试验的基础上,从范围、规范性引用文件、术语和定义、老桃园清理、土壤处理、苗木选择与处理、定植及栽培管理等方面制定了浅山旱区重茬桃园更新改... 详细信息

桃树经济寿命短,品种更新换代快,重茬栽培是产业可持续发展面临的主要障碍之一。在多年试验的基础上,从范围、规范性引用文件、术语和定义、老桃园清理、土壤处理、苗木选择与处理、定植及栽培管理等方面制定了浅山旱区重茬桃园更新改造栽培技术。

关键词：桃重茬更新改造技术规程

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纳米化蒙脱石衍生物对甲型流感病毒的吸附研究

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国际流行病学传染病学杂志 2015年第3期42卷 151-156页

作者：陈帅帅沃恩康张儒轩王怡婷杨新燕郭潮潭浙江省医学科学院生物工程研究所杭州310013

目的研究纳米化蒙脱石衍生物对甲型流感病毒的吸附作用，了解其能否阻止病毒侵入细胞。方法将梯度稀释的纳米化蒙脱石衍生物PTK—RY00101001分别与PR8、Memphis、Aichi3种病毒结合后感染MDCK细胞，利用细胞感染免疫染色方法测定PTK-RY00... 详细信息

目的研究纳米化蒙脱石衍生物对甲型流感病毒的吸附作用，了解其能否阻止病毒侵入细胞。方法将梯度稀释的纳米化蒙脱石衍生物PTK—RY00101001分别与PR8、Memphis、Aichi3种病毒结合后感染MDCK细胞，利用细胞感染免疫染色方法测定PTK-RY00101001对病毒感染细胞的作用，并通过测定MTr观察PTK-RY00101001对正常细胞的损伤影响。此外，将不同浓度PTK-RY00101001固定的纱布与流感病毒作用．对纱布和剩余病毒液分别进行免疫实验和细胞感染免疫实验，判定PTK—RY00101001对病毒的吸附作用。结果PTK-RY0010100l在25μg／mL以下，对正常细胞几乎无损伤。细胞感染免疫染色试验显示，PTK-RY00101001对流感病毒感染细胞的能力有较强减弱作用。不同浓度PTK-RY00101001固定的纱布与病毒作用后，纱布染色结果显示无明显差异，通过剩余病毒液感染细胞免疫实验，1000和200μg／mL浓度的PTK-RY00101001与纱布固定后，PTK-RY00101001对病毒有一定的吸附作用。结论纳米化蒙脱石衍生物在不损伤正常细胞的浓度下，具有通过吸附甲型流感病毒，从而阻断病毒感染细胞的能力，因此推断其能通过吸附作用而阻止流感病毒入侵细胞。

关键词：流感病毒A型纳米化蒙脱石 M1单克隆抗体吸附

甲型流感病毒核蛋白单克隆抗体制备及其初步应用

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国际流行病学传染病学杂志 2017年第2期44卷 79-84页

作者：张儒轩沃恩康丁建祖方迪陈帅帅杨新燕郭潮潭浙江省医学科学院生物工程研究所杭州310013

目的制备甲型流感病毒核蛋白（NP）单克隆抗体,为甲型流感病毒诊断试剂盒以及相关研究提供材料.方法大肠埃希菌BL21 （DE3）表达NP作为免疫原,免疫Balb/c小鼠后取脾脏细胞与SP2/0细胞融合,筛选获得阳性细胞株,注射小鼠腹腔得到单克隆... 详细信息

目的制备甲型流感病毒核蛋白（NP）单克隆抗体,为甲型流感病毒诊断试剂盒以及相关研究提供材料.方法大肠埃希菌BL21 （DE3）表达NP作为免疫原,免疫Balb/c小鼠后取脾脏细胞与SP2/0细胞融合,筛选获得阳性细胞株,注射小鼠腹腔得到单克隆抗体,纯化后进行Western印迹法、ELISA法、细胞免疫染色和荧光法、双抗夹心ELISA法确定NP抗体的生物学特性,探索应用范围.结果从Western印迹法、ELISA和细胞免疫染色法的结果可得知,抗NP单克隆抗体可以与免疫原特异性结合,也可以与H1N1、H3N2亚型流感病毒的NP特异性结合,具备检测流感病毒的能力.双抗夹心ELISA法进一步提升了抗体对抗原的检测灵敏度至128 pg.同时,通过细胞免疫荧光法观察到抗体可在细胞内显示NP从细胞核扩散到细胞质的过程.结论制备的抗体成功检测H1N1、H3N2两种亚型的流感病毒,可作为用于流感防治的流感病毒诊断试剂盒的材料.

