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Spike蛋白介导细胞融合程度定量方法的建立及其在药物筛选中的应用

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安徽大学学报（自然科学版） 2024年第5期48卷 82-93页

作者：刘慕仪张畅李辉龙刘家茏焉秋林杨孟欣黄麟飞万禄明钟辉魏从文军事科学院军事医学研究院生物工程研究所北京100071

新型冠状病毒Spike蛋白(S蛋白)与受体ACE2结合介导细胞融合的发生,为进一步探究新冠感染合胞体发生、发展的规律及致病机制,明确关键蛋白靶点,筛选干预合胞体形成的药物,笔者拟构建新冠S蛋白介导的细胞融合程度的定量方法.利用pCDH-CMV-... 详细信息

新型冠状病毒Spike蛋白(S蛋白)与受体ACE2结合介导细胞融合的发生,为进一步探究新冠感染合胞体发生、发展的规律及致病机制,明确关键蛋白靶点,筛选干预合胞体形成的药物,笔者拟构建新冠S蛋白介导的细胞融合程度的定量方法.利用pCDH-CMV-MCS-EF1-Puro、pLV-CMV-MCS-3FLAG-IRES-Bla、S蛋白基因序列、ACE2基因序列、LacZ基因序列、EcoRⅠ限制性内切酶及同源重组酶构建慢病毒穿梭质粒pCDH-S,pCDH-ACE2,pLV-α与pLV-ω,利用该慢病毒质粒分别构建稳定表达S蛋白与ACE2蛋白的293FT和A549细胞系,随后利用pLV-α与pLV-ω慢病毒质粒分别感染上述稳定细胞系,构建出可以定量细胞融合程度的细胞系293FT-S_(1-56),A549-S_(1-56),293FT-ACE2△_(11-41),A549-ACE2△_(11-41).最后采用Western Blot蛋白免疫印迹技术鉴定上述融合定量细胞系中S蛋白与ACE2蛋白的过表达效果,并通过细胞共培养确定融合效果,用β-半乳糖苷酶报告基因检测试剂盒定量细胞融合程度.结果显示,慢病毒载体和稳定细胞系构建成功,时间梯度、转染梯度实验显示该系统具有良好的定量灵敏度,并能用于卡莫司他(Camostat mesylate)和氯硝柳胺(Niclosamide)等药物抗融合效果的定量评价.成功构建的新冠病毒Spike蛋白介导细胞融合程度定量系统,可用于不同S蛋白突变体致融合能力评价和抗融合药物筛选评价,可为进一步的研究奠定技术基础.

关键词：新型冠状病毒 Spike蛋白 ACE2受体细胞融合定量慢病毒

A network pharmacology-based study on the anti-hepatoma effect of Phellodendri Chinensis Cortex

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Asian Journal of Traditional Medicines 2021年第5期16卷 276-293页

作者： qiulin yan Guodong Yao Key Laboratory of Computational Chemistry-Based Natural Antitumor Drug Research&Development Liaoning ProvinceSchool of Traditional Chinese Materia MedicaShenyang Pharmaceutical UniversityShenyang 110016China

Traditional Chinese medicine(TCM)Phellodendri Chinensis Cortex(PCC)has been used for the treatment of human hepatocellular carcinoma,but the underlying mechanisms are still *** this study,15 active compositions of PCC were obtained from Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology Database(TCMSP),and 505 putative identified targets of PCC were screened by Swiss Target Prediction ***,HCC data was downloaded from Drugbank and GeneCards ***,45 common targets were *** network diagrams of the active component-target network,protein-protein interaction(PPI)network and active component-target-pathway network were constructed using Cytoscape *** analysis of the network results showed that the active ingredients of PCC,such as berberine,obacunone,rutaecarpine,candletoxin A,palmatine,isocorypalmine,quercetin,and(S)-Canadine,had a good binding activity with more ***,Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes(KEGG)pathway enrichment analyses revealed that common targets were significantly enriched in Ras signaling pathway,ErbB signaling pathway,and Mammalian target of rapamycin(mTOR)signaling ***,the multi-component,multi-target,and multi-pathway characteristics of PCC provided a reference for the in-depth study of the mechanism of PCC in the treatment of HCC.

关键词： network pharmacology Phellodendri Chinensis Cortex human hepatocellular carcinoma traditional Chinese medicine

电阻箱R对串联谐振电路中Q值测量精度的影响

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物理通报 2018年第1期47卷 7-9页

作者：颜秋林吴先球华南师范大学物理与电信工程学院

串联谐振电路在交流电压作用下,电感箱和电容箱存在损耗电阻,而通过对串联电路中电阻箱的阻值R的选择,可以降低电感箱和电容箱损耗电阻对Q值测量的影响,从而提高Q值测量的精确度,甚至在较高频率的串联谐振电路里也可使Q值测量值和准确... 详细信息

串联谐振电路在交流电压作用下,电感箱和电容箱存在损耗电阻,而通过对串联电路中电阻箱的阻值R的选择,可以降低电感箱和电容箱损耗电阻对Q值测量的影响,从而提高Q值测量的精确度,甚至在较高频率的串联谐振电路里也可使Q值测量值和准确值的百分误差E（Q）低于1%.

