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ROLE OF B LYMPHOCYTE AND ITS SUBPOPULATIONS IN PATHOGENESIS OF IMMUNORELATED PANCYTOPENIA

Chinese Medical Sciences Journal 2007年第3期22卷 199-202页

作者： rong fu zong-hong shao hong liu yu-hong wu hua-quan wang li-min xing Department of Hematology and Oncology General Hospital of Tianjin Medical University Tianjin 300052

Objective To measure the quantities and apoptosis-related protein levels of B lymphocyte in the patients with immunorelated pancytopenia （IRP） and explore the action of B lymphocyte in the pathogenic mechanism of IRP. Methods quantifies of whole B lymphocytes and CD5^＋ B lymphocytes as well as the expressions of Fas and Bcl-2 in B lymphocytes in 35 patients with untreated IRP, 15 IRP patients in complete remission （CR）, and 10 normal controls were assayed by flow cytometry. The percentages of B lymphocyte and CD5^＋ B lymphocyte were significantly higher in untreated IRP patients than in CR IRP patients and normal controls （ P 〈 0. 05 ）, and there was no significant difference between the latter two groups （ P 〉 0. 05 ）. There was no significant difference of Fas expression in B lymphocyte among three groups （ P 〉 0. 05）. The expression of Bcl-2 in B lymphocyte was significantly higher in untreated patients than in CR patients or normal controls （ P 〈 0. 01 ）, and significantly higher in CR patients than in normal controls （ P 〈 0. 01 ）. The apoptosis. related index was significantly lower in untreated patients than in CR patients or normal controls （ P 〈 0. 05 ）, and signif. icantly lower in CR patients than in normal controls （ P 〈 0. 05 ）. The percentage of B lymphocyte was positively correlated with post-treated response time （ r = 0. 53, P 〈 0. 01 ）. Conclusion The production of auto-antibodies in IRP patients probably has some relationship with the abnormal quantifies of B lymphocyte and its subpopulations as well as with the inhibition of B lymphocyte apoptosis.

关键词： immunorelated pancytopenia B lymphocyte quantifies apoptosis

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Expression of DLK1 Gene in the Bone Marrow Cells of Patients with Myelodysplastic Syndromes and Its Clinical Significance

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Clinical oncology and cancer researeh 2012年第3期9卷 188-191页

作者： Lan-zhu yue rong fu hua-quan wang li-juan li Er-bao Ruan Guo-jin wang Wen Qu Yong liang Jing Guan yu-hong wu hong liu Jia Song Xiao-ming wang li-min xing zong-hong shao Department of Hematology General Hospital of Tianjin Medical University

Objective This study aims to investigate the expression of delta-like 1 （DLK1） gene in the bone marrow cells of patients with myelodysplastic syndromes （MDS） and to explore its molecular characteristics for the early diagnosis of MDS. Methods The expression of DLK1 mRNA in the bone marrow cells of cases with MDS, acute myeloid leukemia （AML）, and normal control groups were measured by real-time polymerase chain reaction and were analyzed for clinical significance. Results Significantly higher expression of DLK1 mRNA was observed in the bone marrow cells of MDS patients （0.7342±0.3652） compared with the normal control group （0.4801±0.1759）（P〈0.05）. The expression of DLK1 mRNA had a positive correlation with the proportion of bone marrow blasts （r=0.467, P〈0.05）. Moreover, DLK1 mRNA expression was significantly increased as MDS progressed （P〈0.05）. Patients with abnormal karyotypes exhibited significantly higher expression of DLK1 mRNA （0.9007±0.4334） than those with normal karyotypes （0.6411±0.2630）（P〈0.05）. Subsequently, patients with highly expressed DLK1 （≥0.8） presented significantly higher malignant clone burden （0.4134±0.3999） than those with lower DLK1 expression （〈0.8）,（0.1517±0.3109）, （P〈0.05）. Conclusions The DLK1 gene was highly expressed in MDS patients, and was increased as MDS progressed. The expression of DLK1 mRNA was positively correlated with the proportion of the bone marrow blasts. A high expression of DLK1 gene suggested a higher malignant clone burden of MDS.

