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肝脏常温灌注在移植器官保存中的应用

中华肝胆外科杂志 2014年第7期20卷 538-542页

作者：陈治泉王彦峰叶啟发熊艳范晓礼武汉大学中南医院武汉大学肝胆疾病研究院武汉大学移植医学中心移植医学技术湖北省重点实验室430071

随着肝移植供体需求量的增加,部分之前不被使用的“边缘供体”开始用于移植手术,这对器官保存方式提出了更高要求.常温灌注作为一种优于现行常用低温器官保存手段,在“边缘供体”保存方面发挥了重要作用.本文综述了肝脏常温灌注在器官... 详细信息

随着肝移植供体需求量的增加,部分之前不被使用的“边缘供体”开始用于移植手术,这对器官保存方式提出了更高要求.常温灌注作为一种优于现行常用低温器官保存手段,在“边缘供体”保存方面发挥了重要作用.本文综述了肝脏常温灌注在器官保存及修复方面的临床应用情况,以及肝脏常温灌注模型在基础研究中的作用.

关键词：肝脏常温灌注器官保存

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亚低温对肝脏缺血再灌注损伤的防护作用研究

中华肝胆外科杂志 2015年第8期21卷 555-558页

作者：叶啟发胡龙夏志平王伟王彦峰熊艳涂强中南大学湘雅三医院器官移植科长沙410013 武汉大学中南医院肝胆疾病研究院

目的研究亚低温预处理对肝脏缺血再灌注损伤的防护作用。方法雄性BALB／c小鼠（8周大小，n=15）随机分成3组。缺血再灌注组：5只小鼠夹闭肝脏门静脉和肝动脉第三分叉以上血管，肝脏在常温下（37℃±0．5oC）缺血35min再灌注24h。亚低温... 详细信息

目的研究亚低温预处理对肝脏缺血再灌注损伤的防护作用。方法雄性BALB／c小鼠（8周大小，n=15）随机分成3组。缺血再灌注组：5只小鼠夹闭肝脏门静脉和肝动脉第三分叉以上血管，肝脏在常温下（37℃±0．5oC）缺血35min再灌注24h。亚低温预处理组：5只小鼠肝脏缺血再灌注前亚低温（32℃±0．5℃）预处理2h。假手术组：5只小鼠开腹和肝脏操作与缺血再灌注组相同但是没有夹闭血管。检测各组血浆谷氨酸氨基转移酶（AST）和天门冬氨酸氨基转移酶（ALT）变化、肝脏组织病理变化及细胞凋亡情况。检测亚低温2h后冷诱导RNA结合蛋白（CIRP）的表达。结果实验显示亚低温预处理组ALT和AST平均值明显低于缺血再灌注组。病理检测显示亚低温预处理组肝细胞水肿程度明显低于缺血再灌注组。凋亡检测显示缺血再灌注组凋亡细胞数量明显高于亚低温预处理组凋亡细胞数。蛋白免疫印迹试验显示肝脏CIRP的表达在小鼠亚低温2h后逐渐升高。结论亚低温预处理对肝脏缺血再灌注损伤具有预防保护作用，CIRP可能参与其中。

关键词：亚低温肝脏缺血再灌注损伤冷诱导RNA结合蛋白

低温机械灌注对大鼠心脏死亡器官捐献供肝移植的保护作用

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中华实验外科杂志 2017年第6期34卷 1008-1010页

作者：程楚红范林付贞王彦峰熊艳叶殷发武汉大学中南医院武汉大学肝胆疾病研究院武汉大学移植医学中心移植医学技术湖北省重点实验室 430071 中南大学湘雅三医院卫生部移植医学工程技术研究中心长沙410013

目的建立稳定的大鼠心脏死亡器官捐献（DCD）供肝低温机械灌注后肝移植模型，探讨低温机械灌注（HMP）对大鼠DCD供肝移植的保护作用。方法雄性SD大鼠90只，分为3组，HMP组DCD30min后的肝脏用4℃HTK液冷保存（SOS）2h、低温机械灌注2h后... 详细信息