关键词：串联谐振电阻箱R值 Q值测量精度

益心舒胶囊联合美托洛尔缓释片治疗冠心病室性早搏的临床观察

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湖南中医药大学学报 2016年第3期36卷 60-63页

作者：骆杨平唐铭翔王鹏闫秋林湖南省人民医院湖南长沙410002 湖南中医药大学湖南长沙410208

目的观察益心舒胶囊联合美托洛尔缓释片治疗冠心病室性早搏的临床疗效。方法将100例冠心病伴室性早搏患者随机分为观察组(益心舒胶囊联合美托洛尔缓释片)与对照组(单用美托洛尔缓释片),疗程均为4周。观察用药前后主要临床症状、24 h动... 详细信息

目的观察益心舒胶囊联合美托洛尔缓释片治疗冠心病室性早搏的临床疗效。方法将100例冠心病伴室性早搏患者随机分为观察组(益心舒胶囊联合美托洛尔缓释片)与对照组(单用美托洛尔缓释片),疗程均为4周。观察用药前后主要临床症状、24 h动态心电图的变化、QT离散度(QTd)变化。结果在治疗室性早搏疗效方面,两组室性早博次数均减少(P<0.01),且观察组低于对照组(P<0.05),两组总有效率分别为75.0%、57.1%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05);在改善临床症状上,观察组总有效率为62.5%,对照组为55.1%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05);在中医症候疗效改善方面,两组患者中医证侯改善疗效的比较差异有统计学意义(P<0.05),观察组证候疗效优于对照组;与对照组相比,观察组QTd、校正QTd明显下降(P<0.01)。结论益心舒胶囊联合美托洛尔治疗冠心病室性早搏的疗效明显;可以降低QT离散度,抑制恶性心律失常的发生。

关键词：冠心病室性早搏益心舒胶囊美托洛尔缓释片人参丹参麦冬

A MALDI-MS sensing chip prepared by non-covalent assembly for quantitation of acid phosphatase

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Science China Chemistry 2021年第1期64卷 151-156页

作者： qiulin Ma Yunlong Chen Nan Feng Feng yan Huangxian Ju State Key Laboratory of Analytical Chemistry for Life Science School of Chemistry and Chemical EngineeringNanjing UniversityNanjing 210023China Department Clinical Laboratory Affiliated Cancer Hospital of Nanjing Medical UniversityJiangsu Cancer HospitalJiangsu Institute of Cancer ResearchNanjing 210009China

A novel sensing chip was designed for MALDI-MS quantitation of acid phosphatase(ACP).The ACP sensing chip was constructed through non-covalent interaction of streptavidin and biotin for the assembly of biotinylated peptide substrate on biotinylated polyethylene-glycol(PEG)modified indium-tin oxide(ITO)*** the presence of ACP,the peptide substrate was dephosphorylated under acidic condition to generate a new mass *** quantitative assay of ACP was achieved with the mass signal ratio of product to the sum of product and left peptide *** optimal detection conditions,the ratio was linearly correlated with the concentration of ACP in the range of 0.05–12 g/L with a detection limit(LOD)of 0.04 g/*** designed ACP sensing chip has been used to analyze ACP in complex clinical samples,which exhibited high selectivity,good repeatability,and admirably anti-interference *** work further demonstrates the concept of MS sensing and the application of MALDI-MS in quantitative analysis,and provides a convenient method for the quantitation of proteases in clinical diagnosis.

关键词： acid phosphatase sensing chip MALDI-MS quantitation proteases mass signal

青少年特发性脊柱侧凸主胸弯悬吊位和矫形术后Cobb角分布差异分析

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海军军医大学学报 2024年第6期45卷 688-692页

作者：刘延刘青山王梦真韩良丽杨长伟侯藏龙张秋林海军军医大学(第二军医大学)研究生院上海200433 中国人民解放军联勤保障部队北戴河康复疗养中心秦皇岛066199 海军军医大学(第二军医大学)第一附属医院麻醉科上海200433 海军军医大学(第二军医大学)第一附属医院脊柱外科上海200433

目的分析Lenke 1型青少年特发性脊柱侧凸(AIS)患者主胸弯Cobb角分布特征,以及不同节段间悬吊牵引法测得的柔韧性、矫正率、矫正指数的差异。方法纳入2015年1月至2018年12月于海军军医大学(第二军医大学)第一附属医院行一期脊柱侧凸后路... 详细信息

