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Improvement in Tol2 transposon for efficient large-cargo capacity transgene applications in cultured cells and zebrafish(Danio rerio)

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Zoological Research 2024年第3期45卷 567-574页

作者： Peng-Cheng Wang Hao Deng rang xu Jiu-Lin Du Rongkun Tao Department of Pediatric Cardiology Xinhua HospitalShanghai Jiao Tong University School of MedicineShanghai 200092China Institute of Neuroscience State Key Laboratory of NeuroscienceCenter for Excellence in Brain Science and Intelligence TechnologyChinese Academy of SciencesShanghai 200031China Medical School Kunming University of Science and TechnologyKunmingYunnan 650500China Scientific Research Center Xinhua HospitalShanghai Jiao Tong University School of MedicineShanghai 200092China University of Chinese Academy of Sciences Beijing 100049China School of Life Science and Technology ShanghaiTech UniversityShanghai 200031China

Most viruses and transposons serve as effective carriers for the introduction of foreign DNA up to 11 kb into vertebrate ***,their activity markedly diminishes with payloads exceeding 11 *** the payload capacity of transposons could facilitate more sophisticated cargo designs,improving the regulation of expression and minimizing mutagenic risks associated with molecular therapeutics,metabolic engineering,and transgenic animal *** this study,we improved the Tol2 transposon by increasing protein expression levels using a translational enhancer(QBI SP163,ST)and enhanced the nuclear targeting ability using the nuclear localization protein H2B(SHT).The modified Tol2 and ST transposon efficiently integrated large DNA cargos into human cell cultures(H1299),comparable to the well-established super PiggyBac ***,mRNA from ST and SHT showed a significant increase in transgene delivery efficiency of large DNA payloads(8 kb,14 kb,and 24 kb)into zebrafish(Danio rerio).This study presents a modified Tol2 transposon as an enhanced nonviral vector for the delivery of large DNA payloads in transgenic applications.

关键词： Zebrafish Tol2 transposase Transgene Large payload Synthetic biology

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ccdc141 is required for left-right axis development by regulating cilia formation in the Kupffer's vesicle of zebrafish

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Journal of Genetics and Genomics 2024年第9期51卷 934-946页

作者： Pengcheng Wang Wenxiang Shi Sijie Liu Yunjing Shi xuechao Jiang Fen Li Sun Chen Kun Sun rang xu Department of Pediatric Cardiology Xinhua HospitalShanghai Jiao Tong University School of MedicineShanghai 200092China Department of Cardiovascular Medicine Heart Failure CenterRuijin HospitalRuijin Hospital Lu Wan BranchShanghai Jiao Tong University School of MedicineShanghai 200025China Scientific Research Center Xinhua HospitalShanghai Jiao Tong University School of MedicineShanghai 200092China Department of Pediatric Cardiology Shanghai Children's Medical CenterShanghai Jiao Tong University School of MedicineShanghai 200127China

Laterality is a crucial physiological process intricately linked to the cilium-centrosome complex during embryo *** in the process can result in severe organ ***-coil domain containing 141(CCDC141)has been previously known as a centrosome-related gene,but its role in left-right(LR)asymmetry has not been *** this study,we utilize the zebrafish model and human exome analysis to elucidate the function of ccdc141 in laterality *** knockdown of ccdc141 in zebrafish disrupts early LR signaling pathways,cilia function,and Kupffer's vesicle *** ccdc141-knockdown embryos exhibiting aberrant LR patterns,ccdc141-null mutants show no apparent abnormality,suggesting a genetic compensation response *** parallel,we observe a marked reduction inα-tubulin acetylation levels in the ccdc141 *** treatment with histone deacetylase(HDAC)inhibitors,particularly the HDAC6 inhibitor,rescues the ccdc141 crispant ***,exome analysis of 70 patients with laterality defects reveals an increased burden of CCDC141 mutations,with in-vivo studies verifying the pathogenicity of the patient mutation *** findings highlight the critical role of ccdc141 in ciliogenesis and demonstrate that CCDC141 mutations lead to abnormal LR patterns,identifying it as a candidate gene for laterality defects.