关键词： DLK1 gene myelodysplastic syndromes expression

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SUBTYPES OF B LYMPHOCYTES IN PATIENTS WITH AUTOIMMUNE HEMOCYTOPENIA

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Chinese Medical Sciences Journal 2007年第2期22卷 128-131页

作者： li-min xing zong-hong shao rong fu hong liu Jun Shi Jie Bai Mei-feng Tu hua-quan wang Zhen-zhu Cui Hai-rong Jia Juan Sun Chong-li Yang Department of Hematology and Oncology General Hospital of Tianjin Medical University Tianjin 300052 Department of Hematology Institute of Hematology and Blood Diseases Hospital Chinese Academy of Medical Sciences ＆ Peking Union Medical College Tianjin 300020

Objective To investigate the quantities of bone marrow CD5+ B lymphocytes in the patients with autoimmune hemocytopenia and the relationship between quantities of CD5+ B lymphocytes and clinical or laboratorial parameters. Methods quantities of CD5+ B lymphocytes in the bone marrow of 14 patients with autoimmune hemolytic anemia (AIHA) or Evans syndrome, 22 immunorelated pancytopenia (IRP) patients, and 10 normal controls were assayed by flow cytometry. The correlation between their clinical or laboratorial parameters and CD5+ B lymphocytes was analyzed. Results The quantity of CD5+ B lymphocytes of AIHA/Evans syndrome (34.64%±19.81%) or IRP patients (35.81%±16.83%) was significantly higher than that of normal controls (12.00%±1.97%, P0.05). In all hemocytopenic patients, the quantity of bone marrow CD5+ B lymphocytes showed significantly negative correlation with serum complement C3 level (r=-0.416, Pquantity of bone marrow CD5+ B lymphocytes showed significantly positive correlation with serum indirect bilirubin level (r=1.00, Pquantity of CD5+ B lymphocytes in bone marrow showed significantly positive correlation with platelet-associated immunoglobulin G (r=0.761, Plin M (r=0.925, Pquantity of CD5+ B lymphocytes in bone marrow of all hemocytopenic patients showed significantly negative correlation with treatment response (tau-b=-0.289, Pming unit-erythroid (r=-0.205, P>0.05) or colony forming unit-granulocyte-macrophage colonies (r=-0.214, P>0.05). Conclusions The quantity of bone marrow CD5+ B lymphocytes in the patients with autoimmune hemocytopenia significantly increases and is correlated with disease severity and clinical response, which suggest that CD5+ B lymphocytes

关键词： autoimmune hemocytopenia B lymphocyte subtype

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TET2 Expression in Bone Marrow Mononuclear Cells of Patients with Myelodysplastic Syndromes and Its Clinical Significances

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Clinical oncology and cancer researeh 2012年第1期9卷 34-37页

作者： Wei Zhang zong-hong shao rong fu hua-quan wang li-juan li Jun wang Wen Qu Yong liang Guo-jin wang Xiao-ming wang yuhong wu hong liu Jia Song Jing Guan li-min xing Department of Hematology Tianjin Medical University General Hospital

Objective To investigate the expression of TET2 mRNA and protein in the bone marrow mononuclear cells （BMMNC） of patients with myelodysplastic syndrome （MDS） and its clinical significance. Methods The expression of TET2 mRNA and protein in bone marrow mononuclear cells （BMMNC） of 32 patients with MDS and 20 healthy donors was examined by qPCR and Western blot. Results The expression of TET2 mRNA in BMMNC was down-regulated in MDS patients compared with the donor group [（0.41±0.28）% vs. （1.07±0.56）%] （P〈0.001）. Compared with lower expression group （TET2〈0.4） [（6.53±6.17）%], patients with higher expression of TET2 ≥0.4） presented significantly lower proportion of bone marrow blasts [（1.21±1.56）%1 （P〈0.05）. The expression of TET2 mRNA in BMMNC of MDS patients was inversely correlated with malignant clone burden （t=--0.398, P〈0.05） and IPSS r=-0.412, P〈0.05）. The expression of TET2 protein was down-regulated in MDS patients compared with that in the donor group. Conclusions The mRNA and protein expression of TET2 in BMMNC of MDS patients is decreased, which might be useful as an important parameter for the evaluation of MDS clone burden.