目的分析Lenke 1型青少年特发性脊柱侧凸(AIS)患者主胸弯Cobb角分布特征,以及不同节段间悬吊牵引法测得的柔韧性、矫正率、矫正指数的差异。方法纳入2015年1月至2018年12月于海军军医大学(第二军医大学)第一附属医院行一期脊柱侧凸后路三维矫形融合内固定术的48例Lenke 1型AIS患者。将主胸弯分为近段(T_(5)~T_(7)或T_(6)~T_(8))、中段(T_(7)~T_(9)或T_(8)~T_(10))、远段(T_(9)~T_(11)或T_(10)~T_(12)),并测量各段的Cobb角。计算不同节段的侧弯柔韧性、矫正率和矫正指数(术后矫正率/术前侧弯柔韧性)。采用随机区组的方差分析进行统计学分析。结果患者术前平均年龄为(14.31±2.24)岁,总Cobb角为(51.25±11.86)°,平均Risser分级为2.88±1.93;术后平均随访时间为(38.75±8.82)个月。术前近段Cobb角与远段Cobb角相似[(13.31±5.10)°vs(13.94±5.67)°,P=0.757],中段Cobb角[(24.00±5.61)°]大于近段及远段Cobb角(均P<0.001)。术前近段、中段、远段Cobb角占总Cobb角的比例分别为(25.72±7.97)%、(47.08±5.22)%、(27.20±8.00)%。术前远段侧弯柔韧性高于近段和中段[(64.01±24.18)%vs(35.00±18.02)%、(41.49±17.65)%,均P<0.001]。术后1周,近段、中段、远段矫正率分别为(74.61±15.80)%、(65.66±16.36)%和(73.76±19.41)%,差异无统计学意义(P=0.280);矫正指数分别为2.41±1.20、2.03±1.45和1.49±1.31,近段矫正指数高于远段(P=0.040)。末次随访时,近段、中段、远段矫正率分别为(71.10±14.07)%、(62.39±13.47)%和(69.75±17.53)%,差异无统计学意义(P=0.226);矫正指数分别为2.24±1.10、1.92±1.30和1.39±1.10,近段的矫正指数高于远段(P=0.026)。结论在Lenke 1型AIS患者中,近段、中段和远段Cobb角分别占主胸弯的25.72%、47.08%、27.20%。悬吊牵引法对远段柔韧性的评估能力最强,即悬吊位下远端节段最灵活,而各节段术后矫正率无明显差异。

关键词：青少年特发性脊柱侧凸柔韧性悬吊牵引法 Cobb角矫正率

血管内治疗前高分辨率磁共振血管壁成像重构指数预测颅内动脉粥样硬化性大血管闭塞性卒中

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国际脑血管病杂志 2024年第5期32卷 326-332页

作者：阎雨婷赵义瞿航周秋麟王苇扬州大学附属医院影像科扬州225000

目的探讨高分辨率磁共振血管壁成像(high-resolution magnetic resonance vessel wall imaging,HRMR-VWI)特征对颅内大血管闭塞(large vessel occlusion,LVO)所致急性缺血性卒中(acute ischemic stroke,AIS)病因的预测价值。方法回顾性收集2019年8月1日至2022年8月1日期间扬州大学附属医院诊断为LVO所致AIS的患者。所有患者在发病后4.5~24 h期间接受HRMR-VWI评估以及血管内治疗。首过直接抽吸术后闭塞血管实现完全再通定义为栓塞性LVO,首过直接抽吸术后残余狭窄>50%归类为颅内动脉粥样硬化狭窄相关性LVO(intracranial atherosclerotic stenosis-related LVO,ICAS-LVO)。结果共纳入28例患者,年龄(65.32±2.23)岁,男性20例(71.4%);embo-LVO组22例(78.6%),ICAS-LVO组6例(21.4%)。多变量logistic回归分析显示,在HRMR-VWI影像特征中,重构指数是ICAS-LVO的独立预测因素(优势比1.081,95%置信区间1.001~1.167;P=0.046)。受试者工作特征曲线分析显示,重构指数预测ICAS-LVO的曲线下面积为0.882(95%置信区间0.724~1.000;P=0.003),最佳截断值为1.1,预测敏感性和特异性分别为66.7%和100.0%。结论HRMR-VWI重构指数是ICAS-LVO的独立预测因素,重构指数≥1.1提示为ICAS-LVO。HRMR-VWI可帮助识别LVO所致AIS患者的病因,从而指导血管内治疗。