目的建立稳定的大鼠心脏死亡器官捐献（DCD）供肝低温机械灌注后肝移植模型，探讨低温机械灌注（HMP）对大鼠DCD供肝移植的保护作用。方法雄性SD大鼠90只，分为3组，HMP组DCD30min后的肝脏用4℃HTK液冷保存（SOS）2h、低温机械灌注2h后行同种异体肝移植，SCS组DCD30min后的肝脏用4℃HTK液冷保存4h后行同种异体肝移植，正常对照组供肝不经过热缺血经灌洗后用4℃HTK液保存45min后行同种异体肝移植，观察低温机械灌注与冷保存对大鼠DCD供肝移植的影响。结果HMP组肝移植术后16h血清ALT含量为（2．04±0．41）IU／gliver，低于SCS组（4．51±1．07）IU／gliver，差异有统计学意义（P=0．001）；HMP组肝移植术后16h血清AST含量为（2．61±0．59）IU／gliver，低于SCS组（6．35±1．21）IU／gliver，差异有统计学意义（P=0．001）；HMP组低温机械灌注2h后Krtipple样转录因子2（KLF2）和内皮型一氧化氮合酶（eNOS）蛋白表达较灌注前明显增多，SCS组在后2h冷保存前后KLF2和eNOS蛋白表达无明显变化。结论低温机械灌注可使KLF2和eNOS蛋白表达增加，保护大鼠肝细胞，有利于提高供肝质量。

关键词：大鼠心脏死亡器官捐献供肝低温机械灌注冷保存肝移植

脑死亡供肝中乙醛脱氢酶表达与细胞凋亡的关系

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武汉大学学报（医学版） 2016年第4期37卷 595-597,619页

作者：张萌钟自彪胡前超闫晓敏王彦峰叶啟发武汉大学中南医院/武汉大学肝胆疾病研究院/武汉大学移植医学中心/移植医学技术湖北省重点实验室湖北武汉430071 中南大学湘雅三医院/卫生部移植医学工程技术研究中心湖南长沙410013

目的:探究脑死亡供肝中乙醛脱氢酶(ALDH2)表达与细胞凋亡的关系,为临床脑死亡供肝质量评估提供新指标。方法:应用免疫组化学方法检测脑死亡家兔肝脏组织中p-ALDH2表达;细胞水平建立缺氧模型并应用抑制剂大豆苷或激动剂Alda-1干扰ALDH2表... 详细信息

目的:探究脑死亡供肝中乙醛脱氢酶(ALDH2)表达与细胞凋亡的关系,为临床脑死亡供肝质量评估提供新指标。方法:应用免疫组化学方法检测脑死亡家兔肝脏组织中p-ALDH2表达;细胞水平建立缺氧模型并应用抑制剂大豆苷或激动剂Alda-1干扰ALDH2表达,应用免疫印迹法检测p-ALDH2和Cleaved-caspase 3的表达。结果:p-ALDH2主要表达于内皮细胞和肝细胞,且脑死亡组中p-ALDH2表达较低;人脐静脉内皮细胞中缺氧组pALDH2表达水平较正常组低而Cleaved-caspase 3较高;大豆苷+缺氧组中p-ALDH2表达降低,Cleaved-caspase 3表达升高;在Alda-1+缺氧组中,与正常组相比,p-ALDH2的表达水平较低,Cleaved-caspase 3表达水平较高,而与缺氧组相比,p-ALDH2的表达水平较高,Cleaved-caspase 3表达水平较低,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:脑死亡供肝ALDH2表达降低可增加细胞凋亡,引起肝脏损伤。

关键词：脑死亡肝移植 ALDH2 细胞凋亡

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大鼠皮肤伤口感染模型的建立

武汉大学学报（医学版） 2018年第3期39卷 412-416页

作者：方泽鸿杨志坚曾宪鹏薛帅熊艳叶啟发王彦峰武汉大学中南医院/武汉大学肝胆疾病研究院/武汉大学移植医学中心/移植医学技术湖北省重点实验室中南大学湘雅三医院/卫生部移植医学工程技术研究中心

目的:探讨大鼠皮肤伤口大肠杆菌(***)和金黄色葡萄球菌(***)感染模型的制备方法,建立大鼠背部皮肤伤口感染的模型,为临床创伤及术后伤口感染愈合提供小动物研究模型,同时为新型生物医学敷料及药物等的研究提供模型基础。方法:剃除大鼠... 详细信息