关键词： myelodysplastic syndrome TET2 gene clinical features

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Increased circulating of myeloid-derived suppressor cells in myelodysplastic syndrome

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Chinese Medical Journal 2013年第13期126卷 2582-2584页

作者： JIANG Hui-juan fu rong wang hua-quan li li-juan QU Wen liANG Yong wang Guo-jin wang Xiao-ming wu yu-hong liu hong SONG Jia GUAN Jing X1NG li-min RUAN Er-bao shao zong-hong Department of Hematology General Hospital of Tianjin Medical University Tianjin 300052 China

Myelodysplastic syndrome （MDS） is a group of clonal .hematopoietic stem cell disorders, characterizedby varying degrees ot peripheral cytopema caused by ineffective dysplasia of the myeloid lineages. MDS also has a high risk of progression to acute myeloid leukemia. But the role of immune abnormalities in the pathogenesis of MDS is still not clear. Myeloid-derived suppressor cells （MDSCs） constitute a heterogeneous population of immature cells derived from the bone marrow. In the recent years, MDSCs were reported to play an important role in suppressing lymphocytes in tumor-bearing animal models and cancer patients. This could be one of the mechanisms on tumor immune evasion, which aggravates the development and growth of tumors. In a mice model, MDSCs are characterized by co- expression of GR1 and CDllb. In humans, the phenotype of MDSCs was accepted as lin- HLA-DR- CD33＋.l In the present study, we investigated the level of circulating MDSCs （lin- HLA-DR- CD33＋） in patients with MDS and evaluated the association between MDSCs and malignancy in MDS. METHODS Patients Thirty-five patients with MDS （24 men and 11 women, median age 59 years （age range 21-83）, including refractory anemia （n=3）; refractory anemia with ringed sideroblasts （n=3）; refractory cytopenia with multilineage dysplasia （n=9）; refractory anemia with excess blast-I （n=4）; refractory anemia with excess blast-II （n=16））, and without other systemic diseases, were enrolled in the present study. All the patients underwent diagnosis in the Department of Hematology, General Hospital of Tianjin Medical University from March 2011 to April 2012, according to the diagnostic criteria of MDS proposed between 2007 and 2008. After treatment for three months, 14 MDS patients were investigated again for their MDSCs changes. Twenty normal healthy individuals were selected as controls （9 men and 11 women, median age 34 years （age range 26-82））. The study was approved by the Ethics Committee of Tianjin Medical Universit

关键词： myeloid-derived suppressor cells myelodysplastic syndrome CD34+ cells

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重型再生障碍性贫血患者树突细胞刺激异体淋巴细胞增殖的功能

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中华内科杂志 2009年第12期48卷 1040-1043页

作者：王珺邵宗鸿付蓉吴玉红邢莉民王化泉天津医科大学总医院血液肿瘤科 300052

目的了解重型再生障碍性贫血（SAA）患者树突细胞（DC）刺激异体淋巴细胞增殖的功能，探讨SAA的免疫病理机制。方法以25例SAA患者和12例正常对照者为研究对象，以重组人白介素4（rhIL-4）、重组人粒-巨噬细胞集落刺激因子（rhGM—CSF）... 详细信息

目的了解重型再生障碍性贫血（SAA）患者树突细胞（DC）刺激异体淋巴细胞增殖的功能，探讨SAA的免疫病理机制。方法以25例SAA患者和12例正常对照者为研究对象，以重组人白介素4（rhIL-4）、重组人粒-巨噬细胞集落刺激因子（rhGM—CSF）和重组人肿瘤坏死因子（rhTNF）体外诱导骨髓单核细胞分化为成熟髓细胞样DC（mDC），与正常淋巴细胞按1：100、1：50作混合淋巴细胞培养（MLR），噻唑兰（MTT）比色法计算淋巴细胞增殖率。EliSA法检测MLR培养上清IL-12、干扰素γ（IFNγ）浓度。分析MLR上清液IL4、IFN-γ水平与淋巴细胞增殖率相关性。结果SAA初治组、恢复组和对照组mDC与淋巴细胞1：100混合培养时，淋巴细胞增殖率分别为（219．8±94．0）％、（159．1±66．0）％、（160．1±91．9）％，培养上清IL-12水平分别为（8．2±3．6）ng／L、（6．5±2．8）ng/L、（6．1±2．6）ng／L，IFNγ／水平分别为（21.8±8．7）ng／L、（25．5±9．1）ng／L和（22．6±7．8）ng／L，3组差异均无统计学意义（P值均〉0．05）。初治组、恢复组和对照组mDC与淋巴细胞1：50混合培养时，淋巴细胞增殖率分别为（322．1±171．1）％、（180．9±79．1）％、（192．3±91．9）％，培养上清TL—12水平分别为（12．6±4．4）ng／L、（9．44-3．3）ng／L、（8．5±3．7）ng／L，IFNγ水平分别为（32．3±9．2）ng／L、（27．4±6．5）ng／L、（24．4±7．4）ng／L，3项指标初治组均高于对照组（P〈0．05），恢复组与对照组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。MLR上清液IL-12水平与淋巴细胞增殖率呈正相关（r=0．529，P〈0．01）；MLR上清液IFNγ水平与淋巴细胞增殖率呈正相关（r=0．381，P〈0．05）。结论SAA患者mDC刺激淋巴细胞增殖功能增强，在SAA发病中起重要作用。