关键词：流感病毒A型核蛋白单克隆抗体

燕窝对再生障碍性贫血小鼠血常规及继发流感病毒感染的影响

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国际流行病学传染病学杂志 2017年第4期44卷 228-232页

作者：郭潮潭曹毅胡致平沃恩康陈帅帅尤金彪张儒轩浙江省医学科学院生物工程研究所杭州310013 浙江省中医院血液科杭州310003

目的探讨食用燕窝对再生障碍性贫血（再障）继发流感病毒感染的保护作用。方法食用燕窝的药理测定。体外实验采用血液凝集抑制试验和细胞感染中和试验，体内实验采用再障小鼠动物模型和病毒感染模型，观察燕窝酶解物对再障小鼠血常规的... 详细信息

目的探讨食用燕窝对再生障碍性贫血（再障）继发流感病毒感染的保护作用。方法食用燕窝的药理测定。体外实验采用血液凝集抑制试验和细胞感染中和试验，体内实验采用再障小鼠动物模型和病毒感染模型，观察燕窝酶解物对再障小鼠血常规的影响，判断食用燕窝的生物药效。结果经胰蛋白酶水解后的燕窝酶解物N1-Pan和N2-Pan的血凝抑制活性分别为4μg／mL和125μg／mL，具有较强的抑制血凝的活性。N1-Pan对流感病毒有很强的抑制作用（IC50为40μg／mL）。小鼠喂养实验发现，无病毒燕窝喂养组第20天血常规比第10天有明显改善（提升10％-20％），组内比较差异有统计学意义（确切概率法，P〈0．05）；燕窝喂养的接种流感病毒再障小鼠较未喂养燕窝的再障小鼠外周血常规和体重有明显改善（确切概率法，P〈0．05），存活率也显著高于后者（4／8：7／8，确切概率法，P〈0．05）。结论N1-Pan能明显改善再障小鼠的外周血常规和体重，提高流感病毒感染再障小鼠的存活率。

关键词：贫血再生障碍性燕窝流感病毒感染

H5N6人禽流感病毒分离株序列分析及其生物学特日期究

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国际流行病学传染病学杂志 2017年第1期44卷 10-15页

作者：沃恩康王怡婷杨新燕张儒轩方迪刘亚辉郭潮潭浙江省医学科学院生物工程研究所杭州310013

目的分析研究H5N6人禽流感病毒基因组序列特征，明确该病毒的分子进化及生物学特性。方法从GenBank和GISAI中获取人H5N6分离株全序列，通过软件BioEdit7．0．9对各节段基因与其他相关毒株序列进行比对。用软件Mega5．0，Neighbor—Join... 详细信息

目的分析研究H5N6人禽流感病毒基因组序列特征，明确该病毒的分子进化及生物学特性。方法从GenBank和GISAI中获取人H5N6分离株全序列，通过软件BioEdit7．0．9对各节段基因与其他相关毒株序列进行比对。用软件Mega5．0，Neighbor—Joining法绘制血凝素（HA）和神经氨酸酶（NA）基因进化树，并全面分析病毒株的基因组序列特征、病毒进化及来源、传染性、致病性和药物敏感等。结果H5N6病毒的基因组完全属于禽源特征，根据病毒进化及来源可分为两大类。HA基因都属于H5亚型的2．3．4．4进化支，NA基因都来源于H6N6亚型毒株，属于欧亚谱系。其余6段内部基因分别来自于H9N2亚型或H5亚型2.3.2．1进化支毒株。该病毒尚不能在人与人之间有效传播，呈现高致病性病毒特征，对奥斯他韦敏感，但部分毒株对金刚烷胺类药物耐药。结论H5N6人禽流感分离株并不属于同一毒株，是由H5N1、H5N2、H6N6、H9N2等亚型毒株通过不同组合而重配产生，需加强对这类病毒及其宿主的监控。

关键词：流感病毒A型 H5N6亚型基因组分子特性

Galectin-7 overexpression destroys airway epithelial barrier in transgenic mice

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Integrative Zoology 2021年第2期16卷 270-279页

作者： Jing TIAN ruxuan HE Yimu FAN Qianqian zhang Baolin TIAN Chunju ZHOU Chunyan LIU Mingjing SONG Shunying ZHAO Department of Respiratory Medicine II Beijing Children’s HospitalCapital Medical UniversityNational Center for Children’s HealthBeijingChina Virus Laboratory Beijing Children’s HospitalCapital Medical UniversityNational Center for Children’s HealthChina Key Laboratory of Human Disease Comparative Medicine National Health Commission of China(NHC)Beijing Engineering Research Center for Experimental Animal Models of Human DiseasesInstitute of Laboratory Animal SciencePeking Union Medicine CollegeChinese Academy of Medical SciencesBeijingChina

