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中医正骨 2013年第12期25卷 15-19页

作者：全仁夫倪月明郑宣谢尚举李长明浙江省杭州市萧山区中医院浙江杭州311201 浙江中医药大学浙江杭州310053

目的:观察经皮椎体成形术后骨折椎体的生物力学性能和组织形态。方法:将105只新西兰雌兔随机分为3组,每组35只。B组和C组采用卵巢切除加地塞米松肌肉注射法进行骨质疏松造模。造模成功后,在所有实验动物L4和L5椎体上通过手术造成骨缺损,... 详细信息

目的:观察经皮椎体成形术后骨折椎体的生物力学性能和组织形态。方法:将105只新西兰雌兔随机分为3组,每组35只。B组和C组采用卵巢切除加地塞米松肌肉注射法进行骨质疏松造模。造模成功后,在所有实验动物L4和L5椎体上通过手术造成骨缺损,C组实验动物在形成骨缺损的椎体中模拟经皮椎体成形术注射调制好的聚甲基丙烯酸甲酯骨水泥Ⅲ。分别于模拟经皮椎体成形术完成后2周、4周、8周、12周、16周、24周、48周从各组中随机选取5只实验动物处死,取出进行过手术的2个椎体,进行生物力学强度测定。同时,C组作盐酸四环素荧光标记,经甲苯胺蓝染色后进行椎体组织形态观察。结果:①椎体轴向压缩实验结果。除48周外[(0.54±0.14)mm,(0.83±0.26)mm,(0.54±0.16)mm,F=3.744,P=0.054],3组椎体标本术后2周、4周、8周、12周、16周、24周时的轴向压缩位移比较,组间差异均有统计学意义[(0.62±0.10)mm,(0.92±0.22)mm,(0.43±0.09)mm,F=13.489,P=0.001;(0.65±0.17)mm,(1.01±0.16)mm,(0.44±0.08)mm,F=24.843,P=0.000;(0.61±0.12)mm,(1.27±0.23)mm,(0.50±0.11)mm,F=32.262,P=0.000;(0.61±0.15)mm,(1.10±0.10)mm,(0.49±0.13)mm,F=25.488,P=0.000;(0.58±0.19)mm,(1.17±0.16)mm,(0.54±0.10)mm,F=24.730,P=0.000;(0.55±0.17)mm,(1.10±0.28)mm,(0.53±0.15)mm,F=11.998,P=0.001]。进一步两两比较,A组和C组各时点轴向压缩位移均小于B组(P=0.009,P=0.001,P=0.000,P=0.000,P=0.000,P=0.001;P=0.000,P=0.000,P=0.000,P=0.000,P=0.000,P=0.001);除4周时外(P=0.038),A组各时点轴向压缩位移与C组比较,差异均无统计学意义(P=0.062,P=0.328,P=0.208,P=0.648,P=0.894)。②椎体三点弯曲实验结果。3组实验动物椎体标本术后2周、4周、8周、12周、16周、24周和48周时的最大载荷比较,组间差异均有统计学意义[(178.0±7.7)N,(130.3±6.2)N,(232.0±1.7)N,F=385.253,P=0.000;(178.3±4.4)N,(127.7±7.1)N,(226.0±5.4)N,F=371.286,P=0.000;(182.4±4.4)N,(131.8±5.2)N,(221.0±3.1)N,F=536.544,P=0.000;(184.0±0.8)N,(137.0±6.6)N,(215.0±3.2)N,F=422.579,P=0.000;(182.9±0.9)N,(140.2±1.5)N,(217.0±4.3)N,F=1 006.122,P=0.000;(189.0±3.2)N,(140.6±1.7)N,(194.0±4.9)N,F=351.372,P=0.000;(191.9±3.9)N,(142.4±2.1)N,(191.0±8.1)N,F=139.682,P=0.000]。进一步两两比较,A组和C组各时点的最大载荷均大于B组(P=0.000,P=0.000,P=0.000,P=0.000,P=0.000,P=0.000,P=0.000;P=0.000,P=0.000,P=0.000,P=0.000,P=0.000,P=0.000,P=0.000);除24周和48周外(P=0.054,P=0.724),C组各时点的最大载荷均大于A组(P=0.000,P=0.000,P=0.000,P=0.000,P=0.000)。③椎体抗扭转实验结果。3组实验动物椎体标本术后2周、4周、8周、12周、16周、24周和48周时的扭转角度比较,组间差异均有统计学意义[(3.8°±0.6°),(5.4°±0.5°),(2.4°±0.6°),F=37.977,P=0.000;(4.0°±1.3°),(5.8°±1.6°),(2.4°±0.7°),F=9.408,P=0.003;(3.7°±0.8°),(5.7°±0.4°),(2.3°±0.7°),F=32.229,P=0.000;(3.5°±0.8°),(5.8°±0.4°),(2.4°±0.5°),F=38.685,P=0.000;(3.5°±0.8°),(5.7°±0.4°),(2.4°±0.4°),F=41.931,P=0.000;(3.

