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Hippo(YAP)-autophagy axis protects against hepatic ischemia-reperfusion injury through JNK signaling

Chinese Medical Journal 2024年第6期137卷 657-668页

作者： Shuguang Zhu Xiaowen Wang Haoqi Chen Wenfeng Zhu Xuejiao Li ruiwen cui Xiaomeng Yi Xiaolong Chen Hua Li Genshu Wang Department of Hepatic Surgery Liver TransplantationThe Third Affiliated Hospital of Sun Yat-sen UniversityGuangzhouGuangdong 510630China Department of Hepatology lab The Third Affiliated Hospital of Sun Yat-sen UniversityGuangzhouGuangdong 510630China Department of General Surgery The Third Affiliated Hospital of Sun Yat-sen UniversityGuangzhouGuangdong 510630China Department of Organ Transplantation The Third Affiliated Hospital of Sun Yat-sen UniversityGuangzhouGuangdong 510630China Department of Renal Transplantation Guangdong Provincial Hospital of Chinese MedicineGuangzhouGuangdong 510630China Department of Surgical Intensive Care Unit The Third Affiliated Hospital of Sun Yat-sen UniversityGuangzhouGuangdong 510630China Department of Hepatic Surgery Liver TransplantationGuangdong Provincial Hospital of Chinese MedicineGuangzhouGuangdong 510630China

Background:Hepatic ischemia-reperfusion injury(HIRI)remains a common complication during liver transplantation(LT)in *** a key downstream effector of the Hippo pathway,Yes-associated protein(YAP)has been reported to be involved in various physiological and pathological ***,it remains elusive whether and how YAP may control autophagy activation during ***:Human liver tissues from patients who had undergone LT were obtained to evaluate the correlation between YAP and autophagy *** an in vitro hepatocyte cell line and in vivo liver-specific YAP knockdown mice were used to establish the hepatic ischemia-reperfusion models to determine the role of YAP in the activation of autophagy and the mechanism of ***:Autophagy was activated in the post-perfusion liver grafts during LT in patients,and the expression of YAP positively correlated with the autophagic level of ***-specific knockdown of YAP inhibited hepatocytes autophagy upon hypoxia-reoxygenation and HIRI(P<0.05).YAP deficiency aggravated HIRI by promoting the apoptosis of hepatocytes both in the in vitro and in vivo models(P<0.05).Attenuated HIRI by overexpression of YAP was diminished after the inhibition of autophagy with *** addition,inhibiting autophagy activation by YAP knockdown exacerbated mitochondrial damage through increasing reactive oxygen species(P<0.05).Moreover,the regulation of autophagy by YAP during HIRI was mediated by AP1(c-Jun)N-terminal kinase(JNK)signaling through binding to the transcriptional enhanced associate domain(TEAD).Conclusions:YAP protects against HIRI by inducing autophagy via JNK signaling that suppresses the apoptosis of *** Hippo(YAP)-JNK-autophagy axis may provide a novel strategy for the prevention and treatment of HIRI.

关键词： YAP-signaling proteins Autophagy c-Jun N-terminal kinase Ischemia-reperfusion injury Liver transplantation

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负载外泌体的3D明胶细胞外基质水凝胶促进皮肤损伤愈合

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中国组织工程研究 2023年第12期27卷 1900-1905页

作者：凌华军崔瑞文王其友佛山市高明区人民医院骨二科广东省佛山市528500 广东省中医院器官移植科广东省广州市510120 南方医科大学附属第三医院脊柱外科广东省广州市510630

背景:应用细胞外基质水凝胶有效递送外泌体,并与皮肤周围组织进行桥接,有助于皮肤损伤的修复。目的:探索负载骨髓间充质干细胞外泌体的3D明胶细胞外基质水凝胶对皮肤损伤的影响。方法:利用超速离心法提取大鼠骨髓间充质细胞上清液中的... 详细信息