关键词： Left-right axis Cilia WES Laterality defects Zebrafish CCDC141

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Double Free:A Promising Route toward Moisture-Stable Hypotoxic Hybrid Perovskites

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CCS Chemistry 2022年第4期4卷 1273-1283页

作者： Guang-Ning Liu Ruo-Yu Zhao rang-Dong xu Cuncheng Li Guo-Cong Guo School of Chemistry and Chemical Engineering University of JinanJinanShandong 250022 State Key Laboratory of Structural Chemistry Fujian Institute of Research on the Structure of MatterChinese Academy of SciencesFuzhouFujian 350002

The moisture instability and toxicity of lead have hindered the development of lead organometal halide perovskites(Pb-OHPs).Similar to Pb-OHPs,OHPs based on Pb-free elements,including Group VA metals Bi and Sb(denoted as M),exhibit optoelectronic properties due to their isoelectronic configuration and close chemistry of the lone-pair ns^(2) ***,M-OHPs are mostly based on hydrophilic protonated organic countercations and possess low structural dimensionalities,which affect the moisture stability and disrupt continuous carrier transport,***,we demonstrate a“double-free”strategy to realize the rational synthesis of moisture-stable hypotoxic hybrid perovskites.A hydrogen-bond-free alkylated countercation was assembled with Pb-free OHP bearing an extended structure in one *** a proof of concept,two double-free M-OHPs are synthesized,which show greatly improved moisture and photostability compared to their corresponding hydrogen-bond OHPs and the extensively studied MA_(3)M_(2)X_(9)(MA=CH_(3)NH_(3)^(+)).The photoconduction behaviors of both double-free OHPs display short rise and decay recovery time and exhibit excellent photocurrent ***,(1-methyl-4-phenylpyridin-1-ium)BiI_(4)(Me4ppi-BiI_(4))displays a comparable switching on/off ratio with MA_(3)Bi_(2)I_(9),and can endure 75% relative humidity(RH)for at least 243 *** photophysical property measurements and theoretical calculations show that this remarkable photoconversion performance results from the relatively low exciton binding energy and greatly improved carrier mobility and concentration.

关键词： bismuth halide crystal structure hydrogen-bond-free inorganic-organic hybrid photoconductor

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列宁关于社会主义文化建设的重要思想

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江汉论坛 2007年第7期 14-17页

作者：许蓉南京师范大学公共管理学院博士研究生南京210097

列宁领导俄国十月革命胜利后,对如何进行社会主义文化建设进行了不懈的努力和探索。他充分认识到加强文化建设的重大意义,并且提出了如何搞好文化建设的重大举措。这些重要思想对于我国新时期的先进文化建设仍具有现实指导意义。

关键词：列宁文化建设社会主义

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Constructing moisture-stable hybrid perovskite-type semiconductors based on hydrogen-bond-free strategy

Constructing moisture-stable hybrid perovskite-type semicond...

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中国化学会第十届全国无机化学学术会议

作者： Ruo-Yu Zhao rang-Dong xu Guang-Ning Liu School of Chemistry and Chemical Engineering University of Jinan