关键词：贫血,再生障碍性树突细胞淋巴细胞反应,混合白细胞介素12

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骨髓单个核细胞Coombs试验阳性血细胞减少患者骨髓巨噬细胞活化抗原表达及其临床意义

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中华内科杂志 2010年第2期49卷 146-149页

作者：王一浩付蓉邵宗鸿邢莉民王化泉吴玉红刘鸿刘惠王珺陈瑾天津医科大学总医院血液肿瘤科 300052

目的探讨骨髓单个核细胞Coombs（BMMNC—Coombs）试验阳性血细胞减少（又称免疫相关性血细胞减少，IRP）患者骨髓巨噬细胞（Mm）活化抗原表达及其临床意义。方法采用流式细胞仪（FACS）检测61例IRP患者及10例重型再生障碍性贫血（SAA）... 详细信息

目的探讨骨髓单个核细胞Coombs（BMMNC—Coombs）试验阳性血细胞减少（又称免疫相关性血细胞减少，IRP）患者骨髓巨噬细胞（Mm）活化抗原表达及其临床意义。方法采用流式细胞仪（FACS）检测61例IRP患者及10例重型再生障碍性贫血（SAA）（病例对照组）和13例正常人（正常对照组）骨髓造血细胞膜自身抗体类型、骨髓M①数量（CD未／CD未）％及Mm活化抗原（CD^69）表达水平（CD68^＋CD69^＋／CD68^＋）％，并探讨其临床意义。结果61例IRP患者其Mm数量及活化抗原表达水平[（0．57±0．30）％和（40．30±18．49）％]均高于病例对照组[（0．46±0．08）％和（32．44±19．37）％]及正常对照组[（0．44±0．69）％和（29．71±11．67）％]（P值均〈0．05）；且其M中数量与活化抗原表达水平呈明显正相关（r=0．89，P〈0．01）。根据Mm数量分为A组（MФ百分率≥0．5％）和B组（Mm百分率〈0．5％），A组34例患者中32例（94．1％）有自身抗体IgG，B组27例患者中仅2例（7．4％）；A组患者骨髓Mm活化抗原表达水平（49．19±16．63）％显著高于B组患者（29．H±14．30）％（P〈0．05），而B组患者和病例对照组及正常组无统计学意义（P值均〉0．05）；A组患者的3、6个月的总有效率（分别为47．06％、79．41％）均明显优于B组患者同期的疗效（22．22％、51．85％）（P〈0．05）；并且A、B组患者6个月的总有效率（79．41％、51．85％）均明显高于3个月的疗效（47．06％、22．22％）（P值均〈0．05）。34例自身抗体IgG（＋）IRP患者按M中数量分为高（≥0．75％）、低（〈0．75％）水平2组，25例M中低水平组24例仅能检测到1系骨髓细胞（CD34^＋或CD15^＋或GlycoA^＋）有自身抗体IgG（96％），1例检测到2系骨髓细胞有自身抗体IgG；9例Mm高水平组有8例能检测到2系骨髓细胞有自身抗体IgG，1例为3系骨髓细胞均有自身抗体IgG；高水平组IRP患者M巾活化抗原表达水平（56．12±15．11）％显著高于低水平组（44．58±18．16）％（P〈0．05）；外周血红细胞、血红蛋白、血小板计数均显著低于低水平组（P〈0．05）；而外周血网织红细胞比例、总胆红素、间接胆红素及胸骨红系比例均显著高于低水平组（P〈0．05）。结论IRP患者（尤其有骨髓造血细胞膜自身抗体IgG的IRP患者）骨髓M垂数量明显增多，活化抗原高表达，即多呈激活状态，激活的巨噬细胞可能参与IRP患者骨髓早期造血细胞的破坏。