关键词：脊柱骨折椎体成形术生物力学组织学动物实验

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软骨组织工程中种子细胞的研究进展

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中国医药导报 2017年第23期14卷 36-39页

作者：张治金全仁夫岳振双朱芳兵杭州市萧山区中医院浙江杭州311201

组织工程修复软骨缺损是组织工程技术运用于临床最具可行性的研究领域之一,而种子细胞是软骨组织工程研究及临床应用的基本要素和首要环节。本文结合国内外的研究成果,对组织工程修复软骨缺损中种子细胞的研究现状进行回顾,综述种子细... 详细信息

组织工程修复软骨缺损是组织工程技术运用于临床最具可行性的研究领域之一,而种子细胞是软骨组织工程研究及临床应用的基本要素和首要环节。本文结合国内外的研究成果,对组织工程修复软骨缺损中种子细胞的研究现状进行回顾,综述种子细胞的特点、来源、种类以及培养和鉴定,以期为软骨组织工程的进一步发展提供依据。

关键词：软骨缺损组织工程种子细胞

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水针疗法联合中药内服外敷治疗退行性膝关节病96例临床观察

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甘肃中医学院学报 2013年第5期30卷 43-46页

作者：郑宣倪月明谢尚举李长明全仁夫浙江中医药大学浙江杭州310053 杭州市萧山中医院浙江杭州310009

目的观察水针疗法联合中药内服外敷治疗退行性膝关节病的临床疗效。方法将96例退行性膝关节病患者随机分为治疗组和对照组,每组48例。治疗组给予水针疗法联合中药内服外敷治疗,对照组给予水针注射治疗。5 d 1次,15 d为1个疗程。治疗3个... 详细信息

目的观察水针疗法联合中药内服外敷治疗退行性膝关节病的临床疗效。方法将96例退行性膝关节病患者随机分为治疗组和对照组,每组48例。治疗组给予水针疗法联合中药内服外敷治疗,对照组给予水针注射治疗。5 d 1次,15 d为1个疗程。治疗3个疗程后对2组患者治疗前后膝关节功能评分进行比较,并对临床疗效进行统计分析。结果治疗组总有效率为89.58%,对照组为52.08%,2组比较差异有统计意义(P<0.05)。结论水针疗法联合中药内服外敷治疗退行性膝关节病见效快、疗效显著,值得进一步推广应用。

关键词：水针中药内服外敷退行性膝关节病临床疗效

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中医综合疗法治疗强直性脊柱炎36例临床观察

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甘肃中医学院学报 2015年第1期32卷 46-48页

作者：李长明谢尚举杜伟斌王拓全仁夫浙江中医药大学第三临床医学院浙江杭州310053 杭州市萧山区中医院浙江杭州310009

目的观察中医综合疗法治疗强直性脊柱炎的临床疗效。方法将72例患者随机分为2组,对照组给予水针注射治疗,治疗组在对照组治疗基础上联合中药内服、外敷加刺络拔罐治疗,15 d为1个疗程,连续治疗3个疗程后比较2组的临床疗效。结果对照组总... 详细信息

目的观察中医综合疗法治疗强直性脊柱炎的临床疗效。方法将72例患者随机分为2组,对照组给予水针注射治疗,治疗组在对照组治疗基础上联合中药内服、外敷加刺络拔罐治疗,15 d为1个疗程,连续治疗3个疗程后比较2组的临床疗效。结果对照组总有效率为55.56%,治疗组为86.11%,2组比较差异有统计意义(P<0.05),表明治疗组临床疗效显著优于对照组。结论中医综合疗法治疗强直性脊柱炎疗效显著,值得临床广泛应用和推广。

关键词：中医综合疗法水针强直性脊柱炎临床疗效

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3D支架载尿液细胞来源IPSCs-NSCs移植对急性脊髓损伤大鼠的修复作用观察