Hybrid perovskites-type light absorbers, notably based on methylammonium or formamidinium, have promising application in optoelectronics;however they are notorious for their characteristic low moisture stabilities and monotonous band gaps. Constructing new stability-enhanced hybrid lead iodine perovskites（HLIPs） with desired band gaps is imperative, but still a critical challenge. Herein, we demonstrate two effective strategies, which provide new ways to solve the above two issues. The "hydrogen-bond-free" strategy is aimed to enhance the stability of HLIPs by prohibiting organic components from forming strong hydrogen bonds with external water molecules. The "dual-iodine" strategy is towards the synthesis of stable HLIPs with reduced band gaps, which indicates that the I-coordinated metal complex can strongly reconstruct both the bottom of conduction bands（CBs） and the top of valence bands（VBs） of inorganic lead iodines skeleton to reduce the band gaps. As a proof-of-concept application, ambient-stable HLIPs（1,1’-diethyl-[2,2’-bipyridine]-1,1’-diium）Pb3 I8（denoted as EtBpy-Pb3 I8） and [Cu（2,2’-bipyridine）2 I]2 Pb2 I6（denoted as CuIBpy-Pb2 I6） are synthesized, which can endure relative humidity（RH） of 100% and sunlight irradiation at least 60 days. Both EtBpy-Pb3 I8 and CuIBpy-Pb2 I6 show good photoconduction behavior with short rise and decay recovery time, and exhibit excellent repeatabilities of photocurrent. This work not only provides two new promising stability-enhanced lead-based semiconductors for light absorption application, but also opens the new ways to enhance the stabilities and tune the band gaps of HLIPs.

关键词： Perovskite Lead iodine Inorganic–organic hybrids Photoconduction Crystal structure

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风洞收缩段曲线气动性能研究

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实验流体力学 2009年第4期23卷 73-76,81页

作者：李国文徐让书沈阳航空工业学院沈阳110136

介绍了一种新的风洞收缩段曲线的设计方法,即UG参数化收缩段壁型曲线设计。采用商用软件fluent对这种收缩段曲线性能进行数值模拟计算,获得了好的流场品质,对于风洞的设计以及流动优化提供了新的设计思想。在模拟计算的基础上应用了该... 详细信息

介绍了一种新的风洞收缩段曲线的设计方法,即UG参数化收缩段壁型曲线设计。采用商用软件fluent对这种收缩段曲线性能进行数值模拟计算,获得了好的流场品质,对于风洞的设计以及流动优化提供了新的设计思想。在模拟计算的基础上应用了该研究成果加工制造了一座低速风洞,并对风洞流场进行了校测,对比了模拟计算结果与实验测量结果,并进行了流场性能分析。该设计方法可以应用推广到风洞设计工作中去。

关键词：收缩段参数化数值模拟风洞

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长链非编码RNA在心脏发育中的作用

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上海交通大学学报（医学版） 2014年第12期34卷 1834-1838页

作者：李婷婷徐让上海交通大学医学院附属新华医院小儿心血管科上海200092

哺乳动物的心脏发育涉及胚胎多能性细胞分化为中胚层以及心脏各种类型的细胞,包括心肌细胞、内皮细胞和平滑肌细胞,心脏发育需要精细的调控网络。长链非编码RNA(lncRNA)是人类和小鼠转录组中最重要的RNA之一。随着新一代测序技术的发展... 详细信息

哺乳动物的心脏发育涉及胚胎多能性细胞分化为中胚层以及心脏各种类型的细胞,包括心肌细胞、内皮细胞和平滑肌细胞,心脏发育需要精细的调控网络。长链非编码RNA(lncRNA)是人类和小鼠转录组中最重要的RNA之一。随着新一代测序技术的发展,对于lncRNA的研究越来越受到重视。文章主要讨论lncRNA在哺乳动物心脏胚胎分化发育的基因调控过程中发挥的重要作用。

关键词：长链非编码RNA 基因调控胚胎心脏发育

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CArG调控元件辐射诱导活性的研究

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上海交通大学学报（医学版） 2006年第4期26卷 385-388页

作者：徐让卢健钱关祥上海交通大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室上海200025

目的构建含有人工合成CArG调控元件的荧光素酶报告基因重组质粒,研究该元件在多种肿瘤细胞中不同剂量放射线照射下的放射诱导活性。方法将含有9个串联的CCATATAAGG结构的CArG增强子与CMVIEbasalgenepromoter构成的嵌合调控元件插入到pGL... 详细信息