When the integrity of airway epithelium is destroyed,the ordered airway barrier no longer exists and increases sensitivity to viral infections and allergens,leading to the occurrence of airway inflammation such as ***,we found that galectin-7 transgenic(+)mice exhibited abnormal airway structures as embryos and after *** abnormalities included absent or substantially reduced pseudostratified columnar ciliated epithelium and increased monolayer cells with irregular arrangement and widening of intercellular ***,airway tissue from galectin-7 transgenic(+)mice showed evidence of impaired cell–cell junctions and decreased expression of zonula occludens-1(ZO-1)and *** treated with respiratory syncytial virus(RSV)or ovalbumin(OVA),galectin-7 transgenic(+)mice developed substantially increased bronchial epithelial detachment and apoptosis,airway smooth muscle and basement membrane thickening,and enhanced airway *** found that Galectin-7 localized in the cytoplasm and nucleus of bronchial epithelial cells,and that increased apoptosis was mediated through mitochondrial release of cytochrome c and upregulated JNK1 activation and expression of caspase-3 in galectin-7 Tg(+)*** findings suggested that Galectin-7 causes airway structural defects and destroys airway epithelium barrier,which predispose the airways to RSV or OVA-induced epithelial apoptosis,injury,and other asthma responses.

关键词： airway epithelial barrier epithelial apoptosis galectin-7

再生障碍性贫血继发流感病毒感染的危险性研究

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国际流行病学传染病学杂志 2015年第4期42卷 237-239页

作者：郭潮潭尤金彪曹毅胡致平陈帅帅沃恩康王怡婷杨新燕张儒轩浙江省医学科学院生物工程研究所杭州310013 浙江省中医院皮肤科杭州310006 浙江省中医院血液科

目的探讨流感病毒感染对再生障碍性（再障）贫血模型小鼠造血功能的影响，以期为临床再障合并流感的研究提供参考。方法采用环磷酰胺及甲苯法构建小鼠再障模型，观察再障模型小鼠与正常小鼠血红蛋白和血细胞三系的变化。判断造模效果。... 详细信息

目的探讨流感病毒感染对再生障碍性（再障）贫血模型小鼠造血功能的影响，以期为临床再障合并流感的研究提供参考。方法采用环磷酰胺及甲苯法构建小鼠再障模型，观察再障模型小鼠与正常小鼠血红蛋白和血细胞三系的变化。判断造模效果。用微量病毒接种法判断流感病毒对正常小鼠及再障小鼠血细胞及生存的影响。结果成功建立了小鼠再障模型，再障小鼠的血红蛋白、红细胞、白细胞、血小板计数显著下降，与对照组比较差异均有统计学意义（P〈0．05）。与未接种病毒的小鼠相比，正常小鼠微量多次接种流感病毒后除发生一过性体重轻度下降外，血细胞三系均无明显变化；而再障小鼠模型接种病毒后的病死率较正常小鼠接种病毒后显著增高。结论流感病毒感染对正常小鼠的造血功能无明显影响，但可能会导致再障动物病情加重。甚至增加病死率。

关键词：贫血再生障碍性流感病毒感染

流感病毒M1单克隆抗体的制备及其生物学特征

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国际流行病学传染病学杂志 2015年第1期42卷 3-8页

作者：陈帅帅丁建祖尤金彪沃恩康王怡婷曹毅郭霞杨新燕张儒轩郭潮潭浙江省医学科学院生物工程研究所杭州310013 浙江省医学科学院寄生虫病研究所杭州310013 浙江省医学科学院药物研究所杭州310013 浙江省中山医院检验科杭州310005 浙江省中医院皮肤科杭州310006

目的制备针对流感病毒基质蛋白M1的单克隆抗体（mAb），为研究流感病毒检测试剂盒提供实验材料。方法以纯化的M1蛋白为免疫原，免疫Balb／c小鼠，将其脾细胞与骨髓瘤细胞（SP2／0）融合，筛选出分泌抗M1 mAb的杂交瘤细胞，注射小鼠腹腔... 详细信息