背景:应用细胞外基质水凝胶有效递送外泌体,并与皮肤周围组织进行桥接,有助于皮肤损伤的修复。目的:探索负载骨髓间充质干细胞外泌体的3D明胶细胞外基质水凝胶对皮肤损伤的影响。方法:利用超速离心法提取大鼠骨髓间充质细胞上清液中的外泌体。①制备甲基丙烯酸改性明胶水凝胶,加入外泌体与光引发剂,于紫外线下交联,形成负载外泌体的3D明胶细胞外基质水凝胶;②将成纤维细胞分别接种于负载外泌体的3D明胶细胞外基质水凝胶与普通培养板上,接种12 h后,划痕实验观察细胞迁移情况;③在20只成年SD大鼠背部制作直径1 cm、深0.2 cm的皮肤损伤创面,实验组(n=10)覆盖负载外泌体的3D细胞外基质水凝胶,对照组(n=10)覆盖生理盐水,最后均覆盖无菌纱布,术后2周,通过苏木精-伊红染色法及马松染色观察损伤皮肤结构变化和胶原沉积情况。结果与结论:①划痕实验显示,负载外泌体的3D明胶细胞外基质水凝胶上成纤维细胞的迁移能力强于普通培养板;②动物实验苏木精-伊红染色显示,对照组皮肤组织结构有不同程度的断裂,炎症细胞增多;实验组皮肤组织结构较为完整,细胞数量明显增多,微血管结构清晰可见及密度增加;③动物实验马松染色显示,实验组皮肤组织内含有大量规则排列的胶原纤维,对照组仅存在少量胶原纤维,且呈现稀疏结构;④结果表明,负载骨髓间充质干细胞外泌体的3D明胶细胞外基质水凝胶水凝胶有助于皮肤损伤的愈合,可能与外泌体促进成纤维细胞迁移有关。

关键词：皮肤损伤骨髓间充质干细胞外泌体细胞外基质水凝胶伤口愈合

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负载骨髓干细胞来源外泌体的3D水凝胶通过调节免疫促进损伤软骨的修复

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南方医科大学学报 2022年第4期42卷 528-537页

作者：管鹏飞崔瑞文王其友孙永建中山大学附属第三医院脊柱外科广东广州510630 广州中医药大学第二附属医院器官移植科广东广州510006 南方医科大学第三附属医院脊柱外科广东广州510515 南方医科大学第三附属医院骨科中心小儿骨科广东广州510515

目的分探究负载骨髓干细胞来源外泌体的GelMA水凝胶对软骨损伤的修复情况。方法首先利用超速离心法分离提取出骨髓干细胞上清液中的外泌体,并通过外泌体透射电镜、粒径分析以及Western blot检测外泌体表面marker。检测负载外泌体的GelM... 详细信息

目的分探究负载骨髓干细胞来源外泌体的GelMA水凝胶对软骨损伤的修复情况。方法首先利用超速离心法分离提取出骨髓干细胞上清液中的外泌体,并通过外泌体透射电镜、粒径分析以及Western blot检测外泌体表面marker。检测负载外泌体的GelMA水凝胶相关性能(包括流变以及电镜)。通过BCA测蛋白法检测外泌体的释放情况,以及通过PKH26红色荧光染料标记外泌体,观察外泌体被RAW264.7细胞吞噬情况。将RAW264.7细胞种在孔板表面,分为空白对照组(Control组)、单纯外泌体组(Exo组)、单纯水凝胶组(GelMA组)、负载外泌体的水凝胶组(GelMA-Exo组)。通过q-PCR以及免疫荧光检测负载外泌体的GelMA水凝胶对于RAW264.7细胞极化的影响。建立材料/RAW264.7细胞/软骨细胞Transwell共培养模型,上室为软骨细胞,下室为材料/RAW264.7细胞,分组与上面一致,通过q-PCR以及免疫荧光检测损伤软骨细胞的修复情况。构建大鼠膝关节软骨损伤模型,分为假手术组(Sham组)、单纯损伤组(SI组)、单纯水凝胶组(GelMA组)以及负载外泌体的水凝胶组(GelMA-Exo组),通过HE和Masson染色检测软骨修复情况。结果通过对提取的细胞进行多系分化能力的检测,成功获取了骨髓干细胞。通过透射电镜、粒径分析以及Western blot检测,成功分离出骨髓干细胞外泌体。负载外泌体的GelMA水凝胶明显促进RAW264.7细胞向M2型极化(P<0.05)。体外共培养模型表明负载外泌体的GelMA水凝胶能显著促进损伤软骨细胞的修复通过调节RAW264.7细胞由M1型向M2型转化(P<0.05)。HE和Masson染色表明负载骨髓干细胞来源外泌体的GelMA水凝胶明显促进软骨损伤的修复。结论负载骨髓干细胞来源外泌体的GelMA水凝胶能够通过改善免疫微环境明显促进大鼠软骨损伤的修复。