关键词： Coombs试验全血细胞减少巨噬细胞抗原,CD

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骨髓单个核细胞Coombs试验（＋）血细胞减少患者骨髓巨噬细胞数量及功能的研究

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中华血液学杂志 2009年第8期30卷 538-542页

作者：王一浩付蓉邵宗鸿王化泉邢莉民刘鸿吴玉红李丽娟刘惠王珺陈瑾王红蕾天津医科大学总医院血液肿瘤科 300052

目的探讨骨髓单个核细胞Coombs（BMMNC—Coombs）试验（＋）血细胞减少患者骨髓巨噬细胞（MФ）数量、功能及其临床意义。方法采用流式细胞术（FACS）检测61例BMMNC—Coombs试验（＋）血细胞减少患者、10例重型再生障碍性贫血（SAA）患... 详细信息

目的探讨骨髓单个核细胞Coombs（BMMNC—Coombs）试验（＋）血细胞减少患者骨髓巨噬细胞（MФ）数量、功能及其临床意义。方法采用流式细胞术（FACS）检测61例BMMNC—Coombs试验（＋）血细胞减少患者、10例重型再生障碍性贫血（SAA）患者及13名正常对照骨髓MФ（CD68或CIM5阳性）数量并通过鸡红细胞（CRBC）吞噬试验检测MФ功能，并分析其临床意义。结果BMMNC—Coombs试验（＋）血细胞减少患者其MФ百分率、吞噬率及吞噬指数[（0．57±0．30）％、（37．56±15．20）％和0．75±0．347均高于SAA组[（0．46±0．08）％、（28．26±10．46）％和0．59±0．39]及正常对照组[（0．44±0．69）％、（25．63±19．75）％和0．55±0．16]（P〈0．05）；且Mm百分率与MФ吞噬率及吞噬指数均呈正相关（r=0．43，P〈0．01；r=0．40，P〈0．01）。根据MФ数量将患者分为A组（MФ≥0．5％）和B组（MФ〈0．5％），A组34例患者中32例（94．12％）自身抗体为IgG型，B组27例患者中仅2例（7．41％）自身抗体为IgG型；A组患者MФ的吞噬率和吞噬指数[（46．62±13．38）％和O．91±0．361显著高于B组患者[（28．67±12．59）％和0．61±0．30]（P〈0．05），而B组患者与AA及正常对照组相比差异无统计学意义（P〉0．05）。将34例自身抗体IgG型患者分为MФ高（≥0．75％）、低水平（〈0．75％）两组，MФ低水平组25例患者骨髓均仅能检测到一系细胞与IgG结合，MФ高水平组9例患者中8例能检测到二系细胞结合IgG，1例骨髓三系细胞均结合有IgG；MФ高水平组患者中MФ的吞噬率及吞噬指数[（60．22±12．51）％、1．23±0．23]显著高于MФ低水平组[（43．32±9．24）％、0．84±0．24]（P〈0．05）；MФ高水平组患者外周血红细胞、血红蛋白、血小板计数均显著低于MФ低水平组（P〈0．05）；MФ高水平组网织红细胞比例、胆红素水平及胸骨红系比例均显著高于MФ低水平组（P〈0．05）。结论IgG型BMMNC—Coombs试验（＋）血细胞减少患者骨髓MФ数量增多，功能增强；IgG自身抗体阴性的BMMNC—Coombs试验（＋）血细胞减少患者多有IgM型自身抗体或冷抗体，其骨髓损伤过程无MФ参与。

关键词： Coombs试验骨髓单个核细胞血细胞减少巨噬细胞

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中性粒细胞缺乏血液病患者并发嗜麦芽窄食单胞菌败血症的临床特征和预后分析