目的制备针对流感病毒基质蛋白M1的单克隆抗体（mAb），为研究流感病毒检测试剂盒提供实验材料。方法以纯化的M1蛋白为免疫原，免疫Balb／c小鼠，将其脾细胞与骨髓瘤细胞（SP2／0）融合，筛选出分泌抗M1 mAb的杂交瘤细胞，注射小鼠腹腔获得M1mAb，并用辣根过氧化物酶（HRP）标记M1mAb。通过Western印迹法、EUSA、细胞感染免疫染色实验检测所获M1mAb的作用和特性。结果获得能稳定分泌抗流感病毒基质蛋白M1的杂交瘤细胞系，纯化腹水得到M1mAb和HRP—M1mAb。Western印迹法结果显示，M1mAb和HRP—M1mAb能与M1抗原及H1N1、H3N2亚型流感病毒的M1蛋白反应，是针对M1蛋白的mAb；利用ELISA方法研究M1mAb和HRP．M1mAb对M1抗原及流感病毒的检测作用，结果显示它们能检测H1N1和H3N2亚型的甲型流感病毒，而HRP．M1mAb的检测能力比M1mAb强；细胞免疫染色实验显示，M1mAb能结合H1N1和H3N2亚型病毒感染的细胞。结论针对M1蛋白的M1mAb和HRP—M1mAb已制备成功。它们能检测H1N1和H3N2亚型甲型流感病毒，有望应用于流感病毒诊断以及鉴别诊断试剂盒的研发。

关键词：流感病毒A型 M1蛋白抗体单克隆

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金属激光增材制造材料设计研究进展

金属学报 2023年第1期59卷 1-15页

作者：宋波张金良章媛洁胡凯方儒轩姜鑫张莘茹吴祖胜史玉升华中科技大学材料成形与模具技术国家重点实验室武汉430074

激光增材制造被公认为是解决个性化、复杂化金属构件整体成形难题的有效技术手段。现有金属增材制造的研究主要从传统合金牌号出发,但基于平衡凝固过程设计的传统合金成分难以满足增材制造的非平衡冶金动力学特点,往往面临高裂纹敏感性... 详细信息

激光增材制造被公认为是解决个性化、复杂化金属构件整体成形难题的有效技术手段。现有金属增材制造的研究主要从传统合金牌号出发,但基于平衡凝固过程设计的传统合金成分难以满足增材制造的非平衡冶金动力学特点,往往面临高裂纹敏感性、低韧低疲劳、各向异性等共性问题。因此,需要开展面向激光增材制造的新型材料成分设计研究,充分挖掘增材制造非平衡凝固特性的潜在优势与价值。本文综述了铝合金、钛合金、铁基合金、镁合金等不同材料现有合金牌号增材制造的技术瓶颈,以及面向增材制造的材料创新设计方法与新型合金及其复合材料发展的研究进展。最后提出了金属增材制造材料设计的未来发展趋势。

关键词：激光增材制造金属材料设计新材料

Plant-derived phosphocholine facilitates cellular uptake of anti-pulmonary fibrotic HJT-sRNA-m7

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Science China(Life Sciences) 2019年第3期62卷 309-320页

作者： Jianchao Du Zhu Liang Jiantao Xu Yan Zhao Xiaoyun Li Yanli zhang DANDan Zhao ruxuan Chen Yang Liu Trupti Joshi Jiahui Chang Zhiqing Wang Yanxu zhang Jindong Zhu Qiang Liu Dong Xu Chengyu Jiang State Key Laboratory of Medical Molecular Biology Institute of Basic Medical Sciences Chinese Academy of Medical SciencesDepartment of Biochemistry Peking Union Medical College Department of Internal Medicine Peking Union Medical College Hospital Chinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical College Department of Computer Science Informatics Institute and Christopher S.Bond Life Science Center University of Missouri Department of Health Management and Informatics and Office of Medical Research School of Medicine University of Missouri State Key Laboratory of Biotherapy/Collaborative Innovation Center for Biotherapy West China Hospital Sichuan University

Pulmonary fibrosis, a progressive chronic disease with a high mortality rate, has limited treatment options. Currently, lung transplantation remains the only effective treatment. Here we report that a small RNA, HJT-sRNA-m7, from a Chinese herbal medicine Hong Jing Tian(HJT, RHODIOHAE CRENULATAE RADIX ET RHIZOMA, Rhodiola crenulata) can effectively reduce the expressions of fibrotic hallmark genes and proteins both in alveolar in vitro and in mouse lung tissues in vivo. We also discovered over one hundred oil-soluble chemicals from HJT decoctions, most of which are found in lipid extracts from other Chinese herbals decoctions, including Pu Gong Ying(PGY, TARAXACI HERBA, Taraxacum mongolicum), Chuan Xin Lian(CXL, changed to "ANDROGRAPHIS HERBA, Andrographis paniculata"), and Jin Yin Hua(JYH, lonicera japonica or Honeysuckle). We identified the active component in these decoctions as two forms of phosphocholines, PC(18:0/18:2) and PC(16:0/18:2). These PCs potentially could form liposomes with small RNAs to enter human alveolar and gastric cells. Our experimental results suggest an unprecendent lipid complex route through which botanic small RNA can enter human *** results provide an innovative treatment strategy for oral delivery of siRNAs as therapeutic medication.

关键词： PC cellular uptake anti-fibrotic HJT sRNA