关键词： GelMA水凝胶软骨损伤外泌体免疫调节

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我国银行间风险交叉传染机制研究——基于SIRS传染病模型

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华北金融 2022年第11期 24-34页

作者：陈文浩崔睿文刘梦娜南京审计大学江苏南京市211899

基于我国资本市场改革和新经济发展的形势,探讨在系统性风险冲击下的银行间风险传染问题。通过构建生物学的传染病模型SIRS,模拟金融风险在我国银行间交叉传染的情形。利用构建的微分方程和数值仿真分析金融风险如何在银行间有效传播,... 详细信息

基于我国资本市场改革和新经济发展的形势,探讨在系统性风险冲击下的银行间风险传染问题。通过构建生物学的传染病模型SIRS,模拟金融风险在我国银行间交叉传染的情形。利用构建的微分方程和数值仿真分析金融风险如何在银行间有效传播,并控制不同变量,研究不同变量下的银行间各个不同状态节点的变化。模拟结果表明,基本再生数R0是决定风险是否会在银行间传播扩散的关键因素。当R_(0)>1时,表明金融风险存在跨银行间传染的可能性。基本再生数的数值越大,系统性风险在银行系统中传播的可能性和范围就会越大。同时,α、β、μ、γ、δ系数也是影响传染性银行将风险扩散蔓延至其他银行的关键因素。最后,根据仿真模拟结果给出防控风险扩散蔓延的有效解决方法和建议。

关键词：传染病模型数值仿真模拟交叉网络传染银行间风险

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Hippo-YAP信号通路与HBx交联机制在肝细胞癌中的研究进展

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中华肝脏外科手术学电子杂志 2018年第2期7卷 159-161页

作者：崔瑞文李华中山大学附属第三医院肝脏外科广州510630

肝细胞癌（肝癌）是全球最常见的恶性肿瘤之一，也是引起肿瘤相关死亡第3位常见原因[1]。Hippo-Yes相关蛋白（Yes-associated protein，YAP）信号通路作为近年新发现的重要生物化学信号通路，在调节细胞增殖、凋亡及再生方面有着不可或... 详细信息

肝细胞癌（肝癌）是全球最常见的恶性肿瘤之一，也是引起肿瘤相关死亡第3位常见原因[1]。Hippo-Yes相关蛋白（Yes-associated protein，YAP）信号通路作为近年新发现的重要生物化学信号通路，在调节细胞增殖、凋亡及再生方面有着不可或缺的作用。研究发现，Hippo-YAP（Hippo）信号通路参与多种人类肿瘤细胞的发生及发展，包括直肠癌、乳腺癌，肺癌、卵巢癌、胆管癌及肝癌等[2]。中国拥有庞大的乙型病毒性肝炎（乙肝）患者，而慢性HBV感染是肝癌发生、发展的主要危险因素之一。其中，HBV编码的HBx作为一种多功能蛋白，在病毒致病及致癌方面起着至关重要的作用[3]。

关键词：信号通路癌,肝细胞肝炎,乙型

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circSNRK通过上调Akt通路改善肾小管上皮细胞缺血-再灌注损伤

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器官移植 2023年第4期14卷 529-538页

作者：孟凡航崔瑞文陈秋源顾世杰曹荣华广州中医药大学第二附属医院器官移植科广州510120

目的探讨环状RNA SNRK(circSNRK)在缺血-再灌注损伤(IRI)中的作用及机制。方法构建缺氧-复氧(IRI)细胞模型,检测IRI处理后circSNRK的表达情况及过表达circSNRK对细胞增殖和细胞凋亡的影响。分析circSNRK的作用靶点。将HK2细胞分为空白组... 详细信息