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山东医药 2020年第35期60卷 17-21页

作者：李长明邵荣学邓小梅赵士杰王拓全仁夫杭州市萧山区中医院杭州311200 杭州市中医院

目的将尿液细胞来源重编程诱导性多能干细胞(IPSCs)分化为神经干细胞(NSCs),与3D打印脊髓支架(简称3D支架)共培养后观察其对急性脊髓损伤(SCI)大鼠的修复作用。方法将尿液细胞来源IPSCs分化为NSCs,免疫荧光检测结果显示IPSCs-NSCs中的... 详细信息

目的将尿液细胞来源重编程诱导性多能干细胞(IPSCs)分化为神经干细胞(NSCs),与3D打印脊髓支架(简称3D支架)共培养后观察其对急性脊髓损伤(SCI)大鼠的修复作用。方法将尿液细胞来源IPSCs分化为NSCs,免疫荧光检测结果显示IPSCs-NSCs中的胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和微管蛋白(β-tubulinⅢ)阳性表达,证实细胞分化能力良好。提取新生SD大鼠海马组织,制备Hd-NSCs并进行鉴定。制备3D支架,电镜显示内部呈三维立体疏松多孔结构。选择成年雄性SD大鼠56只,随机分为4组各14只,均建立SCI模型。建模1周后,IPSCs-NSCs组植入载IPSCs-NSCs的3D支架,Hd-NSCs组植入载Hd-NSCs的3D支架,模型组植入DMEM培养液0.2 mL,支架模型组植入载DMEM培养液的3D支架。比较各组术后2~8周开放领域运动测试(BBB)评分,术后8周Tarlov、Rivlin评分及运动、感觉诱发电位;术后8周处死,HE染色观察受损节段脊髓组织病理改变。结果IPSCs-NSCs组、Hd-NSCs组术后2~8周BBB评分及术后8周Tarlov评分、Rivlin评分、运动和感觉诱发电位振幅均高于模型组、支架模型组,术后8周运动和感觉诱发电位潜伏期均短于模型组、支架模型组(P均0.05)。结论3D支架载尿液细胞来源重编程IPSCs-NSCs移植可改善急性SCI大鼠的运动及感觉功能、促进损伤处的脊神经纤维生长,其效果与海马来源的NSCs相当。

关键词：脊髓损伤神经干细胞 3D打印脊髓支架尿液大鼠

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强直性脊柱炎易感基因的相关研究进展

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中医正骨 2019年第4期31卷 48-51页

作者：任伟凡胡劲涛全仁夫吕建兰钱建胜浙江中医药大学第三临床医学院浙江杭州310053 杭州市萧山区中医院浙江杭州311201

强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)是临床上常见的一种具有高度遗传性的慢性炎症性疾病。HLA-B27基因被认为是与AS相关性最强的易感基因,但越来越多的研究发现,除HLA-B27基因外,包括内质网氨基肽酶1基因、白细胞介素23/白细胞介... 详细信息

强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)是临床上常见的一种具有高度遗传性的慢性炎症性疾病。HLA-B27基因被认为是与AS相关性最强的易感基因,但越来越多的研究发现,除HLA-B27基因外,包括内质网氨基肽酶1基因、白细胞介素23/白细胞介素17炎症轴相关基因、肿瘤坏死因子α基因、白细胞介素1基因、杀伤细胞免疫球蛋白样受体基因在内的多种基因均与AS的易感性有关。目前所发现的易感基因与AS关联的机制尚不十分清楚,仍须开展更多高质量、多角度、深层次的研究。

关键词：脊柱炎,强直性易感基因遗传多态性,单核苷酸综述

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γ-分泌酶抑制剂对毛囊干细胞诱导分化为血管内皮细胞效率的影响

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中华实验外科杂志 2017年第6期34卷 949-952页

作者：杜伟斌全仁夫郑宣李强曹国平庄伟邵荣学杨迪生浙江省萧山中医院骨科杭州311200 浙江中医药大学杭州310053 浙江大学附属第二医院骨科杭州310009

目的观察Notch信号通路的特异性阻断剂——γ-分泌酶抑制剂（DAPT）对毛囊干细胞（rHFSCs）诱导分化为血管内皮细胞（ECs）效率的影响。方法运用改良的rHFSCs分离培养、纯化鉴定的方法得到种子细胞，并用透射电镜观察其内部结构。用10... 详细信息