目的:探讨大鼠皮肤伤口大肠杆菌(***)和金黄色葡萄球菌(***)感染模型的制备方法,建立大鼠背部皮肤伤口感染的模型,为临床创伤及术后伤口感染愈合提供小动物研究模型,同时为新型生物医学敷料及药物等的研究提供模型基础。方法:剃除大鼠背部毛发,同时用7%硫化钠溶液对大鼠背部剩余的毛发彻底清除。于大鼠脊柱两侧分别剪取直径为1.5cm的伤口,保证伤口深达肌层。将实验分为3组:(1)非感染组;(2)***感染组;(3)***感染组。在大鼠行伤口制备术后,按分组将100μl生理盐水或菌液滴加到相应组别伤口表面。在伤口表面贴附临床静脉留置针贴膜,同时在贴膜表面加以医用胶布固定。术后每只大鼠于独立通气笼具(IVC笼具)内饲养,24-48h后观察各组伤口表面感染情况。结果:术后48h伤口处可形成明显的感染灶,***菌液浓度在109集落形成单位(CFU)/ml以内可形成明显感染且不致死,而***感染伤口菌液浓度在超过10~8 CFU/ml后感染严重且致死率较高,菌液浓度控制在106-10~8 CFU/ml之间能够形成明显的***感染灶且能保证大鼠存活。结论:***菌液(10~6-10~7 CFU/ml,100μl)、***菌液浓度(107-10~8 CFU/ml,100μl)能够成功制备大鼠伤口感染模型,且保证大鼠正常存活。

关键词：大鼠皮肤伤口金黄色葡萄球菌大肠杆菌感染模型

肝移植后急性抗体介导的排斥反应一例诊断和治疗

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中华器官移植杂志 2018年第8期39卷 479-481页

作者：巩颖郭晖钟自彪熊艳周鑫张涛叶啟发叶少军武汉大学中南医院武汉大学肝胆疾病研究院武汉大学移植医学中心移植医学技术湖北省重点实验室 430071 华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部/卫生计生委器官移植重点实验室

目的探讨肝移植术后抗体介导的排斥反应(AMR)的诊断和治疗。方法回顾性分析肝移植术后发生AMR 1例受者的病例资料。受者因自身免疫性肝炎肝硬化(失代偿期)接受血型相合肝移植,术后采用他克莫司+吗替麦考酚酯+泼尼松的三联免疫抑制方案,... 详细信息

目的探讨肝移植术后抗体介导的排斥反应(AMR)的诊断和治疗。方法回顾性分析肝移植术后发生AMR 1例受者的病例资料。受者因自身免疫性肝炎肝硬化(失代偿期)接受血型相合肝移植,术后采用他克莫司+吗替麦考酚酯+泼尼松的三联免疫抑制方案,血他克莫司浓度谷值维持在8~10μg/L。术后1个月移植肝功能恢复正常,丙氨酸转氨酶为16U/L,天冬氨酸转氨酶为37U/L,胆红素总量为17.3U/L。结果术后3个月后,复查肝功能指标急剧上升(胆红素总量为481.8U/L);术后14周行第1次移植肝穿刺活组织病理检查,提示急性排斥反应组织学表现,结合临床表现,给予激素冲击治疗,效果不佳;术后18周再次行移植肝穿刺活检显示,少数肝细胞坏死和中央静脉分支管壁明显淋巴细胞贴附,肝小叶内中央静脉分支邻近部分毛细胆管内明显胆汁和胆栓淤积,检测群体反应性抗体(PRA)显示抗HLAⅡ类抗体强阳性,确诊为急性AMR;予以血浆置换和调整免疫抑制剂药物浓度治疗,治疗后移植肝功能逐步恢复正常。结论血型相容肝移植和自身免疫性肝病肝移植受者,也应警惕术后发生急性AMR,应及时行移植肝穿刺活检和PRA检测以明确诊断。采用血浆置换治疗肝移植术后急性AMR有良好的治疗效果。

关键词：肝移植移植物排斥抗体介导诊断治疗

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供体缺血预处理对肝移植临床疗效的系统评价

中华肝胆外科杂志 2017年第3期23卷 149-153页

作者：张行健刘忠忠肖琦方泽鸿叶啟发王彦峰熊艳武汉大学中南医院武汉大学肝胆疾病研究院武汉大学移植医学中心移植医学技术湖北省重点实验室武汉430071 中南大学湘雅三医院卫生部移植医学工程技术研究中心