目的探讨环状RNA SNRK(circSNRK)在缺血-再灌注损伤(IRI)中的作用及机制。方法构建缺氧-复氧(IRI)细胞模型,检测IRI处理后circSNRK的表达情况及过表达circSNRK对细胞增殖和细胞凋亡的影响。分析circSNRK的作用靶点。将HK2细胞分为空白组(Mock组)、IRI组、对照质粒+IRI组(IRI+NC组)、过表达人circSNRK+IRI组(IRI+circSNRK组)、过表达人circSNRK+IRI+蛋白激酶B(Akt)抑制剂组(IRI+circSNRK+MK2206组)、对照质粒组(NC组)。检测Mock组、IRI组、IRI+NC组、IRI+circSNRK组细胞增殖及凋亡情况。进行circSNRK作用靶点的基因本体(GO)富集分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)聚类分析。检测Mock组、IRI组、IRI+NC组、IRI+circSNRK组细胞CDKN1A、Akt、B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-9信使RNA(mRNA)表达水平,p21、Bcl-2、Caspase-9、Akt、p-Akt蛋白表达水平。检测NC组、IRI+NC组、IRI+circSNRK组、IRI+circSNRK+MK2206组细胞增殖及凋亡情况。结果与Mock组比较,IRI组circSNRK表达水平较低,HK2细胞增殖能力下降,细胞凋亡增多。IRI+circSNRK组细胞增殖能力较IRI+NC组升高,细胞凋亡较IRI+NC组减少。circSNRK可通过51个微小RNA(miRNA)作用于648个靶点。GO富集分析显示,circSNRK作用靶点主要富集于细胞过程和生物调节等生物学过程,细胞部分、细胞和细胞外部分等细胞成分,以及结合、结合蛋白和酶等分子功能。KEGG聚类分析显示,circSNRK作用靶点主要富集在癌症信号通路、磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)-Akt信号通路和癌症miRNA等相关通路。与Mock组比较,IRI组CDKN1A和Caspase-9 mRNA相对表达量较高,miR-99a-5p RNA表达水平较高,Akt和Bcl-2 mRNA相对表达量较低;与IRI+NC组比较,IRI+circSNRK组CDKN1A和Caspase-9 mRNA相对表达量较低,Akt和Bcl-2 mRNA相对表达量较高,miR-99a-5p RNA表达水平较低,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。IRI组p21和Caspase-9蛋白表达较Mock组增多,p-Akt、Akt和Bcl-2蛋白表达较Mock组减少;IRI+circSNRK组p21和Caspase-9蛋白表达较IRI+NC组减少,p-Akt、Akt和Bcl-2蛋白表达较IRI+NC组增多。circSNRK和Akt上存在miR-99a-5p结合位点。与NC组比较,IRI+NC组细胞增殖能力下降;与IRI+NC组比较,IRI+circSNRK组细胞增殖能力升高;与IRI+circSNRK组比较,IRI+circSNRK+MK2206组细胞增殖能力下降(均为P<0.05)。IRI+NC组细胞凋亡水平较NC组高;IRI+circSNRK组细胞凋亡水平较IRI+NC组低;IRI+circSNRK+MK2206组细胞凋亡水平较IRI+circSNRK组高。结论在IRI条件下,circSNRK可影响HK2细胞增殖和凋亡,可能是通过Akt通路发挥作用。

关键词：肾移植缺血-再灌注损伤环状RNA 微小RNA 蛋白激酶B 细胞凋亡细胞增殖作用靶点

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盐酸决奈达隆的合成工艺研究

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中国药物化学杂志 2024年第1期34卷 49-54页

作者：石创业张瑞文崔宝刚潘莉程卯生沈阳药科大学制药工程学院辽宁沈阳110016 大道隆达(北京)医药科技发展有限公司北京101102

目的优化盐酸决奈达隆的合成工艺。方法以5-硝基水杨醛为起始原料,经醚化、水解、环合、傅克酰化、脱甲基反应得到关键中间体2-丁基-3-(4-羟基苯甲酰基)-5-硝基苯并呋喃,再经醚化、还原、甲磺酰化和成盐反应得到目标化合物盐酸决奈达隆... 详细信息