目的观察Notch信号通路的特异性阻断剂——γ-分泌酶抑制剂（DAPT）对毛囊干细胞（rHFSCs）诱导分化为血管内皮细胞（ECs）效率的影响。方法运用改良的rHFSCs分离培养、纯化鉴定的方法得到种子细胞，并用透射电镜观察其内部结构。用10恤晷／L血管内皮生长因子165（VEGF165）作为诱导因子进行诱导，流式细胞仪检测分化效率。用不同浓度DAPT（0．5、1．0μmol／L）进行抑制，将他们分为诱导组和抑制组。两组细胞均处理1周，用实时荧光定量聚合酶链反应（FQ—PCR）和Western blot法分别检测两组CD31、血管内皮钙黏蛋白（VE—cadherin）mRNA和蛋白表达，联合DiL标记的乙酰化低密度脂蛋白（Dil—gc—LDL）吞噬功能检测和体外成血管实验形成实验进行对比，综合评价DAPT在抑制Notch信号通路后对rHFSCs诱导分化为ECs的影响。结果改良分离、培养、纯化的rHFSCs克隆能力好，活力强。流式细胞仪检测β1、α6整合素、细胞角蛋白15（CK15）、p63呈高表达，分别为98．9％、97．9％、68．1％和98．5％；低弱表达CD31、VE—cadherin，分别为13．6％和17．9％；透射电镜显示细胞处于原始状态。诱导1周后，流式细胞仪检测高表达内皮细胞标志物CD31和VE—cadherin，分别为61．5％和95．9％。抑制Notch信号通路后两组FQ-PCR结果显示，CD31变化差异无统计学意义（P=0．136）、VE-cadherinmRNA变化差异有统计学意义（P=0．003），Western blot法得到CD31、VE-cadherin蛋白表达明显降低（P=0．000），体外Dil—ac-LDL吞噬功能，成血管形成能力明显减弱。结论DAPT通过阻断Notch信号通路，虽没有显著影响CD31、VE—cadherinmRNA水平，但能较好抑制CD31、VE-cadherin蛋白表达，体外吞噬和成血管的能力，从而减低rHFSCs诱导分化为ECs的效率。

关键词：毛囊干细胞 γ-分泌酶抑制剂DAPT Notch信号通路血管内皮细胞诱导抑制

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3D打印技术在骨科领域的应用进展

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中医正骨 2022年第12期34卷 52-55,59页

作者：周涵薇陈涛杜伟斌何丽红全仁夫杭州市萧山区中医院浙江杭州311201

3D打印技术是一种快速成型技术,近年来该技术在骨科领域逐渐被广泛应用。本文对3D打印技术在骨科医疗器械制造、骨组织工程和再生医学研究、骨科解剖模型制作中的应用进展进行了综述,并对3D打印技术在骨科领域的待完善之处进行了总结。

关键词：打印,三维医院,骨科骨疾病/医疗器械组织工程再生医学人体模型综述

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大鼠毛囊干细胞体外培养及基因转染方法

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中医正骨 2014年第6期26卷 19-23页

作者：全仁夫郑宣许世超倪月明谢尚举李长明浙江省杭州市萧山区中医院浙江杭州311201 浙江中医药大学浙江杭州310012

目的：探讨大鼠毛囊干细胞体外培养和基因转染的方法.方法：采用组织块法分离、培养大鼠触须隆突部毛囊干细胞,经Ⅳ型胶原差速贴壁法纯化后,采用碱性磷酸酶染色和细胞免疫荧光染色进行细胞鉴定,测定细胞生长曲线,并分别采用脂质体和慢... 详细信息

目的：探讨大鼠毛囊干细胞体外培养和基因转染的方法.方法：采用组织块法分离、培养大鼠触须隆突部毛囊干细胞,经Ⅳ型胶原差速贴壁法纯化后,采用碱性磷酸酶染色和细胞免疫荧光染色进行细胞鉴定,测定细胞生长曲线,并分别采用脂质体和慢病毒质粒进行毛囊干细胞基因转染.结果：经两次Ⅳ型胶原贴壁筛选后,毛囊干细胞呈克隆性生长,具有典型的干细胞生物学特征,碱性磷酸酶染色阳性,角蛋白-15、整合素-α6和整合素-β1表达均为阳性.细胞生长曲线显示毛囊干细胞在接种后第3天时出现干细胞克隆;第5天和第6天时细胞处于对数生长期.脂质体介导的毛囊干细胞基因转染率为1.55％～17.21％,中位数9.63％;慢病毒介导的毛囊干细胞基因转染率为62.14％～79.42％,中位数71.52％.结论：采用组织块法分离、培养大鼠触须隆突部毛囊干细胞,经Ⅳ型胶原差速贴壁法纯化后,毛囊干细胞可保持较好的生长状态和较强的克隆形成能力,且慢病毒介导毛囊干细胞基因转染比脂质体转染更高效、稳定.