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天津医药 2018年第8期46卷 815-818页

作者：李洪照韩宇吴玉红付蓉瞿文邢莉民王化泉邵宗鸿天津医科大学总医院血液科 300052

目的探讨中性粒细胞缺乏血液病患者发生嗜麦芽窄食单胞菌败血症的临床特征和预后因素。方法回顾性分析我科2006年1月—2016年12月收治的32例发生嗜麦芽窄食单胞菌败血症合并中性粒细胞缺乏患者的临床资料。结果 32例患者中急性白血病20... 详细信息

目的探讨中性粒细胞缺乏血液病患者发生嗜麦芽窄食单胞菌败血症的临床特征和预后因素。方法回顾性分析我科2006年1月—2016年12月收治的32例发生嗜麦芽窄食单胞菌败血症合并中性粒细胞缺乏患者的临床资料。结果 32例患者中急性白血病20例,重型再生障碍性贫血(SAA)7例,非霍奇金淋巴瘤5例。所有患者长时间应用广谱抗生素,中心静脉置管(21例)或者外周静脉置管(11例)。25例化疗后出现中性粒细胞缺乏,7例SAA为本病导致中性粒细胞缺乏。死亡17例,好转15例。药敏试验显示多药耐药,替加环素、甲氧苄啶-磺胺甲噁唑、左氧氟沙星、头孢哌酮/舒巴坦、头孢他啶、哌拉西林/他唑巴坦部分敏感,其余均耐药。重度中性粒细胞缺乏、重度血小板减少、粒细胞减少持续时间过长和复合感染等是预后不良因素。结论中性粒细胞缺乏血液病患者并发嗜麦芽窄食单胞菌败血症死亡率高,及时诊断和治疗对预后至关重要。

关键词：粒细胞缺乏血液病嗜麦芽窄食单胞菌细菌感染预后

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中国实验血液学杂志 2017年第1期25卷 186-191页

作者：周秋帆徐淑梅王化泉邢莉民付蓉邵宗鸿天津医科大学总医院血液科天津300052 天津医科大学生理学教研室天津300070

目的:研究免疫相关性血细胞减少症(IRP)患者外周血淋巴细胞线粒体DNA(mtDNA)D-LOOP区多态性的意义及其与免疫指标的相关性。方法:提取43例初治IRP患者外周血淋巴细胞mtDNA,对其D-LOOP区序列进行PCR扩增,通过正反向直接测序法对PCR扩增... 详细信息

目的:研究免疫相关性血细胞减少症(IRP)患者外周血淋巴细胞线粒体DNA(mtDNA)D-LOOP区多态性的意义及其与免疫指标的相关性。方法:提取43例初治IRP患者外周血淋巴细胞mtDNA,对其D-LOOP区序列进行PCR扩增,通过正反向直接测序法对PCR扩增产物基因序列进行检测,将检测结果与人线粒体DNA文库记录的剑桥序列以及mtDB数据库的Polmorphic Sites子数据库的相关数据库进行对比。结果:43例IRP患者的外周血淋巴细胞mtDNA D-LOOP区中共有110个变异位点,其中62个为多态位点(SNP),48个为突变位点,其中14个位点为数据库中未提及的新突变位点。在110个变异位点中共发现516个碱基改变,最主要的改变是410个碱基置换,常见的碱基置换为T/C(184/410)和A/G(113/410);110个变异位点中高频变异位点73和263,其变异率为43/43,位点311的变异率为32/43,位点310和16 224的变异率为27/43,16 519的变异率为25/43,位点489和16 362为24/43。对IRP患者外周血淋巴细胞mtDNA D-LOOP区多态性与患者骨髓单个核细胞的相关性统计发现,以年龄18岁为界的35例成年组中淋巴细胞mtDNA D-LOOP区多态性与患者骨髓单个核细胞的CD15 IgM、GLYCoA^+细胞IgM、CD34^+细胞IgG、CD34^+细胞IgM存在显著相关性。结论:IRP患者外周血淋巴细胞的mtDNA D-LOOP区存在高频突变,且在成年组(年龄≥18岁)中与骨髓单个核细胞膜结合自身抗体显著相关,这可能是免疫相关性血细胞减少症发病机制中的重要环节。

关键词：免疫相关血细胞减少症线粒体DNA(mtDNA) D-LOOP区多态性

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