目的优化盐酸决奈达隆的合成工艺。方法以5-硝基水杨醛为起始原料,经醚化、水解、环合、傅克酰化、脱甲基反应得到关键中间体2-丁基-3-(4-羟基苯甲酰基)-5-硝基苯并呋喃,再经醚化、还原、甲磺酰化和成盐反应得到目标化合物盐酸决奈达隆。结果与结论目标化合物及关键中间体的结构均经^(1)H-NMR谱确证,目标化合物总收率为44.7%,纯度为99.9%,产品质量符合《欧洲药典》标准。优化后的工艺简化了实验操作,产品质量易于控制,更有利于实现工业化生产。

关键词：盐酸决奈达隆合成工艺优化

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瑞格菲尼联合维替泊芬对肝癌细胞的影响

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中华实验外科杂志 2017年第12期34卷 2113-2115页

作者：崔瑞文朱曙光袁泽南郑啟发李华中山大学附属第三医院肝脏外科广州510630

目的观察瑞格菲尼联合维替泊芬对肝癌细胞的影响。方法应用细胞计数试剂盒（CCK-8）法检测瑞格菲尼及瑞格菲尼联合维替泊芬对肝癌细胞增殖能力的影响，Transwell实验检测瑞格菲尼及瑞格菲尼联合维替泊芬对肝癌细胞迁移能力影响，Western... 详细信息

目的观察瑞格菲尼联合维替泊芬对肝癌细胞的影响。方法应用细胞计数试剂盒（CCK-8）法检测瑞格菲尼及瑞格菲尼联合维替泊芬对肝癌细胞增殖能力的影响，Transwell实验检测瑞格菲尼及瑞格菲尼联合维替泊芬对肝癌细胞迁移能力影响，Western blot法检测瑞格菲尼及瑞格菲尼联合维替泊芬对肝癌细胞上皮-间充质转化（EMT）相关蛋白表达的影响，流式细胞仪检测瑞格菲尼及瑞格菲尼联合维替泊芬对肝癌细胞凋亡影响。结果CCK-8实验结果表明瑞格菲尼联合维替泊芬（1 μmol/L）处理肝癌细胞的半数抑制浓度（IC50）为2.629 μmol/L，低于单用瑞格菲尼处理肝癌细胞的IC50（3.576 μmol/L）。Transwell检测结果显示瑞格菲尼（4 μmol/L）联合维替泊芬（2 μmol/L）组细胞迁移数为（147.00±9.54）个，低于瑞格菲尼（4 μmol/L）组细胞迁移数[（336.00±27.31）个，t＝－11.360，P＝0.000]，并且明显低于对照组细胞迁移数[（531.67±29.54）个，t＝－21.466，P＝0.000]。瑞格菲尼（2 μmol/L）联合维替泊芬（1 μmol/L）组的细胞凋亡率为（10.20±1.06）%，高于瑞格菲尼组细胞（2 μmol/L）的凋亡率[（5.13±0.95）%；t＝6.170，P＝0.004]，明显高于对照组细胞的凋亡率[（1.13±0.35）%；t＝14.080，P＝0.000]。结论维替泊芬能增强瑞格菲尼对肝癌细胞的抑制增殖、迁移，促进肝癌细胞凋亡的作用。

关键词：肝癌维替泊芬瑞格菲尼

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A Planar 4-Bit Reconfigurable Antenna Array Based on the Design Philosophy of Information Metasurfaces

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Engineering 2022年第10期17卷 64-74页

作者： Zheng Xing Wang Hanqing Yang ruiwen Shao Jun Wei Wu Guobiao Liu Feng Zhai Qiang Cheng Tie Jun cui State Key Laboratory of Millimeter Waves School of Information Science and EngineeringSoutheast UniversityNanjing 210096China The Institute of Electromagnetic Space Southeast UniversityNanjing 210096China