关键词：干细胞毛囊细胞培养技术转染大鼠

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3D打印技术制备新型HA/Zr02梯度复合材料在犬股骨干骨缺损修复中的应用

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中华解剖与临床杂志 2018年第5期23卷 428-437页

作者：王拓全仁夫杜伟斌邵荣学杨迪生浙江中医药大学附属江南医院杭州311200 浙江大学附属第二医院骨科

目的运用3D打印技术制备新型羟基磷灰石/二氧化锆(HA/ZrO2)梯度复合材料,分析其性能,并观察其修复比格犬股骨干骨缺损的能力.方法随机抽取6月龄雄性比格犬1只,截去右下肢股骨中段全层15 mm制成骨缺损模型后,放入动物专用Micro CT进行... 详细信息

目的运用3D打印技术制备新型羟基磷灰石/二氧化锆(HA/ZrO2)梯度复合材料,分析其性能,并观察其修复比格犬股骨干骨缺损的能力.方法随机抽取6月龄雄性比格犬1只,截去右下肢股骨中段全层15 mm制成骨缺损模型后,放入动物专用Micro CT进行容积扫描,完成数据采集、转化及后期处理,将处理后的数据导入CeraFab 7500光固化3D打印机中.根据设定参数启动打印程序,形成复合光敏树脂初胚,并对其进一步脱脂烧结,然后采用浸涂法制备HA/ZrO2梯度复合材料.运用扫描电镜、X射线衍射(XRD)和生物力学实验分析HA/ZrO2梯度复合材料的性能.制备HA/ZrO2梯度复合材料浸提液.培养小鼠成纤维细胞株L929,采用噻唑蓝(MTT)法检测HA/ZrO2梯度复合材料对体外细胞增殖和毒性的影响.将16只比格犬随机分为4组,每组4只.A组:截取犬股骨中段15 mm后,不植入任何材料;B组、C组、D组分别截去股骨中段15、25、35 mm制成骨缺损模型,然后分别植入相应规格的HA/ZrO2梯度复合材料.术后第2、4、8、12周拍摄术肢股骨正侧位X片,观察植入材料与自身骨结合情况及周围骨痂生长情况.术后12周处死实验动物,截取整段股骨,大体观察标本植入材料与周围骨生长状况;行Micro CT扫描,测定新生骨量,并对新生骨进行3D图像重建;对股骨标本进行极限抗压实验,测量极限抗压强度.结果运用3D打印技术制备的HA/ZrO2梯度复合材料扫描电镜显示表面光滑,结构均匀,断口表面层均匀过渡结合,没有明显界限,相互之间冶金结合,结构稳定.XRD分析显示HA及ZrO2峰形明显、结晶程度较好、粉体纯度高.抗压试验显示极限抗压强度为(43.37±2.31)***试验显示HA/ZrO2梯度复合材料无明显细胞毒性.实验动物术后X线片显示:A组术后形成骨不连;B组有连续性骨痂通过,人工假体与宿主骨之间的界线消失;C组术后第2、4、8周连续性骨痂及新生骨长入速度较B组缓慢,但人工假体与断端间隙逐渐被新生骨填充,有连续性骨痂通过;D组新骨生成缓慢,仅在断端周围出现新生骨.术后12周取材,Micro CT 3D重建及新生骨量检测,B、C、D组单位体积新生骨量分别为(238.55±19.11)mm3/cm3、(223.31±13.41)mm3/cm3、(110.83±6.48)mm3/cm3,3组间比较差异有统计学意义(F=156.824,P0.05).结论运用3D打印技术制备的纳米HA/ZrO2梯度复合材料具有可靠的生物相容性及生物力学强度,可以实现临床个体化治疗原则,能很好地修复犬股骨干35 mm内骨缺损,是一种理想的骨组织替换材料.

关键词：组织工程羟基磷灰石类锆三维打印技术梯度复合材料动物实验骨缺损

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