目的系统评价供体缺血预处理（IPC）对肝移植临床疗效的影响.方法计算机检索Cochrane Library、PubMed、EMbase、中国知网、万方及维普数据库,搜集国内外关于供体缺血预处理对肝移植临床疗效影响的随机对照试验研究（RCT）.检索时限... 详细信息

目的系统评价供体缺血预处理（IPC）对肝移植临床疗效的影响.方法计算机检索Cochrane Library、PubMed、EMbase、中国知网、万方及维普数据库,搜集国内外关于供体缺血预处理对肝移植临床疗效影响的随机对照试验研究（RCT）.检索时限均从建库至2016年6月.应用比值比（odds,OR）和95％ CI评价结局指标.用Review Manager 5.2软件进行Meta分析.结果本系统评价共纳入6项研究、322例患者.Meta分析显示：与对照组比较,缺血预处理对肝移植术后患者1年生存率（OR =0.51,95％ CI0.24 ～ 1.05,P＞0.05）、移植物原发性无功能（PGNF）发生率（OR=0.33,95％ CI0.08～1.40,P＞0.05）、ICU停留时间（OR=-0.17,95％ CI-2.72 ～2.38,P＞0.05）以及术后第1、3、7天血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）和总胆红素（TBil）水平无明显影响.结论供体IPC对肝移植的保护作用目前尚缺乏充足的循证医学证据支持.

关键词：缺血预处理肝移植供体

淀粉还原制备纳米MnO_2超级电容器电极材料

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化工新型材料 2009年第2期37卷 86-88页

作者：王红强张艳伟李庆余代启发张安娜颜志雄广西师范大学化学化工学院桂林541004

采用氧化交联淀粉还原高锰酸钾制备出了超级电容器纳米MnO2电极材料。通过XRD和SEM对电极材料进行了表征，采用电化学测试手段对电极材料在1mol／LNa2SO4溶液中的电容特性和比容量进行了分析。结果表明，采用该方法所制备的材料为无定... 详细信息

采用氧化交联淀粉还原高锰酸钾制备出了超级电容器纳米MnO2电极材料。通过XRD和SEM对电极材料进行了表征，采用电化学测试手段对电极材料在1mol／LNa2SO4溶液中的电容特性和比容量进行了分析。结果表明，采用该方法所制备的材料为无定型的α-MnO2，颗粒尺寸在100-150nm左右；循环伏安和恒流充放电试验测试结果表明，α-MnO2电极具有良好的电容特性。在放电电流为100mA／g时，其比容量高达158F／g。

关键词：氧化交联淀粉 MnO2 比容量超级电容器

肾移植术后液体管理改善移植肾功能延迟恢复的研究进展

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中华移植杂志（电子版） 2021年第6期15卷 370-374页

作者：徐艳何重香周鑫潘丽叶啟发武汉大学中南医院武汉大学肝胆疾病研究院武汉大学移植医学中心国家人体捐献器官获取质量控制中心移植医学技术湖北省重点实验室湖北省天然高分子生物肝临床医学研究中心湖北省天然高分子基医用材料构建工程技术研究中心430071 中南大学湘雅三医院卫生部移植医学工程技术研究中心长沙410013

移植肾功能延迟恢复(DGF)是肾移植术后常见并发症,其危险因素包括缺血时间、边缘供者及排斥反应等。近年来的研究认为,液体管理可能也是肾移植术后并发DGF的影响因素之一,合理有效的围手术期液体管理不仅能够降低肾移植术后DGF发生率、... 详细信息

移植肾功能延迟恢复(DGF)是肾移植术后常见并发症,其危险因素包括缺血时间、边缘供者及排斥反应等。近年来的研究认为,液体管理可能也是肾移植术后并发DGF的影响因素之一,合理有效的围手术期液体管理不仅能够降低肾移植术后DGF发生率、改善移植肾长期功能,还可降低受者围手术期死亡率。本文对围手术期肾移植受者液体管理、容量评估、液体不足及液体过载的治疗作一综述,以期为降低肾移植受者移植术后DGF发生率及改善预后提供参考。

关键词：肾移植移植肾功能延迟恢复液体管理