Inspired by the design philosophy of information metasurfaces based on the digital coding concept,a planar 4-bit reconfigurable antenna array with low profile of 0.15λ0(whereλ0is the free-space wavelength)is *** array is based on a digital coding radiation element consisting of a 1-bit magnetoelectric(ME)dipole and a miniaturized reflection-type phase shifter(RTPS).The proposed 1-bit ME dipole can provide two digital states of"0"and"1"(with 0°and 180°phase responses)over a wide frequency band by individually exciting its two symmetrical feeding *** designed RTPS is able to realize a relative phase shift of 173°.By digitally quantizing its phase in the range of 157.5°,additional eight digital states at intervals of 22.5°are *** achieve low sidelobe levels,a 1:16 power divider based on the Taylor line source method is employed to feed the array,A prototype of the proposed 4-bit antenna array has been fabricated and tested,and the experimental results are in good agreement with the *** beams within a±45°range were measured with a maximum realized gain of 13.4 dBi at12 *** sidelobe and cross-polarization levels are below-14.3 and-23.0 dB,***,the beam pointing error is within 0.8°,and the 3 dB gain bandwidth of the broadside beam is 25%.Due to its outstanding performance,the array holds potential for significant applications in radar and wireless communication systems.

关键词： 4-bit reconfigurable antenna array Information metasurface Digital coding method Low sidelobe Low profile

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徒手-机器联合复苏在脑死亡供者心脏骤停后器官维护中的作用

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中华肝脏外科手术学电子杂志 2022年第3期11卷 283-287页

作者：顾世杰马麟陈秋源崔瑞文赖柏聪石小红孟凡航易述红曹荣华广州中医药大学第二附属医院器官移植科广州510120 广州中医药大学第二附属医院器官捐献办公室广州510120 广州中医药大学第二附属医院影像科广州510120 中山大学附属第三医院肝脏外科暨肝移植中心广州510630

目的探讨徒手-机器联合复苏在脑死亡器官捐献(DBD)供者心脏骤停后器官维护中的价值。方法回顾性分析2020年1月6日至2020年2月20日在广州中医药大学第二附属医院采用徒手-机器联合复苏的3例DBD供者及对应6例受者临床资料。患者均签署知... 详细信息

目的探讨徒手-机器联合复苏在脑死亡器官捐献(DBD)供者心脏骤停后器官维护中的价值。方法回顾性分析2020年1月6日至2020年2月20日在广州中医药大学第二附属医院采用徒手-机器联合复苏的3例DBD供者及对应6例受者临床资料。患者均签署知情同意书,符合医学伦理学规定。供者均为男性,年龄分别为44、52、57岁。死亡原因为脑干出血、脑外伤、脑梗死。依据脑死亡判定标准与技术规范进行评估,符合中国Ⅰ类器官捐献。3例供者突发心脏骤停时即刻予徒手心肺复苏并进行全身肝素化,给予肾上腺素、阿托品等抢救药物,安装胸腔按压机接力复苏。总结供体维护方案及心脏骤停复苏方法,观察供、受者围手术期情况及术后并发症情况等。结果1例因供肝脂肪变性程度约60%且为大泡性脂肪变性而弃用,余2例肝脏均成功完成移植;1例供者的2个肾脏因微循环严重血栓而弃用,余4个肾脏均成功完成移植。徒手、机器交替时间间隔约1 min,联合复苏时间中位数为68(65~78)min,热缺血时间7(5~8)min,冷缺血时间6.8(4.5~11.0)h。2例肝移植受者术后肝功能恢复良好,未发生并发症。肾移植受者1例术后第7天发生急性排斥反应,给予抗排斥治疗后肾功能恢复正常,术后4个月出现移植肾动脉狭窄,予加用抗血小板聚集及降脂药物治疗后狭窄减轻,移植肾功能恢复正常;1例发生移植肾功能延迟恢复,给予血液透析辅助治疗后恢复正常;余2例术后恢复顺利,未发生并发症。结论徒手-机器联合复苏能维持DBD供者心脏骤停后的生命体征,保证肝脏、肾脏的血液灌注,提高捐献成功率和器官利用率。

关键词：器官捐献组织和器官获取心肺复苏术脑死亡肝移植

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