关键词：缺血性卒中颅内动脉硬化血管内手术血栓切除术磁共振成像诊断,鉴别

Study on Sustained-Release Pesticides Blended with Fosthiazate-Stearic Acid/Expanded Perlite

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Journal of Renewable Materials 2023年第1期11卷 257-272页

作者： Huimin Huang Zijun Wu Zhijian Zhou qiulin Xu Jie yan Qiaoguang Li College of Chemistry and Chemical Engineering Zhongkai University of Agriculture and EngineeringGuangzhou510225China College of Light Industry and Food Science Zhongkai University of Agriculture and EngineeringGuangzhou510225China

The low utilization rate of pesticides makes the migration of pesticides in water and soil,which brings great harm to the *** development of pesticide carriers with good drug loading capacity and release control abil-ity is an effective method to realize effective utilization of pesticides and reduce pesticide *** this work,fosthiazate-stearic acid/expanded perlite sustained-release particles were successfully prepared by vacuum impregnation using expanded perlite(EP)as carrier,fosthiazate(FOS)as model pesticide and stearic acid(SA)as hydrophobic *** structure and morphology of the samples were studied by BET,FT-IR,TGA,XRD,DSC and *** effects of different mass ratios of FOS to SA on loading capacity and release rate at 24 h were *** sustained release behavior of FOS-SA/EP at different temperatures and pH values was investigated by static dialysis bag *** results showed that FOS and SA were adsorbed in EP pores by physical *** the mass ratios of FOS to SA decreasing from 7:3 to 3:7,the 24 h release rate of FOS-SA/EP decreased from 18.77%to 8.05%,and the drug loading decreased from 461.32 to 130.99 mg/***-SA/EP showed obvious temperature response at 25℃,30℃ and 35℃,the cumulative release rate(CRR)of 200 h were 33.38%,41.50%and 51.17%,*** pH=5,the CRR of FOS was higher than that of pH=7,and the CRR of FOS for 200 h were 49.01%and 30.12%,*** different temperatures and pH=5,the release mechanism of FOS-SA/EP belongs to the Fickian diffusion mechanism;When pH=7,the diffusion mechanism is dominant,and the dissolution mechanism is complementary.

关键词： Expanded perlite fosthiazate stearic acid sustained release release kinetics

帕利哌酮联合右佐匹克隆治疗精神分裂症伴睡眠障碍疗效及对患者神经功能睡眠质量血清催乳素C反应蛋白的影响

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中国药物与临床 2024年第12期24卷 774-780页

作者：颜铁论谢何杰吴秋琳陈卫丰丽水市第二人民医院检验科浙江丽水323000

目的探讨帕利哌酮联合右佐匹克隆治疗精神分裂症伴睡眠障碍疗效及对患者神经功能、睡眠质量、血清催乳素(PRL)、C反应蛋白(CRP)水平的影响。方法选取2021年7月至2023年12月丽水市第二人民医院收治的精神分裂症伴睡眠障碍患者92例,按治... 详细信息

目的探讨帕利哌酮联合右佐匹克隆治疗精神分裂症伴睡眠障碍疗效及对患者神经功能、睡眠质量、血清催乳素(PRL)、C反应蛋白(CRP)水平的影响。方法选取2021年7月至2023年12月丽水市第二人民医院收治的精神分裂症伴睡眠障碍患者92例,按治疗方法分为联合组(46例,奇号)和对照组(46例,偶号),对照组服用帕利哌酮联合劳拉西泮治疗,联合组服用帕利哌酮联合右佐匹克隆治疗,于治疗前和治疗4、8和12周后评估2组精神分裂症状[采用阴性和阳性症状量表(PANSS)]评分变化,神经功能治疗前后变化[蒙特利尔认知评估量表(MoCA)和简易精神状态评定表(MMSE)]、睡眠质量改善情况[匹兹堡睡眠质量指数(PSQI)]、脑神经营养指标变化[脑源性神经营养因子(BDNF)、神经营养因子3(NT-3)、多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)]水平及血清催乳素(PRL)、C反应蛋白(CRP)水平变化,统计治疗期间不良反应情况。结果治疗4周、8周、12周后,2组PANSS评分均逐渐降低,组内不同时间点比较,差异有统计学意义(P0.05),但治疗12周后联合组CRP(53±6)mg/L水平低于对照组(56±6)mg/L(P<0.05);联合组总发生反应发生率(8%)低于对照组(26%)(P<0.05)。结论相较帕利哌酮联合劳拉西泮,帕利哌酮联合右佐匹克隆能更好缓解精神分裂症伴睡眠障碍患者的精神分裂症病情程度、改善其睡眠障碍、提高脑神经营养因子水平,值得应用。

关键词：棕榈酸帕利哌酮右佐匹克隆精神分裂症睡眠障碍