目的构建含有人工合成CArG调控元件的荧光素酶报告基因重组质粒,研究该元件在多种肿瘤细胞中不同剂量放射线照射下的放射诱导活性。方法将含有9个串联的CCATATAAGG结构的CArG增强子与CMVIEbasalgenepromoter构成的嵌合调控元件插入到pGL3Basic质粒,构建荧光素酶报告质粒。利用脂质体将该报告质粒瞬时转染肿瘤细胞株HeLa、A549、HepG2,给予不同剂量137Csγ射线照射,36h后检测荧光素酶活性,观察该调控序列的放射诱导活性。结果该CArG调控元件在低剂量放射线的诱导下能明显增强下游基因的表达,在3Gy的γ射线照射下诱导活性最强。结论人工合成的CArG调控元件在低剂量的放射线作用下能有效诱导下游基因的表达,在肿瘤的放射-基因治疗中具有较强的应用潜力。

关键词： CArG元件放射基因治疗辐射诱导活性肿瘤细胞

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GAL4/VP16融合人工转录因子的活性研究

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上海交通大学学报（医学版） 2013年第4期33卷 404-408页

作者：张萍应磊钱关祥徐让上海交通大学基础医学院生物化学与分子细胞生物学系上海200025 上海交通大学医学院附属新华医院科研中心上海200092

目的构建含有融合转录因子GAL4/VP16的表达载体和含有上游激活序列(UAS)启动子驱动报告基因增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的表达载体组成的GAL4/VP16-UAS系统,观察融合转录因子GAL4/VP16的活性。方法构建含有融合转录因子GAL4/VP16的表达载... 详细信息

目的构建含有融合转录因子GAL4/VP16的表达载体和含有上游激活序列(UAS)启动子驱动报告基因增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的表达载体组成的GAL4/VP16-UAS系统,观察融合转录因子GAL4/VP16的活性。方法构建含有融合转录因子GAL4/VP16的表达载体pcDNA3-GAL4/VP16,含有5个拷贝UAS串联排列序列和腺病毒E1b基因核心启动子的人工杂合启动子驱动报告基因EGFP的表达载体pGL3-G5E1b-TATA-EGFP,利用脂质体将两种载体瞬时转染Hep3B和HEK293细胞,48 h后采用RT-PCR和流式细胞术检测EGFP的表达,观察GAL4/VP16融合转录因子对G5E1B-TATA的转录调节作用。结果在GAL4/VP16融合转录因子存在的情况下,G5E1b-TATA启动子活性明显上调,甚至可以达到巨细胞病毒(CMV)启动子的活性程度。结论 GAL4/VP16融合转录因子具有上调G5E1B-TATA启动子转录活性的作用,并且该转录活性足以达到驱动下游目的基因高效表达的水平,在基因治疗和基因功能的研究中具有一定的应用潜力。

关键词： GAIA YP16 人工转录因子增强型绿色荧光蛋白

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超高转速离心通风器性能仿真分析

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航空动力学报 2016年第3期31卷 685-691页

作者：韩金在陈聪慧徐让书中国航空工业集团公司沈阳发动机设计研究所沈阳110015 沈阳航空航天大学航空航天工程学部沈阳110136

以某型航空发动机的超高转速离心通风器为研究对象,应用欧拉-拉格朗日方法对其内部两相流场进行数值模拟.针对不同转速、入口质量流量进行了数值计算,分析其对超高转速离心通风器压降与分离效率的影响.计算表明:超高转速下,优化旋转空... 详细信息

以某型航空发动机的超高转速离心通风器为研究对象,应用欧拉-拉格朗日方法对其内部两相流场进行数值模拟.针对不同转速、入口质量流量进行了数值计算,分析其对超高转速离心通风器压降与分离效率的影响.计算表明:超高转速下,优化旋转空心轴结构可以减小离心通风器压降,提高分离效率.

关键词：离心通风器航空发动机两相流压降分离效率

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